In vitro toxicity of Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa on bovine embryos

Niedenzuella (Tetrapterys) multiglandulosa, a vine plant found in Brazil, has been correlated to outbreaks of poisoning in cattle and buffaloes, generating economic losses related to the death due to heart failure, miscarriage, abortion, stillbirth, and neonatal mortality. The aim of this study was to examine the embryotoxic potential of the aqueous plant extract on in vitro bovine embryos. In vitro study was performed in five replicates of bovine embryo culture assigned in two groups: control, in vitro embryo culture medium without the aqueous plant extract; treated group, with addition of 2.7mg/mL of aqueous plant extract (10%) to the embryo culture on the sixth day of culture. Cleavage rate was evaluated at day 2 of the cell culture. Viability, hatchability and underdevelopment of blastocysts on the seventh, eighth, and ninth days (D7, D8, and D9, respectively) of culture were assessed under stereoscopic microscope. On day 7, blastocysts were submitted to TUNEL assay to determine apoptotic index. In vitro exposure of bovine embryos to of N. multiglandulosa resulted in reduced embryo development and survival, evaluated by dark cytoplasm indicating poor morphology and poor quality with marked reduction of hatchability. We observed a significant reduction of blastocyst production/number of cleaved embryos (60.6% vs 41.5%); reduction of blastocysts production/total number of matured bovine oocytes (35.1% vs 21.3%); and embryonic hatching rates (38.0% vs 10.0%). However, no effects were observed on the apoptotic rate. In conclusion, aqueous extract of N. multiglandulosa leaves reduces bovine embryo viability in vitro, suggesting possible detrimental effects on embryo development. Key words: apoptosis; blastocyst; toxic plant

Influence of the different managements and hormonal treatments on ovarian dynamic during the estrus cycle and in postpartum anestrus of the Gir and Nelore cows

Este trabalho foi realizado com os seguintes objetivos: a) Caracterizar a dinâmica folicular ovariana e o momento de ovulação em vacas das raças Gir e Nelore, durante duas estações do ano (verão e inverno). Este estudo foi feito com 25 vacas da raça Gir (10 no inverno e 15 no verão) e 15 vacas da raça Nelore (7 no inverno e 8 no verão). Os parâmetros foliculares não foram afetados pela estação do ano e não diferiram entre as raças. Houve maior percentagem de ciclos com três (68,0 e 66,7%) e duas ondas foliculares (24,0 e 26,7%) para as raças Gir e Nelore, respectivamente. O momento de ovulação ocorreu, em média, cerca de 23 horas após a identificação do estro, para as duas raças; b) Determinar a área do corpo lúteo e das cavidades luteais, bem como do volume do tecido luteal e das concentrações de progesterona de vacas das raças Gir e Nelore, durante duas estações do ano. A área e o volume dos corpos lúteos e as concentrações de progesterona foram estudadas em 25 vacas da raça Gir e 15 da raça Nelore, durante um ciclo estral completo e duas estações do ano (inverno e verão), e foram verificadas diferenças estacionais na área e volume luteal; c) Estudar a regressão luteal, o desenvolvimento folicular e o momento de ovulação de vacas das raças Gir e Nelore tratadas com prostaglandina F 2α . Foram utilizadas 12 vacas da raça Gir e em 7 da raça Nelore, tratadas com prostaglandina F 2α entre os dias 10 e 12 do ciclo estral. A ovulação do folículo dominante da segunda onda foi verificada em 72,7% na raça Gir, e em todas as vacas Nelore. O diâmetro do folículo ovulatório na raça Nelore foi menor (11,0 ± 0,9mm) ao da raça Gir (13,0 ± 1,7mm) após a sincronização com prostaglandina, e o intervalo da aplicação do luteolítico ao estro foi de 88,7 e 91,6h para as raças Nelore e Gir, respectivamente; d) Estudar a dinâmica folicular no pós-parto, bem como de verificar o efeito do tratamento com GnRH ou hCG no retorno da atividade ovariana de vacas da raça Gir em anestro. O padrão de crescimento folicular no pós-parto foi estudado por meio de ultra-sonografia diária em 15 vacas da raça Gir amamentando, durante os primeiros 50 dias de lactação. Nenhum animal apresentou estro, ovulação ou luteinização folicular durante o período de avaliação e apresentaram de quatro a oito ondas foliculares. No estudo do crescimento folicular após tratamentos hormonais com GnRH e hCG, foram utilizadas 22 vacas da raça Gir em anestro pós- parto. Aos 56 dias no pós-parto 11 vacas foram tratadas com 0,0042 mg de acetato de buserelina e 11 com 3.000UI de hCG. Ovulação, regressão e luteinização folicular foram verificadas nos dois tratamentos, e uma nova onda folicular surgiu dentro de dois a três dias; e) Verificar o efeito do tratamento com o progestágeno associado com a redução na freqüência de amamentação na atividade ovariana de vacas da raça Gir em anestro pós-parto. O estudo foi feito com 40 vacas da raça Gir em anestro no pós-parto, visando estudar o efeito do tratamento com progestágeno, associado ou não à amamentação limitada no retorno à atividade ovariana. Os animais foram distribuídos em quatro tratamentos de 10 animais, aos 42 dias no pós-parto: T1 = duas mamadas/dia (Controle); T2 = Norgestomet + duas mamadas/dia; T3 = uma mamada/dia e T4 = Norgestomet + uma mamada/dia. Nenhum animal de T1 manifestou estro e, para T3, cinco animais tiveram ovula ção silenciosa ou estro durante o período experimental. Oito animais manifestaram estro característico no tratamento T2 e, somente dois no T4. Cinco animais do T2 e dois do T4 ficaram gestantes após os tratamentos com Norgestomet; f) Estudar o perfil metabólico entre o final da gestação e no início da lactação de vacas das raças Gir e Nelore. O perfil metabólico e hormonal foi acompanhado em 10 vacas da raça Gir e 7 da raça Nelore, onde foram analisadas as concentrações de glicose, uréia, colesterol total, albumina, proteínas totais, lipídeos totais, beta-hidroxi-butirato, insulina, triiodotironina (T 3 ), tiroxina (T 4 ) e progesterona. Foram encontradas diferenças entre as raças somente para albumina, beta-hidroxi- butirato, T 4 , T 3 e insulina. Para os dias entre o pré e o pós-parto foram diferentes a uréia, T 3 , T 4 , glicose, colesterol total, progesterona, beta-hidroxi-butirato e insulina.The objectives of the experiment were: a) To study the follicular dynamic and the ovulation time in Gir and Nelore cows, during two seasons of the year (summer and winter). This experiment was done in 25 Gir cows (winter: 10 and summer: 15) and 15 Nelore cows (winter: 7 and summer: 8). The follicular characteristics did not differ between two the seasons and breeds. The follicular dynamic was characterized by the predominance of three (68.0 and 66.7%) and two follicular waves (24.0 and 26.7%) for Gir and Nelore cows, respectively. On average, Gir and Nelore cows ovulated 23 hours after the onset of estrus; b) To determine the surface area of corpus luteum and luteal cavities, as well as its volume, and plasma progesterone concentration in Gir and Nelore, during two seasons of the year. The area and volumes of corpus luteum, as well as progesterone concentration were evaluated in 25 Gir and 15 Nelore cows, during the estrous cycle on two seasons (winter and summer), and was observed seasonal differences for area and volumes of corpus luteum; c) To study the luteal regression, the follicular development and the ovulation time in Gir and Nelore cows treated with prostaglandin F 2α between day 10 and 12 of estrous cycle. This study was done with 12 Gir and 7 Nelore cows, treated with prostaglandin F 2α , between day 10 and 12 of estrous cycle. The ovulation of second dominant follicle occurred in 72.7% of Gir and all Nelore cows. Ovulatory follicle diameter of the Nelore was lower (11.0 ± 0.9mm) than Gir cows (13.0 ± 1.7mm) after prostaglandin treatment. The average interval from prostaglandin to estrus, was 88.7 and 91.6h for Nelore and Gir cows, respectively; d) To study the postpartum follicular dynamic, as well as to evaluate the effect of GnRH and hCG treatments on return of the ovarian activity of Gir cows in anestrus. The postpartum follicular growth was studied by daily ultra-sonography in 15 suckled Gir cows, during the first 56 days of lactation. No animal showed estrus, ovulation or follicular luteinization during de experimental period, and four to eight follicular waves were found. The study about follicular development after hormonal treatments with GnRH and hCG was done with 22 Gir cows in postpartum anestrus. On day 56 of postpartum period 11 cows were treated with 0.0042mg of buserelin acetate and in 11 cows with 3,000UI of hCG. Ovulation, follicular regression and luteinization were studied for cows from the two treatments, and one new follicular wave emerged within two or three days; e) To evaluate the effect of progestin treatment associated with suckling management on ovarian activity of Gir cows in postpartum anestrus. This experiment was done with 40 anestrus Gir cows to study the effect of progesterone treatment, with or without suckling manipulation, on return of ovarian activity. Animals were assigned to four treatments groups with ten cows each one, forty-two days after parturition: T1 = two-daily suckling (Control); T2 = Norgestomet and = two-daily suckling; T3 = once-daily suckling and T4 = Norgestomet and once-daily suckling. No animal of T1 respond with standing estrus and, for T3 five animals showed silent ovulation or estrus during the experimental period. Eight animals showed standing estrus for treatment T2 and only two for T4. Five animals of T2 and two of T4 became pregnant after Norgestomet treatment; f) To study the metabolite profile between the late pregnancy and early lactation in Gir and Nelore cows. The metabolic and hormonal profiles were performed in 10 Gir and 7 Nelore cows. The following blood components were measured: glucose, urea, total cholesterol, albumin, total proteins, total lipids, beta-hydroxy-butyrate, insulin, triiodothyronine (T 3 ), thyroxin (T 4 ) and progesterone. Differences for breeds were found for albumin, beta-hydroxy-butyr ate, T 4, T 3 and insulin. Differences for the days between pre and postpartum were found for urea, T 3 , T 4 , glucose, total cholesterol, progesterone, beta-hydroxy-butyrate and insulin.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológic

Metais tóxicos e seus efeitos sobre a reprodução dos animais. Revisão de Literatura

No Brasil, em decorrência dos seguidos crimes ambientais envolvendo mineradoras, aumentou-se a preocupação sobre o perigo à saúde humana e animal pela exposição aos metais tóxicos. Esta revisão tem como objetivo fazer levantamento bibliográfico sobre as alterações reprodutivas em animais promovidas por metais tóxicos contaminantes do ambiente, incluindo possíveis danos permanentes ao banco genético da fauna das regiões afetadas. Os metais tóxicos, erroneamente denominados “metais pesados”, se referem a um grupo de elementos que não possuem funções fisiológicas conhecidas nos organismos vivos. Portanto, podem produzir efeitos prejudiciais para funções metabólicas, mesmo em quantidades muito pequenas. A bioacumulação e a alta reatividade de metais como mercúrio, chumbo e cádmio, entre outros, faz com que as intoxicações sejam um problema de saúde pública. O impacto da ocorrência da intoxicação por metais tóxicos no sistema produtivo brasileiro ainda é de difícil mensuração, devido à falta de informações estatísticas. Ainda, também contribuem com a destruição do banco genético animal, principalmente da fauna silvestre, uma vez que tais animais são expostos aos metais tóxicos devido à proximidade com as áreas contaminadas com seu habitat natural.

Concentrações plasmáticas de progesterona e metabólitos lipídicos em novilhas mestiças tratadas ou não com hormônio de crescimento e superovuladas

O objetivo do experimento foi estudar as concentrações plasmáticas de progesterona em novilhas mestiças, correlacionando-as com as concentrações de metabólitos lipídicos. Utilizaram-se 26 fêmeas divididas em dois tratamentos: T1 = aplicação de 500 mg de sometribove zinco (somatotropina bovina recombinante) no terceiro dia do ciclo estral superovulado e T2 = controle. As coletas de sangue foram feitas durante dois ciclos estrais: normal e superovulado, e as análises de progesterona e dos metabólitos foram realizadas por radioimunoensaio e pelo método enzimático, respectivamente. O período experimental do ciclo estral superovulado foi dividido em três fases: P1 = do estro à inseminação artificial (0 ao 15° dia); P2 = da inseminação artificial até a coleta de embriões (15° ao 21° dia) e P3 = da coleta de embriões até o final do período (21o ao 27° dia). Houve diferença nas concentrações de progesterona entre os animais dos dois tratamentos durante o P1, porém não diferiram nos P2 e P3. As concentrações plasmáticas de progesterona alcançaram valores superiores a 60 ng/mL após a superovulação. Os valores de colesterol total e de HDL foram diferentes entre os dois tratamentos, durante os períodos P2 e P3. Não houve correlações entre as concentrações plasmáticas dos metabólitos lipídicos e de progesterona durante os ciclos estrais estudados.The objective of this experiment was to study the progesterone plasma concentrations in crossbred heifers, and the correlation with lipid metabolites concentrations. Twenty-six heifers were distributed into two treatments: T1 - treated with 500 mg sometribove zinc (recombinant bovine somatotropin) on day 3 of superovulated estrous cycle and T2 - control. The blood samples were collected during two estrous cycles: normal and superovulated one. The progesterone and metabolic lipids concentrations were determined by RIA and enzymatic method, respectively. The experimental period of the superovulated estrous cycle was divided into three periods: P1 = from estrus to artificial insemination (0 to 15th day); P2 - from artificial insemination to embryo collection (15th to 21st day) and P3 - from embryo collection to the end of the experiment (21st to 27th day). Plasma progesterone concentration differed between the two treatments during P1, but did not during P2 and P3. Progesterone concentration was greater than 60 ng/mL in superovulated heifers. The total plasma cholesterol and HDL concentrations were different between the two treatments, during P2 and P3. There were no correlations among the lipid metabolites and progesterone concentrations during the estrous cycles

Concentrações Plasmáticas de Progesterona e Metabólitos Lipídicos em Novilhas Mestiças Tratadas ou Não com Hormônio de Crescimento e Superovuladas

O objetivo do experimento foi estudar as concentrações plasmáticas de progesterona em novilhas mestiças, correlacionando-as com as concentrações de metabólitos lipídicos. Utilizaram-se 26 fêmeas divididas em dois tratamentos: T1 = aplicação de 500 mg de sometribove zinco (somatotropina bovina recombinante) no terceiro dia do ciclo estral superovulado e T2 = controle. As coletas de sangue foram feitas durante dois ciclos estrais: normal e superovulado, e as análises de progesterona e dos metabólitos foram realizadas por radioimunoensaio e pelo método enzimático, respectivamente. O período experimental do ciclo estral superovulado foi dividido em três fases: P1 = do estro à inseminação artificial (0 ao 15° dia); P2 = da inseminação artificial até a coleta de embriões (15° ao 21° dia) e P3 = da coleta de embriões até o final do período (21º ao 27° dia). Houve diferença nas concentrações de progesterona entre os animais dos dois tratamentos durante o P1, porém não diferiram nos P2 e P3. As concentrações plasmáticas de progesterona alcançaram valores superiores a 60 ng/mL após a superovulação. Os valores de colesterol total e de HDL foram diferentes entre os dois tratamentos, durante os períodos P2 e P3. Não houve correlações entre as concentrações plasmáticas dos metabólitos lipídicos e de progesterona durante os ciclos estrais estudados

Resposta superovulatória de novilhas mestiças Holandês-Zebu tratadas com somatotropina bovina recombinante (rbST)

O objetivo do experimento foi estudar o efeito do pré-tratamento com 500 mg de sometribove (rbST) sobre a resposta superovulatória, o número e a qualidade dos embriões coletados de 26 novilhas mestiças holandês-zebu, divididas em dois tratamentos: T1 = tratadas com rbST (n=13) e T2 = controle (n=13). Foram feitas 13 superovulações entre o mês de setembro e o início de dezembro de 1997 (período 1) e 13 superovulações entre o final do mês dezembro de 1997 e fevereiro de 1998 (período 2), sendo que, para cada período, sete animais receberam 500 mg de rbST (T1) por via subcutânea, no terceiro dia do ciclo estral, e seis animais (T2) não receberam medicação. Os animais foram superovulados com FSH a partir do 10o dia do ciclo estral, e as coletas foram realizadas entre os dias 7 e 8 após a inseminação artificial. A resposta superovulatória, o número total de estruturas, o número de embriões viáveis, de não-viáveis e de ovócitos não foram afetados pelo tratamento com somatotropina bovina. Foram coletadas médias de 15,3 ± 9,5 e 17,4 ± 10,9 estruturas totais, 8,5 ±8,3 e 11,5 ± 10,0 embriões viáveis, 4,6 ± 4,7 e 3,4 ± 1,3 embriões não-viáveis, 2,2 ± 2,8 e 2,8 ± 4,0 ovócitos por coleta dos tratamentos 1 e 2, respectivamente. As mórulas e os blastocistos jovens foram os estádios de desenvolvimento coletados em maior percentagem, entre o sétimo e oitavo dia após a inseminação artificial.The objective of the experiment was to study the effect of pretreatment with 500 mg of sometribove (rbST) on superovulatory response, on number and embryos quality of twenty six crossbred holstein-zebu heifers, allocated into two treatments: T1 ¾ treated with rbST (n=13) and T2 - control (n=13). Thirteen superovulations were done between september and december of 1997 (period 1), and thirteen superovulations between the end of december 1997 and february of 1998 (period 2). For each period seven animals were injected with 500 mg SC sustained-release formulated rbST (T1) on day 3 of estrous cycle, while six animals (T2) did not receive any medication. The animals were superovulated with FSH on day 10, and the embryo collection were performed on day 7 or 8 after the artificial insemination (A.I.). Pretreatment of heifers with rbST did not increase the superovulatory response, total number of structures recover, viable and non viable embryos and ova per collection. The average of total number of structures recovered, viable and non viable embryos and ova per collection were: 15.3 ± 9.5 and 17.4 ± 10.9; 8.5 ± 8.3 and 11.5 ± 10.0; 4.6 ± 4.7 and 3.4 ± 1.3; 2.2 ± 2.8 and 2.8 ± 4.0, respectively, for T1 and T2. The morulae and initial blastocists were recovered in greater percentage on day 7 or 8 after A.I

Desenvolvimento luteal e concentrações plasmáticas de progesterona em vacas das raças Gir e Nelore

A dinâmica folicular e a regressão luteal foram avaliadas em 12 vacas da raça Gir e em sete da raça Nelore tratadas com cloprostenol sódico entre os dias 10 e 12 do ciclo estral. A porcentagem de sincronização foi superior a 92% para as duas raças, e a ovulação do folículo dominante da segunda onda foi verificada em 72,7% da raça Gir e em todas as vacas Nelore. O diâmetro do folículo ovulatório na raça Nelore foi inferior (11,0 ± 0,9 mm) ao da raça Gir (13,0 ± 1,7 mm). O intervalo médio da aplicação do luteolítico ao estro, à ovulação e o momento de ovulação após o início do estro foram de 88,7 e 91,6h, 119 e 113h, 26,5 e 24,3h para as raças Nelore e Gir, respectivamente

Resposta superovulatória de novilhas mestiças holandês-zebu tratadas com somatotropina bovina recombinante (rbST)

O objetivo do experimento foi estudar o efeito do pré-tratamento com 500 mg de sometribove (rbST) sobre a resposta superovulatória, o número e a qualidade dos embriões coletados de 26 novilhas mestiças holandês-zebu, divididas em dois tratamentos: T1 = tratadas com rbST (n=13) e T2 = controle (n=13). Foram feitas 13 superovulações entre o mês de setembro e o início de dezembro de 1997 (período 1) e 13 superovulações entre o final do mês dezembro de 1997 e fevereiro de 1998 (período 2), sendo que, para cada período, sete animais receberam 500 mg de rbST (T1) por via subcutânea, no terceiro dia do ciclo estral, e seis animais (T2) não receberam medicação. Os animais foram superovulados com FSH a partir do 10º dia do ciclo estral, e as coletas foram realizadas entre os dias 7 e 8 após a inseminação artificial. A resposta superovulatória, o número total de estruturas, o número de embriões viáveis, de não-viáveis e de ovócitos não foram afetados pelo tratamento com somatotropina bovina. Foram coletadas médias de 15,3 ± 9,5 e 17,4 ± 10,9 estruturas totais, 8,5 ±8,3 e 11,5 ± 10,0 embriões viáveis, 4,6 ± 4,7 e 3,4 ± 1,3 embriões não-viáveis, 2,2 ± 2,8 e 2,8 ± 4,0 ovócitos por coleta dos tratamentos 1 e 2, respectivamente. As mórulas e os blastocistos jovens foram os estádios de desenvolvimento coletados em maior percentagem, entre o sétimo e oitavo dia após a inseminação artificial