The detection and occurence of veterinary tranquillizers and the beta-blocker carazolol in slaughter pigs

Om binnen Nederland tot een analytisch onderzoeksmodel voor het opsporen van residuen van veterinaire tranquillizers alsmede de beta-blokker carazolol te komen werd een analysemethode voor het onderzoek van monsters varkensnier ontwikkeld. De methode is gebaseerd op hogedruk vloeistofchromatografie met UV-spectrum identificatie. Extra identificatie kan, indien gewenst, met behulp van dunnelaagchromatografie plaatsvinden. De identificatiegrenzen varieren van minder dan 1 tot 2,5 mug/kg afhankelijk van het residu. In samenwerking met het Rijkskwaliteitsinstituut voor Land- en Tuinbouwprodukten werd een onderzoek uitgevoerd bij Nederlandse slachtvarkens. Een eerste onderzoek werd door het RIKILT uitgevoerd, verdachte en positieve monsters werden tevens door het RIVM onderzocht. Geconcludeerd wordt dat in 2,6% van de Nederlandse slachtvarkens residuen van tranquillizers of carazolol aanwezig zijn en wel in 2,0% azepromazine, 0,2% azaperol/azaperon, 0,2 carazolol en 0,2% azepromazine gecombineerd met carazolol. Haloperidol, xylazine, propiopromazine en chloorpromazine werden bij dit bewakingsonderzoek niet aangetoond.Abstract not availableVH

Confirmational analysis of Nicarbazine in poultry feed by combined liquid chromatography/ infrared spectrometry

Orienterend onderzoek is uitgevoerd naar de bruikbaarheid van vloeistofchromatografie met infraroodspectrometrische detectie voor de bevestigingsanalyse van het cocciodio-staticum Nicarbazine in afmestvoer voor pluimvee. Een methode is ontwikkeld gebaseerd op identificatie van de actieve component van Nicarbazine, het 4,4'-Dinitro-carbanilide (DNC). Het principe van de bepaling is concentratie van het monster op een voorkolom gevolgd door kolomschakeling en 'back-flush' gradient-elutie over een capillaire analytische kolom. IR-detectie vindt plaats na eliminatie van de mobiele fase en depositie van de gescheiden componenten op een IR transparant medium met behulp van een vernevelingsinterface. De identificatiegrens van DNC in monsters wordt geschat op 40 tot 60 ng geinjecteerd, afhankelijk van de matrix. Dit komt overeen met circa 1 mg/kg ( 1 ppm) in het oorspronkelijke materiaal.A pilot study has been carried out into the usefulness of combined liquid chromatography and infrared spectrometry to confirm the abuse of the anticoccidial drug Nicarbazin in samples of poultry feed. A method has been developed based on the identification of the active component of Nicarbazin, 4,4'-Dinitro-carbanilide (DNC). The principle is concentration of the extracted sample on a trap column followed by column-switching and back-flush gradient elution over a capillary analytical column. IR-detection is carried out after elimination of the mobile phase and deposition of the eluate on an IR transparant substrate by a spray-jet interface. The limit of identification of DNC in samples is estimated as 40-60 ng injected, depending on the matrix. This corresponds with approximately 1 mg/kg (1 ppm) in the original material.V

Surveillance into the occurrence of residues of anabolic compounds, beta agonists and tranquillizers in slaughter animals

Gedurende het in 1993 uitgevoerde bewakingsonderzoek "bijzondere slachtplaatsen" werden 311 monsters onderzocht op de aanwezigheid van residuen van illegale groeibevor-derende stoffen respectievelijk tranquillizers. In zeven monsters werd een van de gezochte verbindingen aangetoond. In zes gevallen werd de bijbehorende actiegrens overschreden. Uitgedrukt in aantallen onderzochte dieren ontstaat een iets ander beeld doordat de in totaal 156 onderzochte monsters urine en lever op beta-agonisten afkomstig waren van 93 dieren. Van dit aantal dieren waren er 5 positief op clenbuterol. Geconcludeerd kan worden dat in een aanzienlijk percentage (6%) monsters residuen van clenbuterol aanwezig waren. Overige beta-agonisten werden niet aangetroffen. Het gebruik van gestagenen blijkt nog steeds voor te komen, het percentage blijft echter gering. Hoewel het aantal onderzochte monsters gering is lijkt het gebruik van tranquillizers toegenomen te zijn. Op basis van deze resultaten is voor het onderzoek gedurende 1994 geadviseerd het onderzoek op beta-agonisten en gestagenen voort te zetten en dat op tranquillizers uit te breiden. Zo mogelijk dient multi-residu onderzoek op hormonale anabolica uitgevoerd te worden.During the surveillance conducted in 1993 focusing on special slaughter locations, 311 samples were analyzed for the presence of residues from illegal growth stimulating compounds, beta agonists and tranquillizers. One of the compounds was detected in seven samples. In six cases the corresponding action level was exceeded. When considering the number of animals tested, a different picture emerges for the beta agonists since the 156 samples of urine and liver tested originated from the 93 animals. Of this number five animals were positive for clenbuterol. It is concluded that still a significant percentage (6%) of animals was treated with clenbuterol. Other beta agonists were not detected. In addition, there still is some use of gestagens, the percentage, however, being relatively small. On the other hand, the percentage of samples found positive for tranquillizers seems large. The number of samples analyzed, however, was limited. On the basis of these results it is advised to continue the surveillance for beta agonists and gestagens, and to increase the activities with respect to tranquillizers. Additionally, multi-residue analyses for hormonal anabolic compounds are recommended.VH

Surveillance for the use of anabolic agents in slaughter animals. Report on an investigation of minced meat for residues of boldenone, ethynylestradiol, medroxyprogesterone, chlormadinone and megesterol

This report describes the results obtained in an investigation of 99 samples minced beef for the presence of illegal xenobiotic anabolic steroids. In five samples (5%) the presence of medroxyprogesterone was detected in a range of 0.9 to 5.6 mug/kg. The identity of the residues was confirmed by gas chromatography-mass spectrometry in accordance with the EC-criteria for reference methods. The concentrations detected do not pose a serious risk for the consumer.VH

Investigation into the occurance of nicarbazin in poultry

In de periode 1990-1994 zijn gehalten aan nicarbazine gemeten in materialen als maaginhoud, afmestvoer, strooisel, vlees en lever van vleeskuikens en ander consumptiegevogelte. Uit deze onderzoeken bleek dat maaginhoud, afmestvoer en strooisel veelal aanzienlijke concentraties aan nicarbazine bevatten, hoewel in het laatste jaar van meten (1994) een behoorlijke concentratiedaling van nicarbazine in maaginhoud heeft plaatsgevonden. Voor het afmestvoer was dit resultaat onverwacht omdat dit, gezien de wachttermijn, geacht werd nicarbazinevrij te zijn ten tijde van het afmesten. Verantwoordelijk voor het vinden van nicarbazine in de monsters maaginhoud is waarschijnlijk het nicarbazine, via de mest in het strooisel gekomen, dat vervolgens weer door het vleeskuiken kan worden opgenomen. Ook wordt een bijdrage geleverd door het afmestvoer indien dat niet nicarbazine vrij was. Een correlatie tussen het nicarbazine gehalte in monsters lever en monsters maaginhoud werd aangetoond. De gevonden gehalten in monsters lever waren ca. een factor 50 hoger dan in vlees. De rol van het productieproces van het afmestvoer is hierbij het onderwerp van separaat onderzoek.During the period 1990-1994 nicarbazin concentrations were determined in sample materials like stomach content, feed, manure/straw, meat and liver from broilers and other consumption poultry. From these studies it appeared that stomach content, feed and manure/straw contained relative high concentrations of nicarbazin, even though a significant decrease in the concentration of nicarbazin in samples of stomach content was observed during the last year of measurement. This finding was not expected for the feed, since feed should be free of nicarbazin during the withdrawal period prior to slaughter. The reason for the presence of nicarbazin in the samples of stomach content probably is the 'consumption' of nicarbazin present in the straw due to recirculation via the manure. An additional contribution can arise from the sometimes rather high concentrations of nicarbazin in the supposed nicarbazin-free feed. A correlation between the concentrations in liver and stomach content was observed. Concentrations of nicarbazin in samples of liver appeared to be a factor 50 higher than those in meat. The role of the production process of feed in contaminating nicarbazin-free feed was the subject of a separate study.V

Surveillance 1994 into the occurrence of residues of beta-agonists, gestagens and tranquillizers in slaughter animals

Gedurende het in 1994 uitgevoerde bewakingsonderzoek 'bijzondere slachtplaatsen' werden 196 monsters lever en 147 monsters urine onderzocht op de aanwezigheid van residuen van beta-agonisten, 197 monsters niervet werden onderzocht op de aanwezigheid van gestagenen en 141 monsters nier onderzocht op de aanwezigheid van tranquillizers. In geen van de onderzochte monsters urine en lever werden beta-agonisten aangetoond.Van de onderzochte monsters niervet werd in een geval het gestageen medroxyprogesteron(acetaat) aangetroffen, in alle overige onderzochte monsters niervet werden geen gestagenen aangetoond. Van de onderzochte monsters nier zijn in acht gevallen residuen van tranquillizers of carazolol aangetroffen. Acepromazine was de meest voorko-mende tranquillizer, azaperol/a-zaperon en xylazine werden eenmaal aangetroffen. In een geval werd de beta-blokker carazolol aangetroffen. Op basis van de resultaten is geadviseerd om in 1995 het onderzoek op beta-agonisten voort te zetten maar een andere matrix, namelijk retina te onderzoeken. Dit vanwege het feit dat de halfwaardetijd van beta-agonisten in retina langer is dan voor urine en lever. Het onderzoek op gestagenen en tranquillizers dient te worden voortgezet. Tevens werd aanbevolen om de aandacht in 1995 meer te richten op de anabole steroiden m.n. boldenon, methylboldenon, methyltestosteron en chloortestosteronacetaat.During the surveillance conducted in 1994, focussing on special slaughter places, 196 samples of liver and 147 samples of urine were analysed for the presence of residues of beta-agonists, 197 samples of kidney fat were analysed for the presence of gestagens and 141 samples of kidney were analysed for the presence of tranquillizers. In none of the analysed samples of urine and liver beta-agonists were detected. In one sample of kidney fat medroxyprogesterone (acetate) was detected. In 8 of the analysed samples of kidney residues of tranquillizers or carazolol were detected. Acepromazine was the most frequently detected tranquillizer, azaperol/azaperone and xylazine were detected once. The beta-blocker carazalol also was detected once. Based on the results for beta-agonists it is suggested to continue the study using a matrix with a larger withdrawal time for residues, e.g. retina. Furthermore it is advised to continue the surveillance for gestagens and tranquillizers, and to focus the surveillance in 1995 on the anabolic steroids e.g. boldenone, methylboldenone, methyltestosterone and chlorotestosterone acetate.V

Surveillance into the occurrence of residues of anabolic steroids and beta-agonists in slaughter animals during 2000.

This report describes the results of a surveillance conducted in 2000. In total 70 animals were tested for a range of anabolic compounds and beta-agonists. In two cases a compound was detected and confirmed, one case of stanozolol and one case of isoxsuprine, a registered veterinary drug.Dit rapport beschrijft de resultaten van een in 2000 uitgevoerd bewakingsonderzoek. Zeventig dieren werden onderzocht op de aanwezigheid van anabolica en beta-agonisten. In twee gevallen werd een stof aangetoond. Een geval betrof de groeibevorderende stof stanozolol, een andere betrof het geregistreerde geneesmiddel Isoxsuprine

Surveillance 1998-1999 into the occurrence of residues of anabolic steroids, beta-agonists, sedatives and thyreostats in slaughter animals

During the surveillance conducted in the period 1998 - 1999, focusing on special slaughter places, different samples were analysed for the presence of residues of anabolic compounds and sedatives, beta-agonists and thyreostats. The conclusion drawn from this surveillance is that 8% (14 animals) of the 172 animals controlled were found positive for one or more of the illegal growth promoting agents tested for.Gedurende het in de jaren 1998 en 1999 uitgevoerde bewakingsonderzoek "bijzondere slachtplaatsen" werd een groot aantal heid van residuen van dierbehandelingsmiddelen, beta-agonisten en thyreostatica. Vanuit dit onderzoek is geconcludeerd dat in 14 dieren (8% van de 172 gecontroleerde dieren) residuen van een of meerdere illegale groeibevorderende stoffen zijn gevonden

Surveillance 1998-1999 into the occurrence of residues of anabolic steroids, beta-agonists, sedatives and thyreostats in slaughter animals

Gedurende het in de jaren 1998 en 1999 uitgevoerde bewakingsonderzoek "bijzondere slachtplaatsen" werd een groot aantal heid van residuen van dierbehandelingsmiddelen, beta-agonisten en thyreostatica. Vanuit dit onderzoek is geconcludeerd dat in 14 dieren (8% van de 172 gecontroleerde dieren) residuen van een of meerdere illegale groeibevorderende stoffen zijn gevonden.During the surveillance conducted in the period 1998 - 1999, focusing on special slaughter places, different samples were analysed for the presence of residues of anabolic compounds and sedatives, beta-agonists and thyreostats. The conclusion drawn from this surveillance is that 8% (14 animals) of the 172 animals controlled were found positive for one or more of the illegal growth promoting agents tested for.Kv

Hormones in imported meat. An evaluation of recent data on levels of natural hormones

Consumptie van vlees, geimporteerd uit Zuid-Amerika, met name Argentinie en Brazilie, leidt niet tot inname van lichaamsvreemde hormonen. Bovendien zijn er geen aanwijzingen voor inname van verhoogde hoeveelheden lichaamseigen hormonen. Onderzoek naar het illegaal gebruik van groeibevorderende stoffen vindt binnen de Europese Unie plaats in het kader van Nationale residu controleprogramma's, uitgevoerd in het kader van Europese regelgeving. Zulk onderzoek vindt plaats zowel gedurende de boerderijfase als ten tijde van de slacht. Veelal richt dit onderzoek zich op excreta zoals urine of mest, of op orgaanvlees. Bij import van buiten de Europese Unie is als regel uitsluitend het voor consumptie bedoelde spiervlees beschikbaar. Het systematisch onderzoek van dit materiaal heeft tot op heden slechts zeer beperkt plaatsgevonden waardoor gegevens over de blootstelling van de consument nauwelijks beschikbaar zijn. Dit rapport beschrijft de resultaten van onderzoek van ca. 300 monsters rund- en varkensvlees op lichaamseigen en lichaamsvreemde hormonen. Geen van de lichaamsvreemde hormonen waarop onderzoek is verricht werd aangetroffen. In zes monsters varkensvlees werden nortestosteron en boldenon aangetroffen. De aanwezigheid van deze hormonen betekent dat ook vlees van beren (niet gecastreerde mannelijke varkens) wordt geexporteerd. In een monster rundvlees overschreed het gehalte aan 17beta-oestradiol de voorlopige grenswaarde van 0,1 microg/kg.Consumption of meat imported from South America, mainly Argentina and Brazil, does not result in the intake of exogenous hormones. In addition, there are no indications for the intake of elevated amounts of endogenous (natural) hormones. Testing for the illegal use of growth promoting compounds within the European Union is conducted within the framework of national residue control programmes, based on European legislation. Such testing takes place "on farm" and after slaughter. Most of the tests are conducted on excreta like urine and manure and on organ tissues. However, in case of import only the muscle tissue intended for consumption is available. Systematic testing of this material, however, has been very limited. Consequently limited information on the actual intake by consumers is available. This report describes the results of the analyses of approximately 300 samples of bovine and porcine meat for the presence of xenobiotic and endogenous hormones. None of the xenobiotic hormones analyzed for was detected in these analyses. In six samples of pork meat nortestosterone and boldenone were detected. The presence of these hormones indicates that boar meat was exported too. In one sample the level of 17beta-oestradiol exceeded the provisional reference value of 0.1 microg/kg.VW