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Evaluación de la seguridad viral en productos biológicos
PosterEl desarrollo de productos biofarmacéuticos requiere un control estricto de los procesos de manufactura a fin de obtener un producto seguro para humanos y animales Para esto es fundamental realizar el control de contaminantes virales sobre los productos biológicos y los reactivos o sustratos de origen animal utilizados para producirlos El esquema estándar de control de contaminantes virales adventicios sigue los lineamientos y normativas nacionales e internacionales, e incluye la inoculación de la muestra en líneas celulares susceptibles para detectar una amplia variedad de virus.Instituto de VirologíaFil: Salazar, Daniela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. Laboratorio de Virus Adventicios; ArgentinaFil: Salazar, Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Franco, Lautaro Nahuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. Laboratorio de Virus Adventicios; ArgentinaFil: Franco, Lautaro Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Becerra, María Luciana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. Laboratorio de Virus Adventicios; ArgentinaFil: Becerra, María Luciana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Perez Lopez, Jorgelina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. Laboratorio de Virus Adventicios; ArgentinaFil: Perez Lopez, Jorgelina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Politzki, Romina Paula. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. Laboratorio de Virus Adventicios; ArgentinaFil: Politzki, Romina Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ruiz, Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. Laboratorio de Virus Adventicios; ArgentinaFil: Ruiz, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Alvarez, Irene. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. Laboratorio de Virus Adventicios; ArgentinaFil: Alvarez, Irene. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Olguin Perglione, Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas. Laboratorio de Virus Adventicios; ArgentinaFil: Olguin Perglione, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin
Influencia de las condiciones de incubación en la detección de anticuerpos contra el Virus de la Leucosis bovina por ELISA = Influence of the incubation conditions on the detection of antibodies to bovine leukemia virus by ELISA
En este trabajo se modificaron las condiciones de incubación del ensayo de ELISAp24 que detecta anticuerpos contra el Virus de la Leucosis bovina, con el propósito de evaluar si se reduce el número de resultados falsos y en consecuencia la factibilidad de usarlo con fines diagnósticos confirmatorios, ya
que fue desarrollado y validado en nuestro laboratorio para el análisis y monitoreo de seroprevalencia a nivel rodeo y/o para tamizaje de muestras individuales. Se analizaron 128 muestras de suero pertenecientes a 2 rodeos infectados naturalmente de distinto sistema productivo y prevalencia
individual, utilizando las condiciones estándar (20-25ºC-30 minutos) y las modificadas (4-8ºC-16-24hs). Los resultados evidencian que las condiciones modificadas no sólo mejoran la capacidad de detección de individuos infectados, sino que disminuyen el número de resultados falsos positivos. Estos hallazgos evidencian la factibilidad de utilizar el ensayo de ELISAp24 como método confirmatorio, y abren camino
hacia la realización de un protocolo integral de validación para evaluar su performance diagnóstica, ya que la mejora independiente de la sensibilidad y la especificidad resulta de importancia crítica cuando se utiliza un ensayo para determinar el estado sanitario individual.The p24ELISA assay has been developed in our laboratory
for screening, seroprevalence analysis and/or surveillance
of Bovine Leukemia Virus natural infection. In this work we
modified the incubation conditions of the p24ELISA, with
the final purpose to evaluate if the total number of false
results can be reduced. We analyzed 128 samples from cattle
of two herds naturally infected, an artificial insemination center
and a commercial dairy farm using the previously defined
(20-25ºc-30min) and the modified (4-8ºC-16-24hs) incubation
conditions. The results show that the modified conditions not
only improve the sensitivity but also the specificity of
detection, since not only the number of false negative but also
false positive results can be reduced. This evidence permits
to lucubrate about the factibility to use the p24ELISA system
for confirmatory diagnosis, and show the importance to follow
up a complete validation protocol to finally evaluate the
diagnostic performance of the assay. This is important since
the independent modification of sensitivity and specificity is
critical when some assay is used for confirmatory diagnosis.Instituto de VirologíaFil: Lomonaco, Marina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Martinez, Cecilia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Alvarez, Irene. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Gutierrez, Gerónimo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Politzki, Romina Paula. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Trono, Karina Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentin
Analysis of irradiated Argentinean fetal bovine serum for adventitious agents
Fetal bovine serum (FBS) used in cell culture may be contaminated with adventitious agents, which can affect the production of biologicals and the results of clinical laboratory tests. We carried out a retrospective study to determine the incidence of adventitious agent contamination of Argentinean irradiated FBS dating from 2015 to 2019. We analyzed FBS batches for mycoplasma and adventitious viruses (bovine pestiviruses, bovine adenovirus, bluetongue virus, bovine parainfluenza virus 3, rabies virus, bovine parvovirus, bovine herpesvirus 1, bovine respiratory syncytial virus, and reovirus). Cell passages followed by direct immunofluorescence were carried out to check viability of the mentioned adventitious agents. Also, molecular detection of mycoplasma and pestiviruses was performed on the FBS samples. The presence of neutralizing antibodies against pestiviruses was determined. Molecular analyses indicated that frequencies of mycoplasma and pestiviruses in FBS were 14% and 84%, respectively. All of the batches were seronegative for pestiviral antibodies. After cell passages, all FBS samples were negative for hemadsorbent agents and by immunofluorescence for all of the viral species analyzed; PCR assays were negative for mycoplasma and pestiviruses. Our results demonstrate that, of all adventitious agents tested, local FBS batches only had traces of mycoplasma and pestiviruses; gamma irradiation was effective in inactivating them.Instituto de VirologíaFil: Pecora, Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Perez Lopez, Jorgelina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Jordan, Maximiliano Jesus. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Franco, Lautaro Nahuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Politzki, Romina Paula. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Ruiz, Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Alvarez, Irene. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; Argentin