日本脳炎ウイルスに対する日本産蛇の感受性の検討

No virus could be isolated from sera of 305 wild snakes captured in nature, but hemagglutination-inhibition antibody was found in 6 of 270 snakes only at low titer. Sixty-four snakes were inoculated with JE virus, at various temperatures and attempted for virus recovery from the blood of them at intervals of 1-7 days during the experimental periods of 27-40 days. In only five cases the virus was recovered once for all on the third day (two cases), on the fourth day (one case) and on the sixth day (two cases) after inoculation. HI antibody developed in just one of 60 snakes at low titer, however, no response of NT antibody could be observed in 15 paired sera. These findings seem to imply that the common wild snakes in Japan are low susceptible to JE virus and they are in turn considered to play a minor role in epidemiology of Japanese encephalitis.1967年4月から10月にかけて採取されたヤマカガシ213匹,アオダイショウ28匹,シマヘビ49匹,ヒバカリ6匹,ジムグリ4匹,マムシ4匹合計305匹から日脳ウイルスの分離を試みたがすべて陰性であった.これらの蛇のHI抗体保有はアオダイショウ3匹,シマヘビ2匹,マムシ1匹に10乃至40倍という低い値であったがこれが真にHI抗体か否かはなお検討の要が考えられた.59匹の蛇を用い実験的感染を試みた.感染には10^MLD_の日脳ウイルスを腹腔内に接種し,25℃,室温,15℃,4℃の温度条件で飼育,また途中でウイルスの活性化を目的とし低温飼育から高温飼育に環境を変化させることも行なった.ウイルス接種後,数日おきに採血し,ウイルス血症の有無,HI抗体の上昇を検査した.ヤマカガシ2匹が,ウイルス接種後3日目と6日目に,シマヘビ1匹は5日目に,ヒバカリ及びジムグリのそれぞれ1匹が4日目と6日目に血液からウイルスが分離されたがそれ以後はウイルスの分離は出来なかった.平均30日後のHI抗体上昇の検査ではヤマカガシ28匹中1匹のみに10倍という低い値を示した.以上の事実から蛇の日脳ウイルスに対する感受性は予想以上に低いことが考えられるが蛇の日脳ウイルス増巾に果す役割は,ウイルス感染系路,飼育条件,抗体様成分の解析を吟味し検討した後明かにされるであろう.しかし今後,蛇以外の冷血動物に関しても広汎な実験を行う必要がある

日本脳炎ウイルスの生態学的研究.1968年の調査成績

A serial survey on the ecology of Japanese encephalitis (JE) virus was made in 1968. Virus isolation was negative from 848 hibernated females of Culex tritaeniorhynchus collected in March to early May. In mid May, when newly emerged females appeared, and thereafter, attempts to isolate the virus were continued, but it was July 23 that the first isolation was made. A strain of JE virus was isolated each from C. pseudovishnui in early August and from Aedes vexans nipponii in late July. Eight other species of mosquitoes were negative for JE virus throughout the year. The pigs susceptible to JE virus were exposed in nature to mosquitoes including hibernated females of C. tritaeniorhynchus in spring without detecting the rise in hemagglutination inhibition (HI) antibody in their sera. Continuing the exposure to mosquitoes, the HI antibody was detected only after early August. The number of human cases was smaller than in any of the previous three years. One of the reasons is considered to be that the number of vector mosquitoes was smaller at the time of the epizootic in pigs.前年までに引き続き,1968年に日本脳炎ウイルスの生態学的調査を行なった.3月-5月上旬に採集したコガタアカイエカ越冬雌成虫848個体からはウイルスは分離されなかった.新生雌成虫が出現し始めた5月中旬及びそれ以後も分離を試みたが,始めて日本脳炎ウイルスが分離できたのは7月23日であった.シロハシイエカからは8月上旬に,キンイロヤプカからは7月下旬に,各々1株の日本脳炎ウイルスが分離された.感受性の豚を各々1頭ずつ2月下旬に3部落の豚舎に配って,自然に蚊から吸血されるままにして飼育し続けて,HI抗体が出現する時期を調べたが,抗体が検出されたのは8月上旬以降であった.発生患者数は,過去3年の何れにおけるよりも少なかった.その理由の1つは,豚で日本脳炎の流行が起っている時期のコガタアカイエカの数が少なかったことであると考えられる

日本脳炎ウイルスの生態学の研究 : 1969年,1970年及び1971年の調査成績

Serial surveys on the ecology of Japanese encephalitis virus in Nagasaki area were made during from 1969 to 1971. In total, 11,229 hibernated female mosquitoes of Culex tritaeniorhynchus were caught in early spring every year for virus isolation, however it was unsuccessful. The significant increase of hemagglutination inhibition antibody possessing rate in the sera of slaughtered pigs in early spring was not found in these three years. Virus isolations from the vector mosquitoes in epidemic season were made from 1st to 26th of August in 1969, from 19th of July to 16th of August in 1970 and from 13th to 27th of July in 1971, respectively. Although the isolation efficiencies were not remarkably different at the highest level in a certain limited period in epidemic season during the years 1964 to 1971, the periods for JE virus isolation from the vector mosquitoes became shorter in the years from 1968 to 1971 than from 1964 to 1967. It was considered as one of the reasons that the number of the vector mosquitoes was smaller during the epizootic from 1968 to 1971 than from 1964 to 1967. Subsequently, it was noted that the encephalitis case sbecame to decrease in number in recent years.1969年,1970年及び1971年の3年間に越年コガタアカイエカ11,229個体,65プールについて哺乳マウス脳内接種法でウイルスの分離を試みたが,成績は陰性であった.流行期における蚊からのウイルスの分離は1969年は,8月1日から8月26日まで,1970年は,7月19日から8月6日まで,1971年は7月13日から7月27日までの期間であった.各年の捕集蚊からの日脳ウイルスの分離効率は最も高いときは1969年3.6,1970年4.8,1971年4.4であって,1968年以前の流行盛期のそれと大差がない.以上の事実は,最近3年間の野外でのコガタアカイエカのウイルス汚染が流行期の或る一時期には1968年以前と同じくらいに行われていることを示している.これに反して,蚊からのウイルスの分離期間が異常に短かくなっていることは,コガタアカイエカの発生,消長が最近3年間では著しく減少していることに,その一つの要因を求めることが出来る.これと平行して.患者数も減少し,1969年19名,1970年17名,1971年3名の届出患者があったにすぎない

日本脳炎ウイルスの生態学的研究1966年及び1967年の野外調査成績

Serial survey on the ecology of Japanese encephalitis (JE) virus was made in 1966 and 1967. In spring in the both years, wild caught females of Culex tritaeniorhynchus and many other species including a great number of hibernated females were examined for JE virus. In 1967, besides the above, wild caught females in spring were forced to engorge blood from susceptible pigs, and some days after, the engorged ones were examined for the virus and the pigs for HI antibody. However, no virus was found in all the mosquitoes examined, and no antibody was detected in the pigs. Nevertheless, in mid-spring in 1967 2-ME sensitive antibody was found in a few of slaughtered pigs. This facts is very important and it seems necessary to set forward the program of investigations. Japanese common snakes of six species were examined for the reservoir of JE virus in nature, but it was concluded that snakes play minor role as a natural source of the virus transmission even in the epidemic season. Despite of the fact that the starting time of epizootic in pigs and of the occurrence of infected mosquitoes was nearly the same in 1966 and 1967, the duration and size of the infection in mosquitoes and of the epidemic in men were shorter and smaller in 1967 than in the previous year. The reason seems that the larger number of infected mosquitoes at the starting time in late June,1967 caused earlier and more rapid rise in the HI antibody possessing rate of pigs at the early days of epizootic in them reducing the remaining rate of susceptible pigs as faster as about a half-month than in 1966, and this, in turn, caused subsequent infections in mosquitoes and then in men to be shorter in duration and smaller in size.前年に引き続き,1966年及び1967年に日本脳炎ウイルスの生態学的調査を行つた.両年の春,野外で採集した,多数の越年雌成虫を含むコガタアカイエカ及び他の数種の蚊からのウイルス分離を試みた.更に1967年の春には,野外採集蚊を感受性豚から吸血させ,数日後に吸血蚊からはウイルス分離を,吸血された豚からはウイルス分離とHI抗体の検出を試みた,しかし,上記の何れの蚊からもウイルスは発見されず,何れの豚からも抗体は認められなかつた.それにも拘らず1967年の春には少数のと場豚から2-ME感受性抗体が検出された.この事実は注目に値し,今後この方面からの研究が必要である.野外で採集した6種の蛇について調査した結果,蛇は日本脳炎ウイルスの伝搬源としては,日本脳炎の流行期においても,重要な役割を果していないものと結論される.豚における日本脳炎ウイルスの汚染及び感染蚊出現の開始時期は1966年と1967年とで殆んど同じであつたが,蚊における感染及び人における流行の期間と大きさは1966年には1967年におけるよりも長く,かつ大きかつた.従つて,これは1967年におけるように,流行の開始時期に感染蚊が多く,豚における汚染の上昇が前年に比較して半月ほど早く,かつ急激であつた.このことが感受性豚を少なくし,従って蚊における感染及び人における感染を短かく,そして小さくしたものと思われる

日本脳炎伝搬蚊,特にコガタアカイエカの生態 : I. 1965年の成績

The ecology of vector mosquitoes of Japanese Encephalitis is essential to obtain a satisfactory understanding of the epidemiology of the disease. In this connection, the relative abundance, host preference, and seasonal history of the mosquitoes in Nagasaki area were investigated in 1965. Culex tritaeniorhynchus is a most abundant species in farm villages, and is strongly zoophilic. The overwintered females begin to appear in late March or early April; adults of both sexes originated from them appear in middle or late May; the population density thereafter is nearly unchanged until the maximum period in density from middle July to late August; the number of mosquitoes decreases abruptly in early September and thereafter a very small number of them are only collected till early October. The day length seems to be a controlling factor in determining the gonoactivity of the females of C. tritaeniorhynchus rather than the temperature under certain conditions. The seasonal prevalence of this mosquito is compared also with those of the other four dominant species, Culex vishnui, Aedes vexans nipponii, Armigeres subalbatus and Anopheles sinensis.牛舎,豚舎,山羊舎,鶏舎,人家において,及びドライアイストラップ,二重蚊帖を用いて,長崎地方の19部落で,1965年の早春から初冬まで,定期的又は不定期的に蚊の採集を行なった.また,蚊の飼育実験をも研究室で実施した.得られた結果は次の通りである.1)合計して,18種149,100個体の蚊が採集された.最も多い種はコガタアカイエカであり,全体の72.85%を占めている.次いで,シロハシイエカ,シナハマダラカ,オオタロヤブカ,アカイエカがこの順に多く,他の種類は極めて少ない.ここで,アカイエカが余り多くないのは,人家や鶏舎での採集回数が少なかったことによると思われる.2)各々の種類の全採集蚊数に対する百分率組成を,採集方法別に算出,比較して,吸血嗜好性を吟味した.その結果,コガタアカイエカは大動物及び鳥類を,シロハシイエカは鳥類及び大動物を,シナハマダラカとキンイロヤブカは大動物を,アカイエカは人類及び鳥類を好むことがわかった.3)コガタアカイエカの越冬雌成虫は,3月下旬又は4月上旬に出現し始め,4月下旬にその活動の山がある.新生第一世代の成虫は5月中,下旬に出現する.その後個体数は殆んど変らないか幾分減少して,7月下旬乃至8月下旬の最盛期を迎える.9月上旬になると個体数は激減して,その後10月上旬まで極く少数の雌成虫が採集されるのみとなる.4)コガタアカイエカ雌成虫の個体数が9月上旬に激減することから,大多数の雌成虫がこの頃から越年に入るものと思われる.本種雌成虫の生殖活動性を決定する要因としては,温度よりもむしろ日長時間が少なく共ある条件下では重要と考えられる.5)シロハシイエカは7月中旬～9月上旬に,シナハマダラカは4月上・中旬及び7月下旬～9月中旬に,キンイロヤブカは5月中旬～8月上旬に,オオクロヤブカは7月～9月に,盛に活動する

ビオチン，アビジン，ペルオキシダーゼ法（免疫酵素抗体法）による狂犬病ウイルス感染価の迅速測定法とそのウイルス中和抗体測定への応用

マイクロスライドチェンパーを使用し，免疫酵素抗体法(ピオチン，アピジン，ベロキシダーゼ法)による狂犬病ウイルス感染価およびウイルス中和抗体価の迅速測定法を確立した。この方法は迅速であるのみならず，感度，再現性も優れており，従来から使用されている螢光抗体法に代って狂犬病の迅速診断あるいは血清疫学に有用な新らしい方法となるものである。The rapid titration method of the infectivity and the neutralizing antibody of rabies virus was established by the use of immuno-peroxidase (biotin-avidinperoxidase) staining technique in microslide culture chambers. This method offers high sensitivity and reproducibility and would provide a new mean for the rapid diagnosis of rabies and the seroepidemiology of rabies virus

日本脳炎ウイルスに対する日本産蛇の感受性の検討

No virus could be isolated from sera of 305 wild snakes captured in nature, but hemagglutination-inhibition antibody was found in 6 of 270 snakes only at low titer. Sixty-four snakes were inoculated with JE virus, at various temperatures and attempted for virus recovery from the blood of them at intervals of 1-7 days during the experimental periods of 27-40 days. In only five cases the virus was recovered once for all on the third day (two cases), on the fourth day (one case) and on the sixth day (two cases) after inoculation. HI antibody developed in just one of 60 snakes at low titer, however, no response of NT antibody could be observed in 15 paired sera. These findings seem to imply that the common wild snakes in Japan are low susceptible to JE virus and they are in turn considered to play a minor role in epidemiology of Japanese encephalitis.1967年4月から10月にかけて採取されたヤマカガシ213匹,アオダイショウ28匹,シマヘビ49匹,ヒバカリ6匹,ジムグリ4匹,マムシ4匹合計305匹から日脳ウイルスの分離を試みたがすべて陰性であった.これらの蛇のHI抗体保有はアオダイショウ3匹,シマヘビ2匹,マムシ1匹に10乃至40倍という低い値であったがこれが真にHI抗体か否かはなお検討の要が考えられた.59匹の蛇を用い実験的感染を試みた.感染には10^MLD_の日脳ウイルスを腹腔内に接種し,25℃,室温,15℃,4℃の温度条件で飼育,また途中でウイルスの活性化を目的とし低温飼育から高温飼育に環境を変化させることも行なった.ウイルス接種後,数日おきに採血し,ウイルス血症の有無,HI抗体の上昇を検査した.ヤマカガシ2匹が,ウイルス接種後3日目と6日目に,シマヘビ1匹は5日目に,ヒバカリ及びジムグリのそれぞれ1匹が4日目と6日目に血液からウイルスが分離されたがそれ以後はウイルスの分離は出来なかった.平均30日後のHI抗体上昇の検査ではヤマカガシ28匹中1匹のみに10倍という低い値を示した.以上の事実から蛇の日脳ウイルスに対する感受性は予想以上に低いことが考えられるが蛇の日脳ウイルス増巾に果す役割は,ウイルス感染系路,飼育条件,抗体様成分の解析を吟味し検討した後明かにされるであろう.しかし今後,蛇以外の冷血動物に関しても広汎な実験を行う必要がある