绿色荧光蛋白基因在大黄鱼体内的表达

以绿色荧光蛋白基因为报告基因 ,以pIRESneo为载体质粒 ,制备含有报告基因的质粒 ,以肌肉注射的方式导入大黄鱼体内 ,每隔一周用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白基因在鱼体不同部位的表达情况 .结果表明 ,绿色荧光蛋白基因可以在大黄鱼体内得到表达 ,表达时间高达 2 8d以上 .绿色荧光蛋白基因不仅可以在肌肉注射部位组织细胞得到表达 ,而且在其它部位的肌肉、肝脏、肾脏和心脏等组织中也有表达 ,但表达水平低于肌肉注射部位组

斑节对虾白斑综合症暴发流行与水体理化因子的关系

用海水化学分析方法每天检测 5口斑节对虾 ( Penaeus monodon)养成池两茬共 90余天 9项水质指标 ,结果表明它们的变化范围是 :温度 14.7～ 31.8℃、盐度 13.6～ 30 .6、溶解氧 2 .3～ 9.8mg/ L、p H7.3～ 9.5、硫化物 ( S2 -) 0～ 0 .13mg/ L、磷酸盐 ( PO4 3-- P) 0～ 2 .33mg/ L、硝酸氮 ( NO3--N) 0～ 1.33mg/ L、亚硝酸氮 ( NO2 -- N) 0～ 0 .2 8mg/ L、氨态氮 ( NH4 +- N+NH3- N) 0～ 0 .66mg/ L ,皆在斑节对虾该项指标的耐受范围内 ,且无论这些因子含量如何变化 ,5口虾池两茬对虾养殖 55d后皆因患 WSS而死亡 ,表明在所检测的虾池这些水质因子并非 WSSV感染暴发流行的指标因

抗RIP3抗体的制备及其亚细胞定位

目的:制备兔抗受体相互作用蛋白3(RIP3)的抗体,并探讨其在鼠源NIH3T3细胞株中的定位。方法:用RTPCR技术从NIH3T3细胞株中克隆鼠rip3基因,进行原核表达及电洗脱纯化。以高纯度的RIP3抗原免疫新西兰兔制备抗血清并纯化。用Westernblot检测该抗体的特异性,以免疫荧光法确定RIP3在NIH3T3细胞株中的定位,以及TNFα和zVAD.fmk对其定位的影响。结果:获得特异性的兔抗RIP3蛋白的抗体。免疫荧光的结果显示,RIP3定位于细胞质中。单用TNFα或zVAD.fmk处理NIH3T3细胞后,RIP3的定位均无明显变化;而用zVAD.fmk和TNFα共同处理细胞后,在核内外均有RIP3分布。结论:成功地克隆rip3基因并制备高特异性的兔抗RIP3抗体。RIP3在NIH3T3细胞株中定位于细胞质中,为进一步研究RIP3在TNFα诱导的caspase非依赖的细胞凋亡途径中的作用奠定了基础

九孔鲍暴发性流行病的病原及病理

1999年 2～ 5月 ,东山县养殖九孔鲍暴发了大规模流行病 ,不少养殖场全场覆没 .病鲍表现为分泌粘液增多、肝脏红肿、足部僵硬和反应迟钝 .应用磷钨酸负染、超薄切片的电镜观察和现场检测等方法 ,对病鲍的病原及肝肠组织的病理情况进行观测 ,结果表明引发这次养殖鲍暴发严重病害的主要病原是致病力很强的病毒和弧菌 .电镜观察到病毒发生在细胞质中的一种称为“封入体”的泡状结构中 ,证实了病原的入侵造成九孔鲍肝及肠等组织、细胞产生病变 ,描述了细菌和病毒混合感染导致九孔鲍细胞的病理变

闽南养殖九孔鲍暴发性流行病的病原研究

从1999年春季东山县九孔鲍暴发流行病的病鲍内脏提取病原粗提液,经电镜观察和回归感染实验,证实其病原主要是病毒合并细菌感染,细菌为两种弧菌,病毒为球形,其发生基质为细胞质中一种双层膜的泡状结构,观察到病原入侵后引起鲍的组织细胞产生严重的病理变化,探讨病原的入侵途径,提出预防该流行病的一些措施

含副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus) Fla I基因真核表达重组质粒的构建

用ClaⅠ /EcoRⅠ双酶切带有副溶血弧菌 (Vibrioparahaemolyticus)极鞭毛蛋白FlaI基因的质粒pMD18 FlaI,回收目的基因片段 ,插入到真核细胞表达载体pIRESneo同样经ClaⅠ /EcoRⅠ切开的窗口中 ,成功地将FlaI克隆到pIRESneo中 ,获得有意义的重组质粒pIRESneo FlaI.构建的pIRESneo FlaI真核表达重组质粒 ,将为海水经济鱼类副溶血弧菌DNA疫苗的研制奠定基

口服免疫添加剂对养殖大黄鱼免疫机能影响的初步研究

对福建省连江县厦宫乡新辉村的养殖大黄鱼病害进行免疫防治试验 ,通过定期口服免疫添加剂后 ,检测大黄鱼血清中溶菌酶活力、抗菌活力和酚氧化酶活力 ,测定大黄鱼体长和体重 .研究结果表明 :大黄鱼在服用免疫添加剂后血清中的溶菌酶活力平均值提高了 2 6% ,抗菌活力增加了 18% ,酚氧化酶活力提高幅度高达 4 6% .与此同时 ,实验组大黄鱼的生长速度也比对照组要快 ,其中实验组平均体长比对照组高 3.8% ,平均体重增加 13.5%

Frequency and distribution of AP-1 sites in the human genome

The AP-1-binding sequences are promoter/enhancer elements that play an essential role in the induction of many genes in mammalian cells; however, the number of genes containing AP-1 sites remains unknown. In order to better address the overall effect of AP-1 on expression of genes encoded by the entire genome, a genome-wide analysis of the frequency and distribution of AP-1 sites would be useful; yet to date, no such analysis of AP-1 sites or any other promoter/enhancer elements has been performed. We present here our study of the consensus AP-1 site and two single-bp variants showing that the frequency of AP-1 sites in promoter regions is significantly lower than their average rate of occurrence in the whole genomic sequence, as well as the frequency of a random heptanucleotide suggesting that nature has selected for a decrease in the frequency of AP-1 sites in the regulatory regions of genes. In addition, genes containing multiple AP-1 sites are more prevalent than those containing only one copy of an AP-1 site, which again may have evolved to allow for greater signal amplification or integration in the regulation of AP-1 target genes. However, the number of AP-1-regulated genes identified in various studies is far smaller than the number of genes containing potential AP-1 sites, indicating that not all AP-1 sites are activated in a given cell under a given condition, and is consistent with the prediction by others that cellular context determines which AP-1 sites are targeted by AP-1

利用P因子不精确剪切获得Tis11基因敲除果蝇

Tis11是哺乳动物基因TTP在果蝇中的同源物,其基因位于果蝇X染色体11B9区.它含有两个保守的顺式Cys-X8-Cys-X5-Cys-X3-His(CCCH)锌指结构.它与mRNA的稳定性有关.为了进一步从动物水平研究Tis11的生物学功能,作者利用P因子不精确剪切的特性来获得Tis11基因敲除果蝇.以P因子插入果蝇19949为起始材料,经过一系列杂交后,挑取了700株P因子被切除的果蝇.通过PCR筛选和鉴定,从这700株果蝇中获得一株果蝇279,它的Tis11基因的第2个外显子中包括翻译起始位点的区域被删除