Analysis of antioxidants in meads

Cílem této diplomové práce bylo stanovení jednotlivých fenolických látek s antioxidační aktivitou v medovinách. Vzorky medovin byly analyzovány bez úpravy nebo byly extrahovány do směsi ethylacetát:diethylether. Pro kvantitativní stanovení byla zvolena vysokoúčinná kapalinová chromatografie v systému s obrácenými fázemi ve spojení s hmotnostním spektrometrem. Vybrané fenolické látky byly kvantifikovány a jejich obsah v extraktech byl porovnán s obsahem při analýze neupravených vzorků medovin. Zastoupení fenolických látek v medovinách bylo podobné, lišilo se jejich množství v závislosti na použitém medu či technologii výroby.The goal of this thesis was the determination of individual phenolic compounds with antioxidant aktivity in meads. Samples of meads were analyzed either directly without any pretreatments or with extraction step in ethyl acetate:diethyl ether extraction solution. Phenolics were analyzed by high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry. Selected phenolic compounds were quantified and ther amount found both in the non-treated samples and in the extraction-treated samples was compared. Phenolic compound profile in analyzed samples was quite similar; their amount depends on honey used and on production technology of mead.Fakulta chemicko-technologickáStudentka seznámila členy zkušební komise s obsahem své diplomové práce a odpověděla na dotazy členů zkušební komise

Non-covalent Capillary Coating

Tato práce se zabývá pokrýváním kapilár v elektroforéze se zaměřením na nekovalentní pokrývání. Vedle teoretické části, kde jsou popsány různé možnosti pokrývání kapilár, je v experimentální části práce popsán a diskutován postup nekovalentního pokrývání kapiláry kationtovýni tenzidy CTAB a DDAB.This work deals with coating of capillaries for electrophoresis with focus on noncovalent bonding. Besides the theoretical part, which describes the different possibilities of capillary coating, results obtained with noncovalent coating of capillaries with CTAB and DDAB are described and discussed in the experimental part of the work.Ústav organické chemie a technologieStudentka přednesla a úspěaně obhájila svou bakalářskou prác

Srovnání HPLC a elektrochemického stanovení 5-hydroxymethylfurfuralu v medu a v medovině

The content of 5-hydroxymethylfurfural (HMF) in honey and mead is strongly influenced by the technological process of these products and could be used as the parameter of choice to assess the quality of honey and mead. Therefore, the aim of this work was the comparison of well established reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) with voltammetric determination at the glassy carbon electrode. The final HPLC separation was performed on an Ascentis Express C18 column (150 × 3 mm, 2.7 μm) using isocratic elution with 10 % methanol in water. In total, 9 samples (6 honeys and 3 meads) were used for determination of the content of HMF.Obsah 5-hydroxymethylfurfuralu (HMF) v medu a medovině je silně ovlivněn technologickým procesem těchto produktů a lze jej použít jako parametr výběru pro hodnocení kvality medu a medoviny. Proto bylo cílem této práce srovnání dobře zavedené vysoko-účinné kapalinové chromatografie v systémech s obrácenými fázemi (RP-HPLC) s voltametrickým stanovením na skelné uhlíkové elektrodě. Konečná HPLC separace byla provedena na koloně Ascentis Express C18 (150 mm x 3,0 mm, 2,7 um) za použití izokratické eluce s 10% methanolem ve vodě jako mobilní fází. Pro stanovení obsahu HMF bylo použito celkem 9 vzorků (6 medů a 3 medoviny)

Stanovení vybraných pesticidů v medu a medovině pomocí HPLC

The aim of this study was to monitor selected pesticides (Carbendazim, Acetamiprid, Thiacloprid, Epoxiconazole, Metconazole, Prochloraz, Deltamethrin, and T-fluvalinate) in honey and mead samples by reversed-phase liquid chromatography with spectrophotometric detection after QuEChERS extraction. The final separation was performed on YMC triart C18 column with mobile phase consisting of water and acetonitrile. The identification of selected pesticides in samples of honey and mead was performed on the basis of retention times conformity with the standards and quantification using the calibration curve method.Cílem této studie bylo sledovat vybrané pesticidy (Carbendazim, Acetamiprid, Thiacloprid, Epoxiconazol, Metconazol, Prochloraz, Deltamethrin a T-fluvalinát) ve vzorcích medu a medoviny kapalinovou chromatografií v systémech s obrácenými fázemi se spektrofotometrickou detekcí po extrakci QuEChERS. Konečná separace byla provedena na koloně YMC triart C18 s mobilní fází sestávající z vody a acetonitrilu. Identifikace vybraných pesticidů ve vzorcích medu a medoviny byla provedena na základě shody retenčních časů se standardy a kvantifikace byla provedena metodou kalibrační křivky

Determination of caffeine and glucose in selected energy drinks

The aim of this study was to monitor the caffeine and glucose content in several energy drinks. The caffeine was determined by (direct) differential pulse voltammetry at a glassy carbon paste electrode in 0.5 mol L–1 sulfuric acid at a potential step of 5 mV, potential amplitude of 40 mV, and the scan rate of 50 mV s–1. The content of glucose was determined using amperometric glucose biosensor in 0.1 mol L–1 phosphate (pH 7.0) buffer solution at a constant voltage of +0.4 V and stirring speed of 400 min–1. The selected samples were analysed and the results obtained compared to those declared by manufactures. Except to three samples, namely "Monster", "Red Bull" (without sugar) and "Spark", the individual results were in good agreement with the declared amounts. Moreover, based on the analyses performed, it can be stated that the energy drinks "Big Shock!" and "Red Bull" are the best source of energy when considering the found total sugar via the glucose content

Rychlá HPLC/MS/MS analýza profilu a obsahu fenolických látek pro hodnocení kvality medovin

The monitoring of phenolic compounds in mead is a useful tool for the evaluation of its quality and potential adulteration because the profile and content of phenolic compounds strongly depend on the amount and type of honey used for mead production and on the technological process. Therefore, the aim of this study was the optimization of rapid reversed-phase high performance liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry for the determination of 23 phenolic compounds in 22 mead samples. The isolation of monitored phenolic compounds was performed using liquid-liquid extraction with a mixture of diethyl ether and ethyl acetate. 3,4-dihydroxybenzoic, 4-hydroxybenzoic, caffeic, p-coumaric, salicylic, chlorogenic, gentisic, gallic and ferulic acids, together with apigenin, quercetin and 3,4-dihydroxybenzaldehyde were the most frequently occurred phenolic compounds in mead extracts. The instrumental limits of detection and quantification were for all compounds below 20 ug/L and 65 ug/L, respectively. Among the samples studied, four meads contained a low total amount of phenolic compounds (below 10 mg/L), and two of them did not even exceed 2 mg/L. Moreover, a very high concentration of vanillin as a flavouring was observed in one of those samples.Sledování fenolických sloučenin v medovině je užitečným nástrojem pro hodnocení její kvality a možného falšování, protože profil a obsah fenolických sloučenin silně závisí na množství a druhu medu použitého při výrobě medoviny a na technologickém postupu. Cílem této studie byla optimalizace rychlé vysokoúčinné kapalinové chromatografie v systémech s obrácenými fázemi ve spojení s tandemovou hmotnostní spektrometrií pro stanovení 23 fenolických sloučenin ve 22 vzorcích medoviny. Izolace sledovaných fenolických sloučenin byla provedena pomocí extrakce kapalina-kapalina směsí diethyletheru a ethylacetátu. Kyselina 3,4-dihydroxybenzoová, 4-hydroxybenzoová, kávová, p-kumarová, salicylová, chlorogenová, gentisová, galová a ferulová spolu s apigeninem, kvercetinem a 3,4-dihydroxybenzaldehydem byly nejčastěji se vyskytujícími fenolickými sloučeninami v medovinových extraktech. Instrumentální limity detekce a kvantifikace byly pro všechny sloučeniny pod 20 ug/l a 65 ug/l. Mezi studovanými vzorky čtyři medoviny obsahovaly nízké celkové množství fenolických sloučenin (pod 10 mg/l) a dvě z nich dokonce nepřesáhly 2 mg/l. Navíc byla v jednom z těchto vzorků pozorována velmi vysoká koncentrace vanilinu jako ochucovadla

HPLC/MS/MS analysis of polyphenolic compounds in meads

Medovina je alkoholický nápoj, k jehož tradiční výrobě se používá fermentovaná směs medu a vody, ale i ovocné šťávy (melomel) nebo koření a byliny (metheglin). Med obsahuje sacharidy, proteiny, enzymy, aminokyseliny, vitamíny, minerály a fenolické látky. Složení medoviny a obsah fenolických látek záleží vždy na konkrétním typu medu, který byl na výrobu medoviny použit a na technologickém procesu. Fenolické látky jsou sloučeniny, odvozené od sekundárních metabolitů rostlin, které jsou charakteristické svými antioxidačními vlastnostmi. Cílem této práce bylo stanovení 23 fenolických látek v medovinách,pomocí RP-HPLC/MS. Optimalizovaná separace trvala pouze 8 minut. Mezi analyzovanými vzorky medovin byl nalezen vzorek, který neobsahoval běžně se vyskytující fenolické látky. Jednalo se zřejmě o falzifikát a tento vzorek medoviny nebyl vyroben z medu. Na základě výsledků této práce by analýza fenolických látek mohla sloužit jako jeden z parametrů k ověřování kvality medovin, protože pokud se v medovině fenolické látky nevyskytují, znamená to, že při výrobě této medoviny nebyl použit med nebo byl použit med nekvalitní.Mead is alcoholic beverage created by fermenting honey with water and yeast, sometimes can also be added various fruits juice (Melomel), herbs or spices (Metheglin). Honey is composed of saccharides, proteins, enzymes, amino acids, vitamins, minerals and phenolic compounds. Phenolic compounds content in meads depends on honey and used ingredients. Phenolic compounds profile is strongly influenced by the addition of fruit juices and herbal extracts. It is also changed during technological processes, such as fermentation, heat treatment, storage. In this work the quantitative analysis of 23 selected polyphenolic compounds was performed using reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) separation coupled with mass spectrometric (MS) detection. Optimized HPLC/MS separation was carried out in 8 min. The mead without any honey phenolic compounds was found in one studied sample, which can be probably caused by falsification. Therefore the monitoring phenolic profile in mead can help to verify quality of mead

HPLC/MS/MS analysis of polyphenolic compounds in meads

Medovina je alkoholický nápoj, k jehož tradiční výrobě se používá fermentovaná směs medu a vody, ale i ovocné šťávy (melomel) nebo koření a byliny (metheglin). Med obsahuje sacharidy, proteiny, enzymy, aminokyseliny, vitamíny, minerály a fenolické látky. Složení medoviny a obsah fenolických látek záleží vždy na konkrétním typu medu, který byl na výrobu medoviny použit a na technologickém procesu. Fenolické látky jsou sloučeniny, odvozené od sekundárních metabolitů rostlin, které jsou charakteristické svými antioxidačními vlastnostmi. Cílem této práce bylo stanovení 23 fenolických látek v medovinách,pomocí RP-HPLC/MS. Optimalizovaná separace trvala pouze 8 minut. Mezi analyzovanými vzorky medovin byl nalezen vzorek, který neobsahoval běžně se vyskytující fenolické látky. Jednalo se zřejmě o falzifikát a tento vzorek medoviny nebyl vyroben z medu. Na základě výsledků této práce by analýza fenolických látek mohla sloužit jako jeden z parametrů k ověřování kvality medovin, protože pokud se v medovině fenolické látky nevyskytují, znamená to, že při výrobě této medoviny nebyl použit med nebo byl použit med nekvalitní.Mead is alcoholic beverage created by fermenting honey with water and yeast, sometimes can also be added various fruits juice (Melomel), herbs or spices (Metheglin). Honey is composed of saccharides, proteins, enzymes, amino acids, vitamins, minerals and phenolic compounds. Phenolic compounds content in meads depends on honey and used ingredients. Phenolic compounds profile is strongly influenced by the addition of fruit juices and herbal extracts. It is also changed during technological processes, such as fermentation, heat treatment, storage. In this work the quantitative analysis of 23 selected polyphenolic compounds was performed using reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) separation coupled with mass spectrometric (MS) detection. Optimized HPLC/MS separation was carried out in 8 min. The mead without any honey phenolic compounds was found in one studied sample, which can be probably caused by falsification. Therefore the monitoring phenolic profile in mead can help to verify quality of mead

Tyosinázový biosenzor v průtokvé injekční analýze pro přímé stanovení acetaminofenu v lidské moči

An amperometric biosensor compatible with a flow injection analysis (FIA) for highly selective determination of acetaminophen (APAP) in a sample of human urine was developed. This biosensor is also suitable for use in the routine pharmaceutical practice. To prove this statement, two different commercially available pharmaceutical formulations were analyzed. This nano-(bio)electroanalytical device was made from a commercially available screen-printed carbon electrode covered by a thin layer of non-functionalized graphene (NFG) as amperometric transducer. A biorecognition layer was prepared from mushroom (Agaricus bisporus) tyrosinase (EC 1.14.18.1) cross-linked using glutaraldehyde, where resulting aggregates were covered by Nafion (R), a known ion exchange membrane. Owing to the use of tyrosinase and presence of NFG, the developed analytical instrument is able to measure even at potentials of 0 V. Linear ranges differ according to choice of detection potential, namely up to 130 mu mol L-1 at 0 V, up to 90 mu mol L-1 at -0.1 V, and up to 70 mu mol L-1 at -0.15 V. The first mentioned linear range is described by the equation I-p [mu A] = 0.236-0.1984c [mu mol L-1] and correlation coefficient r = 0.9987; this equation was used to quantify the content of APAP in each sample. The limit of detection of APAP was estimated to be 1.1 mu mol L-1. A recovery of 96.8% (c = 25 mu mol L-1, n = 5 measurements) was calculated. The obtained results show that FIA is a very selective method for APAP determination, being comparable to the chosen reference method of reversed-phase high-performance liquid chromatography.Byl vyvinut amperometrický biosenzor kompatibilní s průtokovou injekční analýzou (FIA) pro vysoce selektivní stanovení acetaminofenu (APAP) ve vzorku lidské moči. Tento biosenzor je také vhodný pro použití v běžné farmaceutické praxi. K prokázání tohoto tvrzení byly analyzovány dvě různé komerčně dostupná léčiva. Toto nano-(bio) elektroanalytické zařízení bylo vyrobeno z komerčně dostupné sítotiskové uhlíkové elektrody pokryté tenkou vrstvou nefunkcionalizovaného grafenu (NFG) jako amperometrického převodníku. Biorozpoznávací vrstva byla připravena z houbové (Agaricus bisporus) tyrosinázy (EC 1.14.18.1) zesíťované pomocí glutaraldehydu, kde výsledné agregáty byly pokryty Nafionem (R), jakožto známou iontoměničovou membránou. Díky použití tyrosinázy a přítomnosti NFG je vyvinutý analytický přístroj schopen měřit i při potenciálu detekce 0 V. Lineární rozsahy se liší podle výběru detekčního potenciálu, a to až do 130 µmol L-1 při 0 V, do 90 umol L-1 při -0,1 V a do 70 umol L-1 při -0,15 V. První uvedený lineární rozsah je popsán rovnicí Ip [mu A] = 0,236-0,1984c [mu mol L -1] a korelační koeficient r = 0,9987; tato rovnice byla použita pro kvantifikaci obsahu APAP v každém vzorku. Mez detekce APAP byla odhadnuta na 1,1 umol L-1. Byl vypočítán výtěžek 96,8% (c = 25 um mol L-l, n = 5 měření). Získané výsledky ukazují, že FIA ​​je velmi selektivní metoda pro stanovení APAP, která je srovnatelná s vybranou referenční metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie s obrácenými fázemi

Simultánní stanovení kofeinu a pyridoxinu v energetických nápojích pomocí diferenciální pulzní voltametrie na elektrodě ze skelného uhlíku modifikované Nafionem (R)

A new voltammetric method for simultaneous determination of caffeine and pyridoxine present in different types of commercial energy drinks has been developed. This electroanalytical method is based on anodic oxidation of these biologically active nitrogen-containing heterocycles at glassy carbon electrode covered with thin layer of sulfonated fluoropolymer Nafion® using differential pulse voltammetry in 0.1 M Britton-Robinson buffer of pH 4.5 at potential step 5 mV, potential amplitude 70 mV, and scan rate 50 mV/s. Linear ranges for caffeine and pyridoxine determination were 63.1-600 µM and 7.5-200 µM with the detection limits of 18.9 and 2.2 µM, respectively. It was validated using high-performance liquid chromatography with spectrophotometric detection. Obtained results have shown that voltammetric approach is very simple and low-cost analytical method which can be used for routine determination of caffeine and pyridoxine in energy drinks.Byla vyvinuta nová voltametrická metoda pro simultální stanovení kofeinu a pyridoxinu přítomného v různých typech komerčních energetických nápojů. Tato elektroanalytická metoda je založena na anodické oxidaci těchto biologicky aktivních heterocyklů obsahujících dusík na elektrodě ze skelného uhlíku pokryté tenkou vrstvou sulfonovaného fluoropolymeru Nafionu® pomocí diferenciální pulzní voltametrie v 0,1 M Britton-Robinsonově pufru o pH 4,5 v potenciálním kroku 5 mV , potenciální amplituda 70 mV a rychlost snímání 50 mV/s. Lineární rozsahy pro stanovení kofeinu a pyridoxinu byly 63,1 až 600 µM a 7,5 až 200 µM s detekčními limity 18,9 a 2,2 µM, v tomto pořadí. Byla validována pomocí vysoce účinné kapalinové chromatografie se spektrofotometrickou detekcí. Získané výsledky ukázaly, že voltametrický přístup představuje jednoduchou a nízkonákladovou analytickou metodu, kterou lze použít k rutinnímu stanovení kofeinu a pyridoxinu v energetických nápojích