63 research outputs found
Ablation of the deubiquitinase USP15 ameliorates nonalcoholic fatty liver disease and nonalcoholic steatohepatitis
Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) occurs due to the accumulation of fat in the liver, leading to fatal liver diseases such as nonalcoholic steatohepatitis (NASH) and cirrhosis. Elucidation of the molecular mechanisms underlying NAFLD is critical for its prevention and therapy. Here, we observed that deubiquitinase USP15 expression was upregulated in the livers of mice fed a high-fat diet (HFD) and liver biopsies of patients with NAFLD or NASH. USP15 interacts with lipid-accumulating proteins such as FABPs and perilipins to reduce ubiquitination and increase their protein stability. Furthermore, the severity of NAFLD induced by an HFD and NASH induced by a fructose/palmitate/cholesterol/trans-fat (FPC) diet was significantly ameliorated in hepatocyte-specific USP15 knockout mice. Thus, our findings reveal an unrecognized function of USP15 in the lipid accumulation of livers, which exacerbates NAFLD to NASH by overriding nutrients and inducing inflammation. Therefore, targeting USP15 can be used in the prevention and treatment of NAFLD and NASH.ope
Syngman Rheeโs Diplomacy and Press Clippings at the time of the Washington Conference, 1921โ1922
The Effects of Peer Status and Social Goal on Peer Conformity
ํ์๋
ผ๋ฌธ (๋ฐ์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ์ฌ๋ฒ๋ํ ๊ต์กํ๊ณผ, 2019. 2. ์ ์ข
ํธ.๋๋ ๋์กฐ(peer conformity)๋ ๋๋์ ์๊ฒฌ, ํ๋จ, ํ๋์ ๋ฐ๋ผ ์์ ์ ์๊ฒฌ, ํ๋จ, ํ๋์ ๋ณ๊ฒฝํ๋ ๊ฒ์ ๋ปํ๋ค. ์๋์ ์ฐ๋ น์ด ๋์์ง์ ๋ฐ๋ผ ๋๋์ ์ค์์ฑ์ ์ปค์ง๋ฉฐ, ์ด์ ๋ฐ๋ผ ๋๋์๊ฒ ๋์กฐํ๋ ค๋ ๊ฒฝํฅ์ฑ ๋ํ ์ฆ๊ฐํ๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ชจ๋ ๋๋๊ฐ ๋์ผํ ์ํฅ๋ ฅ์ ๊ฐ์ง๋ ๊ฒ์ ์๋ ์ ์๋ค. ๋๋ ๊ด๊ณ ๋ํ ๋ค๋ฅธ ์ฌํ ๊ด๊ณ์ ๋ง์ฐฌ๊ฐ์ง๋ก ์ผ์ข
์ ์ง์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๋ณด์ด๋ฉฐ, ์ง์ ๊ตฌ์กฐ์์ ๋์ ์์น๋ฅผ ์ฐจ์งํ๋ ์๋ ๋ฐ ์ฒญ์๋
์ด ๋๋ ๊ด๊ณ์์ ๋ ๋์ ์ํฅ๋ ฅ์ ๋ฐํํ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ค. ์ด์ ์ฐฉ์ํ์ฌ ์ต๊ทผ ๋๋ ๋ด ์ง์์ ์ํฅ๋ ฅ์ ํ์ธํ ์ฐ๊ตฌ๋ค์ด ๋ค์ ์ด๋ฃจ์ด์ก์ง๋ง, ์ฐ๊ตฌ๋ค์ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๋ค์ ํผ์ฌ๋์ด ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ด์ ๋ํ ์ฒด๊ณ์ ์ธ ํ์์ด ํ์ํ ์ค์ ์ด๋ค.
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ค์ ๋ค ๊ฐ์ง ์ ์ ์ฃผ๋ชฉํ์ฌ ๋๋ ์ง์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด๋ค ์ธ๋ฐํ๊ฒ ํ์ํ๊ณ ์ ํ์๋ค. ์ฒซ์งธ, ๊ธฐ์กด ์ง์ ์๋ ๋๋์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ค์ ๊ฒฝ์ฐ ์ฃผ๋ก ์ง์ ์ฐ๊ตฌ๋ ์๊ด ์ฐ๊ตฌ์ ์ฃผ๋ก ์์กดํ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์, ์ธ๊ณผ ๊ด๊ณ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ด๋ ต๋ค๋ ํ๊ณ๊ฐ ์์๋ค. ์ด์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์คํ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ํตํด ์ง์ ์๋ ๋๋์ ์ํฅ๋ ฅ์ด ์ค์ ๋ํ๋๋์ง๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ ์ ํ์๋ค. ๋์งธ, ๋๋ ๋ด ์ง์์ ๋ํ ์ต๊ทผ ์ฐ๊ตฌ๋ค์ ๋ฐ์ํ์ฌ ๋๋ ๋ด ์ง์์ ์ ํ์ ์ธ๊ธฐ ์๋ ๋๋์ ์ ํธํ๋ ๋๋๋ก ๊ตฌ๋ถํ๊ณ , ๋์กฐ์ ์์ด ๊ฐ ์ง์ ์ ํ์ ์ฐจ๋ณ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ ์ ํ์๋ค. ์
์งธ, ๋์กฐ์๋ ํ์ธ์ ํ๋์ ๋ฐ๋ผํ๋ ค๋ ์๋์ ์ธก๋ฉด ์ด์ธ์ ์์ ์ด ์ค์ํ๋ค๊ณ ์๊ฐํ๋ ๋ชฉํ๋๋ก ํ๋์ ์ ํํ๊ณ ์ ํ๋ ๋ฅ๋์ ์ธก๋ฉด ๋ํ ์กด์ฌํ๋ค๋ ์ ์ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ๋์กฐ์ ์์ด ๊ฐ์ธ์ฐจ๋ฅผ ํจ๊ป ์ดํด๋ณด๊ณ ์ ํ์๋ค. ํนํ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ฐ์ธ์ด ์ฌํ์ ์ํฉ์์ ์ถ๊ตฌํ๊ณ ์ ํ๋ ๋ชฉํ๊ฐ ์ฃผ๋์ ์ด๋, ๊ด๊ณ์ ์ด๋์ ๋ฐ๋ผ ๋์กฐ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ฌ๋ผ์ง ๊ฒ์ผ๋ก ์์ธกํ๊ณ , ์ฌํ์ ๋ชฉํ์ ์กฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํจ๊ป ํ์ธํ์๋ค. ๋์ผ๋ก, ๋์กฐ ์ํฉ์ ๋ณด๋ค ๋ค์ํํ๊ณ ์ ํ์๋ค. ์ ์ ๊ฐ์์ ๊ฐ์ด ๋น๊ต์ ๋ต์ด ๋ช
ํํ ๊ณผ์ ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ง์ ์๋ ๋๋์ ์ํฅ๋ ฅ์ ์ดํด๋ณธ ์ ํ ์ฐ๊ตฌ์ ๋ฌ๋ฆฌ, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋๋์ ์๊ฒฌ์ ํนํ ๋ฏผ๊ฐํ ์ ์๋ ์ฌํ์ ์ํฉ์ ์ค์ฌ์ผ๋ก ๋์กฐ ์ํฉ์ ๊ตฌ์ฑํ์๋ค.
์ด์ ์ด๋ฑํ๊ต 5,6ํ๋
290๋ช
์ ๋์์ผ๋ก, ์น์ฌํ์ ์ํฉ(์น๊ตฌ ๋๊ธฐ), ๋ฐ์ฌํ์ ์ํฉ(๋ฐ๋๋ฆผ), ๊ฐ์ธ ์ทจํฅ ์ํฉ์์ ๋๋ ๋์กฐ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ ์ ํ์๋ค. ์ฌ์ ์ ์ฌํ์ ๋ชฉํ๋ฅผ ์๊ธฐ๋ณด๊ณ ์์ผ๋ก ์ธก์ ํ ํ, ์ฐธ์ฌ์๋ค์ ๊ฐ๊ฐ 1) ์ด๋ฅธ์ ์๊ฒฌ์ ์ ์๋ฐ์ ์กฐ๊ฑด, 2) ์ผ๋ฐ ๋๋(๋ฐ ์์ด๋ค)์ ์๊ฒฌ์ ์ ์๋ฐ์ ์กฐ๊ฑด, 3) ์ธ๊ธฐ ์๋ ๋๋์ ์๊ฒฌ์ ์ ์๋ฐ์ ์กฐ๊ฑด, 4) ์ ํธํ๋ ๋๋์ ์๊ฒฌ์ ์ ์๋ฐ์ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ๋ฌด์ ํ ๋นํ์ฌ ๋์กฐ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค.
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ์ฃผ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์์ฌ์ ์ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ๋ค. ์ฒซ์งธ, ๋ฐ์ฌํ์ ์ํฉ, ์น์ฌํ์ ์ํฉ ๋ชจ๋ ์ผ๋ฐ ๋๋ ์ง๋จ์ ์ํฅ๋ ฅ์ด ์ด๋ฅธ ์ง๋จ๋ณด๋ค ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด๋ ์๋์ ์ฐ๋ น์ด ๋์์ง์ ๋ฐ๋ผ ์ ์ฐจ ๋ถ๋ชจ ๋ฑ ์ด๋ฅธ๋ณด๋ค๋ ๋๋์ ์ํฅ์ ๋ ๋ง์ด ๋ฐ๋๋ค๋ ์ ํ ์ฐ๊ตฌ์ ์ผ์นํ๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก, ์ด ์๊ธฐ ์๋ ๋ฐ ์ฒญ์๋
์ ํ๋ ๋ณํ๋ฅผ ์ดํดํ๊ธฐ ์ํด์๋ ๋๋์ ์ํฅ๋ ฅ์ ์ค์ํ๊ฒ ๊ณ ๋ คํ ํ์๊ฐ ์์์ ์์ฌํ๋ค. ๋์งธ, ์น์ฌํ์ ์ํฉ๊ณผ ๋ฐ์ฌํ์ ์ํฉ์์ ๊ด๊ณ์ ๋ชฉํ๊ฐ ๋์์ง์ ๋ฐ๋ผ ์ง์ ์๋ ๋๋์ ์ํฅ์ ๋ ๋ฐ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด๋ ๊ด๊ณ๋ฅผ ์ค์ํ๊ฒ ๊ณ ๋ คํ๋ ์๋์ผ์๋ก ๋๋ ๋ด์ ์ง์๊ฐ ๋์ ์๋์ ํ๋จ์ ๋์ฑ ๋ฏผ๊ฐํ๋ฉฐ, ๋๋ ๋์กฐ๊ฐ ๋ฌธ์ ์๋๋ ์ํฉ์ด ๋ํ๋ ๋ ๊ด๊ณ์ ๋ชฉํ๋ฅผ ๊ฐ์ง ์๋์ ๋ํ ๊ฐ์
์ด ํ์ํจ์ ์์ฌํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํด์ํ ์ ์๋ค.
์
์งธ, ์ธ๊ธฐ ์๋ ๋๋์ ๊ฒฝ์ฐ ๋ฐ์ฌํ์ ์ํฉ์์, ์ ํธํ๋ ๋๋์ ๊ฒฝ์ฐ ์น์ฌํ์ ์ํฉ์์ ๋์ ์ํฅ๋ ฅ์ ๋ณด์๋ค. ์ด๋ ์ฌํ์ ๋ฅ๋ ฅ ์ด์ค์์ ๋ชจํ์์ ์ ์ํ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ๋๋ ๋ด ์ง์๊ฐ ๋ ๊ฐ์ง ์ ํ์ผ๋ก ๋ถํ๋์ด ์๊ณ , ๊ฐ ์ ํ์ด ์๋ก ๋ค๋ฅธ ๋ฐฉ์์ผ๋ก ๋๋ ๋ด์ ์ํฅ์ ๋ผ์น๋ค๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ ๊ฒฐ๊ณผ์ด๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํด ๋ณผ ๋ ํ๊ตํญ๋ ฅ๊ณผ ๊ฐ์ ๋ฐ์ฌํ์ ํ๋์ ์ค์ด๊ธฐ ์ํด์๋ ์ธ๊ธฐ ์๋ ๋๋๋ค์ ํ์ฉํ๋ ๊ฒ์ด, ๋ฐ๋๋ก ์น์ฌํ์ ํ๋์ ์ฆ์ง์ํค๊ธฐ ์ํด์๋ ์ ํธํ๋ ๋๋๋ฅผ ํ์ฉํ๋ ๊ฒ์ด ํจ๊ณผ์ ์ผ ์ ์์ ๊ฒ์ด๋ค. ๋์ผ๋ก, ์น์ฌํ์ , ๋ฐ์ฌํ์ ์ํฉ๊ณผ ๋ฌ๋ฆฌ ๊ฐ์ธ ์ทจํฅ ์ํฉ์ ๊ฒฝ์ฐ ๋๋ ์ง์ ์ ํ๊ณผ ์ฌํ์ ๋ชฉํ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ฐจ๋ณ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ํ๋์ง ์์๋ค. ์ด๋ ๋๋ ๋ด ์ง์์ ์ํฅ๋ ฅ์ ํ์ธํ๋ ๋ฐ ์์ด ์ง์๊ฐ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฉ์ ํน์ฑ์ ๊ณ ๋ คํ๋ ๊ฒ์ด ์ค์ํจ์ ๋ณด์ฌ์ค๋ค.Peer conformity refers to changing one's opinions, judgments, and behaviors in accordance with peers' opinion, judgments, and behaviors. The importance of peer with increasing age, thus the tendency to peer conformity also intensifies. Not all peers, however, have the same influence. Like other social relationship, peer relationship also shows a status structure, and children who have high peer status are likely to exert greater influence in peer relationships. Although numerous studies have conducted to investigate the effects of peer status on peer conformity, the results of these studies are mixed.
Considering the following four points, this study tried to reveal the peer status effect more closely. First, there was a limitation that it was difficult to identify the causal relationship because the existing peer status studies mainly relied on qualitative research or correlation research. This study tried to find out whether the effects of peer status actually appears in an experimental research setting. Second, this study classified two subtypes of peer status, popularity and likability, in order to reflect the recent research on peer status, trying to identify the differential effects of each status type in the peer group. Third, considering that there is also an active aspect in conformity, this study predicted that the impact of peer status on peer conformity could vary depending on the individuals' social goal. Finally, in contrast to previous research, which examined the influence of peer status using task unrelated to the social situation, this study focused on social situations that are particularly sensitive to peer judgments.
Two-hundred ninety 5th and 6th-grade elementary school students participated in this study. In order to confirm their peer conformity effect, students were asked to make a judgment in three situations: (a) prosocial situation - helping a friend, (b) antisocial situation - relational bullying, and (c) personal taste situation. Participants were randomly assigned to four conditions: (a) receiving adults' judgment group, (b) receiving all classmates' judgment group, (c) receiving popularity peers' judgment group and (d) receiving likeability peers' judgment group.
The main results and implications of this study were as follows. First, consistent with the previous studies that children were more likely to be influenced by peers than adults, the conformity effects of peer group were higher than that of the adult group in both prosocial situation and antisocial situation. These results reassure that peer is vital to understand the behavior changes in childhood. Second, the effects of peer status were more intense for children who had a high communal goal. This result suggests that children who care about the relationship are more susceptible to high-status peers' judgments. It also suggests that intervention for children with high communal goal is needed when the problem of peer conformity becomes serious.
Third, in the case of the popular peer, the conformity effects were significant in the antisocial situation, while the preferred peer showed a high influence in the prosocial situation. This is supported by the fact that the peer status is differentiated into two types as suggested in the social competence dual factor model, and that each type influences peers in different ways. These results indicate that it may be useful to use popular peers to reduce antisocial behavior, such as school violence, and to use preferred peers to promote prosocial behavior on the contrary. Finally, in contrast to prosocial and antisocial situations, there was no discriminative effect of peer status and social goals in personal taste situations. These results showed that it is necessary to consider the situation specificity in identifying peer conformity effects.โ
. ์๋ก 1
1. ์ฐ๊ตฌ์ ํ์์ฑ ๋ฐ ๋ชฉ์ 1
2. ์ฐ๊ตฌ ๋ฌธ์ 11
3. ์ฃผ์ ์ฉ์ด ์ ๋ฆฌ 11
๊ฐ. ๋๋ 11
๋. ๋์กฐ 12
๋ค. ๋์กฐ ์ํฉ 12
๋ผ. ๋๋ ์ง์ ์ ํ 13
๋ง. ์ฌํ์ ๋ชฉํ 13
โ
ก. ์ด๋ก ์ ๋ฐฐ๊ฒฝ 15
1. ๋์กฐ 16
๊ฐ. ๋์กฐ์ ์ ์ ๋ฐ ์ ํ 16
๋. ๋์กฐ์ ์ด์ 19
๋ค. ๋์กฐ์ ์์ด ๊ฐ์ธ์ฐจ 22
2. ์๋ ๋ฐ ์ฒญ์๋
๊ธฐ ๋๋ ๋์กฐ 23
๊ฐ. ๋์กฐ์ ๋ฐ๋ฌ์ ๊ฒฝํฅ 23
๋. ๋๋ ๋์กฐ 26
๋ค. ๋๋ ๋์กฐ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ์์ธ 31
3. ๋๋ ๋ด ์ง์ 33
๊ฐ. ์ํฅ๋ ฅ ์ถ์ฒ์ ์ง์ 33
๋. ์๋ ๋ฐ ์ฒญ์๋
๊ธฐ ๋๋ ๋ด ์ง์ ๊ตฌ๋ถ 34
๋ค. ์๋ ๋ฐ ์ฒญ์๋
๊ธฐ ๋๋ ๋ด ์ง์์ ์ํฅ๋ ฅ 43
4. ์ฌํ์ ๋ชฉํ 47
๊ฐ. ๋ชฉํ์ ๋๋ ๊ด๊ณ 47
๋. ์ฃผ๋์ ๋ชฉํ์ ๊ด๊ณ์ ๋ชฉํ 51
5. ๋์กฐ ์ํฉ๊ณผ ๋๋ ๋ด ์ง์, ์ฌํ์ ๋ชฉํ 55
๊ฐ. ๋์กฐ ์ํฉ 55
๋. ๋์กฐ ์ํฉ๊ณผ ์ฌํ์ ๋ชฉํ์ ๋ฐ๋ฅธ ๋๋ ๋ด ์ง์์ ์ฐจ๋ณ์ ํจ๊ณผ 58
โ
ข. ์ฐ๊ตฌ๋ฐฉ๋ฒ 61
1. ์ฐ๊ตฌ ์ฐธ์ฌ์ 61
2. ์ฐ๊ตฌ ์ ์ฐจ 62
3. ์คํ ์ฒ์น 67
3. ์คํ ํ๊ฒฝ 69
5. ์ฐ๊ตฌ๋๊ตฌ 69
๊ฐ. ๋์กฐ ์ํฉ 69
๋. ๋์กฐ ์ ๋ 70
๋ค. ์ฌํ์ ๋ชฉํ 71
๋ผ. ์ฌํ์ ๋ฐ๋์ง์ฑ 73
6. ์๋ฃ ๋ถ์ ๋ฐฉ๋ฒ 74
โ
ฃ. ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ 77
1. ๊ธฐ์ ํต๊ณ ๋ฐ ์๊ด 77
2. ์คํ ์กฐ๊ฑด ๊ฐ ๋์ง์ฑ ๊ฒ์ 79
๊ฐ. 1์ฐจ ํ๋จ์ ์์ด ์คํ ์กฐ๊ฑด ๊ฐ ๋์ง์ฑ ๊ฒ์ 79
๋. ์ ์๋ ํ์ธ์ ์๊ฒฌ์ ์์ด ์คํ ์กฐ๊ฑด ๊ฐ ๋์ง์ฑ ๊ฒ์ 80
๋ค. ์ ์๋ ํ์ธ์ ์๊ฒฌ๊ณผ 1์ฐจ ํ๋จ์ ์ฐจ์ด์ ์์ด ์คํ ์กฐ๊ฑด ๊ฐ ๋์ง์ฑ ๊ฒ์ 80
3. ๋๋ ์ง์ ์ ํ๊ณผ ์ฌํ์ ๋ชฉํ๊ฐ ๋๋ ๋์กฐ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ ๋ถ์ 81
๊ฐ. ์น์ฌํ์ ์ํฉ์์ ๋๋ ์ง์ ์ ํ๊ณผ ์ฌํ์ ๋ชฉํ๊ฐ ๋๋ ๋์กฐ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ ๋ถ์ 82
๋. ๋ฐ์ฌํ์ ์ํฉ์์ ๋๋ ์ง์ ์ ํ๊ณผ ์ฌํ์ ๋ชฉํ๊ฐ ๋๋ ๋์กฐ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ ๋ถ์ 87
๋ค. ์ทจํฅ ๊ด๋ จ ์ํฉ์์ ๋๋ ์ง์ ์ ํ๊ณผ ์ฌํ์ ๋ชฉํ๊ฐ ๋๋ ๋์กฐ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ ๋ถ์ 92
โ
ค. ๊ฒฐ๋ก ๋ฐ ๋
ผ์ 94
1. ์ฃผ์ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ ์์ฝ ๋ฐ ๋
ผ์ 94
2. ์ฐ๊ตฌ์ ํ๊ณ ๋ฐ ํ์ ์ฐ๊ตฌ ์ ์ธ 99
์ฐธ๊ณ ๋ฌธํ 102
๋ถ๋ก 120
A. ์ธก์ ๋๊ตฌ 121
B. ์คํ ํ๋ฉด 124
C. ์ง๋จ ๋ณ ์๊ด๊ณ์ 133
D. ์ ์ฒด ํ๊ท๋ถ์ ๊ฒฐ๊ณผ 137
E. ์ฃผ์ ๊ฒฐ๊ณผ ์์ฝ 140
Abstract 141Docto
Determination of the optimum experimental condition for enhancing the resolution in RBS using He ions
ํ์๋
ผ๋ฌธ(๋ฐ์ฌ)--์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ :์์ํต๊ณตํ๊ณผ,1996.Docto
Saccharomyces cerevisiae์์ ์ฝ์ฐ ์คํธ๋ ์ค ๋ฐ์๊ณผ ๋ฆฌ๋ณด์ข ๋จ๋ฐฑ์ง ์ ์ ์์ ๋ฐํ ์กฐ์
ํ์๋
ผ๋ฌธ (๋ฐ์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ๊ณต๊ณผ๋ํ ํํ์๋ฌผ๊ณตํ๋ถ, 2018. 8. ํ์ง์.Saccharomyces cerevisiae is widely used in molecular and cell biology since it is one of the simplest eukaryotic single cell. Due to its easiness in manipulation and fast growth, S. cerevisiae has served as a model system for fundamental cellular processes for all eukaryotes. In nutrient rich conditions, yeast cells rapidly grow and proliferate. To maintain robust growth, yeast cells generate numerous ribosomes to synthesize proteins in need. In response to stresses, cells rapidly adjust global gene expressions to adapt to stresses. For rapid growth and stress responses, cells activate transcription factors to regulate gene expressions. In this dissertation, regulatory mechanisms of transcription factors Haa1/War1 for weak organic acid stresses and Ifh1/Crf1 for the expression of ribosomal protein genes were studied.
Firstly, S. cerevisiae is known to activate transcription factors such as Haa1 and War1 for cellular adaption against weak acids. Haa1 plays important roles against less lipophilic acids such as acetic acid and lactic acid, whereas War1 exert protection against more lipophilic acids such as propionic acid, sorbic acid, and benzoic acid. However, it has been unknown how these transcription factor are activated in response to weak acid stresses. Using field-effect transistor (FET) type biosensor based on carbon nanofibers, it has been revealed that Haa1 and War1 directly bind to weak acid anions with varying affinities. In agreement with previous studies, Haa1 binds acetate most strongly followed by lactate, whereas War1 binds benzoate most strongly followed by sorbate. Upon activation of Haa1 by direct binding with acetate, Haa1 binds to DNA of target gene promoters through the N-terminal Zn-binding domain of Haa1. Acetate is shown to bind N-terminal 150 amino acid region of Haa1, however, further C-terminal region of Haa1 is required for acetic acid induced transcriptional activation of its target genes. Therefore, it is proposed that conformation changes caused by direct binding of acetate may activate Haa1, being capable of DNA binding and transcriptional activation.
Secondly, transcription factors Ifh1 and Crf1 are involved in the regulation of ribosomal protein (RP) genes through interaction with a forkhead-associated (FHA) domain containing transcription regulator Fhl1. The FHA domain of Fhl1 interacts with FHB domains of RP gene co-activator Ifh1 or co-repressor Crf1. Ifh1T681 and Crf1T348, which are resides in the FHB domain, is phosphorylated by CK2 kinase. These phosphorylations play very critical roles for interaction with Fhl1. Cells expressing Ifh1T681A mutant showed reduced phosphorylation by CK2 followed by substantially decreased interaction with Fhl1. Decreased interaction resulted in defects in association of Ifh1 at the RP gene promoters and finally reduced RP gene transcriptional activation, thereby resulting in slow growth rates. On the contrary, cells expressing Crf1T348A failed to repress RP gene transcription upon inhibition of target of rapamycin complex 1 (TORC1) by rapamycin treatment. Taken together, these results propose that CK2-dependent phosphorylation of transcription factors, Ifh1 and Crf1, regulates recruitment transcription factors at the RP gene promoters, which leads to transcription of RP genes. Abstractโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.1
Contentsโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ......................................โฆโฆโฆโฆโฆ5
List of Figuresโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ...โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..8
List of Tableโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..10
List of Abbreviationsโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..11
Chapter 1. Research background and objectivesโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ14
Chapter 1. Literature reviewโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..โฆโฆโฆโฆโฆโฆ17
2.1. Stress responses in S. cerevisiaeโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.โฆโฆ.18
2.1.1. An overview of adaptive response to weak acidsโฆโฆโฆ19
2.1.2. Transcription factors involved in resistance to weak
acidsโฆ..โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ22
2.2. The expression of ribosomal protein genes in S. cerevisiaeโฆโฆโฆ.โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.โฆ27
2.2.1. An overview of ribosomal protein gene expression.......28
2.2.2. Transcription factors involved in ribosomal protein gene
expressionโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.โฆ.โฆ31
Chapter 3. Materials and methodsโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ...34
3.1. Strains and mediaโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.35
3.2. Plasmidsโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.......37
3.3. Quantitative reverse transcription PCR (qRT-PCR)โฆโฆ..โฆ..42
3.4. Fluorescence microscopy analysisโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ....42
3.5. Chromatin immunoprecipitation (ChIP)โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.42
3.6. Weak acid tolerance testโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.44
3.7. Fabrication of carboxyl-functionalized carbon nanofibers
(CNFs) and CNF-FET biosensor electrodeโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..44
3.8. Measurement of real-time responses using CNF-FET
electrodes.......โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.46
3.9. Yeast two-hybrid assayโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ...โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.47
3.10. in vitro phosphorylation assayโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.โฆโฆโฆโฆโฆโฆ.48
3.11. Western blottingโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..48
3.12. GST pull-down assayโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.โฆโฆโฆโฆโฆโฆ49
Chapter 4. Activation of Haa1 and War1 transcription factors by
differential binding of weak acid anions in
S. cerevisiaeโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ...51
4.1. Introductionโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ...52
4.2. Haa1 requires zinc ions for its proper functionsโฆโฆ..โฆโฆโฆ.55
4.3. N-terminal Zn-binding domain is required for DNA binding of
Haa1โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..โฆ65
4.4. Nuclear localization of Haa1 is not sufficient for Haa1 target
gene transcriptionโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ67
4.5. Mapping the activation domain of Haa1โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ73
4.6. Mapping the acid responsible region of Haa1โฆโฆ.โฆโฆโฆโฆ.75
4.7. Activation of Haa1 and War1 by different weak acidsโฆโฆโฆ..77
4.8. Direct binding of acetate to Haa1 detected by CNF-FET sensor
Electrodeโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ...83
4.9. Differential binding of weak acid anions to Haa1 and War1....91
4.10. Conclusionsโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ95
Chapter 5. Role of CK2dependent phosphorylation of Ifh1 and
Crf1 in transcriptional regulation of ribosomal protein
genes in S. cerevisiaeโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ....โฆโฆโฆโฆโฆ.98
5.1. Introductionโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ99
5.2. CK2 phosphorylates Ifh1 and Crf1โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ101
5.3. Phosphorylation of Ifh1 T681 and Crf1 T348 is required for
interaction with Fhl1โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..108
5.4. Regulatory subunits of CK2 regulate the interaction between
Fhl1 and Ifh1โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ...โฆ112.
5.5. Impaired activation of RP gene transcription by Ifh1T681Aโฆ.121
5.6. Impaired repression of RP gene transcription by Crf1T348โฆ.128
5.7. Conclusionsโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ130
Chapter 6. Overall discussion and recommendationsโฆโฆโฆโฆ.133
Bibliographyโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ.โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..142
Abstract in Koreanโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..โฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆโฆ..158Docto
ํ๋ํ์ต ์ํฉ์์ ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด ๋ฐ ์์ธ์ด ์ ์, ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ, ์ฑ์ทจ ๊ธฐ๋์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ
ํ์๋
ผ๋ฌธ (์์ฌ)-- ์์ธ๋ํ๊ต ๋ํ์ : ๊ต์กํ๊ณผ(๊ต์กํ์ ๊ณต), 2014. 2. ์ ์ข
ํธ.๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ํ๋ํ์ต ์ํฉ์์ ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด์ ์์ธ์ ๋ฐ๋ผ ์คํจ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ ์, ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋๊ฐ ์ด๋ป๊ฒ ๋ฌ๋ผ์ง๋์ง๋ฅผ ์์๋ณด๊ณ ์ ํ์๋ค. ์ฐ๊ตฌ 1์์๋ ํ์ธ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ์ํฉ์์ ์คํจ์ ์์ธ(์๋์ ๋ฅ๋ ฅ๋ถ์กฑ, ์๋์ ๋
ธ๋ ฅ๋ถ์กฑ)์ด ๋ฌ๋ผ์ง์ ๋ฐ๋ผ ์ ์(ํ, ์ฐ๋ฏผ), ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ(๋ฌธ์ ํด๊ฒฐ ์ ๊ทผ, ๋น๋ ์ ๊ทผ), ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋๊ฐ ์ด๋ป๊ฒ ๋ค๋ฅด๊ฒ ๋ํ๋๋์ง๋ฅผ ์ดํด๋ณด์๋ค. ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ ์ฐ๊ตฌ ์ฐธ์ฌ์๋ค์ ์๋์ ๋ฅ๋ ฅ ๋ถ์กฑ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ์ํฉ์ ๋นํด ์๋์ ๋
ธ๋ ฅ ๋ถ์กฑ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ์ํฉ์์ ๋ ๋ง์ ํ๋ฅผ ๋๊ผ๊ณ , ๋ ์ ์ ์ฐ๋ฏผ์ ๋ณด์๋ค. ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ์ ๊ฒฝ์ฐ ์๋์ ๋
ธ๋ ฅ ๋ถ์กฑ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ์ํฉ์์ ๋ ๋ง์ ๋น๋ ์ ๊ทผ์ ๋ณด์๊ณ , ๋ ์ ์ ๋ฌธ์ ํด๊ฒฐ ์ ๊ทผ์ ๋ณด์๋ค. ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋์ ์์ด์๋ ์๋์ ๋
ธ๋ ฅ ๋ถ์กฑ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ์ํฉ๊ณผ ๋ฅ๋ ฅ ๋ถ์กฑ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ์ํฉ์ ์์ด ์ฐจ์ด๊ฐ ์์๋ค.
์ฐ๊ตฌ 2์์๋ ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด(์์ , ์๋)๋ฅผ ๋ฌ๋ฆฌํ์ฌ ๋์ผํ ์คํ์ ์งํํ๋, ๊ฐ ์ํฉ์์ ๋
ธ๋ ฅ, ๋ฅ๋ ฅ๊ณผ ๊ฐ์ ๊ท์ธ ์์๋ฅผ ํต์ ์์ฌ, ์์ ์ฑ, ํต์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ ์ธก๋ฉด์์ ํ์ ํ๋๋ก ํ์๋ค. ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ ์ฐ๊ตฌ1๊ณผ ๋์ผํ๊ฒ ์คํจ ์์ธ์ ๋ฐ๋ผ ์คํจ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ ์, ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋๊ฐ ๋ค๋ฅด๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ํฅ๋ฏธ๋ก์ด ๊ฒ์ ๋จ์ํจ๊ณผ๋ถ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก, ์ฐ๊ตฌ ์ฐธ์ฌ์๋ค์ ๋ฅ๋ ฅ ๋ถ์กฑ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ์ํฉ์์๋ ์์ ์ด๋, ์๋๋์ ๋ฐ๋ผ ํ, ๋ฌธ์ ํด๊ฒฐ ์ ๊ทผ, ๋น๋ ์ ๊ทผ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋์ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์์ง๋ง ๋
ธ๋ ฅ ๋ถ์กฑ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ์ํฉ์์๋ ์๋๋ก ์ธํด ์คํจํ ๊ฒฝ์ฐ์ ๋นํด ์์ ์ผ๋ก ์ธํด ์คํจํ ๊ฒฝ์ฐ์ ๋ ๋ง์ ํ, ๋ฌธ์ ํด๊ฒฐ ์ ๊ทผ๊ณผ ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋๋ฅผ ๋ณด์๊ณ , ๋ ์ ์ ๋น๋ ์ ๊ทผ์ ๋ณด์๋ค.
์ด๋ ๋์ผํ ๋
ธ๋ ฅ, ๋ฅ๋ ฅ์ด๋ผ๋ ์์ ์ด๋, ์๋๋์ ๋ฐ๋ผ ๊ทธ ์ธ๊ณผ์ ์ฐจ์์ ๋ค๋ฅด๊ฒ ์ธ์ํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ผ ์ ์๋ค. ์ ์๋ฅผ ํต์ ํ ์ํ์์ ์ธ๊ณผ์ ์ฐจ์์ด ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋์ ๋ผ์น๋ ์ํฅ์ ์ดํด๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ ๋
ธ๋ ฅ์ ์์ ์ ์ด๋ผ ์๊ฐํ ์๋ก ๋ฌธ์ ํด๊ฒฐ์ ๊ทผ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋๊ฐ ๋ฎ์์ง๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋น๋์ ๊ทผ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ ์ ๋ฐ์์ธ ํ๊ฐ ์ ์๋ฏธํ๊ฒ ์ค๋ช
ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด, ์์ธ์ ๋ฐ๋ผ ์ธ๊ณผ ์ฐจ์์ ์ด๋ป๊ฒ ๋ค๋ฅด๊ฒ ์ธ์งํ๋์ง๋ฅผ ์ดํด๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ ๊ฐ์ ๋
ธ๋ ฅ์ด๋๋ผ๋ ์์ ์ด๋, ์๋๋์ ๋ฐ๋ผ ์ธ๊ณผ ์ฐจ์์ ๋ค๋ฅด๊ฒ ์ธ์งํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ฌ๋๋ค์ ์๋์ ๋
ธ๋ ฅ์ ์์ ์ ๋
ธ๋ ฅ๋ณด๋ค ๋ ์์ ์ ์ธ ๊ฒ์ด๋ผ ์ธ์งํ๊ณ ์์๋ค. ์ฆ ์ฌ๋๋ค์ ์๋์ ๋
ธ๋ ฅ์ ์์ ์ ๋
ธ๋ ฅ๋ณด๋ค ๋ถ๋ณํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐํ๊ณ ์์์ผ๋ฉฐ, ์ด ์ฐจ์ด๊ฐ ์์ ์ฑ ์ฐจ์์ ์ํฅ์ ๋ฐ๋ ๋ฌธ์ ํด๊ฒฐ์ ๊ทผ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋ ์์ ์ฐจ์ด์ ์ํฅ์ ๋ผ์น๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํด์ํ ์ ์๋ค.
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ ํ๋ํ์ต ์ํฉ์์ ๋์ผํ ์คํจ๋ผ ํ ์ง๋ผ๋ ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด ๋ฐ ์์ธ์ ๋ฐ๋ผ ์ ์, ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋๊ฐ ๋ค๋ฅด๊ฒ ๋ํ๋๋ฉฐ, ๊ฐ ์ํฉ์ ๋ฐ๋ผ ๊ฐ๊ธฐ ๋ค๋ฅธ ๊ต์์ ๋ต์ด ํ์ํ๋ค๋ ์ฌ์ค์ ๋ณด์ฌ์ค๋ค. ๊ฒฐ๋ก ๋ถ๋ถ์์ ์ฐ๊ตฌ์ ์์์ ๊ฐ ์ํฉ์์ ์์ฒญ๋๋ ๊ต์์ ๋ต์ ๊ฐ์ค์ ์ธ ์ฐจ์์์ ๋
ผ์ํ์๋ค.โ
. ์๋ก
1. ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชฉ์ ๋ฐ ํ์์ฑ
2. ์ฐ๊ตฌ๋ฌธ์
3. ์ฉ์ด์ ์ ์
๊ฐ. ์คํจ, ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด ๋ฐ ์์ธ
๋. ์คํจ์ ๋ํ ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ
๋ค. ์ ์
๋ผ. ์ฑ์ทจ ๊ธฐ๋
๋ง. ์ธ๊ณผ ์ฐจ์
โ
ก. ์ด๋ก ์ ๋ฐฐ๊ฒฝ
1. ํ๋ํ์ต
๊ฐ. ํ๋ํ์ต
๋. ํ๋ํ์ต์ ๋ํ ๊ณผ์ ์ค์ฌ์ ์ ๊ทผ
2. ํ๋ํ์ต๊ณผ ์คํจ์ ๋ํ ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ
๊ฐ. ์คํจ์ ํ์ต, ํ๋ํ์ต
๋. ์คํจ์ ๋ํ ๋ ๊ฐ์ง ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ
3. ๊ท์ธ์ด๋ก ๊ณผ ํ๋ํ์ต
๊ฐ. ๊ท์ธ์ด๋ก
๋. ๊ท์ธ์ด๋ก ๊ณผ ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋, ์ ์
๋ค. ํ์ธ ์ํ์ ๋ํ ๊ท์ธ์ด๋ก ๊ณผ ํ๋ํ์ต
โ
ข. ์ฐ๊ตฌ1: ํ๋ํ์ต ์ํฉ์์ ์คํจ์ ์์ธ์ด ์ ์, ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ ๋ฐ ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ
1. ์ฐ๊ตฌ์ฃผ์
2. ์ฐ๊ตฌ๋ด์ฉ ๋ฐ ๊ฐ์ค
3. ์ฐ๊ตฌ๋ฐฉ๋ฒ
๊ฐ. ์ฐ๊ตฌ ์ฐธ์ฌ์
๋. ์คํ ์ ์ฐจ
๋ค. ์ธก์ ๋๊ตฌ
๋ผ. ๋ถ์๋ฐฉ๋ฒ
4. ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ
๊ฐ. ๊ธฐ์ ํต๊ณ
๋. ์คํจ์ ์์ธ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ ์ ๋ฐ์์ ์ฐจ์ด
๋ค. ์คํจ์ ์์ธ์ ๋ฐ๋ฅธ ์คํจ์ ๋ํ ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ์ ์ฐจ์ด
๋ผ. ์คํจ์ ์์ธ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋์ ์ฐจ์ด
5. ์๋
ผ์
โ
ฃ. ์ฐ๊ตฌ2: ํ๋ํ์ต ์ํฉ์์ ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด์ ์์ธ, ์ธ๊ณผ ์ฐจ์, ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ ๋ฐ ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋ ๊ฐ์ ๊ด๊ณ ํ์
1. ์ฐ๊ตฌ์ฃผ์
2. ์ฐ๊ตฌ๋ด์ฉ ๋ฐ ๊ฐ์ค
3. ์ฐ๊ตฌ๋ฐฉ๋ฒ
๊ฐ. ์ฐ๊ตฌ ์ฐธ์ฌ์
๋. ์คํ ์ ์ฐจ
๋ค. ์ธก์ ๋๊ตฌ
๋ผ. ๋ถ์๋ฐฉ๋ฒ
4. ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ
๊ฐ. ์ฌ์ ์ง๋จ ๋์ง์ฑ ๊ฒ์ฆ
๋. ์ฃผ์ ๋ณ์์ ๊ธฐ์ ํต๊ณ
๋ค. ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด, ์์ธ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ ์, ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋์ ์ฐจ์ด
๋ผ. ์ธ๊ณผ ์ฐจ์์ด ๋ฐ์ํ๋ ์ ํ, ์ฑ์ทจ๊ธฐ๋์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ
๋ง. ์คํจ์ ์ฃผ์ฒด, ์์ธ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ธ๊ณผ ์ฐจ์์ ์ฐจ์ด
5. ์๋
ผ์
โ
ค. ๋
ผ์ ๋ฐ ๊ฒฐ๋ก
1. ์ฃผ์ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ ์์ฝ
2. ๋
ผ์ ๋ฐ ์์ฌ์
3. ์ถํ ์ฐ๊ตฌ์ ๋ํ ์ ์ธ
์ฐธ๊ณ ๋ฌธํ
๋ถ๋ก
AbstractMaste
- โฆ