Characterization of new cell line stably expressing CHI3L1 oncogene

Aim. To characterize the immortalized 293 cell line after stable transfection with human oncogene (CHI3L1). Methods. 293 cells, stably transfected with pcDNA3.1_CHI3L1, and 293 cells, stably transfected with pcDNA3.1 as a negative control, were used throughout all experiments. The clones of CHI3L1-expressing 293 cells and 293 cells, transfected with pcDNA3.1, were analyzed by immunofluorescence and confocal microscopy. Cell proliferation was measured using MTT assay; analyses of ERK1/2 and AKT activation and their cellular localization were performed with anti-phospho-ERK and anti-phospho-AKT antibodies. Specific activation of MAP and PI3 kinases was measured by densitometric analysis of Western-blot signals. Results. The obtained results show quite modest ability of CHI3L1 to stimulate cell growth and reflect rather an improved cellular plating efficiency of the 293 cells stably transfected with pcDNA3.1_CHI3L1 as compared to the 293 cells transfected with an «empty» vector. ERK1/2 and AKT are activated in the 293_CHI3L1 cells. In these cells phosphorylated ERK1/2 were localized in both cell cytoplasm and nuclei while AKT only in cytoplasm. The 293_CHI3L1 cells differed from the 293 cells, transfected with an «empty» vector, in their size and ability to adhere to the culture plates. Conclusions. The overexpression of CHI3L1 is likely to have an important role in tumorigenesis via a mechanism which involves activation of PI3K and ERK1/2 pathways. The tumors which can be induced by orthotopic implantation of the transformed human cells with overexpressed human oncogene CHI3L1 into the rat brain can be used as a target for anticancer drug development

Розвиток кінологічної служби в аспекті забезпечення собак, строк служби яких закінчився

Авдєєв, В. О. Розвиток кінологічної служби в аспекті забезпечення собак, строк служби яких закінчився / Василь Олександрович Авдєєв, Анатолій Сергійович Колотік // Шляхи покращення професійного рівня працівників кінологічних служб : тези доп. Всеукр. наук.-практ. конф. (м. Харків, 14 груд. 2018 р.) / МВС України, Харків. нац. ун-т внутр. справ. – Харків, 2018. – С. 81-83.Наголошено, що використання службових собак кінологічними службами є одним із аспектів який підвищує ефективність діяльності поліції та інших державних органів та формувань. Розглянуто проблему забезпечення собак, строк служби яких закінчився.It was emphasized that the use of service dogs by canine services is one of the aspects that increases the effectiveness of the police and other state bodies and formations. Considered the problem of providing for dogs whose term of service has ended.Отмечено, что использование служебных собак кинологическими службами является одним из аспектов, который повышает эффективность деятельности полиции и других государственных органов и формирований. Рассмотрена проблема обеспечения собак, срок службы которых истек

The naked truth: a comprehensive clarification and classification of current 'myths' in naked mole-rat biology.

The naked mole-rat (Heterocephalus glaber) has fascinated zoologists for at least half a century. It has also generated considerable biomedical interest not only because of its extraordinary longevity, but also because of unusual protective features (e.g. its tolerance of variable oxygen availability), which may be pertinent to several human disease states, including ischemia/reperfusion injury and neurodegeneration. A recent article entitled 'Surprisingly long survival of premature conclusions about naked mole-rat biology' described 28 'myths' which, those authors claimed, are a 'perpetuation of beautiful, but falsified, hypotheses' and impede our understanding of this enigmatic mammal. Here, we re-examine each of these 'myths' based on evidence published in the scientific literature. Following Braude et al., we argue that these 'myths' fall into four main categories: (i) 'myths' that would be better described as oversimplifications, some of which persist solely in the popular press; (ii) 'myths' that are based on incomplete understanding, where more evidence is clearly needed; (iii) 'myths' where the accumulation of evidence over the years has led to a revision in interpretation, but where there is no significant disagreement among scientists currently working in the field; (iv) 'myths' where there is a genuine difference in opinion among active researchers, based on alternative interpretations of the available evidence. The term 'myth' is particularly inappropriate when applied to competing, evidence-based hypotheses, which form part of the normal evolution of scientific knowledge. Here, we provide a comprehensive critical review of naked mole-rat biology and attempt to clarify some of these misconceptions

Інноваційні технології як альтернативні засоби підвищення ефективності кримінального судочинства України

Innovative technologies as alternative means of improving the efficiency of criminal justice in Ukraine / Vlada Husieva, Oleksandr Avdieiev, Volodymyr Kornienko, Larysa Kryvoruchko // Amazonia Investiga. – 2022. – Vol. 11, Issue 52 (April). – P. 260-268. – DOI: https://doi.org/10.34069/AI/2022.52.04.28.Husieva, V., Avdieiev, O., Kornienko, V., & Kryvoruchko, L. (2022). Innovative technologies as alternative means of improving the efficiency of criminal justice in Ukraine. Amazonia Investiga, 11(52), 260-268. https://doi.org/10.34069/AI/2022.52.04.28.Метою дослідження є вивчення слідчої та судової практики, а також міжнародного досвіду задля визначення перспектив упровадження інноваційних технологій у кримінальне судочинство України за сучасних умов, розкриття їх можливостей у контексті підвищення ефективності слідчих (розшукових) дій та судових розглядів. Задля досягнення мети статті використовувався порівняльно-правовий метод, який дозволив визначити міжнародні апробовані інноваційні методи удосконалення кримінального судочинства. Методи аналізу та узагальнення сприяли визначенню сучасних проблем слідчої та судової практики, які можна вирішити шляхом упровадження сучасних техніко-криміналістичних засобів. Авторами доведено, що альтернативним шляхом підвищення ефективності кримінального судочинства України наразі є впровадження інноваційних технологій, які були апробовані в деяких державах. До криміналістичних інновацій, потреба у яких є нагальною наразі та впровадження яких обґрунтоване потребами слідчих і судових органів України, ми відносимо ті, що спрямовані на автоматизацію, цифровізацію досудового розслідування та судового розгляду. Визначено перспективи впровадження електронної системи експертних висновків, технологій штучного інтелекту, лазерного тривимірного сканування. Наголошено на необхідності удосконалення системи електронного судочинства.The purpose of the article is to study investigative and judicial practice, as well as international experience to determine the prospects for the introduction of innovative technologies in criminal justice in Ukraine in modern conditions, to reveal their capabilities in the context of improving investigative (investigative) actions and trials. In order to achieve the goal of the article, a comparative legal method was used, which allowed to determine the internationally tested innovative methods of improving criminal justice. Methods of analysis and generalization have helped to identify current problems that arise in investigative and judicial practice, which can be solved through the introduction of modern forensic tools. In the article, the authors argued that an alternative way to increase the efficiency of criminal justice in Ukraine is the introduction of innovative technologies that have been tested in some countries. Forensic innovations, the need for which is urgent now and the implementation of which is justified by the needs of investigative and judicial bodies of Ukraine, we include those aimed at automation, digitalization of pre-trial investigation and trial. Prospects for the introduction of an electronic system of expert opinions, artificial intelligence technologies, laser three-dimensional scanning are identified. The need to improve the electronic justice system was emphasized.Целью исследования является изучение следственной и судебной практики, а также международного опыта для определения перспектив внедрения инновационных технологий в уголовное судопроизводство Украины в современных условиях, раскрытие их возможностей в контексте повышения эффективности следственных (розыскных) действий и судебных разбирательств

Stimulation of transient versus sustained ERK1/2 phosphorylation by relative chitinase-like proteins CHI3L1 and CHI3L2 correlates with different kinase localization and biological outcome

Aim. To determine 293 and U373 cell response and ERK1/2 activation profile after CHI3L1 or CHI3L2 treatment. Methods. Specific activation and localization of ERK1/2 kinases after CHI3L1 or CHI3L2 addition to unsupplemented cell medium were evaluated by Western blots, immunofluorescence and confocal microscopy. To determine whether CHI3L1 or CHI3L2 can enhance mitogenesis, [3H]thymidine incorporation in cellular DNA was measured. Results. The obtained results show that ERK1/2 phosphorylation was stimulated in both cell types (293 and U373 cells) following addition of CHI3L2 or CHI3L1 in dose- and time-dependent manner. Unexpectedly, in opposite to CHI3L1, the dose-dependent decreasing of measured mitogenesis parameters was observed in 293 and U373 cells. In both cell types the treatment with CHI3L2 gave more sustained than CHI3L1 MAPK-pathway activation with prolonged phospho-ERK1/2 nuclear accumulation in 293 cells. Conclusions. In contrast to the activation of ERK1/2 phosphorylation by CHI3L1 cell treatment, that leads to a proliferative signal, the activation of these kinases by CHI3L2 addition inhibits cell mitogenesis and proliferation in serum starved 293 and U373 cells. Keywords: chitinase 3-like 1 protein (CHI3L1), chitinase 3-like 2 protein (CHI3L2), MAP kinase, mitogenesis.Мета. Визначити клітинну відповідь та встановити профіль активації кіназ ERK1/2 після обробки клітин 293 та U373 білками CHI3L1 чи CHI3L2. Методи. Специфічну активацію і локалізацію кіназ ERK1/2 після внесення білків CHI3L1 або CHI3L2 до клітинного середовища, що не містить сироватки, проаналізовано Вестерн-блот аналізо та методами імунофлуоресценції і конфокальної мікроскопії. Для встановлення, чи зможе додавання білків CHI3L1 або CHI3L2 посилювати мітогенез, застосовано аналіз інкорпорації [3H]тимідину в клітинну ДНК. Результати. Отримані результати демонструють, що стимуляція фосфорилювання кіназ ERK1/2 після додавання CHI3L1 або CHI3L2 має дозо- та часозалежний характер. Виявилося, що, на відміну від CHI3L1, дозозалежне пригнічення інкорпорації [3H]тимідину констатовано у 293 та U373 клітинах. В обох типах клітин обробка білком CHI3L2 викликає тривалішу активацію каскаду МАРК, ніж обробка білком CHI3L1, з акумулюванням кіназ ERK1/2 у ядрі клітин 293. Висновки. На противагу активації фосфорилювання кіназ ERK1/2 внаслідок обробки клітин білком CHI3L1, що спричиняє проліферацію, стимуляція цих кіназ додаванням білка CHI3L2 пригнічує мітогенез у клітинах 293 та U373, що перебувають у стані сироваткового голодування. Ключові слова: хітиназа 3-подібний білок 1 (CHI3L1), хітиназа 3-подібний білок 2 (CHI3L2), MAP-кіназа, мітогенез.Цель. Определить клеточный ответ и профиль активации киназ ERK1/2 после обработки клеток 293 и U373 белками CHI3L1 или CHI3L2. Методы. Специфическую активацию и локализацию киназ ERK1/2 после внесения белков CHI3L1 или CHI3L2 в клеточную среду, где отсутствует сыворотка, проанализировано методами Вестерн-блот анализа, иммунофлуоресценции и конфокальной микроскопии. Для определения, будет ли добавление белков CHI3L1 или CHI3L2 увеличивать митогенез, использован анализ инкорпорации [3H]тимидина в клеточную ДНК. Результаты. Полученные результаты демонстрируют, что стимуляция фосфорилирования киназ ERK1/2 после добавления CHI3L1 либо CHI3L2 имеет зависящий от дозы и времени характер. Оказалось, что, в отличие от CHI3L1, дозозависимое угнетение инкорпорации [3H] тимидина констатировано в 293- и U373-клетках. В обоих типах клеток обработка белком CHI3L2 вызывает более длительную активацию каскада МАРК, нежели обработка белком CHI3L1, с аккумуляцией киназ ERK1/2 в ядрах клеток 293. Выводы. В отличие от активации фосфорилирования киназ ERK1/2 после обработки клеток белком CHI3L1, приводящей к пролиферации, стимуляция этих киназ добавлением белка CHI3L2 угнетает митогенез в клетках 293 и U373, находящихся в состоянии сывороточного голодания. Ключевые слова: хитиназа 3-подобный белок 1 (CHI3L1), хитиназа 3-подобный белок 2 (CHI3L2), MAP-киназа, митогенез

From reverse transcription to human brain tumors

Reverse transcriptase from avian myeloblastosis virus (AMV) was the subject of the study, from which the investi- gations of the Department of biosynthesis of nucleic acids were started. Production of AMV in grams quantities and isolation of AMV reverse transcriptase were established in the laboratory during the seventies of the past cen- tury and this initiated research on the cDNA synthesis, cloning and investigation of the structure and functions of the eukaryotic genes. Structures of salmon insulin and insulin-like growth factor (IGF) family genes and their transcripts were determined during long-term investigations. Results of two modern techniques, microarray-ba- sed hybridization and SAGE, were used for the identification of the genes differentially expressed in astrocytic gliomas and human normal brain. Comparison of SAGE results on the genes overexpressed in glioblastoma with the results of microarray analysis revealed a limited number of common genes. 105 differentially expressed genes, common to both methods, can be included in the list of candidates for the molecular typing of glioblastoma. The first experiments on the classification of glioblastomas based on the data of the 20 genes expression were conducted by using of artificial neural network analysis. The results of these experiments showed that the expression profiles of these genes in 224 glioblastoma samples and 74 normal brain samples could be according to the Koho- nen’s maps. The CHI3L1 and CHI3L2 genes of chitinase-like cartilage protein were revealed among the most overexpressed genes in glioblastoma, which could have prognostic and diagnostic potential. Results of in vitro experiments demonstrated that both proteins, CHI3L1 and CHI3L2, may initiate the phosphorylation of ERK1/ ERK2 and AKT kinases leading to the activation of MAPK/ERK1/2 and PI3K/AKT signaling cascades in human embryonic kidney 293 cells, human glioblastoma U87MG, and U373 cells. The new human cell line 293_CHI3L1, stably producing chitinase-like protein CHI3L1 was developed and these cells were found to have an accelerated growth rate and could undergo anchorage-independent growth in soft agar which is one of the most consistent indicators of oncogenic transformation. The formation of tumors in rats by 293_CHI3L1 cells evidences that CHI3L1 is an oncogene involved in tumorigenesis. In vitro experiments showed that constitutive expression of CHI3L1 gene promotes chromosome instability in 293 cells