인간 방광암 세포주에서 MutT homolog1 inhibitors의 항암 효과

학위논문(박사)--서울대학교 대학원 :의과대학 의학과,2020. 2. 이은식.Introduction: We investigated the antitumor effects and the possible molecular mechanisms of MutT homolog 1 (MTH1) inhibitors, TH588 or TH287, in cisplatin-sensitive (T24) and -resistant (T24R2) human bladder cancer cell lines. Methods: Cell Counting Kit-8 (CCK-8) and clonogenic assays were performed to assess the anti-proliferative effect of TH588 or TH287 on T24 and T24R2 cells. The generation of reactive oxygen species (ROS) in T24 and T24R2 cells was evaluated with 2,7-dichlorofluorescein diacetate using the IncuCyte® ZOOM System. Flow cytometry was performed to analyze the changes in cell cycle and apoptosis. The expression of proteins related to apoptosis and cell cycle was determined by western blotting. Results: The CCK-8 and clonogenic assays demonstrated the dose-dependent antitumor effects of TH588 or TH287 on T24 and T24R2 cells. Treatment with TH588 or TH287 increased the relative level of reactive oxygen species in both cell lines. MTH1 expression was not dependent on the treatment dose of TH588 or TH287. TH588 or TH287 treatment induced apoptosis via increased expression of fragmented poly (ADP-ribose) polymerase, caspase-3, -8, -9, and cytochrome c. Cell cycle arrest induced by TH588 or TH287 was accompanied by decreased expression of cyclin A. Conclusions: Our results suggest that TH588 or TH287 may induce cancer cell suppression by off-target effects rather than MTH1 inhibition in cisplatin-sensitive and –resistant bladder cancer cells. Further investigations or clinical trials are needed to confirm the antitumor effects and underlying molecular mechanisms of MTH1 inhibitors in human bladder cancer cells.서론: 인간 방광암 세포주에서 MutT homolog (MTH)1 inhibitor의 항암효과와 그 기전을 분자생물학적 수준에서 분석함으로써 전이성 방광암에 대한 새로운 항암 후보물질로서의 MTH1 inhibitor를 규명하고, 나아가 cisplatin 내성 방광암에 대한 2차 항암화학요법의 근간으로써 MTH1 inhibitor의 임상적 활용에 대한 기초자료를 확보하고자 하였다. 방법: 침윤성 방광암 세포주 T24와 cisplatin 내성 방광암 세포주 T24R2에 대한 MTH1 inhibitors (TH588, TH287)의 항암효과를 확인하기 위해 Cell Counting Kit-8 (CCK-8)과 클론원성 분석 (clonogenic assay)을 시행하였다. T24와 T24R2에 TH588또는 TH287을 용량별로 처리한 후 IncuCyte® ZOOM System을 이용하여 reactive oxygen species (ROS)의 발현을 분석하였다. TH588과 TH287 처리 후 T24와 T24R2의 세포주기 변화를 확인하기 위해 유세포 분석 (flow cytometry)을 시행하였고, 세포주기 및 세포고사 관련 단백질 발현의 변화를 측정하기 위해 Western blot을 시행하였다. 결과: CCK-8과 클론원성 분석 결과 TH588과 TH287은 T24와 T24R2에서 용량 의존적 항암 효과를 보여주었다. T24와 T24R2에 TH588 또는 TH287을 처리하였을 때, 두 세포주 모두에서 ROS가 증가하였다. 유세포 분석 결과 24시간 동안 TH588 또는 TH287을 처리하였을 때 T24와 T24R2 두 세포주에서 용량 의존적으로 G1 phase는 감소하였고, sub-G1과 G2/M phase는 증가하였다. Western blot 결과, MTH1 발현은 TH588 또는 TH287의 처리 용량에 의존하지 않았다. TH588 과 TH287은 fragmented poly (ADP-ribose) polymerase, caspase-3, -8, -9, cytochrome c의 발현을 증가시켜 세포사멸을 유도하였고, cyclin A의 발현 감소를 통해 세포주기 정지를 유도하였다. 결론: 본 연구결과 MTH1 inhibitor인 TH588과 TH287은 시스플라틴 민감성 및 내성 방광암 세포에서 MTH1억제가 아닌 표적 외 효과로 항암효과를 유도하였다. 그 기전을 확인하기 위한 추가 연구가 필요하다.Introduction 1 Materials and Methods 3 Results 6 Discussion 15 References 19 국문초록 23 감사의 글 25Docto

세포 분비 경로 단백질과 Ralstonia solanacearum 이펙터 단백질의 상호작용 구명

학위논문 (석사) -- 서울대학교 대학원 : 농업생명과학대학 농림생물자원학부, 2021. 2. Segonzac Cecile Marie Helene.Plants have innate immune responses against pathogens. Many bacterial pathogens secrete type III effectors (T3Es) to promote their growth. Thus, many T3Es target host defense-related components. Therefore, it is important to identify and characterize T3E interactors in the host plant. One bacterial pathogen, Ralstonia solanacearum (R. solanacearum) causes severe wilt in a wide range of horticultural crops. One of R. solanacearum T3E, RipAO, suppresses a defense response, namely flg22-triggered ROS production in Nicotiana benthamiana. Here, I screened Arabidopsis thaliana total cDNA library using RipAO to identify its interactors and test whether candidate interactors are required for the RipAO role to suppress flg22-ROS production. Using yeast two-hybrid screening, three candidate interactors, exocyst complex component SEC3A (SEC3A), SNF1 related protein kinase (KIN10), and Arabidopsis thaliana homolog of yeast oxidase assembly 1 (OXA1) were identified. Interestingly, SEC3A could not accumulate in the presence of RipAO. Moreover, RipAO could not or not fully suppress flg22-triggered ROS production in N. benthamiana plants silenced for SEC3A homologs. Taken together, these results suggest that RipAO targets the exocyst component SEC3A and that SEC3A is required for RipAO suppression of flg22-ROS production. Hence, this study uncovers a possible role of the vesicle trafficking machinery as the target of pathogen effectors to impair the host defense response.식물은 병원균에 대항하여 내재된 면역체계를 가지고 있다. 그래서, 많은 세균성 병원균들은 증식을 위해 이펙터(type III effectors, T3E) 단백질을 주입하며, 이펙터는 기주식물의 방어와 관련된 요소들을 타겟으로 한다. 이러한 이유로, 기주 식물에서 이펙터 단백질과 상호작용하는 단백질을 규명하는 것은 중요하다. 세균성 병원균의 하나인 R. solanacearum은 다양한 원예작물에 심각한 세균성 풋마름병을 일으킨다. R. solanacearum의 이펙터 중 하나인 RipAO는 담배 (Nicotiana benthamiana) 에서 식물의 방어 작용의 하나인 활성산소종 (reactive oxygen species) 생성을 억제한다. 본 연구에서는 애기장대(A. thaliana) cDNA 라이브러리에서 RipAO와 상호작용하는 단백질을 선별하여 이 단백질들이 RipAO의 담배의 활성산소종 생성을 억제하는 것과 연관성이 있는지 실험하였다. 효모 단백질 잡종법(yeast two-hybrid) 스크리닝 결과, 세가지의 단백질, exocyst complex component SEC3A (SEC3A), SNF1 related protein kinase (KIN10) 그리고 Arabidopsis thaliana homolog of yeast oxidase assembly 1 (OXA1)들이 RipAO와 상호작용하는 후보 단백질들로 발견되었다. 흥미롭게도, 담배에서 RipAO 존재 하에 SEC3A 단백질의 축적이 감소하는 것이 발견되었다. 또한 애기장대의 SEC3A의 homolog 단백질(NbSEC3A)들의 발현이 억제된 담배에서 RipAO가 활성산소종의 생성을 억제하지 못하는 것으로 확인 되었다. 이러한 결과들을 종합해 볼 때 RipAO는 SEC3A 단백질을 타겟으로 하며, SEC3A 단백질이 RipAO가 활성산소종을 억제하는데 필요한 요소로 밝혀졌다. 그러므로 본 연구에서는 기주 식물의 방어 작용을 억제하기 위해 막 수송 조직을 타겟으로 하는 이펙터 단백질을 규명하였다.CONTENTS ABSTRACT i CONTENTS iii LIST OF TABLES vi LIST OF FIGURES vii LIST OF ABBREVIATIONS x INTRODUCTION 1 MATERIAL AND METHODS 5 Plant and yeast strain culture 5 Molecular cloning 5 Yeast two-hybrid system 7 Agrobacterium tumefaciens-mediated transient expression in N. benthamiana 9 Immunoprecipitation and immunoblotting 9 Virus induced gene silencing (VIGS) assay 11 Measurement of ROS production 11 Semi-quantitative RT-PCR 11 RESULTS 15 Selection of NLS-containing type III effectors 15 Cloning, expression and activity of the three selected effectors in yeast 16 Some Arabidopsis thaliana genes can activate MEL1 gene with GAL4 DNA-binding domain 20 Yeast two-hybrid screening of A. thaliana cDNA library for RipAO interactors 23 Re-transformation of the original fished-out plasmids 27 Cloning of full-length and truncated cDNA for candidate interactors of RipAO 29 Full-length and truncated candidate genes cannot activate MEL1 gene with GAL4 DNA-activation domain 30 RipAO fused with GAL4 DNA binding-domain interacts with the full-length candidate fused with GAL4 DNA-activation domain 32 SEC3A-YFP accumulates less in the presence of RipAO-FLAG in N. benthamiana 35 Co-expression and co-IP assay of RipAO with KIN10 and OXA1 37 RipAO suppresses flg22-triggered ROS production in N. benthamiana 39 Design silencing fragment to knock-down candidate interactor homolog in N. benthamiana 41 ROS measurement in N. benthamiana silenced for SEC3A homolog and confirmation of silencing efficiency by semi-quantitative RT-PCR 45 Reactive oxygen species (ROS) measurement in N. benthamiana silenced for KIN10 homolog and confirmation of silencing efficiency by semi-quantitative RT-PCR 48 DISCUSSION 52 REFERENCES 59 ABSTRACT IN KOREAN 68Maste

A Heuristic Method for Container Loading on Considering Routing Sequence

The Three-Dimensional Bin packing problem (3BP) consists of allocating, without overlapping, a given set of three dimensional rectangular items to the minimum number of three dimensional identical finite bins. This paper presents a heuristic solution for the three dimensional container loading problem on considering routing sequence. The container loading problem on considering routing sequence is formulated as a zero-one mixed integer programming model whose objective is to minimize number of vehicle. Due to its problem complexity, I propose a heuristic algorithm based on tower loading technique.제 1 장 서론 = 5 1.1 연구의 배경 및 필요성 = 5 1.2 관련 문헌 연구 = 6 1.2.1 적재 문제에 관한 연구 = 6 1.3 논문의 구성 = 8 제 2 장 모형의 수립 = 9 2.1 문제의 설정 = 9 2.2.1 기본 문제 정의 = 9 2.2 수리적 모델 = 10 2.3 모형의 특성 = 14 제 3 장 발견적 해법 및 적용 = 15 3.1 발견적 해법 = 15 3.1.1 Tower의 정의 = 16 3.1.2 발견적 기법의 개괄적 흐름 = 19 3.1.3 발견적 기법의 상세한 흐름 = 20 3.2 예제의 수행 = 23 제 4 장 결론 및 향후 연구방향 = 27 참고문헌 = 2

Origin of Satellite Ganglion Cysts with Effusion in the Flexor Hallucis Longus Tendon Sheath around the Hallux

Background: To describe the clinical and magnetic resonance imaging findings of ganglion cysts with effusion in the flexor hallucis longus tendon sheath around the hallux to evaluate their origin. Methods: Patients with recurrent or painful ganglion cysts around the hallux with effusion in the flexor hallucis longus tendon sheath who underwent surgical treatment at St. Vincent's Hospital from February 2007 to August 2016 were investigated. Surgical indication was a painful or recurrent mass caused by the cystic lesions. Those without effusion of the flexor hallucis longus tendon sheath were excluded. We assessed the clinical and magnetic resonance imaging findings. Results: Magnetic resonance imaging findings in all patients showed several ganglion cysts around the hallux and large fluid accumulations within the flexor hallucis longus tendon sheath. Regarding the location, six ganglion cysts were on the dorsomedial aspect, one on the plantar medial aspect, seven on the plantar lateral aspect, and one in the toe pulp. Ten patients showed joint effusions in both the metatarsophalangeal and interphalangeal joints, two in the metatarsophalangeal joints, and three in the interphalangeal joints. There were communication stalks with a tail shape or abutment between ganglion cysts with surrounding joint effusions. Intraoperatively, connections between ganglion cysts, the synovial cyst of the flexor hallucis longus tendon sheath, and surrounding joints were seen. Conclusions: Synovial fluid accumulation in the metatarsophalangeal or interphalangeal joint supplies the synovial cyst of the flexor hallucis longus tendon sheath and subsequently ganglion cysts in the hallux. In clinical practice, the surgeon should carefully check surrounding joints with tendon sheaths to prevent recurrence of the ganglion cysts around the hallux.ope

Analysis of Chemical Components and Biological Activities of Roots and Leaves from Stachys sieboldii Miq.

This study analyzed flavonoid and phenol contents and fatty acid composition of Stachys sieboldii Miq. and investigated biological activities of crude extracts and fractions of S. sieboldii Miq. The flavonoid and phenol contents of the methanol (MeOH) extract were greater than those of the acetone+methylene chloride (A+M) extract. Among fractions, the flavonoid and phenol contents of the n-buthanol (n-BuOH) fraction were highest in root of S. sieboldii Miq., while the flavonoid and phenol contents of the 85% aqueous methanol (85% aq. MeOH) fraction were highest in leaves of S. sieboldii Miq. In fatty acid composition of root of S. sieboldii Miq., the percentages of linoleic acid (LA, 18:2n-6), linolenic acid (LNA, 18:3n-3) and oleic acid (OA, 18:1n-9) were 54.27%, 20.82% and 2.28%, respectively. Leaves of S. sieboldii Miq. showed that the percentages of LA, LNA and OA were 11.27%, 16.37% and 5.45%, respectively. In anticancer activity, treatments of crude extracts and fractions from S. sieboldii Miq. significantly inhibited the growth of HT-29, AGS and HT-1080 human cancer cell lines (p<0.05). Both A+M and MeOH extracts from roots and leaves showed inhibitory effects on growth by more than 50% at the concentrations of 0.5 mg/mL in AGS and HT-1080 cancer cells. Among the fractions, the 85% aq. MeOH and n-Hexane fractions exhibited a higher inhibitory effect on proliferation of three types of cancer cells. In antioxidant activity, all tested extracts and fractions of S. sieboldii Miq. dose-dependently decreased cellular reactive oxygen species (ROS) production induced by H202 in comparison with that produced by exposure to the extract-free control. The A+M extract of roots showed a higher inhibitory effect on cellular ROS producing than that of the MeOH extract at all concentrations tested. On the other hand, MeOH extract of leaves showed a higher inhibitory effect on cellular ROS producing than that of the A+M extract at all concentrations tested. Among the fractions, both BuOH fraction (0.1 mg/mL concentration) from roots and leaves showed a higher inhibitory effect on cellular ROS production. In DPPH and ABTS radical scavenging assay, the A+M extract from roots showed a greater scavenging effect than that of the MeOH extract of roots(p<0.05). Among extracts from leaves, MeOH extract showed a greater scavenging effect than that of the A+M extract (p<0.05). The n-BuOH fraction showed a stronger radical inhibitory effect than dibutyl hydroxy toluene (BHT). The A+M and MeOH extracts from S. sieboldii Miq. significantly inhibited genomic DNA oxidation (p<0.05). The 85% aq. MeOH fraction showed a higher inhibitory effect against DNA oxidation compared with control (p<0.05). In addition, the extracts and fractions from S. sieboldii Miq. increased levels of intracellular glutathione (GSH) in a dose manner. In anti-inflammatory activity, the productions of nitric oxide (NO) assay showed that the extracts and fractions significantly reduced NO production induced by lipopolysaccharide (LPS) (p<0.05). The n-BuOH fraction from roots of S. sieboldii Miq. showed the highest reduction of NO production by 75.4% and then A+M and MeOH extracts showed reduced NO production by 67.9% and 78.4%. The n-BuOH fraction from leaves of S. sieboldii Miq. showed the highest reduction of NO production by 61.4% and then A+M and MeOH extracts showed reduced NO production by 57.7% and 61.1%. respectively (p<0.05). These results suggested that 85% aq. MeOH and n-BuOH fractions from roots and leaves of S. sieboldii Miq. inhibited cellular oxidation and growth of human cancer cells, suggesting that their biological activity may be associated with the contents of flavonoids and phenols. Thus, S. sieboldii Miq. might be useful for providing valuable materials to the pharmaceutical, cosmetic nutraceutical and food industries.1. 서 론 4 2. 재료 및 방법 7 2.1. 재료 7 2.2. 초석잠 뿌리와 잎 추출 및 분획 7 2.3. 초석잠 뿌리와 잎의 활성 성분 분리 8 2.4. 초석잠 뿌리와 잎의 총 플라보노이드 함량 측정 10 2.5. 초석잠 뿌리와 잎의 총 페놀 함량 측정 11 2.6. 초석잠 뿌리와 잎의 지질 및 지방산 추출 12 2.7. Gas chromatography를 이용한 초석잠 뿌리와 잎의 지방산 분석 14 2.8. 초석잠 뿌리와 잎 생리활성 측정 15 2.8.1. 항암 실험 15 ① 세포 배양 15 ② MTT assay 16 2.8.2. 항산화 실험 18 ① 세포 배양 18 ② 세포 내 활성산소종 (Reactive oxygen species) 측정 19 ③ 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazly (DPPH) 라디칼 소거 활성 측정 21 ④ 2.2'-azino-bis(3-ethybenzthiazoline-6-sulphonic acid) diammonium salt radical cation (ABTS+) 라디칼 소거활성 측정 23 ⑤ Genomic DNA 추출 및 DNA 산화 생성물 측정 25 ⑥ 세포 내 Glutathione (GSH) 함량 측정 25 2.8.3. 항염증 실험 25 ① 세포 내 Nitric oxide (NO) 생성 측정 25 2.9. 통계 분석 26 3. 결과 및 고찰 27 3.1. 초석잠 뿌리와 잎의 총 플라보노이드 및 총 페놀 함량 27 3.1.1 초석잠 뿌리의 총 플라보노이드 및 총 페놀 함량 27 3.1.2 초석잠 잎의 총 플라보노이드 및 총 페놀 함량 29 3.2. 초석잠 뿌리와 잎의 지방산 조성 31 3.2.1 초석잠 뿌리의 지방산 조성 31 3.2.2 초석잠 잎의 지방산 조성 33 3.3. 초석잠 뿌리와 잎의 추출물 및 분획물의 생리활성 35 3.3.1. 초석잠 뿌리와 잎 추출물 및 분획물의 항암 효과 35 3.3.1.1 초석잠 뿌리 추출물 및 분획물의 항암 효과 35 3.3.1.2 초석잠 잎 추출물 및 분획물의 항암 효과 45 3.3.2. 초석잠 뿌리와 잎 추출물 및 분획물의 항산화 효과 55 3.3.2.1 초섬잠 뿌리 추출물 및 분획물의 항산화 효과 55 ① 초석잠 뿌리가 세포 내 활성산소종 (Reactive oxygen species) 생성 억제효과 55 ② 초석잠 뿌리의 DPPH 라디칼 소거활성 58 ③ 초석잠 뿌리의 ABTS+ 라디칼 소거활성 60 ④ 초석잠 뿌리의 Genomic DNA 산화 억제효과 62 ⑤ 초석잠 뿌리가 Glutathione (GSH) 생성에 미치는 효과 64 3.3.2.2 초석잠 잎 추출물 및 분획물의 항산화 효과 67 ① 초석잠 잎의 세포 내 활성산소종 (Reactive oxygen species) 생성 억제효과 67 ② 초석잠 잎의 DPPH 라디칼 소거활성 70 ③ 초석잠 잎의 ABTS+ 라디칼 소거활성 72 ④ 초석잠 잎의 Genomic DNA 산화 억제효과 74 ⑤ 초석잠 잎의 Glutathione (GSH) 생성에 미치는 효과 76 3.3.3.1 초석잠 뿌리 추출물 및 분획물의 항염증 효과 67 ① 세포 내 Nitric oxide (NO) 생성 저해효과 67 3.3.3.2 초석잠 잎 추출물 및 분획물의 항염증 효과 67 ① 세포 내 Nitric oxide (NO) 생성 저해효과 67 4. 요약 및 결론 93 참고문헌 96 감사의 글 103Maste

Surgical Treatment of Patellar Instability in Children and Adolescents

Patellar instability in children and adolescents is caused by abnormalities of various knee structures. Instability of the patellofemoral joint can manifest as an acute dislocation, recurrent dislocation, habitual dislocation, and congenital dislocation. Patellar instability is associated with abnormalities in the anatomical structures around the knee, and a comprehensive analysis of the cause should be undertaken. Surgery can be performed to reconstruct any abnormal musculo-skeletal alignment. Considerable progress has been made in the treatment of patellar instability in recent years, and surgical methods include lateral release, soft tissue realignment procedure, transfer of the autologous tendon, trochleaplasty, and reconstruction of the medial patellofemoral ligament.ope

A Comparison of the Device-Related Complications of Intramedullary Lengthening Nails Using a New Classification System

The purpose of this study was to understand the pros and cons of the lengthening nails which have their own mechanical mechanism; we propose a classification for "device-related complications" arising from mechanical properties of the nail itself. From March 2010 to March 2014, 115 segments of lower limb lengthening were performed using intramedullary lengthening nails (35 ISKD, 34 PRECICE1, and 46 PRECICE2). Device-related complications were sorted into three categories according to a new classification: distraction control-related (type I), stability related (type II), and other device-related (type III); these were subdivided using Paley's concept of problems (a), obstacles (b), and sequel (c). Most common complications were distraction mechanism issues (type I) in ISKD and mechanical strength related ones (type II) in PRECICE1 and PRECICE2. Sixty percent (21/35) of ISKD had device-related problems. In PRECICE1 group, 8.8% (3/34) had device-related problems, and 8.8% (3/34) showed device-related obstacle. In PRECICE2, forty-four percent (20/46) had device-related problems. In conclusion, a new classification showed more clearly the differences of mechanical characteristics of different nails. The most essential thing of future lengthening nail development is minimizing the types I and II complications. Further study is necessary to compare the mechanical strength and stability of lengthening nails.ope

韓國의 分配問題: 現況, 問題點과 政策方向

우리나라의 소득분배문제에 대해서 종래에는 적어도 1980년대 이후 개선되고 있으며, 국제비교에서도 다른 나라에 비해 결코 나쁘지 않다는 평가가 주류를 이루고 있었으나, 최근에는 그에 대한 반론이 만만치 않게 전개되어 있다. 본고에서는 『도시가계연보』의 원자료를 이용한 새로운 추계를 시도하여 1980년대의 소득분배가 지금까지의 통설처럼 그렇게 많이 개선된 것은 아니라는 결과를 제시하였다. 마찬가지로 일부의 반론처럼 1980년대의 소득분배가 실제로 악화되었다는 주장도 과장일 가능성이 크다는 점도 지적하였다. 단, 근로소득의 분배가 개선되고 있음은 분명하나 토지나 주식 등에 의한 불로소득까지 포함하면 결과는 크게 달라질 수 있다. 이 문제의 검증은 아직 끝난것이 아니며, 올바른 결론에 도달하기 위해서는 앞으로 보다 많은 자료들이 발굴, 분석되어야 할 것이다. 한국의 자산분배에 대해서는 지금까지 자료가 별로 없어서 논의 자체가 어려운 상태였다. 최근 대우경제연구의 패널 자료를 분석해본 결과, 한국의 부의 분배는 지금까지 알려진 것보다 훨씬 더 불평등하며, 특히 토지 등 실물자산의 불평등이 심각한 것으로 나타났다. 한편 한국의 빈곤은 많이 줄어든 것이 사실이며, 다른 후진국과 비교해서 빈곤 축소에 큰 성과를 거둔 것으로 평가된다. 본고에서 좀더 현실적인 최저생계비를 가정하여 분석해본 결과 한국의 빈곤은 물론 많이 줄어들었지만 아직 상당히 남아 있으며, 빈곤의 크기 자체(빈곤 갭)는 그다지 크지 않은 것으로 나타났다. 본고에서는 이러한 연구결과에 기초해서 우리나라의 분배문제에 대한 평가를 내리고 효율성과 형평성의 조화라는 관점에서 정책의 기본방향을 설정하였으며, 조세정책과 재벌정책에 초점을 맞추어서 정책방향을 논의하였다. 분배정의의 관점에서, 우리나라의 세제는 직접세 비중을 높이고, 종합토지세, 상속․증여세 등 재산관련 세제의 기능을 강화하며, 근로자와 비근로자간 세부담의 형평성을 제고하는 방향으로 개편되어야 한다. 그리고 재벌의 소유분산 자체는 재벌이 자행할 수 있는 경제력 부조리를 막기 위한 장치를 강화하는 것이 중요하다. 상속․증여세제 등의 강화나 기업경영의 투명성을 제고하기 위해 감시장치가 강화되어야 할 것이다. 특히 자유주의자가 강조하는 &lsquo;정당한 권리의 원칙&rsquo;으로서 &lsquo;부정의의 시정&rsquo;의 원칙이 보다 적극적으로 반영될 수 있어야 하며, 이러한 주장 자체가 시장 메커니즘을 옹호하는 진정한 자유주의 원칙에 입각하고 있다는 점이 강조되어야 할 것이다

韓國産·中國産 잔나비걸상버섯의 抗腫瘍成分에 관한 比較 硏究

학위논문(석사)--서울大學校 大學院 :農生物學科 基礎農生物專攻,1995.Maste

The Influence of Tournament Experience in Golf Gallery on Pleasure, Satisfaction, and Re-spectating Intention: Focus on the Experience Economy Theory

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 체육교육과, 2015. 2. 김기한.스포츠 경기에서 경기장을 직접 방문하는 관람객은 관람 스포츠에서 아주 중요한 역할을 하며, 경기장을 찾아 스포츠 경기를 관람하는 행위는 일종의 소비 행동이다. 관중이 스포츠 경기관람을 결정하는데 있어 직접적으로 영향을 미치는 요인을 경기 관람요인이라고 하며, 골프 종목은 여타 팀스포츠 종목과는 관람 형태에서 확연한 차이를 보이고 있다. 즉, 골프 관람객(gallery)은 이러한 전통적인 스포츠 이벤트 관람객과는 다른 독특하고 고유한 특성들을 가지고 있다. 본 연구에서는 골프 대회 갤러리를 대상으로 하여 이들이 왜 대회장을 찾는가를 파악하고 파인과 길모어(Pine & Gilmore)가 제시한 체험 경제의 개념들이 어떻게 골프 갤러리들에게 적용되고 있는가를 분석하고자 하였다. 따라서, 본 연구는 골프대회 갤러리들의 대회 체험요인을 규명하여, 증가하는 골프 인구와 골프 팬들의 보다 많은 대회 관람을 유치 할 수 있는 토너먼트 마케팅 활동에 도움을 주고자 한다. 이러한 연구 목적을 달성하기 위해 본 연구에서는 Pine & Gilmore의 체험경제이론에 근거한 4가지 체험요인인 엔터테인먼트 체험, 교육 체험, 현실도피 체험, 미적 체험을 바탕으로 골프대회 관람객(gallery)의 특성에 맞게 대회 관람 체험을 엔터테인먼트 체험, 교육 체험, 현실도피 체험, 미적 체험, 편의성 체험으로 구성하였으며, 선행연구를 바탕으로 구성된 5가지 골프대회 체험요인이 각각 즐거움과 만족도, 재관람의도라는 변인에 긍정적인 영향 줄 수 있을 것으로 예상하였다. 본 연구의 대상은 KLPGA투어 매트라이프·한국경제 제36회 KLPGA 챔피언십 대회 관람에 참가한 갤러리를 대상으로 현장에서 설문을 실시하여 총 535명의 자료를 확보하였다. 이들 가운데 불성실한 응답을 보인 설문지를 제외한 493개의 자료를 분석에 활용하였다. 자료 분석은 SPSS 18.0과 AMOS 18.0 통계 분석 프로그램을 이용하여, 확인적 요인분석과 구조방정식 모형 검증을 통해 본 연구의 가설을 검증하였다. 연구 결과, 골프대회 갤러리들의 체험요인 중에서 교육 체험을 제외한 엔터테인먼트 체험, 현실도피 체험, 미적 체험 그리고 편의성 체험이 갤러리들의 즐거움에 각각 정(+)적인 영향을 미치는 것으로 나타났다. 이와 함께 관람객들의 즐거움은 만족도에 긍정적인 영향을 미치는 것으로 나타났으며, 만족도 역시 재관람의도에 통계적으로 유의미한 영향을 미치는 것으로 나타났다. 하지만 교육 체험은 즐거움에 그리고 즐거움은 재관람의도에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다.Ⅰ. 서론 1. 연구의 필요성 2. 연구의 목적 Ⅱ. 이론적 배경 1. 관람요인 1) 관람요인의 개념 2) 주요 종목별 관람요인에 대한 선행연구 2. 골프대회 관람 1) 골프 관람의 특성 2) 골프대회 관람요인 3. 체험경제이론과 골프대회 갤러리 참여 1) Pine & Gilmore의 체험경제이론 2) 골프대회 체험요인 3) 체험요인과 즐거움, 만족도, 재관람의도의 관계 Ⅲ. 연구모형 및 가설 1. 연구모형 44 2. 연구가설 45 Ⅳ. 연구방법 1. 연구대상 및 절차 2. 측정도구 1) 엔터테인먼트 체험 2) 교육 체험 3) 현실도피적 체험 4) 미적 체험 5) 편의성 체험 6) 즐거움 7) 만족도 8) 재관람의도 9) 인구통계학적 변인 10) 골프 관련 변인 3. 자료처리 방법 Ⅴ. 연구결과 1. 예비분석 1) 기술통계 분석 2) 확인적 요인 분석 3) 다중공선성 검증 4) 신뢰도 및 타당도 검증 2. 구조방정식 모델 검증 1) 구조방정식 모델 적합도 검증 2) 연구가설의 검증 Ⅵ. 논의 및 결론 1. 결과정리 2. 시사점 3. 제언 4. 결론 참고문헌 AbstractMaste