National estimates for maternal mortality: an analysis based on the WHO systematic review of maternal mortality and morbidity

BACKGROUND: Despite the worldwide commitment to improving maternal health, measuring, monitoring and comparing maternal mortality estimates remain a challenge. Due to lack of data, international agencies have to rely on mathematical models to assess its global burden. In order to assist in mapping the burden of reproductive ill-health, we conducted a systematic review of incidence/prevalence of maternal mortality and morbidity. METHODS: We followed the standard methodology for systematic reviews. This manuscript presents nationally representative estimates of maternal mortality derived from the systematic review. Using regression models, relationships between study-specific and country-specific variables with the maternal mortality estimates are explored in order to assist further modelling to predict maternal mortality. RESULTS: Maternal mortality estimates included 141 countries and represent 78.1% of the live births worldwide. As expected, large variability between countries, and within regions and subregions, is identified. Analysis of variability according to study characteristics did not yield useful results given the high correlation with each other, with development status and region. A regression model including selected country-specific variables was able to explain 90% of the variability of the maternal mortality estimates. Among all country-specific variables selected for the analysis, three had the strongest relationships with maternal mortality: proportion of deliveries assisted by a skilled birth attendant, infant mortality rate and health expenditure per capita. CONCLUSION: With the exception of developed countries, variability of national maternal mortality estimates is large even within subregions. It seems more appropriate to study such variation through differentials in other national and subnational characteristics. Other than region, study of country-specific variables suggests infant mortality rate, skilled birth attendant at delivery and health expenditure per capita are key variables to predict maternal mortality at national level

Defects in 8-oxo-guanine repair pathway cause high frequency of C > A substitutions in neuroblastoma

Neuroblastomas are childhood tumors with frequent fatal relapses after induction treatment, which is related to tumor evolution with additional genomic events. Our whole-genome sequencing data analysis revealed a high frequency of somatic cytosine > adenine (C > A) substitutions in primary neuroblastoma tumors, which was associated with poor survival. We showed that increased levels of C > A substitutions correlate with copy number loss (CNL) of OGG1 or MUTYH. Both genes encode DNA glycosylases that recognize 8-oxo-guanine (8-oxoG) lesions as a first step of 8-oxoG repair. Tumor organoid models with CNL of OGG1 or MUTYH show increased 8-oxoG levels compared to wild-type cells. We used CRISPR-Cas9 genome editing to create knockout clones of MUTYH and OGG1 in neuroblastoma cells. Whole-genome sequencing of single-cell OGG1 and MUTYH knockout clones identified an increased accumulation of C > A substitutions. Mutational signature analysis of these OGG1 and MUTYH knockout clones revealed enrichment for C > A signatures 18 and 36, respectively. Clustering analysis showed that the knockout clones group together with tumors containing OGG1 or MUTYH CNL. In conclusion, we demonstrate that defects in 8-oxoG repair cause accumulation of C > A substitutions in neuroblastoma, which contributes to mutagenesis and tumor evolution

Actuele ontwikkelingen in regelgeving omtrent het vaststellen van reproductietoxiciteit

Chemische stoffen moeten getest worden op schadelijke effecten op de voortplanting van de mens. Dankzij innovaties zal dit steeds efficienter kunnen, waardoor ook minder proefdieren gebruikt hoeven te worden. Dit staat in dit rapport van het RIVM. Het rapport geeft een overzicht van actuele ontwikkelingen in het meten van reproductietoxiciteit, de schadelijke effecten van chemische stoffen op de voortplanting. Chemische stoffen kunnen schadelijke effecten op de voortplanting teweegbrengen, zoals een verminderde vruchtbaarheid en een verstoorde ontwikkeling van de ongeborene. Onder meer in het kader van het Europese testprogramma REACH moeten producenten van chemische stoffen deze schadelijke effecten vaststellen. De huidige methoden om reproductietoxiciteit in kaart te brengen stammen uit de jaren tachtig. Deze methoden zijn voornamelijk gebaseerd op studies met knaagdieren. Het gebruik van proefdieren ligt daarbij hoog. Dit komt voornamelijk doordat meer dan een generatie moet worden bestudeerd. Een verminderd proefdiergebruik is echter in aantocht. Onderzoek aan hormoonverstoring, proefdierwelzijn en het Europese testprogramma REACH hebben innovaties op dit gebied gestimuleerd. Hierdoor worden gestandaardiseerde testen aangepast en nieuwe testmethoden voorgesteld. Dit beinvloedt tevens teststrategieen, die individuele testen combineren op een getrapte manier. De innovaties moeten leiden tot een verhoogde efficiency en een verminderd proefdiergebruik.Chemicals must be tested for adverse effects on human reproduction. Thanks to innovations, testing will become more efficient, thereby reducing the use of experimental animals. The main developments have been signalled in an overview of current developments in the testing of reproductive toxicity (the adverse effects of chemicals of reproduction) documented in this RIVM report. Chemicals can adversely affect reproduction, which may manifest itself as reduced fertility or maldevelopment of the fetus. Manufacturers of chemicals are required to assess these adverse effects, for example, in the framework of the European programme for chemical safety called REACH. Current methods for reproductive toxicity assessment, which rely mainly on experimental animal studies, stem from the early eighties. The high animal use in the testing of reproductive toxicicity is primarily due to the need to study more than one generation. Reductions of animal use are, however, imminent, with developments in the endocrine disruption, animal welfare and REACH having stimulated innovations in this area. Standard protocols are in the process of being amended and there are proposals for novel test systems. These developments also influence testing strategies, which combine individual tests in a tiered approach. These are innovations then that should lead to increased efficiency and reduced animal use.VW

Het EU (Q)SAR Experience Project: rapportage formats. Sjablonen voor het documenteren van (Q)SAR resultaten voor REACH

De zojuist in werking getreden Europese wetgeving voor chemische stoffen (REACH) propageert alternatieven om het aantal dierproeven te verminderen. (Q)SAR is zo'n alternatief en staat voor kwalitatieve en kwantitatieve structuur-activiteitsrelatie. (Q)SAR's leggen een verband tussen de chemische structuur van de stof en een toxische eigenschap ervan, bijvoorbeeld huidirritatie. Met behulp van deze theoretische modellen is het mogelijk om schadelijke effecten van chemische stoffen voor mens en dier te voorspellen zonder dierproeven te hoeven doen. Het RIVM draagt bij aan het verminderen van het aantal dierproeven door de resultaten van deze modellen, de zogeheten (Q)SAR's, toepasbaar te maken voor beleid. Het RIVM heeft formats ontwikkeld om de resultaten van (Q)SAR's op drie niveaus te beschrijven: het model, het voorspelde effect van een specifieke stof, en de vertaling van dat effect naar beleid. Deze aanvullende informatie is nodig om de geldigheid en betrouwbaarheid van een voorspelling goed te kunnen beoordelen. De formats blijven in ontwikkeling, maar zijn in concept al opgenomen in de REACH-richtlijnen. Ze kunnen bovendien met enige aanpassingen ingezet worden om resultaten van andere alternatieven voor dierproeven, zoals die genoemd worden in Bijlage XI van de REACH wettekst, transparant te documenteren. Genoemde alternatieven zijn onder andere de "read-across"-aanpak en groepering van stoffen ("category"-aanpak), waarbij de toxiciteit van een nieuwe stof gelijk wordt gesteld aan een of meerdere bekende stoffen. Bovenstaande activiteiten zijn het resultaat van het Europese (Q)SAR Experience Project, een initiatief uit 2004 dat het RIVM vooruitlopend op REACH heeft opgezet. Europese beleidsmakers en stoffenbeoordelaars doen hierin kennis en ervaring op met (Q)SAR's, en geven aanbevelingen voor het gebruik ervan in beleid.The European chemicals regulation REACH, which just entered into force, strongly advocates the use of alternatives for animal testing. (Q)SAR is such an alternative and stands for Quantitative Structure-Activity Relationship. (Q)SARs try to correlate the chemical structure of a substance to a toxicological property of that substance, for example skin irritation. The use of these theoretical models makes it possible to predict toxic effects of chemical substances without performing animal tests. RIVM contributes to reducing the number of animal tests by making the results of these models, so called (Q)SARs, suitable for regulatory use. In a European cooperation RIVM developed formats for reporting (Q)SAR results for REACH on three levels: description of the model, the predicted effect for a specific substance, and the interpretation of that effect for regulatory use. This extensive information is needed to be able to judge the validity and reliability of a prediction. These formats continue to develop, but have already been incorporated into the REACH guidance. Furthermore, with simple adaptations they can also serve as reporting formats for other alternatives for animal testing mentioned in Annex XI of the REACH regulation. Examples of such alternatives are the read-across and category approaches, where the unknown toxicity of a new substance is presumed to be equal to one or several similar compounds with known toxic effects. The above mentioned activities are the result of the European (Q)SAR Experience Project, initiated by RIVM in 2004 as a preparation for new regulations under REACH. In this project European regulators and policy makers increase their knowledge of (Q)SARs, gain experience with existing QSAR models, and give recommendations and guidance on the use of these models.VROM-SA

Internationale activiteiten gericht op het verminderen van LC50 testen voor het vaststellen van acute toxiciteit in vissen : International efforts to reduce the use of acute toxicity tests in fish

Om de veiligheid van stoffen voor het milieu te beoordelen is informatie nodig over de mate waarin stoffen giftig zijn. Deze informatie wordt gedeeltelijk via dierproeven verkregen, zoals in vissen. Om zo min mogelijk dierproeven in te hoeven zetten, wordt gezocht naar alternatieven. In dat verband heeft het RIVM in kaart gebracht welke internationale activiteiten zijn ondernomen om het proefdiergebruik te verminderen voor studies naar de acute giftigheid van chemische stoffen voor vissen. Op dit moment vinden de meeste activiteiten hiervoor plaats bij de OESO (Organisatie voor Economische Samenwerking en Ontwikkeling) die zorgt voor uniforme testrichtlijnen en bij ECHA (Europees Agentschap voor Chemische Stoffen) in het kader van de Europese stoffenwetgeving REACH. Bij de acute giftigheidstesten voor vissen wordt gezocht bij welke concentratie 50 procent van de vissen sterft (zogeheten LC50-methode). Deze testen zijn in principe verboden, omdat de dieren veel ongerief ondervinden. Ze worden alleen met ontheffing ingezet als er geen alternatieve methoden mogelijk zijn. Een van de alternatieven is om visembryo's voor deze test te gebruiken; een methode die is geaccepteerd door de OESO en onder bepaalde condities voor REACH mag worden gebruikt. Visembryo's worden tot vijf dagen na bevruchting niet als proefdier aangemerkt, omdat ze dan nog niet zelfstandig kunnen eten en geen pijn en ongerief kunnen ervaren. Implementatie van deze test in de wettelijke richtlijnen kan het proefdiergebruik verminderen. Het is niet mogelijk dierproeven hiermee volledig te vervangen, doordat het gebruik van vissenembryo's niet voor alle (klassen van) chemische stoffen geschikt is. De OESO schrijft nu nog meerdere concentraties voor in de test met volwassen vissen. Het aantal proefdieren kan ook worden verminderd door de huidige test uit te voeren met één concentratie van de stof. Hiervoor wordt bij de OESO momenteel een strategie ontwikkeld.In order to assess the environmental safety of chemical substances, information must be obtained about their toxicity. Such information is partly derived tests performed in animals. Researchers are currently looking for alternative methods to reduce the reliance on animal testing. The Dutch National Institute for Public Health and the Environment (RIVM) has surveyed international efforts to reduce the number of animals in studies examining the acute toxicity of chemical substances to fish. At present, most activities in this area are being undertaken under the auspices of the Organization for Economic Cooperation and Development (OECD), who develop harmonized test guidelines and the European Chemicals Agency (ECHA) for REACH (Registration, Evaluation, Authorization and Restriction of Chemicals). Acute toxicity tests in fish seek to determine the concentration at which 50 percent of the fish die (the so-called 'LC50 test'). In principle, such tests are prohibited because of their large impact on animal welfare. They may only be performed under an exemption when no alternative research methods are available. One alternative is to use fish embryos for this toxicity test. This method has been authorized by the OECD and can be used for REACH purposes. Fish embryos up to five days after fertilization do not fall into the regulatory frameworks dealing with animal experimentation. One reason is that in this early life stage the embryos cannot eat independently or experience pain or discomfort. Implementation of the Fish Embryo Toxicity (FET) tests in the applicable regulatory guidelines may therefore reduce the number of experimental animals for acute toxicity testing. However, FET tests cannot completely replace animal testing because they are not suitable for all (classes of) chemical substances. The OECD guideline currently prescribes multiple concentrations in the fish acute toxicity test. The number of test animals used can also be reduced by performing acute toxicity tests in fish using a single concentration of the substance being studied. The OECD is currently developing a strategy for this.Ministerie van E

Hormoonverstorende stoffen in de Europese regelgeving : Bezien vanuit de gezondheid van de mens

alleen digitaal verschenenDe Europese Commissie heeft concept criteria opgesteld waarmee kan worden bepaald of stoffen hormoonverstorend zijn. Het blijkt dat binnen de huidige wet- en regelgeving veelal de gegevens ontbreken om stoffen aan deze criteria te toetsen. Om aan te tonen of een stof hormoonverstorend is, moet hij een nadelig (of schadelijk) effect veroorzaken, zoals een verminderde vruchtbaarheid of mogelijke verstoring van het zich ontwikkelende zenuwstelsel. Vervolgens moet worden aangetoond dat het schadelijke effect een biologisch verklaarbaar gevolg is van een verstoring van het hormoonsysteem. Dit is doorgaans lastig aan te tonen. De regelgeving vereist informatie die aangeeft dat een stof veilig kan worden gebruikt. Deze informatie kan onder andere in de vorm van gestandaardiseerde dierproeven worden verkregen. De vereiste proefdierstudies zijn echter niet ontwikkeld om alle nadelige effecten als gevolg van hormoonverstoring aan te tonen. Deze studies zijn evenmin ontwikkeld om het achterliggende biologische mechanisme te achterhalen. De studie die op dit moment het beste in staat is om nadelige effecten als gevolg van een mogelijk hormonaal werkingsmechanisme op te pikken is de zogenoemde extended one generation-studie. Deze studie is echter nog lang niet in alle wettelijke kaders verplicht. Hetzelfde geldt voor gestandaardiseerde studies om het biologische werkingsmechanisme te testen. Om beter te kunnen beoordelen of een stof hormoonverstorend is op basis van de voorgestelde criteria pleit het RIVM ervoor om enkele dierproefstudies aan te passen en de extended one generation-studie te verplichten. Daarnaast wordt voorgesteld om de gestandaardiseerde studies naar werkingsmechanismen verplicht te stellen in de huidige regelgeving. Deze aanpassingen in de regelgeving zijn relatief eenvoudig uit te voeren en zijn belangrijk om stoffen met een hormoonverstorende werking op te sporen. Ook zijn nieuwe methoden voor studies nodig om de nog ontbrekende effecten en mechanismen relevant voor hormoonverstoring aan te tonen. Ten slotte is het belangrijk dat er een evenwichtige beoordelingsstrategie wordt ontwikkeld om te evalueren of informatie voldoet aan de voorgestelde criteria.The EU Commission published the draft criteria for the identification of endocrine disrupting chemicals (EDC). Currently the data requirements of the relevant legal frameworks are mostly insufficient to comply with these criteria. An EDC is defined as a substance which causes an adverse effect, like decreased fertility or effects on the developing nervous system. Additionally it must be shown that the adverse effect is biologically related to a disturbance of the function of the hormonal system. This is, in most cases, difficult. Legislation requires information for a safe use of a substance, among which animal studies are also required. Animal studies are, however, not specifically developed to show adverse effects caused by endocrine disruption (ED). These studies are also not developed to elucidate endocrine mechanisms of action (MOA). Currently the best study to investigate effects caused by ED is the extended one generation study (EOGRTS). Neither the EOGRTS nor studies specifically developed to investigate MOA mediated effects are currently required in most of legal frameworks. RIVM recommends to update several animal studies that can detect MOA mediated adverse effects and to oblige the EOGRTS in the data requirements of the relevant legal frameworks. These adoptions are relatively easy to fulfil and are important for the detection of EDC. Additionally it is recommended to develop test guidelines that can detect different endocrine MOAs and the related effects. Finally, it is imperative to develop a balanced guidance to evaluate which information fulfils the proposed criteria.Ministry of HealthWelfare and SportMinistry of Infrastructure and the EnvironmentMinistry of Social Affairs and Employmen

Do current EU regulations for the safety assessment of chemical substances pose legal barriers for the use of alternatives to animal testing?

Voor de beoordeling van risico's van chemische stoffen voor mens en milieu worden veelal dierproeven gebruikt. Alternatieven daarvoor mogen alleen worden ingezet als de wettelijke beoordelingskaders daar expliciet de mogelijkheid voor bieden. Het RIVM heeft bij tien van deze Europese beoordelingskaders onderzocht of dat het geval is. Bij negen van de tien kaders wordt naar alternatieve mogelijkheden voor dierproeven verwezen en doen zich dus geen wettelijke belemmeringen voor. Bij het tiende kader, voor de toelating van diergeneesmiddelen, is het onduidelijk: de wet vermeldt de mogelijkheid niet, maar in de onderliggende richtlijn (guideline), die volgens de wet moet worden nageleefd, worden wel alternatieven aangereikt. Dit maakt de juridische status van de mogelijkheid om ze in te zetten onduidelijk. Uit het onderzoek blijkt ook dat het vooral technisch wetenschappelijke barrières zijn die de inzet van alternatieven voor dierproeven belemmeren, en niet zozeer wettelijke. Er bestaan bijvoorbeeld geen alternatieven voor bepaalde dierproeven, of ze zijn nog onvoldoende geschikt of gevalideerd. Aanbevolen wordt eraan te werken om deze praktische belemmeringen weg te nemen. De studie signaleert daarnaast nog twee aandachtspunten: als eerste gaat het om het gebruik van resultaten van alternatieve methoden voor dierproeven bij de risicobeoordeling bij calamiteiten en bij de vaststelling van industriële locaties waar gevaarlijke stoffen aanwezig zijn. Specifieke dierproefresultaten nemen hier vaak een prominente plaats in. De resultaten van alternatieve methoden passen niet zonder meer in methodieken die in een aantal landen voor deze risicobeoordelingen worden gebruikt. Daarnaast verdient de gevaarsclassificatie, etikettering en verpakking (CLP) van schadelijke stoffen aandacht. Het kader REACH, dat leidend is en waarvoor data voor de CLP worden gegeneerd, schrijft voor dat alternatieven mogelijk zijn mits deze geschikt zijn voor de CLP. Voor de CLP zijn echter voor sommige classificaties geen alternatieve methoden beschikbaar en de classificatie criteria beperken de mogelijkheid om alternatieve methoden te ontwikkelen. De studie is in opdracht van het ministerie van Economische Zaken uitgevoerd, naar aanleiding van een motie in de Tweede Kamer bij de recente aanpassing in de Wet op dierproeven. Mogelijke wettelijke belemmeringen voor geneesmiddelen worden momenteel in een aparte RIVM-studie onderzocht.For the assessment of risks of chemical substances for man and environment, animal studies are commonly performed. Alternatives for these studies may only be applied if the legal frameworks for the assessments explicitly offer a possibility for them. RIVM has analyzed ten of such European frameworks for assessment of chemical substances whether such a possibility is present. In nine of the ten frameworks, reference is made to the possibility to use alternative methods for animal tests and thus pose no barriers for them. In the tenth framework, for the acceptance of veterinary medicinal products, it is not clear: the Directive does not mention this possibility, but in the underlying, mandatory (but nog legally binding) guideline alternative methods are suggested. This makes the legal status of the possibility to use alternative methods unclear in this framework. The investigation also shows that it's mostly practical barriers that obstruct the use of alternatives for animal tests, and not so much legal barriers. There is, for example, a lack of alternatives for some animal tests, or they are not sufficiently suitable or validated. It is recommended to direct the attention to the removal of these practical barriers. The study notices two other points of attention. The first concerns the use of results from alternative methods in the risk assessments for calamities and for the determination of industrial locations with hazardous substances. Specific animal test results are often of high importance there. The results of alternative methods do no directly fit into the calculation methodologies applied by some countries for these risk assessments. Secondly, the classification, labelling and packaging (CLP) of chemical substances needs attention. The framework REACH, which is leading and for which the data used for CLP are generated, states that alternatives are possible, on the condition that the results of alternative methods are suitable for CLP. For some classifications, however, no alternative test methods are available and the classification criteria limit the use/development of alternative methods. The study was performed under commission of the Dutch Ministry of Economic Affairs, because of questions from the Dutch Parliament when the new Law on animal testing was adjusted. Possible legal barriers for human pharmaceuticals are currently investigated in a separate RIVM study.Ministerie van E

Endocrine disrupting chemicals in the EU legal frameworks : Human health perspective

alleen digitaal verschene