НОВЫЙ ПОДХОД К ИММУНОХИМИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ БРАССИНОСТЕРОИДОВ

For the first time, reagents have been synthesized and a technique has been developed for a lanthanide immunofluorometric assay of phytohormonal steroids of 24-epicastasterone and 24-epibrassinolide. A low-molecular-weight conjugate of the brassinosteroid and an Eu3+ complexonate was synthesized by the reaction of 24-epicastasterone-6-(O-carboxymethyl) oxime N-succinimide ester with the europium salt of the diethylenetriaminepentaacetic acid N1-(aminoethyl)amide. A protein conjugate with a high specific fluorescent activity was the product of a simultaneous acylation of primary amino groups in albumin with activated esters of carboxyl derivatives of 24-epicastasterone and an Eu3+ complexonate. Using the high-molecular weight conjugate in an immunochemical system, a linear relationship was obtained between a fluorescent signal of labeled 24-epiсastasterone bound to immobilized antibodies and 24-epibrassinolide concentration in the range of 1 to 300 nM.Впервые получены реагенты и разработана методика лантанидного иммунофлуориметрического анализа фитогормональных стероидов 24-эпикастастерона и 24-эпибрассинолида. В реакции N-сукцинимидного эфира 6-(О-карбоксиметил)оксима 24-эпикастастерона с европиевой солью N1-(аминоэтил)амида диэтилентриаминпентауксусной кислоты синтезирован низкомолекулярный конъюгат брассиностероид-комплексонат Eu3+. Продуктом одновременного ацилирования первичных аминогрупп полипептидной цепи альбумина активированными эфирами карбоксипроизводных 24-эпикастастерона и комплексоната Eu3+ является белковый конъюгат, обладающий высокой удельной флуоресцентной активностью. При использовании высокомолекулярного конъюгата в иммунохимической системе получена линейная зависимость флуоресцентного сигнала меченого 24-эпикастастерона, связанного с иммобилизованными антителами, от концентрации 24-эпибрассинолида (1–300 нМ) в растворе

НАНОСТРУКТУРИРОВАННЫЕ КОМПЛЕКСЫ СТЕРОИДНОГО ФИТОГОРМОНА: НОВЫЙ ПОДХОД К ЗАЩИТЕ ОТ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

The in vitro study of the antiviral activity of the dextrin-24-epibrassinolide complex in chicken embryos was carried out. The complex was shown to have an inhibitory effect against the infectious laryngotracheitis virus.Проведено изучение антивирусной активности комплекса декстрин-24-эпибрассинолид на куриных эмбрионах in vitro. Показано, что данный комплекс является ингибитором вируса инфекционного ларинготрахеита птиц

Вивчення генетичного поліморфізму музейних культур C. diphtheriae в полімеразній ланцюговій реакції з універсальними праймерами

С помощью полимеразной цепной реакции с универсальным праймером № 45 было исследовано 12 музейных культур C. diphtheriae, выделенных от дифтерийных больных и бактерионосителей в 1954-1958 гг. в г. Москве и в 1991г. в г. Харькове. Установлены наиболее типовые профили ампликонов культур, которые были выделены в 50-е и 90-е годы. Выявлен также уровень генетического сходства культур, что проявляется в сопоставлении профилей ампликонов некоторых культур. Полученные данные могут быть использованы при составлении паспорта культуры и создании банка данных, который содержит информацию о геноме возбудителей, циркулирующих на разных территориях при разной интенсивности эпидемического процесса.The 12 C. diphtheriae museum cultures were investigated by polymerase chain reaction with arbitrary primer № 45. These cultures were isolated in 1954-1959 in Moscow and in 1991 in Kharkov from the patients with diphtheria and the bacilli carriers. The most typical amplicon profiles the museum cultures were determined. The level of genetic similarity of the museum cultures, which manifests by coincidence of the amplicon profiles, was determined too. This information will allow supplement the certificates of the museum cultures and creation of the data bank, which contains information about of the pathogene genomes circulating in various regions and different epidemic process intensity.За допомогою полімеразної ланцюгової реакції з універсальним праймером № 45 було досліджено 12 музейних культур C. diphtheriae, які були виділені від хворих на дифтерію та бактеріоносіїв у 1954- 1958 рр. у м. Москва, та у 1991 р. у м. Харків. Встановлено найбільш типові профілі ампліконів культур, які були виділені у 50-ті та 90-ті роки. Виявлений також рівень генетичної подібності культур, що проявляється у зіставленні профілів ампліконів деяких культур. Отримані дані можуть бути використані при складанні паспорту культури та створення банку даних, який містить інформацію про геном збудників, що циркулювали на різних територіях при різній інтенсивності епідемічного процесу

Polymetallic stress changes the endogenous status of brassinosteroids and reduces the effectiveness of photochemical reactions photosystem II in barley plants

Abstract: The effect of polymetallic stress (Mn2+, Cd2+, Cu2+, Ni2+, Zn2+, Pb2+, and Al3+) of different duration and intensity on the endogenous brassinosteroids (BS) content and photochemical activity of photosystem II in barley plants was studied. The content of steroid hormones was determined by a two-stage enzyme immunoassay. It was established for the first time that barley plants responded to polymetallic stress by changing the endogenous content of various phytosteroid groups (24S-methylBS, 24-epiBS, 28-homoBS, B-lactoneBS, and 6-ketoBS). It was shown that the stress-dependent dynamics of changes in the endogenous content of various BS groups is characterized by organ specificity and is determined by the age of plants, the intensity of the acting stressor, and the specificity of brassinosteroids. The observed changes in the endogenous status of BS in barley plants under polymetallic stress are accompanied by inhibition of growth processes, a decrease in the content of the main photosynthetic pigments, and a slight decrease in the efficiency of photochemical processes in PS II (Fv/Fm, ETR, qN, and NPQ). Considering the multifunctional stress-protective effect of brassinosteroids, it is assumed that the change in the endogenous status of BS against the background of polymetallic pollution is adaptive and allows minimizing the damaging effects of toxic heavy metals and aluminum

Характеристика Corynebacterium diphtheriae, що циркулювали на території України під час останньої епідемії

Исследовано 73 культуры C. diphtheriae, выделенных в западном (Львовская и Ивано-Франковская области 14 культур: 7 — gravis, 7 — mitis), восточном (Харьковская область, 6 культур: 4 — gravis, 2 — mitis) и южном (Одесская область, 53 культуры: 39 — gravis, 14 — mitis) регионах Украины в 1985–1995 гг. от больных дифтерией и бактерионосителей. Культуры из западного и восточного регионов получены из коллекций Львовского НИИ эпидемиологии и гигиены и Харьковского института микробиологии и иммунологии. Культуры из южного региона выделялись в рамках выполнения научно-исследовательской работы Одесского государственного медицинского университета “Состояние иммунного статуса в диагностике и прогнозирования клинического течения и исходов дифтерии”.Genetic polymorphism of 73 bacterial cultures of Corynebacterium diphtheriae was conducted by polymerase chain reaction with arbitrary primers (random amplification of polymorphic DNA PCR). The bacterial cultures were isolated in west, east and south region of Ukraine in 1985–1995. It was determined that these cultures belong to 6 genetic isolated types. The first genotypes was registered with frequency 79,5%. It was isolated on all area of the Ukraine. It was determined as epidemic. Other genotypes which was found with frequency 4,1%, 4,1%, 2,7%, 8,2% and 1,4% accordingly.Проведено молекулярно-генетичне типування в полімеразній ланцюговій реакції з універсальним праймером № 45 (RAPD-ПЛР) 73 культур C. diphtheriae, які були виділені у західному, східному та південному регіонах України у 1985–1995 рр. від хворих на дифтерію та бактеріоносіїв. Встановлено, що досліджувані культури належали до 6 генетично відокремлених типів. Питома вага першого генотипу складала 79,5% серед всіх досліджуваних культур, що дозволило віднести даний генотип до епідемічного. Інші генотипи (2–6) реєструвалися з частотою 4,1%, 4,1%, 2,7%, 8,2% та 1,4% відповідно