Ferie – tilsynelatende enkelt og likevel så vanskelig: mellomlederens opplevelse av ferieplanlegging

Prosjektoppgave organisasjon og ledelse, 2012Ferieplanlegging i en hierarkisk organisasjon, har vi opplevd som utfordrende og frustrerende. Vi har belyst fenomenet og beskrevet forslag til endringer som gjør ferieplanlegging enklere. Vi fant ingen tidligere studier som belyser liknende problemstillinger. Dette pirret nysgjerrigheten og økte motivasjonen for arbeidet. For best å belyse lederens opplevelse har vi gjennomført en kvalitativ undersøkelse. Ved å gjennomføre intervju med seks nivå 4 ledere med personalansvar for turnusarbeidere i en sykehusorganisasjon, har vi gjort en beskrivende (eksplorerende) undersøkelse. Vi har gjort gode funn som har gitt oss utfyllende kunnskap om fenomenet. Datamaterialet utkrystalliserte fem begreper, som vi har brukt for å beskrivende opplevelsen. Disse er: struktur og standardisering av oppgaver, dataverktøy, mestringsstrategier, forhandlinger og lederstil. Ferieplanlegging oppleves av nivå 4 leder som en krevende, sammensatt og tidkrevende arbeidsoppgave. Våre funn viser at opplevelsen bedres av styring, struktur og standardisering av oppgaver. Lederens mestringsevne påvirker handlingsrommet som igjen påvirker opplevelsen. Ved å benytte en styrende lederstil og ha vekt på oppgaven, ser vi at lederen får en bedre opplevelse

The EGF-like Modules of Anticoagulant Protein S. Studies of Ca2+ binding and module interactions

Protein S functions as a cofactor to activated protein C (APC) in the degradation of factors Va and VIIIa. In plasma protein S circulates in two forms; 30-40 % circulates as free protein S molecules while the remaining 60-70 % exists in a 1:1 complex with C4b-binding protein (C4BP). Only the free form of protein S functions as a cofactor to APC. Protein S is a mosaic protein composed of four discrete modules; a g-carboxyglutamic acid (Gla)-containing module, a thrombin-sensitive module (TSR), four epidermal growth factor (EGF)-like modules and a C-terminal sex hormone binding globulin (SHBG)-like module. The Gla-module contains 11 Gla residues, which require vitamin K for their biosynthesis, and anchors the protein to the membrane. All four EGF-like modules contain another modified amino acid residue, erythro-b-hydroxyaspartic acid (Hya) or erythro-b-hyroxyasparagine (Hyn). The three C-terminal modules also contain a concensus sequence indicating Ca2+ binding. The C-terminal SHBG-like module contains the binding site for C4BP. The aim of this work has been to study the Ca2+ binding affinity of the EGF-like modules, and the involvement of these modules in interactions with other proteins. Fragments containing one, two, three or four EGF-like modules have been isolated. This includes the chemically synthesized single EGF modules 3 and 4. These two modules were also expressed as a pair in a procaryotic system and folded to a native conformation. EGF 1-4, EGF 1-3, EGF 2-3 and EGF 2-4 were expressed in a baculovirus based insect cell system. The Ca2+ affinity in the modules was determined either by NMR monitored titrations or using chromophoric chelators. We found that the single modules EGF 3 and 4 bound Ca2+ in the low mM range (Kd 6-9 mM). In the EGF 3-4 pair the N-terminal site binds Ca2+ with an affinity that is almost identical to that of free module 3, whereas the affinity of the C-terminal module is greatly enhanced. Compared to the single module the affinity is ~8600-fold higher for EGF 4 in the pair. It thus appears as if the major effect on Ca2+ binding is excerted by the module N-terminal of the Ca2+ binding one. EGF modules 1-4 and 2-4 each was found to contain two very high affinity Ca2+ binding sites; with Kd from 10-8 to 10-6 M, at physiological ionic strength. In contrast, the Ca2+ affinities of EGF 2-3 and EGF 1-3 is two to four orders of magnitude lower. These data imply that also modules C-terminal of the Ca2+ binding one influence the Ca2+ affinity. By using the recombinant EGF modules as inhibitors in a clotting assay, it was shown that the interaction between protein S and APC was mediated by recombinant fragments which contained the first EGF module (EGF 1-4 and EGF 1-3). Yet, EGF 1-4 had an almost 10-fold stronger inhibitory effect than EGF 1-3 for reasons that not yet understood. Using a solid-phase system a direct interaction between protein S and factor Xa was also observed. The Ca2+ binding studies, as well as the experiments where the interactions of protein S were studied indicated that module-module interactions are crucial to the biological function of protein S

Ferie – tilsynelatende enkelt og likevel så vanskelig: mellomlederens opplevelse av ferieplanlegging

Prosjektoppgave organisasjon og ledelse, 2012Ferieplanlegging i en hierarkisk organisasjon, har vi opplevd som utfordrende og frustrerende. Vi har belyst fenomenet og beskrevet forslag til endringer som gjør ferieplanlegging enklere. Vi fant ingen tidligere studier som belyser liknende problemstillinger. Dette pirret nysgjerrigheten og økte motivasjonen for arbeidet. For best å belyse lederens opplevelse har vi gjennomført en kvalitativ undersøkelse. Ved å gjennomføre intervju med seks nivå 4 ledere med personalansvar for turnusarbeidere i en sykehusorganisasjon, har vi gjort en beskrivende (eksplorerende) undersøkelse. Vi har gjort gode funn som har gitt oss utfyllende kunnskap om fenomenet. Datamaterialet utkrystalliserte fem begreper, som vi har brukt for å beskrivende opplevelsen. Disse er: struktur og standardisering av oppgaver, dataverktøy, mestringsstrategier, forhandlinger og lederstil. Ferieplanlegging oppleves av nivå 4 leder som en krevende, sammensatt og tidkrevende arbeidsoppgave. Våre funn viser at opplevelsen bedres av styring, struktur og standardisering av oppgaver. Lederens mestringsevne påvirker handlingsrommet som igjen påvirker opplevelsen. Ved å benytte en styrende lederstil og ha vekt på oppgaven, ser vi at lederen får en bedre opplevelse

Ferie – tilsynelatende enkelt og likevel så vanskelig: mellomlederens opplevelse av ferieplanlegging

Ferieplanlegging i en hierarkisk organisasjon, har vi opplevd som utfordrende og frustrerende. Vi har belyst fenomenet og beskrevet forslag til endringer som gjør ferieplanlegging enklere. Vi fant ingen tidligere studier som belyser liknende problemstillinger. Dette pirret nysgjerrigheten og økte motivasjonen for arbeidet. For best å belyse lederens opplevelse har vi gjennomført en kvalitativ undersøkelse. Ved å gjennomføre intervju med seks nivå 4 ledere med personalansvar for turnusarbeidere i en sykehusorganisasjon, har vi gjort en beskrivende (eksplorerende) undersøkelse. Vi har gjort gode funn som har gitt oss utfyllende kunnskap om fenomenet. Datamaterialet utkrystalliserte fem begreper, som vi har brukt for å beskrivende opplevelsen. Disse er: struktur og standardisering av oppgaver, dataverktøy, mestringsstrategier, forhandlinger og lederstil. Ferieplanlegging oppleves av nivå 4 leder som en krevende, sammensatt og tidkrevende arbeidsoppgave. Våre funn viser at opplevelsen bedres av styring, struktur og standardisering av oppgaver. Lederens mestringsevne påvirker handlingsrommet som igjen påvirker opplevelsen. Ved å benytte en styrende lederstil og ha vekt på oppgaven, ser vi at lederen får en bedre opplevelse

Binding of calcium to anticoagulant protein S: role of the fourth EGF module.

Protein S is an anticoagulant protein containing a Gla (enclosing γ-carboxyglutamic acids) module, a TSR (Thrombin Sensitive Region) module, four EGF (Epidermal Growth Factor)-like modules and an SHBG (Sex Hormone Binding Globulin)-like region. Protein S is a cofactor to activated protein C (APC) in the degradation of coagulation factors Va and VIIIa, but also has APC-independent activities. The function of the fourth EGF module (EGF4) in protein S has so far not been clear. We have now investigated this module through studies of recombinant wild-type protein S and a naturally occurring mutant with Asn217Ser. The mutant has essentially normal APC anticoagulant activity and a previously reported secretion defect. In the wild-type protein, Asn217 is normally β-hydroxylated. The binding of calcium to wild-type protein S is characterised by four high affinity binding sites with K(D) values ranging from 10(-7) to 10(-9) M. Three of these binding sites are located in EGF modules. Using surface plasmon resonance, competition with a calcium chelator and antibody-based methods, we found that one high affinity binding site for calcium was lost in protein S Asn217Ser, but that the mutation also affected the calcium dependent conformation of EGF1. We conclude that binding of calcium to EGF4 of protein S, involving Asn217, is important for the maintenance of the structure of protein S. Also, the abolition of calcium binding to EGF4, related to Asn217, impairs both the structure and function of EGF1

Pharmacokinetics and biodistribution of a human monoclonal antibody to oxidized LDL in cynomolgus monkey using PET imaging.

Oxidized low-density lipoprotein (LDL) plays an essential role in the pathogenesis of atherosclerosis. The purpose of this study was to characterize the pharmacokinetics (PK) of a human recombinant IgG1 antibody to oxidized LDL (anti-oxLDL) in cynomolgus monkey. The tissue biodistribution of anti-oxLDL was also investigated using positron emission tomography (PET) imaging.Anti-oxLDL was conjugated with the N-hydroxysuccinimide ester of DOTA (1,4,7,10-tetraazacyclododecane 1,4,7,10-tetraacetic acid) and radiolabeled by chelation of radioactive copper-64 ((64)Cu) for detection by PET. Anti-oxLDL was administered as a single intravenous (IV) dose of 10 mg/kg (as a mixture of radiolabeled and non-labeled material) to two male and two female cynomolgus monkeys. Serum samples were collected over 29 days. Two ELISA methods were used to measure serum concentrations of anti-oxLDL; Assay A was a ligand binding assay that measured free anti-oxLDL (unbound and partially bound forms) and Assay B measured total anti-oxLDL. The biodistribution was observed over a 48-hour period following dose administration using PET imaging.Anti-oxLDL serum concentration-time profiles showed a biphasic elimination pattern that could be best described by a two-compartment elimination model. The serum concentrations obtained using the two ELISA methods were comparable. Clearance values ranged from 8 to 17 ml/day/kg, while beta half-life ranged from 8 to 12 days. The initial volume of distribution and volume of distribution at steady state were approximately 55 mL/kg and 150 mL/kg, respectively. PET imaging showed distribution predominantly to the blood pool, visible as the heart and great vessels in the trunk and limbs, plus diffuse signals in the liver, kidney, spleen, and bone marrow.The clearance of anti-oxLDL is slightly higher than typical IgG1 antibodies in cynomolgus monkeys. The biodistribution pattern appears to be consistent with an antibody that has no large, rapid antigen sink outside the blood space