Fracionamento do veneno Crotalus durissus terrificus por cromatografia de exclusão molecular

By means of chromatography technique by molecular exclusion using Sephadex G-75 were studied different fractions of venom Crotalus durissus terrificus, one the most common poisonous snakes in Brazil. It were obtained four peaks related to fractions 32, 60, 86 and 103, which molecular weight varied from 4.000 to 150.000. The fractions of all gel filtration diagram were screened through immunoelectrophoresis, in order to verify its charges and migration speed. The precipitation lines were compared with 11 lines obtained through immunoelectrophoresis of total venom against anti-Crotalus durissus terrificus serum. It was observed that fractions of same peak presented peculiar characteristics except fraction 54 (corresponding to the ascending of peak II), which showed significant differences when compared with fraction 60. After screening, fractions of each peak were chosen in order to identify means of double radial diffusion test and the letality was compared with 0,0625 mg/ml concentration of total venom, which corresponds to DL50 in mice by SPEARM & KÄRBER method. Fractions 32, 86 and 103 corresponding to peaks I, III and IV respectively, presented null or negligibe lethality, and fraction II was the most toxic.Através da técnica de cromatografia de exclusão molecular utilizando Sephadex G-75 foram estudadas as diferentes frações do veneno de Crotalus durissus terrificus, uma das serpentes peçonhentas mais comuns no Brasil. Foram obtidos 4 picos (correspondentes às frações 32, 60, 86 e 103) com peso molecular variando de 4.000 a 150.000. As frações de todo o diagrama de gel filtração foram triadas através de reação de imunoeletroforese a fim de se verificar suas cargas e velocidade de migração. As linhas de precipitação encontradas foram comparadas às 11 linhas apresentadas pela reação de imunoeletroforese do veneno total contra o soro anti-crotálico. Constatou-se que as frações de um mesmo pico apresentavam características próprias com exceção da fração 54 (subida do pico II) que mostrou diferenças significativas em relação à fração 60. Após a triagem foram escolhidas as frações de cada pico onde as linhas de precipitação foram mais nítidas e intensas, para estudo de identidade através da reação de difusão radial dupla e letalidade comparada a concentração de 0,0625 mg/ml do veneno total que corresponde a DL50 em camundongo pelo método de SPEARM & KÄRBER. As frações 32, 86 e 103 correspondentes respectivamente aos picos I, III e IV apresentaram letalidade nula ou negligenciada e a fração II foi a mais tóxica

Reatividade tuberculínica e resposta imunológica celular e humoral "in vitro" em doentes com tuberculose pulmonar

This paper presents the results of delayed-type skin reaction to tuberculin and the cellular and humoral immune responses "in vitro" in 50 patients with active pulmonary tuberculosis admitted to the "Parque Hospitalar do Mandaqui", São Paulo, Brazil, in the period from May to August 1980, matched for sex and ranging in age from 20 to 80 years old. In order to study the delayed-type skin reaction to tuberculin, the PPD, Rt-23, 2 TU (Purified protein derivative) was used and the result obtained was of 14.0% of nonreactors, 12.0% of weak reactors and 74.0% of strong reactors. The "in vitro" study of cellular and humoral immune responses was carried out by determining the number of T and B lymphocytes, the lymphocyte transformation, the liberation of the leucocyte inhibitor factor (LIF) and by the passive hemaglutination test. The results showed the importance of calculation of the absolute number of T and B lymphocytes. The culture of lymphocytes and the LIF experiment were able to detect the lymphocyte sensitivity to PPD even in the nonreactor patients and the passive hemaglutination test showed the presence of specific antibodies in the population studied demonstrated by the highest titers when compared with normal subjects, independently of the skin reactivity to tuberculin.Foi estudada a reatividade tuberculínica e a resposta imunológica celular e humoral "in vitro", em 50 doentes de ambos os sexos, de 20 a 80 anos de idade, com tuberculose pulmonar ativa, internados no Parque Hospitalar do Mandaqui da Secretaria de Estado da Saúde, São Paulo (Brasil), no período de maio a agosto de 1980. Para o estudo da reatividade tuberculínica foi utilizado o PPD, Rt-23, 2 UT, tendo havido 14,0% de não-reatores, 12,0% de reatores fracos e 74,0% de reatores fortes. O estudo da imunidade celular e humoral "in vitro" foi realizado pela quantificação de linfócitos T e B, transformação blástica de linfócitos, liberação do fator inibidor da migração de leucócitos (LIF) e reação de hemaglutinação passiva. Os resultados mostraram a validade do cálculo do número absoluto dos linfócitos T e B. A cultura de linfócitos e a técnica do LIF, foram capazes de detectar a sensibilização dos linfócitos ao PPD, mesmo nos doentes não reatores, e a reação de hemaglutinação passiva revelou a presença de anticorpos específicos na população estudada em títulos superiores aos encontrados em pessoas normais, independentemente da reatividade tuberculínica

Reatividade tuberculínica e resposta imunológica celular e humoral "in vitro" em doentes com tuberculose pulmonar Delayed-type skin reaction to tuberculin and the cellular and humoral immune response "in vitro" in patients with pulmonary tuberculosis

Foi estudada a reatividade tuberculínica e a resposta imunológica celular e humoral "in vitro", em 50 doentes de ambos os sexos, de 20 a 80 anos de idade, com tuberculose pulmonar ativa, internados no Parque Hospitalar do Mandaqui da Secretaria de Estado da Saúde, São Paulo (Brasil), no período de maio a agosto de 1980. Para o estudo da reatividade tuberculínica foi utilizado o PPD, Rt-23, 2 UT, tendo havido 14,0% de não-reatores, 12,0% de reatores fracos e 74,0% de reatores fortes. O estudo da imunidade celular e humoral "in vitro" foi realizado pela quantificação de linfócitos T e B, transformação blástica de linfócitos, liberação do fator inibidor da migração de leucócitos (LIF) e reação de hemaglutinação passiva. Os resultados mostraram a validade do cálculo do número absoluto dos linfócitos T e B. A cultura de linfócitos e a técnica do LIF, foram capazes de detectar a sensibilização dos linfócitos ao PPD, mesmo nos doentes não reatores, e a reação de hemaglutinação passiva revelou a presença de anticorpos específicos na população estudada em títulos superiores aos encontrados em pessoas normais, independentemente da reatividade tuberculínica.<br>This paper presents the results of delayed-type skin reaction to tuberculin and the cellular and humoral immune responses "in vitro" in 50 patients with active pulmonary tuberculosis admitted to the "Parque Hospitalar do Mandaqui", São Paulo, Brazil, in the period from May to August 1980, matched for sex and ranging in age from 20 to 80 years old. In order to study the delayed-type skin reaction to tuberculin, the PPD, Rt-23, 2 TU (Purified protein derivative) was used and the result obtained was of 14.0% of nonreactors, 12.0% of weak reactors and 74.0% of strong reactors. The "in vitro" study of cellular and humoral immune responses was carried out by determining the number of T and B lymphocytes, the lymphocyte transformation, the liberation of the leucocyte inhibitor factor (LIF) and by the passive hemaglutination test. The results showed the importance of calculation of the absolute number of T and B lymphocytes. The culture of lymphocytes and the LIF experiment were able to detect the lymphocyte sensitivity to PPD even in the nonreactor patients and the passive hemaglutination test showed the presence of specific antibodies in the population studied demonstrated by the highest titers when compared with normal subjects, independently of the skin reactivity to tuberculin