Investigation of Structures of the Self-assembled Pseudorotaxane of Cucurbiturils with Some Alkyldiamines

以1H核磁共振技术和X射线单晶衍射分析方法考察了 3种瓜环与长链二胺 ( 1,7 庚二胺与 1,8 辛二胺 )相互作用的结构特征 .1HNMR分析表明瓜环 (Q[6]和Q[7] )与有机二胺 ( 1,7 庚二胺与 1,8 辛二胺 )有较强的相互作用 ,形成自组装类轮烷结构 ;Q[8]与 1,7 庚二胺与 1,8 辛二胺之间相互作用力相对较弱 ;晶体结构测定结果表明 ,六元瓜环与辛二胺自组装形成的类轮烷实体中 ,辛二胺是以直链状穿过六元瓜环的空腔 ,两配位氨基留在瓜环两端口之外 .The structures of self-assembled pseudorotaxane of cucurbit[n]urils(n=6～8) with some alkyldiamines have been investigated by 1H NMR technique and single crystal X-ray diffraction method. The results reveal that the interaction between cucurbit[6]uril or cucurbit[7]uril and 1,7-diaminoheptane or 1,8-diaminooctane is stronger than that between cucurbit[8]uril and 1,7-diaminoheptane or 1,8-diaminooctane, and the pseudorotaxanes of cucurbit[n]urils with the alkyldiamines were observed. Particularly, in the pseudorotaxane of cucurbit[6]uril with 1,8-diaminooctane, the amino groups of 1,8-diaminooctane are left outside the ports of cucurbit[6]uril.国家自然科学基金(No.200261002);; 贵州省重点基金(No.20023004);; 贵州省国际合作(No.200211003)资助项目

嗜虫耶尔森氏菌HlyA及HasA外分泌表达系统的构建

【目的】构建一株具备外分泌蛋白功能的工程菌,解决杀虫毒素无法由胞内分泌至胞外,无法直接作用于虫体等问题,为松墨天牛防治提供新思路。【方法】本研究先测定从松墨天牛肠道及其生境中分离出的嗜虫耶尔森氏菌(CSLH88)的生长特性及抗性,进而对其进行分子改造。构建HlyA (pGHKW2)以及HasA (pGHKW4)外分泌表达载体,利用电穿孔法将其转入CSLH88菌株,获得能够表达绿色荧光蛋白的工程菌。利用稀释涂板及荧光体式镜检测技术对两个质粒进行遗传稳定性检测,并采用SDS-PAGE及Western blotting技术验证蛋白外分泌功能。【结果】CSLH88菌株培养2–4 h能够进入对数生长期,并对卡那霉素(Kan)敏感。成功构建了含有Kan抗性基因的pGHKW2(GenBank:MK562405)和pGHKW4(GenBank:MK562404)两个外分泌表达载体的CSLH88工程菌株。其中,发现pGHKW4质粒更加适合在嗜虫耶尔森氏菌中稳定遗传。SDS-PAGE及Western blotting检测结果表明HlyA系统无法在CSLH88菌株中将目的蛋白分泌到胞外,而HasA系统则可以有效地发挥外分泌表达功能。【结论】通过对HlyA及HasA两个外分泌表达系统进行研究,从中筛选出HasA型血红素转运系统作为CSLH88菌株的外分泌表达系统,为后续外分泌杀虫毒素蛋白菌株构建以及CSLH88菌株的致病性研究奠定基础。国家重点研发计划课题(2017YFD0600105);;\n国家自然科学基金(31601905);;\n福建省科技厅自然科学基金(2016J01097);;\n福建省科技计划项目(2018N5002);;\n福建农林大学科研基金(xjq201614);福建农林大学林学院林学高峰学科项目(71201800720,71201800753,71201800779);;\n福建省大学生创新创业训练计划项目(201810389102);;\n福建省林业科学研究项目[Minlinke(2017)03]~

基于内毒素血症探讨皂术茵陈方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的影响

目的 基于内毒素血症探讨皂术茵陈方防治非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的影响及其作用机制。方法 采用随机数字表法将40只大鼠分为5组,即正常组、模型组、皂术茵陈方组、盐酸吡格列酮组及培菲康组,每组8只。除正常组外,其余32只大鼠采用高脂饮食16周建立大鼠NASH模型,在造模第9周开始,皂术茵陈方组给予皂术茵陈方水提液60 mg/(kg·d)灌胃,盐酸吡格列酮组给予盐酸吡格列酮10 mg/(kg·d)灌胃,培菲康组给予培菲康210 mg/(kg·d)灌胃,正常组及模型组均给予双蒸水10 mL/(kg·d)灌胃,共治疗8周。第16周末经腹主动脉取血,生化法检测肝组织甘油三酯(TG)水平,苏木精—伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化。终点显色法检测血浆内毒素(LPS)含量。ELISA法检测肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6等炎症因子的表达水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠肝组织显示出典型的NASH组织学特征,出现重度脂肪变性,不同程度的炎细胞浸润和坏死灶。大鼠肝湿重、肝指数、肝脏TG含量、血浆LPS水平、肝组织TNF-α、IL-1β、IL-6等炎症因..

改良分子信标-双重实时荧光PCR快速检测SARS病毒

目的建立改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒的方法,用于SARS的早期诊断和动物溯源。方法利用改良分子信标技术、装甲RNA和双片段双色荧光技术,根据GenBank公布的SARS病毒聚合酶基因1b的阅读开放框架结构的保守序列,自行设计一对引物和探针,以部分临床标本的酶联吸附实验结果和传统细胞培养方法作为对照,建立分子信标检测SARS病毒的方法。对368份临床标本(咽漱液、血液、粪便、尿液)、52份细胞培养液和50份动物标本进行荧光PCR扩增。结果分子信标检测SARS病毒的方法灵敏度为10～100个拷贝ml,与流感病毒等呼吸道病毒无交叉反应。分子信标检测368份临床标本,20份阳性。其中确诊病例阳性率为21.27%(1047),确诊病例的咽漱液阳性率为43.48%,还分别从粪便和血清中检测到SARS病毒。52份细胞培养液,29份阳性,阳性率为55.77%。50份动物标本,23份阳性,阳性率为46%。结论改良分子信标-双重实时荧光PCR检测SARS病毒方法灵敏度高、特异性强,可用于SARS的临床早期诊断和动物溯源

Investigation of structures of the self-assembled pseudorotaxane of cucurbiturils with some alkyldiamines

The structures of self-assembled pseudorotaxane of cucurbit [n] urils ( n = 6 similar to 8) with some alkyldiamines have been investigated by H-1 NMR technique and single crystal X-ray diffraction method. The results reveal that the interaction between cucurbit[6]uril or cucurbit[7]uril and 1,7-diaminoheptane or 1,8-diaminooctane is stronger than that between cucurbit[ 8] uril and 1,7-diaminoheptane or 1, 8-diaminooctane, and the pseudorotaxanes of cucurbit[n] urils with the alkyldiamines were observed. Particularly, in the pseudorotaxane of cucurbit [6] uril with 1, 8-diaminooctane, the amino groups of 1, 8-diaminooctane are left outside the ports of cucurbit [6] uril

分析含水层水位恢复数据的多次直线解析法

提出了一种分析含水层抽水试验中水位恢复数据的新方法。在方法的建立过程中,考虑了地下水位在上升和下降过程中,含水层的的释水系数和贮水系数之间可能存在着的差异。对表示水位恢复阶段降深变化表达式中的两个表达式都采用了相同的简化方式,即对由于持续抽水引起的降深项和停抽时刻开始的虚拟注水引起的降深项,均采用了保留Theis井函数的级数表达式中前三项作为其简化式,简化条件为无量纲时间u1<0.2和u2<0.2。在这样的简化条件下,建立了具有同时能够确定含水层导水系数、贮水系数和释水系数的方法。根据贮水系数和释水系数是否相等,可以判断含水层水位下降与水位恢复过程的形变是否可逆。最后,通过算例说明了方法的应用步骤

分析非稳定流抽水试验数据的改进直线解析法

以泰斯公式为基础,提出了一种分析非稳定流抽水试验数据,确定含水层导水系数和弹性释水系数的新方法。不同于Jacob-Cooper直线图解法的简化方式,而是取泰斯井函数级数展开式的前三项作为井函数的近似表达式。以这样的简化方式而提出的改进直线解析法,在满足与Jacob-Cooper直线图解法相同计算精度的条件下,要求无量纲变量的值u<0.2或u<1.0。显然,这样的条件较Jacob-Cooper直线图解法要求的u<0.01或u<0.05更易得到满足。最后,通过实例说明了方法的具体步骤,并对方法的适用性进行了初步讨论

粒子群优化算法在确定含水层参数中的应用

以泰斯公式为例,将粒子群优化算法应用于求解分析抽水试验数据,确定含水层参数的函数优化问题。就粒子数目和待估导水系数初值范围等因素对算法收敛性的影响,进行了数值实验。结果表明:①粒子群算法能够有效地应用于求解分析抽水试验数据,确定含水层参数计算问题;②粒子数目的大小对运算时间和算法收敛性有一定的影响,在实际运算时,宜设置较大的粒子数;③待估导水系数的选取初值大小对收敛速度有一定的影响,但不会影响最终计算结果。与其他方法相比较,粒子群优化算法具有原理简单、易于编程和实现等优点