Presenilin Is the Molecular Target of Acidic γ-Secretase Modulators in Living Cells

The intramembrane-cleaving protease γ-secretase catalyzes the last step in the generation of toxic amyloid-β (Aβ) peptides and is a principal therapeutic target in Alzheimer's disease. Both preclinical and clinical studies have demonstrated that inhibition of γ-secretase is associated with prohibitive side effects due to suppression of Notch processing and signaling. Potentially safer are γ-secretase modulators (GSMs), which are small molecules that selectively lower generation of the highly amyloidogenic Aβ42 peptides but spare Notch processing. GSMs with nanomolar potency and favorable pharmacological properties have been described, but the molecular mechanism of GSMs remains uncertain and both the substrate amyloid precursor protein (APP) and subunits of the γ-secretase complex have been proposed as the molecular target of GSMs. We have generated a potent photo-probe based on an acidic GSM that lowers Aβ42 generation with an IC50 of 290 nM in cellular assays. By combining in vivo photo-crosslinking with affinity purification, we demonstrated that this probe binds the N-terminal fragment of presenilin (PSEN), the catalytic subunit of the γ-secretase complex, in living cells. Labeling was not observed for APP or any of the other γ-secretase subunits. Binding was readily competed by structurally divergent acidic and non-acidic GSMs suggesting a shared mode of action. These findings indicate that potent acidic GSMs target presenilin to modulate the enzymatic activity of the γ-secretase complex

Ein neues Neutronen-Doppeldiffraktometer

Die Strahlenschutzmessungen, die nach der Aufste.llung der Anlage am Reaktor an der Monochromatorabschirmung durchgeführt wurden, zeigten, daß sie im angelieferten Zustand zur Schwächung des Primärstrahls und der Streustrahlung auf Toleranzdosisleistung in der nächsten Umgebung außerhalb der Abschirmungnicht ausreichte. Es war daher notwendig, die Hauptabschirmung unter Beibehaltung der äußeren Abmessungen durch Auswahl und Kombination geeigneter Abschirmmaterialien zu verbessern bzw. zu ergänzen. Durch die oben beschriebenen Änderungen konnte die Dosisleistung an der Oberfläche der Hauptabschirmung während des Experimentierbetriebes bei Verwendung der Primärkollimatoren vom Typ A und B auf maximal 30 mrem/h an den ungünstigsten Stellen herabgesetzt werden (Abb. 18, 19 und 21). Die Toleranzdosisleistung von 2, 5 mrem/h wird am Rande des Grundgestells erreicht. Bei zusätzlichem Einbau eines Quarzfilters oder bei Benutzung der Primärkollimatoren vom Typ C liegt die Oberflächendosisleistung an allen Stellen unter 4 mrem/h. Einige Daten der Abschirmung sind in der folgenden Tabelle 1 zusammengestellt. Die in diesem Kapitel angegebenen Dosisleistungs-Werte werden z. T. durch das Abschlußprotokoll des Reaktorstrahlenschutzes vom 10. 8. 1966 bestätigt {Tabelle 2). Dem Reaktorstrahlenschutz sei an dieser Stelle für die freundliche Unterstützung bei den Dosisleistungsmessungen gedankt