Mechanism of resistance to glyphosate in <i>Lolium perenne</i> from Argentina

In Argentina, glyphosate resistance was reported in a Lolium perenne population after 12 years of successful herbicide use. The aim of the current paper was to put in evidence for the mechanism of glyphosate resistance of this weed. Susceptible leaves treated with different doses of glyphosate and incubated in vitro showed an accumulation of shikimic acid of around three to five times the basal level, while no changes were detected in leaves of glyphosate-resistant plants. The resistance mechanism prevents shikimate accumulation in leaves, even under such tissue-isolation conditions. The activity of the glyphosate target enzyme (EPSPS: 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase) was quantified at different herbicide concentrations. EPSPS from resistant plants showed no difference in glyphosate-sensitivity compared to EPSPS from susceptible plants, and, accordingly, no amino acid substitution causing mutations associated with resistance were found. While the glyphosate target enzymes were equally sensitive, the basal EPSPS activity in glyphosate resistant plants was approximately 3-fold higher than the EPSPS activity in susceptible plants. This increased EPSPS activity in glyphosate resistant plants was associated with a 15-fold higher expression of EPSPS compared with susceptible plants. Therefore, the over-expression of EPSPS appears to be the main mechanism responsible for resistance to glyphosate. This mechanism has a constitutive character and has important effects on plant fitness, as recently reported.Instituto de Fisiología VegetalFacultad de Ciencias Agrarias y ForestalesCentro de Investigación de Proteínas Vegetale

Mechanism of resistance to glyphosate in <i>Lolium perenne</i> from Argentina

In Argentina, glyphosate resistance was reported in a Lolium perenne population after 12 years of successful herbicide use. The aim of the current paper was to put in evidence for the mechanism of glyphosate resistance of this weed. Susceptible leaves treated with different doses of glyphosate and incubated in vitro showed an accumulation of shikimic acid of around three to five times the basal level, while no changes were detected in leaves of glyphosate-resistant plants. The resistance mechanism prevents shikimate accumulation in leaves, even under such tissue-isolation conditions. The activity of the glyphosate target enzyme (EPSPS: 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthase) was quantified at different herbicide concentrations. EPSPS from resistant plants showed no difference in glyphosate-sensitivity compared to EPSPS from susceptible plants, and, accordingly, no amino acid substitution causing mutations associated with resistance were found. While the glyphosate target enzymes were equally sensitive, the basal EPSPS activity in glyphosate resistant plants was approximately 3-fold higher than the EPSPS activity in susceptible plants. This increased EPSPS activity in glyphosate resistant plants was associated with a 15-fold higher expression of EPSPS compared with susceptible plants. Therefore, the over-expression of EPSPS appears to be the main mechanism responsible for resistance to glyphosate. This mechanism has a constitutive character and has important effects on plant fitness, as recently reported.Instituto de Fisiología VegetalFacultad de Ciencias Agrarias y ForestalesCentro de Investigación de Proteínas Vegetale

Análisis de la expresión de genes asociados a las vías metabólicas de degradación de clorofilas y síntesis de compuestos flavonoides en brócoli durante la postcosecha

El brócoli (Brassica oleracea L. var. Italica) es una hortaliza ampliamente consumida que pertenece a la familia Brassicaceae, junto con la coliflor, el repollo, los repollitos de Brusellas y el kale. Su consumo aporta una gran cantidad de nutrientes ya que posee una excelente proporción de vitaminas, azúcares y proteínas, una alta proporción de fibras, un bajo contenido de grasas, elevado contenido de antioxidantes, entre los que se destacan los flavonoides, y glucosinolatos. Tanto los flavonoides como los glucosinolatos presentan actividad anticarcinogénica. De la planta de brócoli se consume la inflorescencia, la cual se cosecha en un estado completamente inmaduro y en pleno desarrollo. La cosecha provoca un importante estrés debido a la privación de agua, hormonas y nutrientes, y, en consecuencia, se produce una senescencia acelerada. Este evento se evidencia por un rápido amarillamiento a causa de la degradación de clorofilas. Actualmente, el control de la senescencia se realiza a través de diferentes tipos de tratamientos que tienen como objetivo su retraso. Sin embargo, en muchos de estos tratamientos, se presta particular atención a la calidad organoléptica, dejando de lado la calidad nutricional. El objetivo general del presente plan de trabajo es contribuir al conocimiento a escala bioquímica y fisiológica de la senescencia en brócoli. Como objetivos específicos está el análisis de los genes NYC y NOL de la vía de degradación de clorofilas y los genes CHS y CHI de la vía de síntesis de flavonoides, en distintos tratamientos postcosecha. 26 Para el desarrollo de cada tratamiento se cosecharon entre 30- 40 brócolis a partir de un productor del cinturón hortícola de La Plata, y se transportaron inmediatamente al laboratorio para su limpieza y selección. Los tratamientos a desarrollar fueron: tratamientos físicos con luz blanca (12 µmol.m-2s-1), UV-C (10 kJ.m-2), atmosfera modificada (bolsas de polietileno de baja densidad) y aire caliente (48 ºC 3 h); y tratamientos químicos con citoquininas (100 ppm 6-BAP, 0,1% (v/v) DMSO) y etileno (100 ppm etefón, 0,1% (v/v) DMSO), y con 1-MCP, un inhibidor selectivo de la acción del etileno (100 ppm de 1-MCP). Se realizaron medidas de color superficial, contenido de clorofilas, medida del contenido de compuestos fenólicos y flavonoides. Se realizaron posteriormente análisis de PCR en tiempo real de los genes de interés en las muestras. Lo que se observa hasta el momento es que el contenido de clorofilas se conserva en los tratamientos y correlaciona en muchos casos con una menor expresión de los genes de la vía de degradación como en los tratamientos químicos de citoquininas y 1-MCP. De igual manera, se observa que ciertos tratamientos como los de luz y UV-C aumentan el contenido de fenoles y flavonoides, y en ciertos casos se observa una correlación con la expresión de CHS y CHI. El estudio de los genes aún continúa en proceso.Universidad Nacional de La Plat

Análisis de la expresión de genes asociados a las vías metabólicas de degradación de clorofilas y síntesis de compuestos flavonoides en brócoli durante la postcosecha

El brócoli (Brassica oleracea L. var. Italica) es una hortaliza ampliamente consumida que pertenece a la familia Brassicaceae, junto con la coliflor, el repollo, los repollitos de Brusellas y el kale. Su consumo aporta una gran cantidad de nutrientes ya que posee una excelente proporción de vitaminas, azúcares y proteínas, una alta proporción de fibras, un bajo contenido de grasas, elevado contenido de antioxidantes, entre los que se destacan los flavonoides, y glucosinolatos. Tanto los flavonoides como los glucosinolatos presentan actividad anticarcinogénica. De la planta de brócoli se consume la inflorescencia, la cual se cosecha en un estado completamente inmaduro y en pleno desarrollo. La cosecha provoca un importante estrés debido a la privación de agua, hormonas y nutrientes, y, en consecuencia, se produce una senescencia acelerada. Este evento se evidencia por un rápido amarillamiento a causa de la degradación de clorofilas. Actualmente, el control de la senescencia se realiza a través de diferentes tipos de tratamientos que tienen como objetivo su retraso. Sin embargo, en muchos de estos tratamientos, se presta particular atención a la calidad organoléptica, dejando de lado la calidad nutricional. El objetivo general del presente plan de trabajo es contribuir al conocimiento a escala bioquímica y fisiológica de la senescencia en brócoli. Como objetivos específicos está el análisis de los genes NYC y NOL de la vía de degradación de clorofilas y los genes CHS y CHI de la vía de síntesis de flavonoides, en distintos tratamientos postcosecha. 26 Para el desarrollo de cada tratamiento se cosecharon entre 30- 40 brócolis a partir de un productor del cinturón hortícola de La Plata, y se transportaron inmediatamente al laboratorio para su limpieza y selección. Los tratamientos a desarrollar fueron: tratamientos físicos con luz blanca (12 µmol.m-2s-1), UV-C (10 kJ.m-2), atmosfera modificada (bolsas de polietileno de baja densidad) y aire caliente (48 ºC 3 h); y tratamientos químicos con citoquininas (100 ppm 6-BAP, 0,1% (v/v) DMSO) y etileno (100 ppm etefón, 0,1% (v/v) DMSO), y con 1-MCP, un inhibidor selectivo de la acción del etileno (100 ppm de 1-MCP). Se realizaron medidas de color superficial, contenido de clorofilas, medida del contenido de compuestos fenólicos y flavonoides. Se realizaron posteriormente análisis de PCR en tiempo real de los genes de interés en las muestras. Lo que se observa hasta el momento es que el contenido de clorofilas se conserva en los tratamientos y correlaciona en muchos casos con una menor expresión de los genes de la vía de degradación como en los tratamientos químicos de citoquininas y 1-MCP. De igual manera, se observa que ciertos tratamientos como los de luz y UV-C aumentan el contenido de fenoles y flavonoides, y en ciertos casos se observa una correlación con la expresión de CHS y CHI. El estudio de los genes aún continúa en proceso.Universidad Nacional de La Plat

Análisis de la expresión de genes asociados a las vías metabólicas de degradación de clorofilas y síntesis de compuestos flavonoides en brócoli durante la postcosecha

El brócoli (Brassica oleracea L. var. Italica) es una hortaliza ampliamente consumida que pertenece a la familia Brassicaceae, junto con la coliflor, el repollo, los repollitos de Brusellas y el kale. Su consumo aporta una gran cantidad de nutrientes ya que posee una excelente proporción de vitaminas, azúcares y proteínas, una alta proporción de fibras, un bajo contenido de grasas, elevado contenido de antioxidantes, entre los que se destacan los flavonoides, y glucosinolatos. Tanto los flavonoides como los glucosinolatos presentan actividad anticarcinogénica. De la planta de brócoli se consume la inflorescencia, la cual se cosecha en un estado completamente inmaduro y en pleno desarrollo. La cosecha provoca un importante estrés debido a la privación de agua, hormonas y nutrientes, y, en consecuencia, se produce una senescencia acelerada. Este evento se evidencia por un rápido amarillamiento a causa de la degradación de clorofilas. Actualmente, el control de la senescencia se realiza a través de diferentes tipos de tratamientos que tienen como objetivo su retraso. Sin embargo, en muchos de estos tratamientos, se presta particular atención a la calidad organoléptica, dejando de lado la calidad nutricional. El objetivo general del presente plan de trabajo es contribuir al conocimiento a escala bioquímica y fisiológica de la senescencia en brócoli. Como objetivos específicos está el análisis de los genes NYC y NOL de la vía de degradación de clorofilas y los genes CHS y CHI de la vía de síntesis de flavonoides, en distintos tratamientos postcosecha. 26 Para el desarrollo de cada tratamiento se cosecharon entre 30- 40 brócolis a partir de un productor del cinturón hortícola de La Plata, y se transportaron inmediatamente al laboratorio para su limpieza y selección. Los tratamientos a desarrollar fueron: tratamientos físicos con luz blanca (12 µmol.m-2s-1), UV-C (10 kJ.m-2), atmosfera modificada (bolsas de polietileno de baja densidad) y aire caliente (48 ºC 3 h); y tratamientos químicos con citoquininas (100 ppm 6-BAP, 0,1% (v/v) DMSO) y etileno (100 ppm etefón, 0,1% (v/v) DMSO), y con 1-MCP, un inhibidor selectivo de la acción del etileno (100 ppm de 1-MCP). Se realizaron medidas de color superficial, contenido de clorofilas, medida del contenido de compuestos fenólicos y flavonoides. Se realizaron posteriormente análisis de PCR en tiempo real de los genes de interés en las muestras. Lo que se observa hasta el momento es que el contenido de clorofilas se conserva en los tratamientos y correlaciona en muchos casos con una menor expresión de los genes de la vía de degradación como en los tratamientos químicos de citoquininas y 1-MCP. De igual manera, se observa que ciertos tratamientos como los de luz y UV-C aumentan el contenido de fenoles y flavonoides, y en ciertos casos se observa una correlación con la expresión de CHS y CHI. El estudio de los genes aún continúa en proceso.Universidad Nacional de La Plat

Expresión de genes de biosíntesis y degradación de glucosinolatos indólicos en brócoli durante el ritmo circadiano y senescencia poscosecha

El consumo de brócoli (Brassica oleracea var. Italica) aporta una gran cantidad de compuestos con potencial nutracéutico a la dieta humana. El brócoli posee un elevado contenido de glucosinolatos, compuestos del metabolismo secundario, ricos en nitrógeno y azufre, y con actividad anticarcinogénica. Del brócoli se consume la inflorescencia, la cual se cosecha en un estado de desarrollo incompleto. La cosecha provoca un importante estrés y, como consecuencia, se produce una senescencia acelerada. El objetivo del presente trabajo es evaluar la expresión relativa de genes vinculados a la biosíntesis y degradación de glucosinolatos indólicos a distintas horas del día y durante la senescencia poscosecha de brócoli. Se cosecharon cabezas de brócoli en distintos momentos del día (8 h, 12 h y 18 h) y para el ensayo de senescencia las muestras cosechadas se almacenaron durante 7 días a 20 °C en oscuridad. Se realizaron medidas de color y contenido de clorofilas total a las distintas horas de cosecha y durante el almacenamiento. A las distintas horas del día inicial, el contenido de clorofilas y el color superficial se mantuvieron constantes. Se observó una disminución en el contenido de clorofilas y en el color superficial durante el almacenamiento poscosecha. Se evaluó la expresión relativa mediante qRT-PCR de los genes de biosíntesis de glucosinolatos indólicos (BoCYP83B1, BoST5a, BoCYP81F4) y de degradación (BoMyr). Se observó que la expresión de BoMyr se incrementó a las 18 horas poscosecha. Mientras que la expresión de BoCYP83B1 aumentó a las 12 horas. Diferentemente, la expresión relativa de BoST5a no varió durante el día y BoCYP81F4 disminuyó su expresión relativa hacia las 18 horas. Cuando se analizó la expresión relativa de estos genes en las muestras que fueron cosechadas a las 8 h a lo largo del almacenamiento poscosecha, se encontró que BoMyr y BoCYP81F4 disminuyeron su expresión significativamente en el día 5 y 7 respecto al día 0. Mientras que la expresión relativa de BoST5a disminuyó de forma continua a lo largo de los días. Finalmente, la expresión relativa de BoCYP83B1 disminuye entre el día 5 y el día 7. Se observó que las muestras cosechadas a las 18 h muestran un retardo en la senescencia, con menor disminución en el color superficial y el contenido de clorofilas total respecto a las muestras cosechadas en otras horas del día. La expresión relativa de los genes estudiados, involucrados en la biosíntesis de glucosinolatos indólicos se ven afectados tanto por variaciones en un mismo día como por el almacenamiento poscosecha.Trabajo publicado en Castagnini, Juan Manuel; Luz Marina Zapata; Liliana Mabel Gerard (eds.). Libro de Trabajos Completos I Congreso Argentino de Biología y Tecnología Poscosecha. IX Jornadas Argentinas de Biología y Tecnología Poscosecha. Paraná: Universidad Nacional de Entre Ríos. UNER, 2018.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Expresión de genes de biosíntesis y degradación de glucosinolatos indólicos en brócoli durante el ritmo circadiano y senescencia poscosecha

El consumo de brócoli (Brassica oleracea var. Italica) aporta una gran cantidad de compuestos con potencial nutracéutico a la dieta humana. El brócoli posee un elevado contenido de glucosinolatos, compuestos del metabolismo secundario, ricos en nitrógeno y azufre, y con actividad anticarcinogénica. Del brócoli se consume la inflorescencia, la cual se cosecha en un estado de desarrollo incompleto. La cosecha provoca un importante estrés y, como consecuencia, se produce una senescencia acelerada. El objetivo del presente trabajo es evaluar la expresión relativa de genes vinculados a la biosíntesis y degradación de glucosinolatos indólicos a distintas horas del día y durante la senescencia poscosecha de brócoli. Se cosecharon cabezas de brócoli en distintos momentos del día (8 h, 12 h y 18 h) y para el ensayo de senescencia las muestras cosechadas se almacenaron durante 7 días a 20 °C en oscuridad. Se realizaron medidas de color y contenido de clorofilas total a las distintas horas de cosecha y durante el almacenamiento. A las distintas horas del día inicial, el contenido de clorofilas y el color superficial se mantuvieron constantes. Se observó una disminución en el contenido de clorofilas y en el color superficial durante el almacenamiento poscosecha. Se evaluó la expresión relativa mediante qRT-PCR de los genes de biosíntesis de glucosinolatos indólicos (BoCYP83B1, BoST5a, BoCYP81F4) y de degradación (BoMyr). Se observó que la expresión de BoMyr se incrementó a las 18 horas poscosecha. Mientras que la expresión de BoCYP83B1 aumentó a las 12 horas. Diferentemente, la expresión relativa de BoST5a no varió durante el día y BoCYP81F4 disminuyó su expresión relativa hacia las 18 horas. Cuando se analizó la expresión relativa de estos genes en las muestras que fueron cosechadas a las 8 h a lo largo del almacenamiento poscosecha, se encontró que BoMyr y BoCYP81F4 disminuyeron su expresión significativamente en el día 5 y 7 respecto al día 0. Mientras que la expresión relativa de BoST5a disminuyó de forma continua a lo largo de los días. Finalmente, la expresión relativa de BoCYP83B1 disminuye entre el día 5 y el día 7. Se observó que las muestras cosechadas a las 18 h muestran un retardo en la senescencia, con menor disminución en el color superficial y el contenido de clorofilas total respecto a las muestras cosechadas en otras horas del día. La expresión relativa de los genes estudiados, involucrados en la biosíntesis de glucosinolatos indólicos se ven afectados tanto por variaciones en un mismo día como por el almacenamiento poscosecha.Trabajo publicado en Castagnini, Juan Manuel; Luz Marina Zapata; Liliana Mabel Gerard (eds.). Libro de Trabajos Completos I Congreso Argentino de Biología y Tecnología Poscosecha. IX Jornadas Argentinas de Biología y Tecnología Poscosecha. Paraná: Universidad Nacional de Entre Ríos. UNER, 2018.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Expresión de genes de biosíntesis y degradación de glucosinolatos indólicos en brócoli durante el ritmo circadiano y senescencia poscosecha

El consumo de brócoli (Brassica oleracea var. Italica) aporta una gran cantidad de compuestos con potencial nutracéutico a la dieta humana. El brócoli posee un elevado contenido de glucosinolatos, compuestos del metabolismo secundario, ricos en nitrógeno y azufre, y con actividad anticarcinogénica. Del brócoli se consume la inflorescencia, la cual se cosecha en un estado de desarrollo incompleto. La cosecha provoca un importante estrés y, como consecuencia, se produce una senescencia acelerada. El objetivo del presente trabajo es evaluar la expresión relativa de genes vinculados a la biosíntesis y degradación de glucosinolatos indólicos a distintas horas del día y durante la senescencia poscosecha de brócoli. Se cosecharon cabezas de brócoli en distintos momentos del día (8 h, 12 h y 18 h) y para el ensayo de senescencia las muestras cosechadas se almacenaron durante 7 días a 20 °C en oscuridad. Se realizaron medidas de color y contenido de clorofilas total a las distintas horas de cosecha y durante el almacenamiento. A las distintas horas del día inicial, el contenido de clorofilas y el color superficial se mantuvieron constantes. Se observó una disminución en el contenido de clorofilas y en el color superficial durante el almacenamiento poscosecha. Se evaluó la expresión relativa mediante qRT-PCR de los genes de biosíntesis de glucosinolatos indólicos (BoCYP83B1, BoST5a, BoCYP81F4) y de degradación (BoMyr). Se observó que la expresión de BoMyr se incrementó a las 18 horas poscosecha. Mientras que la expresión de BoCYP83B1 aumentó a las 12 horas. Diferentemente, la expresión relativa de BoST5a no varió durante el día y BoCYP81F4 disminuyó su expresión relativa hacia las 18 horas. Cuando se analizó la expresión relativa de estos genes en las muestras que fueron cosechadas a las 8 h a lo largo del almacenamiento poscosecha, se encontró que BoMyr y BoCYP81F4 disminuyeron su expresión significativamente en el día 5 y 7 respecto al día 0. Mientras que la expresión relativa de BoST5a disminuyó de forma continua a lo largo de los días. Finalmente, la expresión relativa de BoCYP83B1 disminuye entre el día 5 y el día 7. Se observó que las muestras cosechadas a las 18 h muestran un retardo en la senescencia, con menor disminución en el color superficial y el contenido de clorofilas total respecto a las muestras cosechadas en otras horas del día. La expresión relativa de los genes estudiados, involucrados en la biosíntesis de glucosinolatos indólicos se ven afectados tanto por variaciones en un mismo día como por el almacenamiento poscosecha.Trabajo publicado en Castagnini, Juan Manuel; Luz Marina Zapata; Liliana Mabel Gerard (eds.). Libro de Trabajos Completos I Congreso Argentino de Biología y Tecnología Poscosecha. IX Jornadas Argentinas de Biología y Tecnología Poscosecha. Paraná: Universidad Nacional de Entre Ríos. UNER, 2018.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Hot water treatments performed in the base of the broccoli stem reduce postharvest senescence of broccoli (Brassica oleracea L. Var italic) heads stored at 20 ºC

Heat treatments cause a moderate and reversible stress that interrupts the normal metabolism (senescence or fruit ripening) of the product. Although there is a large number of reports about heat treatments on broccoli heads, the effect of subjecting only the stems to thermal treatments has not been studied yet. One of the main reasons to analyze this approach is that the hormone ethylene is actively produced in the stem cutting area. Different hot water treatments were performed on the first 5 cm of broccoli stems with various combinations of time-temperature. Treatment carried out at 50 ºC for 3 min was chosen for further analysis of different quality and senescence parameters, taking into account that broccoli heads presented a delayed change in Hue and L values when compared with controls during storage. While control heads looked yellow, heat-treated samples retained most of their green colour. Furthermore, control heads presented higher weight loss, lower total and soluble protein, and lower total soluble sugar after 3 or 5 storage days, giving evidence of the fact that a heat treatment just on the stem contributes to the delay of broccoli senescence and to the maintenance of the overall quality of the product during storage.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

The time of the day to harvest affects the degreening, antioxidant compounds, and protein content during postharvest storage of broccoli

Harvesting of broccoli at several moments of the day affects the rate of senescence during storage. In this work, broccoli heads were harvested at several moments and then kept at 20°C in order to analyze protein metabolism and antioxidant compounds. Almost no differences were detected in the contents of total and soluble proteins, and free amino acids. Only an increment in free amino acids was detected by day 3 in samples obtained at 8:00 hr. With reference to antioxidants, the contents of ascorbic acid, carotenoids and xanthophylls, phenols, and flavonoids were similar in samples harvested at different moments. However, an increment was detected in carotenoids, phenols, and flavonoids during storage of samples collected at 18:00 hr on day 3 and samples collected at 13:00 hr on day 5. The combination of delay of senescence and increment in antioxidants suggest harvesting at 12:00 or 18:00 hr. Practical application: Broccoli is a vegetable with an important level of nutrients. However, it is also highly perishable and suffers a high rate of senescence and loss of quality during postharvest. In this work, it is demonstrated that the simple practice of harvests in different moments of the day can affect the postharvest behavior of broccoli, and it is suggested to carry out the harvest toward the end of the day.Fil: Casajús, Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Fisiología Vegetal. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Instituto de Fisiología Vegetal; ArgentinaFil: Reyes Jara, Andrea Milagro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Fisiología Vegetal. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Instituto de Fisiología Vegetal; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Gergoff Grozeff, Gustavo Esteban. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Fisiología Vegetal. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Instituto de Fisiología Vegetal; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales; ArgentinaFil: Gómez Lobato, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Fisiología Vegetal. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Instituto de Fisiología Vegetal; ArgentinaFil: Civello, Pedro Marcos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Fisiología Vegetal. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Instituto de Fisiología Vegetal; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Martinez, Gustavo Adolfo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Fisiología Vegetal. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Naturales y Museo. Instituto de Fisiología Vegetal; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas; Argentin