Divergência genética entre híbridos de tangerina 'Cravo' com laranja 'Pêra'

Os marcadores moleculares têm sido utilizados como ferramentas em programas de melhoramento por hibridação sexual, permitindo a caracterização genética de grande número de genótipos. Os marcadores moleculares RAPD são os mais utilizados pois as técnicas empregadas são simples e de baixo custo. Avaliou-se a divergência genética entre híbridos F1 de tangerina 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) com laranja 'Pêra' (C. sinensis (L.) Osbeck) e estudou-se a variabilidade e a similaridade desses materiais entre si e em relação aos parentais. Reações RAPD, com 102 primers, foram realizadas em uma população de 94 híbridos e nos parentais. As análises multivariadas de divergência genética de componentes principais e agrupamento de Tocher foram realizadas, considerando-se, somente, os fragmentos polimórficos. As distâncias genéticas foram obtidas por meio do complemento aritmético do índice de Jaccard. Gráficos bidimensionais de dispersão das distâncias dos híbridos e parentais e da análise de divergência por meio de componentes principais foram construídos. Verificou-se elevada similaridade genética entre as variedades Cravo e Pêra e seus híbridos, demonstrando uma distribuição praticamente aleatória dos híbridos em relação aos parentais, porém em posições intermediárias. A análise de componentes principais apresentou aplicabilidade reduzida no estudo da divergência genética dos híbridos. O método de otimização de Tocher possibilitou a classificação dos híbridos e parentais em função de sua similaridade genética.Molecular markers have been used as tools in breading programs of sexual hybridation, allowing the genetic characterization of a large number of genotypes. The RADP markers are the most used since the employed techniques are simple and of low cost. To evaluate the genetic divergence among F1 hybrids of 'Cravo' mandarin (Citrus reticulata Blanco) and 'Pêra' sweet orange (C. sinensis (L.) Osbeck), this study analyses the variability and similarity of the hybrids among themselves and with their parents. Random Amplified Polimorfic DNA marker analysis, with 102 primers, were applied to a population composed of 94 hybrids and their parents. Multivariate genetic divergence analysis of the principal components and Tocher grouping were carried out only considering the polymorphic fragments. Genetic distances were calculated by the arithmetic complement of the Jaccard index. Bidimensional dispersion graphs among hybrid and parent distances and of the divergence analysis by principal components were constructed. High genetic similarity among Cravo and Pêra varieties and their hybrids was verified, showing a casual distribution from the hybrids in relation to the parents, but in intermediary positions. The principal component analysis showed little applicability in the study of hybrid genetic divergence. The hybrids and parents were classified in groups based on the genetic similarity, using the Tocher optimization method

Caracterização de cultivares apirênicas de citros de mesa por meio de descritores morfológicos

The aim of this work was to characterize nine citrus fresh fruit cultivars by morphological descriptors. Four year-old plants of sweet oranges 'Lane Late', 'Navelate', 'Navelina' and 'Salustiana'; mandarins 'Clemenules', 'Marisol' and satsuma 'Okitsu'; and hybrids 'Nova' and 'Ortanique', grafted in Trifoliata and cultivated in pots of 100 L, were analyzed. Twenty eight morphological descriptors were selected, making possible a rapid and efficient characterization of the cultivars, including the sweet oranges. The standards obtained are in conformity with the phylogenetic relations among the species studied. The standards can be used in certification, breeding, and germplasm conservation programs.O objetivo deste trabalho foi caracterizar nove cultivares apirênicas de citros de mesa por meio de descritores morfológicos. As avaliações foram realizadas em plantas de laranjeiras 'Lane Late', 'Navelate', 'Navelina' e 'Salustiana'; de tangerineiras 'Clemenules', 'Marisol' e satsuma 'Okitsu'; e de híbridos 'Nova' e 'Ortanique', com quatro anos de idade, enxertadas sobre Trifoliata, cultivadas em vasos de 100 L. Vinte e oito descritores morfológicos foram selecionados, possibilitando a rápida e eficiente caracterização das cultivares, inclusive das laranjas doces. Os padrões obtidos estão de acordo com as relações filogenéticas das espécies estudadas, podendo ser utilizados em programas de certificação, melhoramento e conservação de germoplasma

Concentração de bap e a eficiência de micropropagação de bananeira tetraplóide (grupo AAAB)

Com o objetivo de desenvolver um procedimento eficiente para a produção de mudas de bananeiras tetraplóides (Musa sp. cv. FHIA-01, grupo AAAB) estudou-se o efeito do clone no desenvolvimento in vitro dos explantes e as taxas de contaminação, multiplicação e nível de oxidação em meios de cultura contendo cinco concentrações de BAP. Na fase de introdução in vitro dos explantes, foi observada elevada taxa de contaminação (22,32%), causada, principalmente, por bactérias. No entanto, os níveis de contaminação decresceram na seqüência dos subcultivos, tendo sido de 1,07% no oitavo subcultivo. As maiores taxas de multiplicação foram obtidas no meio de cultura MS com 4,0 mg L-1 de BAP, em média de 2,65 plântulas por subcultivo, possibilitando a produção estimada de 584 plântulas de FHIA-01 por explante inicial no sexto e 3451 no oitavo subcultivo. Em função do clone, houve a produção estimada de 305 a 4497 plântulas por explante inicial, após oito subculturas. A eficiência de aclimatização das plântulas foi de 94%, não sendo encontrados variantes somaclonais em condições de casa-de-vegetação.The objective of the present work was to establish an efficient procedure for the in vitro production of tetraploid banana plantlets (Musa sp. cv. FHIA-01, AAAB group). The cloning effect on the in vitro development of the explants, the rates of contamination and multiplication, and the level of oxidation in culture media with five benzylaminopurine (BAP) concentrations were studied. In the phase of in vitro introduction of explants, a high level of contamination (22.32%), caused mainly by bacteria, was observed. However, the degree of contamination decreased along the subcultures, reaching 1.07% in the eighth subculture. Higher multiplication rates were obtained, averaging 2.65 per subculture, on the MS media supplemented with 4.0 mg L-1 BAP, leading to an estimated production of 584 and 3451 plantlets/initial explant after the 6th and 8th subculture, respectively. A pronounced effect of the cloning on multiplication was observed. Acclimatization efficiency of plantlets was 94%. Somaclonal variations were not observed among in vitro micropropagated plantlets under greenhouse conditions

In vitro recovery of diploid embryos in banana

Este trabalho teve por objetivo avaliar a técnica de resgate de embriões de sementes de bananeira em genótipos diplóides e a influência de defeitos do embrião e do endosperma na germinação in vitro. Foram utilizados os genótipos Calcutta, Malaccensis, Butuhan, França, 0304-02, 1304-06, 4252-04 e 9379-09. De cada genótipo, 100 sementes recém-coletadas foram embebidas em água destilada, por 24 horas, e desinfestadas em solução à base de nitrato de prata e cloreto de sódio. Os embriões extraídos foram introduzidos em meio MS com 30 g L-1 de sacarose e 7 g L-1 de ágar, e cultivados em câmara de crescimento, no escuro e em temperatura de 26 ± 20C. A germinação concentrou-se do quinto ao vigésimo dia de cultivo e apresentou uma média de 53,25% após 45 dias, independentemente do genótipo. As espécies selvagens apresentaram porcentagem média de germinação maior do que a dos genótipos híbridos. A presença de embrião e endosperma normais não foi essencial para a germinação in vitro.This study aimed to evaluate the recovery technique applied to zygotic embryos of banana diploid genotypes and to examine the effect of defective embryo and endosperm on in vitro germination. Genotypes Calcutta, Butuhan, Malaccensis, França, 0304-02, 1304-06, 4252-04 and 9379-09 were used. One hundred seeds of each genotype were collected and soaked in distilled water for 24 hours. They were then disinfected by solutions of 0.5% silver nitrate followed by 5% sodium chloride. Excised embryos were put in MS medium with 30 g L-1 sucrose and 7 g L-1 agar and cultured in growth chambers under dark and 26 ± 20C. Germination occurred between the 5th and the 20th day of growth, being 53.25% in average after 45 days independently of the genotype. Wild species showed a higher germination frequency as compared to that of the hybrid genotypes, and normal embryos and endosperm were not essential for the in vitro germination

Quantification and method to select nucellar plants of Poncirus trifoliata

O objetivo deste trabalho foi quantificar a porcentagem de plantas zigóticas e nucelares de Poncirus trifoliata (L.) Raf. em uma população resultante de polinização aberta e avaliar a eficiência de seleção de plantas nucelares com base na morfologia e no vigor. Sementes de frutos maduros foram semeadas em tubetes de 50 cm3, e após 150 dias as plantas foram transplantadas para sacos de plástico. A morfologia foliar e a altura das plantas foram avaliadas 300 dias após a semeadura, e a caracterização genética foi feita por sistemas isoenzimáticos. Em média, obteve-se 1,07 plantas por semente, e o número máximo observado foi de duas plantas por semente. Nesses casos, ambas as plantas foram caracterizadas como nucelares por análise isoenzimática, embora apresentassem tamanho diferenciado e menor do que a média de altura das demais. As plantas zigóticas identificadas, 5,9% da população, distribuíram-se nas classes de menor altura, manifestando depressão genética. Não foram observadas plantas com vigor híbrido. A diferenciação entre as plantas nucelares e zigóticas, por meio de caracteres morfológicos da folha, não foi possível. O descarte visual das plantas menores, cerca de 30% da população, é eficiente na seleção de porta-enxertos nucelares de trifoliata produzidos em tubetes em ambiente protegido.The aim of this work was to quantify the percentage of zygotic and nucellar plants of Poncirus trifoliata (L.) Raf. in an open pollinated population, and to evaluate the efficiency of the morphology and vigor-based selection method of nucellar plants. Seeds from mature fruits were sowed in plastic tubes of 50 cm3. After 150 days the plants were transferred to plastic bags of 4,8 dm3. Leaf morphology and height of plants were evaluated 300 days after sowing. Genetic characterization was carried out by isoenzymatic systems. In average, 1.07 plants were obtained per seed and the maximum value was two plants per seed. In these cases, both plants were characterized as nucellar by isoenzymes, although showing different and smaller size than the average of the rest of the plants. Zygotic plants identified were 5.9% of the population and were distributed in the classes of smaller size, showing genetic depression. Plants showing hybrid vigor were not observed. The differentiation of nucellar from zygotic plants was not possible by leaf morphological characters. The visual elimination of the smaller plants, about 30% of the population, is an efficient method to select trifoliata nucellar plants produced in plastic tubes under protected environment

Hybrid frequency between tangerine 'Cravo' and orange 'Pêra' crossing: analysis of morphological and RAPD markers

Os objetivos deste trabalho foram avaliar a frequência de híbridos de cruzamento entre tangerina 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) e laranja 'Pêra' (Citrus sinensis (L.) Osbeck), o uso de marcadores morfológicos e moleculares (RAPD) na identificação precoce de plantas zigóticas, e a variabilidade dos híbridos. A porcentagem de híbridos foi maior na população germinada em placas de Petri (19,4%). Verificou-se que quanto maior a competição entre os "seedlings" por espaço e nutrientes, menor a freqüência de plantas híbridas. A identificação dos híbridos não foi possível apenas com o uso de marcadores morfológicos. A análise morfológica dos híbridos revelou elevada variabilidade.The objectives of this work were to evaluate the hybrid frequency from the cross between tangerine 'Cravo' (Citrus reticulata Blanco) and sweet orange 'Pêra' (Citrus sinensis (L.) Osbeck), the use of morphological and RAPD markers for early identification of zygotic plants between parents with similar phenotype, and the morphological variability among the hybrids. Plants germinated on Petri dishes showed the higher hybrid percentage (19.4%). Hybrid plant frequency was inversely proportional to the competition level for space and nutrients among the hybrids. Accurate hybrid identification is not possible using morphological markers alone. The hybrids selected showed high morphological variability

Papaya callus and somatic embryo induction and development

Este trabalho teve por objetivo estabelecer um protocolo para a indução e desenvolvimento de calos e embriões somáticos em mamoeiro (Carica papaya L. cv. Tainung n.1). Foram utilizados quatro tipos de explantes (hipocótilo com folhas cotiledonares, hipocótilo, folhas cotiledonares e epicótilo) e duas condições de cultivo (escuro e 16 horas de luz). A indução e o desenvolvimento de calos foram avaliados nos meios de cultura ½MS2, ½MS10 e HMH e a indução e o desenvolvimento de embriões somáticos nos meios ½MS e HMH1. O cultivo de explantes de hipocótilo com folhas cotiledonares em meio de cultura ½MS10, por 20 dias, sob condições de escuro, foi o mais adequado para a indução (100%) e o crescimento de calos friáveis embriogênicos. O cultivo desses calos em meio ½MS, por duas subculturas de 30 dias, sob condições de escuro, foi o mais adequado para a indução (60%) e o desenvolvimento de embriões somáticos. O tipo de explante, meios de cultura e condições de cultivo foram definidos para a embriogênese somática em mamoeiro.In order to establish a protocol for induction and development of callus and somatic embryos of papaya (Carica papaya L. cv. Tainung n.1) four explant types (hypocotyl with cotiledonary leaves, hypocotyl, cotiledonary leaves and epycotyl) and two light conditions (dark and 16 h photoperiod) were used. Callus induction and development were evaluated in ½MS2, ½MS10 and HMH media, and somatic embryo induction and development in ½MS and HMH1 media. In vitro culture of hypocotyl with cotiledonary leaves in ½MS10 medium, under dark condition for 20 days, was suitable for induction (100%) and growth of embryogenic friable callus. The culture of these callus in ½MS medium, under dark condition for two subcultures of 30 days, was suitable for induction (60%) and development of papaya somatic embryos. The explant type, culture media and culture conditions were defined for papaya somatic embryogenesis