Identification et caractérisation moléculaire de gènes impliqués dans la réception phéromonale périphérique et mise au point d'un outil d'analyse fonctionnelle chez un lépidoptère (le ver à soie, Bombyx mori)

La communication phéromonale chez les lépidoptères, si sensible et spécifique, constitue un modèle de choix pour l étude des bases moléculaires de la réception olfactive. La spécificité de ce système serait assurée dès le niveau périphérique, dans l antenne, par l intervention d une diversité de protéines impliquées dans la chimioréception des odorants. Le ver à soie, Bombyx mori, est une espèce particulièrement appréciée pour l étude des mécanismes olfactifs : la réponse des mâles à la phéromone est connue, l espèce est manipulable génétiquement et les séquences génomiques sont accessibles sur Internet. Au cours de mon travail de thèse, j ai pu identifier et caractériser au niveau moléculaire une diversité de gènes olfactifs appartenant à différentes familles par des techniques bioinformatiques d analyse du génome et de biologie moléculaire. Leurs patrons d expression ont notamment été analysés afin de vérifier si leur localisation tissulaire était compatible avec une fonction chimiosensorielle. Certains de ces gènes (BmPBP2, BmPBP3, BmAOX2) pourraient coder pour des protéines spécifiquement impliquées dans la réception phéromonale alors que d autres (BmAOX1, BmSNMP2) pourraient intervenir aussi dans la réception de molécules moins spécifiques. Par leurs interactions combinées et séquentielles avec les molécules odorantes, ces différentes familles de protéines permettraient d assurer leur reconnaissance spécifique au cours des différentes étapes périphériques de la réception olfactive. Par ailleurs, j ai pu participer à la mise au point chez le ver à soie d un outil novateur d analyse fonctionnelle in vivo basé sur l expression par transgenèse de RO dans les antennes du ver à soie. Ce système a été développé avec un récepteur phéromonal mâle-spécifique, BmOR1. Les femelles des lignées transgéniques exprimaient fortement le récepteur dans leurs antennes, mais se sont révélées incapables de répondre au composé phéromonal (Bol) au cours d enregistrements électrophysiologiques. L utilisation future d un nouveau promoteur spécifique des neurones olfactifs, pOR2, pourrait permettre de développer le premier système stable d analyse fonctionnelle in vivo chez un lépidoptère.Lepidoptera s pheromonal communication, so sensitive and specific, constitutes a model of choice to study the molecular basis of olfactory reception. The strong specificity of this system is thought to be ensured in the antennae by the intervention of a diversity of genes implicated in the olfactory chemoreception. The silkworm, Bombyx mori, is a particularly interesting species for studying olfaction in insects: male s response to the pheromone is well known, this species is amenable to genetic manipulations and genomic sequences are available on the Internet. In my PhD work, I have identified and characterized at the molecular level a diversity of olfactory genes by bioinformatic analysis of the genome and molecular biology tools. The expression patterns of these genes have been established in order to check for a possible chemosensory function. Some of them (BmPBP2, BmPBP3, BmAOX2) could encode proteins specifically involved in pheromonal reception whereas others (BmAOX1, BmSNMP2) could also act in the reception of less specific molecules. By their combinatorial and sequential actions in signal recognition, these proteins from different families would ensure specific recognition across the different steps of peripheral olfactory reception. I have also participated in the development of a new in vivo functional analysis tool in B. mori, based on the expression of OR by transgenesis. This system has been tested with a male-specific pheromone receptor, BmOR1. Females from transgenic lines strongly expressed the receptor in their antennae, but were unable to respond to the pheromonal compound (Bol) during electrophysiological recordings. Future use of a new promotor, more specific to olfactory neurons, pOR2, could allow the development of the first stable in vivo functional analysis tool in a lepidoptera.PARIS-BIUSJ-Thèses (751052125) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF

Analyse cytologique et moléculaire des effets induits par la 20 - hydroxyecdysone au cours du cycle des cellules épidermiques du Lépidoptère Plodia interpunctella

PARIS-BIUSJ-Thèses (751052125) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF

La transduction olfactive chez les insectes (étude moléculaire et fonctionnelle de trois protéines de la voie des phosphoinositides chez la noctuelle Spodoptera littoralis)

Chez les insectes, les odeurs sont détectées par des NRO antennaires. Des expériences suggèrent que la transduction de cette information passe par la cascade des phosphoinositides. Pour déterminer les mécanismes de cette cascade chez la noctuelle Spodoptera littoralis, nous nous sommes intéressés à trois protéines : la PLC, le canal TRP et la DGK. Nous avons identifié trois gènes : SlitPLC beta, SlitTRP gamma et SlitDGK theta qui sont exprimés au niveau des structures olfactives et dans d'autres tissus. Ils joueraient un rôle dans la transduction olfactive et dans d'autres processus physiologiques. Ces gènes sont exprimés dans l'antenne durant le développement nymphal et la vie adulte. Ils pourraient assurer la mise en place et le fonctionnement du système olfactif périphérique. Pour préciser le rôle de ces gènes, nous avons entrepris des études fonctionnelles. Nous avons utilisé un agent pharmacologique pour bloquer l'activité du canal TRP, observé l'effet d'une mutation de la DGK sur l'olfaction chez la drosophile et utilisé la technique de RNAi pour invalider la DGK et le TRP. Cependant, nous n'avons pas pu établir de protocoles fiables pour ces techniquesPARIS-BIUSJ-Thèses (751052125) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF

La réception phéromonale périphérique chez les lépidoptères nocturnes (caractérisation moléculaire de gènes olfactifs et étude de la modulation de cette réception par les rythmes circadiens)

La spécificité de la communication phéromonale chez les lépidoptères nocturnes en fait un bon modèle pour l étude des bases moléculaires de la réception olfactive. Ce travail a permis d identifier une diversité de gènes olfactifs antennaires chez les noctuelles, par des approches de clonage par homologie et par l analyse d une banque d EST. Par leur diversité et leur action séquentielle ou combinée, les Pheromone-Binding Proteins, les récepteurs phéromonaux, et les enzymes de dégradation des phéromones (PDE) interviendraient comme filtres successifs pour assurer la spécificité de la reconnaissance. Pour étudier l origine des rythmes comportementaux d attraction par la phéromone, l existence d un contrôle périphérique a été recherchée. Une horloge antennaire, un rythme circadien de la réponse antennaire aux phéromones et la transcription d une PDE sous le contrôle d une horloge ont été mis en évidence. Cependant, leur lien avec le rythme olfactif comportemental reste donc à établir.PARIS-BIUSJ-Thèses (751052125) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF

Mécanismes moléculaires impliqués dans le contrôle de la prolifération cellulaire par les ecdysteroïdes chez le Lépidoptère Plodia interpunctella

PARIS-BIUSJ-Thèses (751052125) / SudocPARIS-BIUSJ-Physique recherche (751052113) / SudocSudocFranceF

P450 and P450 reductase cDNAs from the moth Mamestra brassicae: cloning and expression patterns in male antennaeb

International audienc

Nanosilica-based post-treatment of hardened cement-based materials: The underlying physics

We study here the imbibition of a nanosilica-based product in a hardened cement-based material along with the consequences of the product on transport properties. We use X-ray microtomography to assess the liquid ingress in the cement-based matrix as a function of time. We moreover measure the consequences of the nanosilica treatment on water absorption and chloride penetration. Our results suggest that nano-silica imbibition in cement-based materials involves some deep particle clogging and, in turn, some phase separation in the porous cement-based material. As a consequence, the effective local concentration of nano-silica increases in a clogged zone located between a critical clogging depth and the surface. In this zone, the silica concentration level in the porosity allows for the formation of a physical barrier inside the material, which can, in turn, affect transport properties

Disruption of the Sugar Transporters AtSWEET11 and AtSWEET12 Affects Vascular Development and Freezing Tolerance in Arabidopsis

International audienc

Prendre au sérieux la société de la connaissance: Livre blanc

il s'agit d'un type de produit dont les métadonnées ne correspondent pas aux métadonnées attendues dans les autres types de produit : REPORTCe Livre Blanc est le fruit de quatre années de rencontres, de séminaires préparatoires, de colloques, d’auditions, de focus groups.Plus de 1.500 personnes y ont contribué depuis 2012. Il est représentatif de ce que l’on nomme « la société de la connaissance par le bas ». Il se justifie d’autant plus que la confiance de tous nos interlocuteurs dans l’apport des démarches scientifiques comme de la formation supérieure dans la construction de notre futur commun est avérée.Ce Livre Blanc est une contribution à l’analyse. Il propose des pistes d’amélioration des politiques publiques. Il vise à définir l’horizond’actions pour les acteurs concernés : le législateur, l’exécutif, lesacteurs de la société civile, les établissements d’enseignement supérieuret de recherche, et les collectivités. (...)Evelyne Lhoste et Pierre-Benoit Joly du Laboratoire Interdisciplinaire Sciences Innovations Sociétés de l'Inra font partie du comité de pilotage et de rédaction