Brucella spp. Lumazine synthase as a novel immunomodulator to produce egg yolk antibodies

Lumazine synthase from Brucella spp. (BLS) is a highly immunogenic decameric protein. It has been previously described as a carrier of peptides or proteins to increase their immunogenicity in different animal species, but its activity has never been evaluated in chickens. In this work, the use of BLS to improve the antibody response against bovine rotavirus (BRV) VP8d protein in laying hens was assessed. VP8d is the inner domain of the VP8 spike protein which preserves the sialic acid binding activity and the neutralizing epitopes present in the viral protein. Hens were immunized three times with 2 μg of VP8d alone or fused to BLS. Hens inoculated with BLSVP8d developed higher antibody titers (evaluated by ELISA and viral neutralization test) than hens immunized either with VP8d alone or the mixture of VP8d and BLS. Furthermore, IgY antibodies against BLSVP8d were able to fully protect mice against challenge with virulent BRV in a dose-depent-manner. Overall, these results demonstrate that BLS is a potent immonumodulator that enhances the antibody response in hens, thus increasing the concentration of specific IgY in the egg yolk, one of the main issues to be adressed in order to improve the use of the IgY technology.Instituto de VirologíaFil: Bellido, Demian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Chacana, Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Mozgovoj, Marina Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Gonzalez, Diego. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Goldbaum, Fernando Alberto. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Wigdorovitz, Andres. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentin

Estudio de la respuesta inmune frente a la vacunación con virus respiratorio sincitial bovino (VRSB) inactivado en bovinos. Evaluación de la inmunidad pasiva

El objetivo de este trabajo fue evaluar el título y la duración de anticuerpos neutralizantes (AN) en vacas inmunizadas con una vacuna experimental inactivada para el virus respiratorio sincitial bovino (VRSB) y los niveles y la duración de los anticuerpos maternales anti-VRSB transferidos a través del calostrado en los terneros nacidos. Se inoculó un grupo de seis vacas preñadas con una vacuna inactivada de VRSB 90 y 60 días antes del parto. El grupo control estaba formado por seis vacas sin vacunar. Se obtuvieron muestras de suero de las vacas a los días 90, 60, 30 antes del parto y 0, 60 y 120 días posteriores al parto. Con respecto a los terneros, se recolectaron muestras de suero de ambos grupos a las 48 horas posparto y 30, 60, 90 y 120 días luego del nacimiento. La detección de anticuerpos específicos contra el VRSB se realizó mediante seroneutralización viral. En los terneros se determinaron proteínas totales e inmunoglobulina G total a las 48 horas posparto. Solo las vacas vacunadas seroconvirtieron a los 60 días después del refuerzo y los títulos de anticuerpos permanecieron elevados 180 días después de este. Los terneros recién nacidos mostraron una transferencia pasiva efectiva de anticuerpos maternos específicos para el VRSB. En este trabajo fue posible corroborar la inducción y duración de los anticuerpos específicos contra el VRSB en vacas vacunadas con una vacuna inactivada así como en sus respectivos terneros.The aim of this work was to evaluate the titer and duration of neutralizing antibodies in cows immunized with an inactivated experimental vaccine for BRSV and the levels and duration of anti-BRSV maternal antibodies in calves born. A group of six pregnant cows was inoculated with a inactivated BRSV vaccine, at 90 and 60 days before calving. As a control group, six animals were mock inoculated. Cows´ serum samples were obtained at days 90, 60, 30 before calving and at 0, 60 and 120 days postpartum. Sera from calves were obtained at 48-72 hours postpartum, 30, 60, 90 and 120 days after birth. The kinetic of serum specific antibodies from inoculated animals and newborn calves was analyzed by a serum neutralization assay. Only the vaccinated cows serocoverted 60 days post booster and antibody titers remained high 180 days post booster. Six newborn calves showed an effective passive transfer of specific BRSV maternal antibodies. In this work, it was possible to determine antibody levels against BRSV and their duration after vaccination of cows and calves born using an inactivated vaccine.EEA Marcos JuárezFil: Margineda, Carlos Augusto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; Argentina. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Ferella, Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pérez Aguirreburualde, María Sol. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Sammarruco, Romina Ayelén. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Gonzalez, Diego. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Toledo, Gabriela Fernanda. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mozgovoj, Marina Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Bovine colostral cells—the often forgotten component of colostrum

At birth, neonatal calves have all the essential immune components they need as adult cattle; however, it takes at least 2 to 4 weeks for those components to become fully functional.1,2 The immune system does not become completely mature until the animal is 5 to 8 months old; for example, it takes 8 months for T cells (CD4+, CD8+, and T-cell receptor gδ+ cells) to reach peak numbers.3 Thus, the immature immune system of young calves likely moderates rather than prevents disease. This does not imply that young (< 8 months old) calves cannot respond to antigens; it simply means that the response to those antigens is weaker, slower, and easier to overcome than it will be when the immune system is mature.4Instituto de VirologíaFil: Gonzalez, Diego. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentin

Plant‐produced viral bovine vaccines: what happened during the last 10 years?

Vaccination has proved to be an efficient strategy to deal with viral infections in both human and animal species. However, protection of cattle against viral infections is still a major concern in veterinary science. During the last two decades, the development of efficient plant‐based expression strategies for recombinant proteins prompted the application of this methodology for veterinary vaccine purposes. The main goals of viral bovine vaccines are to improve the health and welfare of cattle and increase the production of livestock, in a cost‐effective manner. This review explores some of the more prominent recent advances in plant‐made viral bovine vaccines against foot‐and‐mouth disease virus (FMDV), bovine rotavirus (BRV), bovine viral diarrhoea virus (BVDV), bluetongue virus (BTV) and bovine papillomavirus (BPV), some of which are considered to be the most important viral causative agents of economic loss in cattle production.Instituto de VirologíaFil: Ruiz, Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Mozgovoj, Marina Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Wigdorovitz, Andres. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Molecular detection and differentiation of arthropod, fungal, protozoan, bacterial and viral pathogens of honeybees

The honeybee Apis mellifera is highly appreciated worldwide because of its products, but also as it is a pollinator of crops and wild plants. The beehive is vulnerable to infections due to arthropods, fungi, protozoa, bacteria and/or viruses that manage to by-pass the individual and social immune mechanisms of bees. Due to the close proximity of bees in the beehive and their foraging habits, infections easily spread within and between beehives. Moreover, international trade of bees has caused the global spread of infections, several of which result in significant losses for apiculture. Only in a few cases can infections be diagnosed with the naked eye, by direct observation of the pathogen in the case of some arthropods, or by pathogen-associated distinctive traits. Development of molecular methods based on the amplification and analysis of one or more genes or genomic segments has brought significant progress to the study of bee pathogens, allowing for: (i) the precise and sensitive identification of the infectious agent; (ii) the analysis of co-infections; (iii) the description of novel species; (iv) associations between geno- and pheno-types and (v) population structure studies. Sequencing of bee pathogen genomes has allowed for the identification of new molecular targets and the development of specific genotypification strategies.Instituto de PatobiologíaFil: Lannutti, Lucas. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología Veterinaria (IPVET); ArgentinaFil: Lannutti, Lucas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lannutti, Lucas. Universidad de Morón. Escuela Superior de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Gonzalez, Fernanda Noemi. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas (IVIT); ArgentinaFil: Gonzalez, Fernanda Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas (IVIT); ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Florin-Christensen, Mónica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología Veterinaria (IPVET); ArgentinaFil: Florin-Christensen, Mónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Florin-Christensen, Mónica. Universidad de Morón. Facultad de Ciencias Exactas; ArgentinaFil: Schnittger, Leonhard. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología Veterinaria (IPVET); ArgentinaFil: Schnittger, Leonhard. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Schnittger, Leonhard. Universidad de Morón. Facultad de Ciencias Exactas; Argentin

Chicken egg yolk antibodies against bovine respiratory syncytial virus neutralize the virus in vitro

5th Vaccine and ISV Annual Global Congress, Seattle, United States of America, 2nd to 4th October 2011Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) and its counterpart in humans (HRSV) are two closely related virus, which are the leading cause of severe respiratory syndrome in calves and young children, respectively. Passive immunization can be a practical alternative to conventional vaccination in order to prevent the disease. In this report the production of chicken egg yolk IgY and its ability to neutralize BRSV in vitro were assessed. Purified IgY against BRSV specifically recognized BRSV in a dot blot assay and was able to neutralize the virus in a viral neutralization assay. These results demonstrate the potential use of IgY as a prophylactic treatment against RSV infection.Instituto de VirologíaFil: Ferella, Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Bellido, Demian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Chacana, Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Wigdorovitz, Andres. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Mozgovoj, Marina Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; Argentin

Dynamics of neutralizing antibodies against Bovine respiratory syncytial virus in a dairy herd from Santa Fe Province, Argentina = Dinámica de anticuerpos neutralizantes contra el virus respiratorio sincitial bovino en un rodeo lechero de la provincia de Santa Fe, Argentina

Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) is one of the most relevant agents responsible for respiratory disease in cattle from both dairy and beef farms. BRSV is spread by horizontal contact causing a constant presence of seropositive animals that favors viral circulation throughout the year. Moreover, reinfections with BRSV are frequent between animals regardless of their age as BRSV does not confer long-lasting protective immunity. Several studies have demonstrated the circulation of BRSV in cattle from different regions of the world; however, little is known about the dynamics of BRSV infection in cows before and after they begin lactation. The aim of this work was to study the dynamics of BRSV neutralizing antibodies from birth up to 36 months of age in a closed dairy herd of Argentina specifically around the lactation period. Passive maternal antibodies against BRSV started to decrease monthly and became almost undetectable at 8 months of age. We detected two potential infection points at months 11 and 27 after birth, in which 30% and 45% of the animals showed seroconversion, respectively. Specifically, an increase in the proportion of seropositive cows after the start of lactation suggests that they became reinfected around the time they began lactating. We demonstrate the importance of understanding BRSV dynamics in a closed dairy herd to review the vaccination schedule of the animals to achieve protection against BRSV infection.El virus respiratorio sincitial bovino (Bovine respiratory syncytial virus, [BRSV]) es uno de los principales agentes responsables de la enfermedad respiratoria en bovinos, tanto de tambos como de cría. El virus se transmite horizontalmente y causa la presencia constante de animales seropositivos, lo cual favorece la circulación viral a lo largo del año. A su vez, las reinfecciones por BRSV son frecuentes entre animales independientemente de su edad, dado que el virus no confiere inmunidad protectora a largo plazo. Numerosos estudios han demostrado la circulación de BRSV en bovinos de diferentes regiones del mundo, sin embargo, poco se conoce acerca de la dinámica de infección en vacas antes y después del inicio de la fase de lactancia. El objetivo de este trabajo fue estudiar la dinámica de anticuerpos neutralizantes anti- BRSV en vacas lecheras desde el nacimiento hasta los 36 meses de vida en un tambo cerrado de Argentina, específicamente, en el período de lactancia. Los anticuerpos pasivos específicos para BRSV comenzaron a declinar mensualmente hasta ser casi indetectables a los 6 meses. Detectamos dos potenciales puntos de infección a los meses 11 y 27 luego del nacimiento, momentos en los que el 30 y el 45% de los animales mostraron seroconversión, respectivamente. El incremento en la proporción de vacas seropositivas luego del comienzo de la lactancia sugiere que estas se reinfectaron en el inicio de dicha etapa. Demostramos la importancia de entender la dinámica de circulación del BRSV en un tambo cerrado, a fin de revisar el esquema de vacunación de los animales para que estén protegidos frente a la posible infección por este virus.Instituto de VirologíaFil: Ferella, Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pérez Aguirreburualde, María Sol. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sammarruco, Romina Ayelén. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Parreño, Viviana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mozgovoj, Marina Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Evaluation of PMA‐qPCR methodology to detect and quantify viable Shiga toxin‐producing Escherichia coli in beef burgers

Propidium monoazide (PMA) is a selective nucleic acid intercalating dye that can be combined with real‐time PCR (qPCR) in order to evaluate cell viability in food samples. The aim of the present work was to evaluate PMA‐qPCR to detect and quantify viable STEC cells in beef burgers using stx2 as target gene. First, it was determined that 100 µM of PMA could inhibit qPCR signal from non‐viable cells and had no influence on the amplification of different concentrations of viable cells. Then, it was shown that PMA efficiently distinguished between different log cfu of viable cells in presence of a high concentration of non‐viable cells, both in culture and in beef burger homogenates. Finally, it was determined that PMA could distinguish between viable and non‐viable cells within the same log cfu in beef burger homogenates. PMA‐qPCR effectively detected and quantified viable STEC cells in culture and in beef burger homogenates.Instituto de Investigación de Tecnología de AlimentosFil: Rey, María De Los Ángeles. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Rey, María De Los Ángeles. Instituto de Ciencia y Tecnología de Sistemas Alimentarios Sustentables (UEDD INTA CONICET); Argentina.Fil: Cap, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Cap, Mariana. Instituto de Ciencia y Tecnología de Sistemas Alimentarios Sustentables (UEDD INTA CONICET); Argentina.Fil: Favre, Leonardo Cristian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Favre, Leonardo Cristian. Instituto de Ciencia y Tecnología de Sistemas Alimentarios Sustentables (UEDD INTA CONICET); Argentina.Fil: Rodriguez, Anabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Rodriguez, Anabel. Instituto de Ciencia y Tecnología de Sistemas Alimentarios Sustentables (UEDD INTA CONICET); Argentina.Fil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto de Virología e Innovaciones tecnológicas. Centro de Investigaciones en Ciencias Veterinarias y Agronómicas (INTA-CONICET); Argentina.Fil: Vaudagna Sergio Ramon. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Vaudagna Sergio Ramon. Instituto de Ciencia y Tecnología de Sistemas Alimentarios Sustentables (UEDD INTA CONICET); Argentina.Fil: Mozgovoj, Marina Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Mozgovoj, Marina Valeria. Instituto de Ciencia y Tecnología de Sistemas Alimentarios Sustentables (UEDD INTA CONICET); Argentina

Bovine respiratory syncytial virus seroprevalence and risk factors in feedlot cattle from Córdoba and Santa Fe, Argentina = Seroprevalencia del virus respiratorio sincicial bovino y factores de riesgo asociados en engordes a corral de Córdoba y Santa Fe, Argentina

Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) is one of the causative agents of respiratory disease in cattle all over the world, leading to important economic losses. The aim of this work was to determine the seroprevalence of BRSV in feedlot cattle of Argentina and the risk factors associated with the disease. Results showed a high individual seroprevalence of 78.64% (95% confidence interval adjusted [CI] = 66.55–90.75%) against the virus. Positive association was found between the presence of high BRSV neutralizing antibody titers, and the following risk factors: cattle age, source of animals, presence of clinical respiratory signs and herd size. This work contributes to updating the understanding of its epidemiology in Argentinean feedlots and poses the need for reevaluating vaccination strategies against this virus in order to control infection and its impact on productivity.El virus respiratorio sincicial bovino (BRSV) es uno de los agentes causantes de enfermedad respiratoria bovina a nivel mundial, conduciendo a importantes pérdidas económicas. El objetivo de este trabajo fue determinar la seroprevalencia del BRSV en bovinos de engorde a corral de Argentina y estudiar los factores de riesgo asociados. Los resultados mostraron una elevada seroprevalencia individual del 78,64% (IC = 66,55-90,75%) contra el virus. Se encontró una asociación positiva entre la presencia de altos títulos de anticuerpos neutralizantes contra BRSV y los factores de riesgo: edad del ganado, origen de los animales, presencia de signos clínicos respiratorios y el tamaño del rebaño. Este trabajo contribuye en gran medida a la comprensión de la epidemiología en los establecimientos de engorde a corral de Argentina y plantea la necesidad de revaluar las estrategias de vacunación contra este virus con el fin de controlar la infección y su impacto en la producción.Instituto de VirologíaFil: Ferella, Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Pérez Aguirreburualde, María Sol. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Margineda, Carlos Augusto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Aznar, Maria Natalia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Sammarruco, Romina Ayelén. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Mozgovoj, Marina Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentin

HoBi-like pestivirus in 2 cases of fatal respiratory disease of feedlot cattle in Argentina

HoBi-like pestivirus (HoBiPeV) is an emerging virus that has been detected in cattle and other ruminants. We diagnosed 2 cases of fatal bovine respiratory disease complex (BRDC) associated with infection with HoBiPeV in a feedlot in Argentina. The main findings in 2 steers autopsied were interstitial bronchopneumonia (case 1) and fibrinous bronchopneumonia (case 2). HoBiPeV was detected by RT-PCR in lungs of both animals and by immunohistochemistry in case 2. Phylogenetic analysis showed that both strains clustered within the “Brazilian-Italian” clade. In case 2, Mannheimia haemolytica was isolated from the lung. There is scant information about the contribution of HoBiPeV to the pathogenesis of BRDC. To our knowledge, HoBiPeV has not been reported previously in association with M. haemolytica pneumonia. Our findings further support the involvement of HoBiPeV in cases of BRDC and contribute to understanding the synergy of this etiologic agent in the pathogenesis of BRD, which is critical for the development of appropriate preventive strategies.EEA Marcos JuárezFil: Margineda, Carlos Augusto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; Argentina.Fil: Margineda, Carlos Augusto. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Ferreyra, Franco Matías. Kansas State University. Veterinary Diagnostic Laboratory; Estados UnidosFil: Masnyj, Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; Argentina.Fil: Audrito, Maximiliano. Establecimiento Don Sebastián, Córdoba; ArgentinaFil: Favaro, Paula Melisa. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Dus Santos, Maria Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pecora, Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Pecora, Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin