Resposta sorológica de ovinos inoculados com plasmídeos codificando a glicoproteína D do herpesvírus bovino 1 (BHV-1)

A genetic vaccine consisting of the bovine herpesvirus-1.2a (BHV-1.2a) glycoprotein D (gD) gene under the control of the cytomegalovirus immediate-early promoter/enhancer was generated and administered to sheep intramuscularly in the neck. All animals developed serum antibodies which recognized the homologous antigen (BHV-1.2a strain BH-83) and also exhibited cross-reactivity against the heterologous antigen (BHV-5 strain EVI-190). Three intramuscularly injections were given but serological responses were not improved after the second inoculation. Specific antibodies were detected against BHV-1.2a until at least 12 months after the first inoculation. However, the capacity to induce antibodies against BHV-5 was lower and of shorter duration than to BHV-1.2a. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: Uma vacina geneticamente preparada com o gene da glicoproteína D do herpesvirus bovino-1.2a (BHV-1.2a) controlado com o promotor/potenciador imediatamente precoce de citomegalovírus foi administrada no pescoço de ovinos. Todos os animais produziram anticorpos séricos que reconheceram, em ELISA, o antígeno homólogo (BHV-1.2a, amostra BH-83) e também mostraram reatividade cruzada contra um antígeno heterólogo (BHV-5 amostra EVI-190). Foram aplicadas três inoculações, mas não houve melhora de resposta com a terceira inoculação. Resposta específica contra BHV-1.2a foi detectada pelo menos até 12 meses após a primeira inoculação, entretanto, a resposta sorológica contra o BHV-5 foi de menor intensidade e duração do que aquela contra o BHV-1.2a

Desenvolvimento de uma sonda de DNA para a detecção do vírus da doença de Aujeszky

Uma sonda radioativa e uma outra biotinilada foram produzidas para detecção do vírus da doença de Aujeszky (VDA). O fragmento de Bam H I 7 do DNA genômico do VDA foi marcado por "nick translation" empregando P32dCTP e um fragmento de 196pb, resultante de uma amplificação pela reação em cadeia pela polimerase marcado com biotina 7-dATP. Essas sondas, de uma maneira rápida e específica, prestaram-se para a detecção da infecção aguda pelo VDA. Entretanto, não se mostraram sensíveis o suficiente para detectar seqüências genômicas de VDA no gânglio trigêmio de suínos e camundongos com infecção latente. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: A DNA hybridization dot-blot assay using a radioactive and a non-radioactive probe has been developed for the detection of Aujeszky's disease virus (ADV). The Bam H I 7 fragment of ADV genomic DNA was labeled by nick translation using 32P-dCTP and the 196bp polymerase chain reaction (PCR) gG glycoprotein gene amplified fragment was also labeled by nick translation but using biotin d-7-dATP. This technique provides a fast and effective means of detecting acute cases of ADV infection but it was unable to detect ADV nucleic acid sequences in trigeminal nerve ganglia of latent infected pigs and mice

Detecção de amostras brasileiras do herpesvirus bovino 1 (BHV-1) pela reação em cadeia pela polimerase

A técnica da reação em cadeia pela DNA polimerase (PCR) foi usada para a amplificação rápida de um fragmento de 456bp da região única curta (Us) do genoma do BHV-1. Iniciadores de 18pb do gene da ORF1 foram usados para a amplificação das amostras-padrão e brasileiras. Uma amplificação clássica não foi bem sucedida. A amplificação foi obtida quando se escolheu uma região com baixa concentração de GC no DNA do BHV-1 e através da desnaturação térmica (95° C para 5min) seguida de ciclos térmicos (94° C por 1min e 30seg; 52° C por 1min; 72° C por 1min e 30seg; e ainda por 35 ciclos de 94° C por 1min; 52° C por 1min; 72° C por 1min e 30seg; usando um tempo de extensão final de 72° C por 5min). A clivagem com Pst I confirmou a especificidade do fragmento da ORF 1 do BHV-1. A amplificação do fragmento em todas as amostras testadas sugere que a região é fortemente conservada no genoma do BHV-1. Este PCR poderá detectar rapidamente amostras clínicas, sendo sensível e específico para diagnosticar infecções pelo BHV-1

Main features of DNA-based immunization vectors

DNA-based immunization has initiated a new era of vaccine research. One of the main goals of gene vaccine development is the control of the levels of expression in vivo for efficient immunization. Modifying the vector to modulate expression or immunogenicity is of critical importance for the improvement of DNA vaccines. The most frequently used vectors for genetic immunization are plasmids. In this article, we review some of the main elements relevant to their design such as strong promoter/enhancer region, introns, genes encoding antigens of interest from the pathogen (how to choose and modify them), polyadenylation termination sequence, origin of replication for plasmid production in Escherichia coli, antibiotic resistance gene as selectable marker, convenient cloning sites, and the presence of immunostimulatory sequences (ISS) that can be added to the plasmid to enhance adjuvanticity and to activate the immune system. In this review, the specific modifications that can increase overall expression as well as the potential of DNA-based vaccination are also discussed

Cartilha educativa violência doméstica em tempos de COVID-19

Objetivou-se relatar a experiência de extensão de um grupo de alunos na confecção de uma cartilha educativa sobre violência doméstica em tempos de pandemia. Trata-se de um relato de experiência de alunos inseridos no Observatório da Violência e dos Direitos Humanos, da Universidade Regional do Cariri, Crato, Ceará, Brasil, na construção de uma cartilha educativa sobre violência doméstica durante a pandemia COVID-19. Para confecção do material utilizou-se artigos sobre a temática e documentos oficiais de órgãos governamentais. A cartilha aborda a conceituação da violência doméstica e sua relação com a pandemia, indicadores atuais, tipologia com exemplificação das violências, ciclo da violência, leis de enfrentamento, estratégias para denúncias em meio à pandemia e rede de enfrentamento. Acredita-se que proporcionar e elevar os conhecimentos do público feminino para (re)conhecimento da susceptibilidade à violência doméstica durante a pandemia COVID-19 poderá repercutir na maior sensibilização quanto ao agravo, possível autorreconhecimento de vitimização e busca por serviços inseridos na rede de enfrentamento, objetivando-se a saída da mulher dos ciclos abusivos. Palavras-chave: Tecnologia educacional; Coronavírus; violência doméstica