Bacillus thuringiensis and their endophytic capabilities

The main characteristic of Bacillus thuringiensis is that during sporulation produces a parasporal inclusion formed by one or more proteinaceous bodies that exhibit insecticidal activity upon ingestion by susceptible larvae of different orders of insects. In addition, the crystals are composed of insecticidal proteins (Cry/Cyt) and constitute the active ingredient of the most widely used biological insecticideInst. de Microbiología y Zoología Agrícola IMyZAFil: Sauka, Diego Hernan. INTA, Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentina. Concejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Progression of the predatory activity of an Argentine strain of Arthrobotrys oligospora (Helotiales: Orbiliaceae) on Panagrellus redivivus (Rhabditidae: Panagrolaimidae) = Progresión de la actividad depredadora de una cepa argentina de Arthrobotrys oligospora (Helotiales: Orbiliaceae) sobre Panagrellus redivivus (Rhabditidae: Panagrolaimidae)

Nematode-trapping fungi constitute a guild of species that develop specialized trapping structures with which they capture and digest nematodes. These traps are not constitutively present, but instead develop in the presence of nematodes3; they attract them2, adhere to their cuticle and eventually pierce it, extending hyphae inside their bodies.Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola (IMYZA)Fil: Maestro, Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Sauka, Diego Hernan. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentin

El papel central de la secuenciación masiva y la correcta identificación de microorganismos en el desarrollo de bioinsumos agrícolas seguros = Central role of massive sequencing and accurate identification of microorganisms in the development of safe agricultural bioinputs

Los bioinsumos han ganado espacio en el marco de una agricultura que aspira a ser cada vez más viable y sostenible, por constituir una opción menos agresiva y más respetuosa con el medio ambiente que los productos químicos convencionales de síntesis. Estos insumos, a menudo de origen microbiano, pueden contribuir significativamente a la reducción del impacto ambiental asociado a la producción de alimentos. La relación entre la producción de bioinsumos y la esperanza de vida al nacer es relevante en este sentido, ya que estos insumos pueden mejorar la calidad de los alimentos producidos y reducir los riesgos de contaminación química, que impactan en la salud de las personas y en el medio ambiente. Como disciplina, la microbiología puede proporcionar soluciones sostenibles a los desafíos actuales en áreas como la salud, el medio ambiente y la agricultura, y los bioinsumos son una de las soluciones específicas que la microbiología puede aportar en este campo.Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola (IMYZA)Fil: Sauka, Diego Herman. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentin

Diversity and distribution of lepidoptera-specific toxin genes in Bacillus thuringiensis strains from Argentina

A total of 268 Bacillus thuringiensis strains obtained from different sources of Argentina were analyzed to determine the diversity and distribution of the cry1, cry2, cry8, cry9 and vip3A genes encoding for lepidopteran-specific insecticidal proteins. Twin strains were excluded. Ten different profiles were detected among the 80 selected B. thuringiensis strains. Two of these profiles (cry1Aa, cry1Ac, cry1Ia, cry2Aa, cry2Ab and vip3Aa (35/80), and cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1Ia, cry2Aa, cry2Ab and vip3Aa (25/80)) pooled 75% of the strains. The existence of this low diversity is rare, since in most of the studied collections a great diversity of insecticidal toxin gene profiles has been described. In addition, the most frequently detected profile was also most frequently derived from soil (70%), stored product dust (59%) and spider webs (50%). In contrast, the cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1Ia, cry2Aa, cry2Ab and vip3Aa profiles were mainly detected in strains isolated from leaves (40%) and dead insect larvae (50%). Six of the identified insecticidal toxin gene profiles were discovered in strains isolated from stored product dust and leaves indicating higher diversity of profiles in these kinds of sources than in others. Some strains with high insecticidal activity against Epinotia aporema (Lepidoptera) larvae were identified, which is important to explore future microbial strategies for the control of this crop pest in the regionSe analizaron 268 cepas de Bacillus thuringiensis obtenidas de diferentes fuentes de Argentina con el objeto de determinar la diversidad y distribución de genes cry1, cry2, cry8, cry9 y vip3A, que codifican proteínas insecticidas lepidóptero-específicas. Se excluyeron las cepas gemelas. Se detectaron solo diez perfiles diferentes entre los 80 B. thuringiensis seleccionados. Dos de estos perfiles, el cry1Aa, cry1Ac, cry1Ia, cry2Aa, cry2Ab y vip3Aa (35/80) y el cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1Ia, cry2Aa, cry2Ab y vip3Aa (25/80), comprendieron el 75% de las cepas seleccionadas. La existencia de esta baja diversidad es una rareza, ya que en la mayor parte de las colecciones estudiadas se ha descrito una gran diversidad de perfiles de genes de toxinas insecticidas. El perfil detectado con mayor frecuencia se obtuvo principalmente de cepas procedentes de suelo (el 70% de los de esa fuente lo tenían), también fue mayoritario entre los procedentes de polvo de producto almacenado (59%) y en los que procedían de telas de araña (50%). En cambio, el perfil cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1Ia, cry2Aa, cry2Ab y vip3Aa se detectó principalmente en las cepas aisladas de hojas (40%) y de larvas de insectos muertos (50%). Seis de los perfiles identificados fueron encontrados en cepas aisladas de polvo de producto almacenado y de hojas, lo que indica una mayor diversidad de perfiles en estas fuentes que en otras. Se identificaron algunas cepas con alta actividad insecticida contra larvas de Epinotia aporema (Lepidoptera), hallazgo importante para explorar en el futuro estrategias microbianas para el control de esta plaga en la región.Inst. de Microbiología y Zoología Agrícola IMyZAFil: Sauka, Diego Hernan. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Benintende, Graciela Beatriz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentin

Desarrollo de Herramientas para el manejo integrado de Artrópodos perjudiciales. Resúmenes de actividades

Uno de los problemas más importantes de la agricultura moderna es la pérdida de rendimiento derivada del ataque de invertebrados perjudiciales. El uso de plaguicidas químicos para enfrentarlos se contrapone a la demanda mundial de alimentos sanos, con menores niveles de residuos químicos y obtenidos bajo sistemas productivos respetuosos del ambiente. El Programa Nacional de Protección Vegetal del INTA esta fuertemente comprometido con la búsqueda de soluciones a esta problemática promoviendo el Manejo Integrado de Plagas (MIP) y sus distintas tácticas de control. En este marco, el Proyecto Específico del INTA PNPV1135033 “Desarrollo de herramientas para el manejo integrado de artrópodos perjudiciales” se propuso generar conocimientos útiles para el desarrollo de métodos de control biológico, microbiano, genético y comportamental de invertebrados plaga.Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola ( IMYZA)Fil: Lopez, Silvia Noemi. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Sauka, Diego Herman. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Segura, Diego Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de genética E.A.Favret; ArgentinaFil: Segura, Diego Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET); ArgentinaFil: Viscarret, Mariana Mabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentin

Variantes hiperproductoras de proteínas insecticidas de Bacillus thuringiensis obtenidas por mutagénesis inducida aumentan toxicidad para Alphitobius diaperinus

Poster y resumenLa producción avícola puede verse afectada por Alphitobius diaperinus (Coleoptera: Tenebrionidae). Su control se basa principalmente en el empleo de productos químicos. La utilización de una herramienta de control ambientalmente sostenible podría contemplar el uso de bioinsecticidas que contengan Bacillus thuringiensis como ingrediente activo. La cepa nativa INTA Mo4-4, productora mayoritariamente de la proteína insecticida Cry3 durante la esporulación, presenta alta virulencia en larvas de A. diaperinus. A efectos de reducir costos de producción a nivel industrial, es necesario maximizar la obtención de biomasa activa (esporas y cristales proteicos). Esto podría lograrse mediante la selección de mutantes que sinteticen mayores proporciones de proteínas insecticidas obtenidas a través de mutagénesis inducida al azar. Recientemente obtuvimos tres variantes hiperproductoras de INTA Mo4-4 (28, 30 y 113) por exposición a etilmetanosulfonato. Un análisis microscópico evidenció a 30 como una variante claramente oligosporogénica. El objetivo de este trabajo fue cuantificar la actividad tóxica de las tres variantes hiperproductoras de proteínas insecticidas y compararlas con la de INTA Mo4-4. Asimismo se pretendió especular acerca de alguna posible razón responsable de la hiperproducción. La virulencia de las variantes y de la cepa silvestre en A. diaperinus se determinó a través de la estimación de la concentración letal media (Cl50) en bioensayos de incorporación en dieta. Se emplearon seis concentraciones de cada muestra. Los valores obtenidos de Cl50 resultaron del promedio de tres bioensayos realizados en días diferentes y estimados mediante análisis Probit. Además se realizaron recuentos de esporas viables en placa a partir de la biomasa de cada variante y de la cepa silvestre. Los resultados mostraron un aumento significativo de la actividad tóxica de las variantes hiperproductoras en comparación con INTA Mo4-4 (Cl50= 200,7 ± 32,5 μg de biomasa/ml de dieta), representando mejoramientos entre un 53 y 57%. Los recuentos de esporas de las variantes 28 y 113 fueron similares entre sí y alrededor de 3,5 veces menores que el de INTA Mo4-4 (5x107 UFC/mg de biomasa). En cambio, el recuento de la variante 30 resultó un orden de magnitud menor que el de las otras variantes y la cepa silvestre. Considerando estos resultados y observaciones microscópicas previas, la hiperproducción se asoció a variantes oligosporogénicas. Este tipo de variantes se caracterizan por cultivos donde algunas células hijas pueden esporular y otras no, haciendo que la fase estacionaria se prolongue en estas últimas, y se produzca mayor cantidad de proteínas insecticidas. Esto se evidenció claramente en la variante 30, y en menor medida en la 28 y 113, donde los recuentos de esporas fueron menores que en la cepa silvestre. El uso de este tipo de variantes podría mejorar el rendimiento de la producción de biomasa activa de INTA Mo4-4 para el desarrollo de un bioinsecticida.Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola (IMYZA)Fil: Pérez, Melisa Paula. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Pérez, Melisa Paula. Agencia Nacional de Promoción Científica y Tecnológica (ANPCyT); ArgentinaFil: Berretta, Marcelo Facundo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Berretta, Marcelo Facundo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Benintende, Graciela Beatriz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Sauka, Diego Herman. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Sauka, Diego Herman. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Análisis metagenómico 16s comparativo del compost de dos lecherías de la provincia de Córdoba

Poster y resumenEl compostaje permite convertir residuos orgánicos a inorgánicos asimilables para las plantas por la acción de un consorcio microbiológico de organismos mesófilos y termófilos. La identificación de sus componentes es importante para la caracterización de nuevas bacterias y enzimas termoestables que podrían aplicarse en la industria para la degradación de la biomasa. El objetivo de este trabajo es comparar la comunidad microbiana de las camas de compost (CC) de dos lecherías de la provincia de Córdoba mediante secuenciación metagenómica 16s e inferir diferencias según cada sistema de compostaje. Las dos lecherías (MB y AT) se muestrearon en julio de 2019. MB tenía 30 meses desde su inicio, piso de concreto en el área donde la vaca para a alimentarse, y una carga (CA) de 14,5 vacas/m2 sobre área de la cama. La cama de compost MB se inició sobre el suelo natural, siempre ha sido laboreada con cincel en profundidad dos veces por día y sin adición de sustrato. La cama AT tenía 20 meses desde su inicio, no cuenta con piso de concreto donde la vaca se alimenta (establo 100% cama) y la carga era de 13,75 vacas/ m2. AT inició con 40 cm de cáscara de maní, y luego se continúo adicionando para mantenimiento con laboreo siempre a cincel más rotocultivador a razón de dos veces por día. Se recogieron dos muestras por lechería a 30 cm de profundidad, se liofilizaron y homogeneizaron con un desintegrador universal de alta velocidad (modelo FW100). El ADN total se purificó con el kit PureLink Microbiome (ThermoFisher) y se secuenció en INDEAR (Rosario, Santa Fe). Las lecturas crudas Illumina se filtraron eliminando duplicaciones y lecturas quiméricas. El análisis metagenómico se realizó utilizando el pipeline QIIME (http://qiime.org/). Las curvas de rarefacción obtenidas en los dos tratamientos alcanzaron sus asíntotas, por tanto, las unidades taxonómicas operativas (OTUs) observadas son representativas del conjunto de la diversidad bacteriana. La biodiversidad filogenética (PD) es levemente mayor en MB, aunque el índice de diversidad de Shannon indicó un 97% de similitud entre los tratamientos. Los phyla predominantes en ambos tratamientos fueron Actinobateria, Proteobateria y Bacteroidetes. Se observaron diferencias en los phyla Planctomicetes, (AT = 0,2% y MB = 7%), y Firmicutes, (AT entre 11 y 18% y MB 24%). Algunos géneros que podrían jugar un papel importante en la degradación de la biomasa son Clostridum, Symbiobacterium, Thermobacter, Geobacillus, Bacillus, Ureibacillus, Theropolyspora, Thermobispora, Thermospora. De éstos, en las muestras analizadas se identificaron Clostridium (aproximadamente 7% en AT y 1% en MB) y Bacillus que sólo se identificó en AT con una frecuencia de 1,3%. Nuestros resultados indican que hay diferencias entre los tratamientos. Si bien AT llevó un menor tiempo de compostaje se identificó una mayor frecuencia de géneros de interés y que posiblemente este tratamiento, sea más eficiente en la degradación de materia orgánica.Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola (IMYZA)Fil: Marozzi, Antonela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente (INIBIOMA); Argentina. Universidad Nacional del Comahue. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente (INIBIOMA); ArgentinaFil: Monge, Juan Leandro. Universidad Nacional de Villa María; ArgentinaFil: Sauka, Diego Herman. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Peralta, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Universidad Nacional de Villa María; ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); Argentin

Análisis de la secuencia genómica de Bacillus thuringiensis serovar darmstadiensis INTA Mo14-4, una cepa argentina con actividad nematicida

Poster y resumenBacillus thuringiensis es una bacteria gram positiva que produce durante la esporulación uno o más cuerpos parasporales cristalinos proteínicos responsables de su actividad letal para diversos invertebrados (artrópodos y algunos nematodos).Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola (IMYZA)Fil: Palma, Leopoldo. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ghiglione, Bárbara. Universidad de Buenos Aires, Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Ghiglione, Bárbara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pérez, Melisa Paula. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Salas, Augusto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Salas, Augusto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Berretta, Marcelo Facundo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Berretta, Marcelo Facundo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sauka, Diego Herman. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Sauka, Diego Herman. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Bacillus sp. 123, una cepa aislada de suelos agrícolas con potencial para degradar diferentes antibióticos

Poster y resumenLas especies pertenecientes al género Bacillus poseen diferentes propiedades naturales que van desde la síntesis de diferentes toxinas hasta la producción de varias proteínas y enzimas con aplicaciones biotecnológicas. Muchos de los genes que las codifican se encuentran localizados en el ADN extracromosomal o plasmídico, generalmente acompañados de otros factores de virulencia tales como genes de resistencia a antibióticos. Estos plásmidos son transferibles pudiendo alcanzar a especies receptoras relacionadas mediante transferencia horizontal. Los genes de resistencia a antibióticos son imprescindibles para hacer frente a los mismos por parte de las bacterias patógenas, pero también son frecuentemente encontrados en bacterias no patógenas aisladasdesde diferentes ecosistemas. Esta propiedad es muy interesante ya que brinda la posibilidad de que sean utilizadas en el desarrollo de nuevas herramientas aplicables a la biorremediación de suelos o aguas contaminadas con antibióticos, especialmente aquellas provenientes de hospitales y establecimientos lecheros o productores de ganado. El objetivo de este trabajo fue realizar la caracterización microbiológica y secuenciación genómica de la cepa de Bacillus sp. 123, aislada de una muestra de suelo proveniente de un lote agrícola de la localidad de O`Higgins, Buenos Aires. El análisis bajo microscopio de campo claro mostró que la cepa 123 se corresponde a un bacilo gram-positivo a gram-positivo-variable con producción de espora de resistencia terminal deformante, una característica morfológica que fue posteriormente confirmada por análisis en microscopio electrónico de barrido. Su secuencia genómica mostró un tamaño total de 5.139.413 bp y un porcentaje de G+C de 36.1%. Tanto el análisis de su ADN ribosomal 16S como los cálculos ANI (porcentaje promedio de identidad nucleotídica) mostraron que la cepa 123 correspondería a una nueva especie del género Bacillus. La anotación de su genoma fue realizada con el servidor RAST y produjo 5671 secuencias codificantes o CDs de entre los cuales se encontraron genes relacionados a la degradación de los siguientes antibióticos: Penicilina, Vancomicina B, Zwittermicina A, Fosfomicina, Fosmidomicina, Tetraciclina, Cloranfenicol, y Novobiocina. Ensayos preliminares de resistencia a antibióticos mediante pruebas de difusión en agar Mueller- Hinton se encuentran en realización con el objeto de determinar el verdadero potencial biorremediador de la cepa 123.Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola (IMYZA)Fil: Sauka, Diego Herman. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Areco, Vanessa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); ArgentinaFil: Areco, Vanessa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Peralta, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); ArgentinaFil: Peralta, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Marozzi, Antonela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente (INIBIOMA); Argentina. Universidad Nacional del Comahue. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente (INIBIOMA); ArgentinaFil: del Valle, Eleodoro Eduardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Ciencias Agropecuarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Ciencias Agropecuarias del Litoral; ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Bacillus thuringiensis Bt_UNVM-84, una cepa cordobesa con actividad insecticida contra Anthonomous grandis (Coleoptera: Curculionidae)

Poster y resumenBacillus thuringiensis es una bacteria gram positiva capaz de producir durante la fase de esporulación unas inclusiones cristalinas de naturaleza proteínica, comúnmente conocidos como cristales paraesporales, con actividad tóxica específica contra distintas especies de insectos y algunos nematodos.Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola (IMYZA)Fil: Sauka, Diego Herman. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Sauka, Diego Herman. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pérez, Melisa Paula. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Marozzi, Antonela Alejandra. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente; ArgentinaFil: Molla, Antonella. FMC; ArgentinaFil: Fiodor, Angelika. University of Bialystok. Faculty of Biology. Department of Microbiology; PoloniaFil: Peralta, Cecilia. Universidad Nacional de Villa María; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); ArgentinaFil: Peralta, Cecilia. Universidad Nacional de Villa María; ArgentinaFil: Peralta, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Universidad Nacional de Villa María; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica (IMITAB); ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Universidad Nacional de Villa María; ArgentinaFil: Palma, Leopoldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin