Characterization of single chain antibody against DR5

目的探究抗人死亡受体5(dr5)单链抗体(Adr5SCfV)的特异性。方法 ElISA检测Adr5SCfV的效价、亲和力和表位分析。WESTErn blOTTIng检测单链抗体的特异性。MTT检测Adr5SCfV对结肠癌细胞SW480的生长抑制。结果 ElISA显示抗人死亡受体5单链抗体抗体效价为1.2x104。通过间接ElISA证实Adr5SCfV与Adr5MAb识别dr5胞外段(Edr5,系本实验室自己构建)的同一个位点。Adr5SCfV的亲和力常数为2.12x10-2。Edr5与Adr5SCfV能够特异结合。MTT检测结果显示,Adr5SCfV抑制SW480细胞生长呈剂量依赖性,Adr5SCfV终质量浓度分别为0.225 Mg/Ml、0.45 Mg/Ml、0.9 Mg/Ml、1.2 Mg/Ml。200μl时,SW480细胞的存活率分别为97.7%,70.9%、70.1%、23.6%。结论 Adr5SCfV能与Edr5特异性结合,并有较强的活性。The aim of our study is to characterize the property of aDR5ScFv.We employed ELISA to determine the titer,relative affinity and epitope recognition of aDR5ScFv,while Western blotting to analyze the specificity of aDR5ScFv.We also measured the inhibitory effects of aDR5ScFv on colon cancer cell SW480 growth by MTT.We found that the titer of aDR5ScFv was 1.2×104;aDR5ScFv and aDR5mAb recognized the same epitope on DR5 molecule;and the affinity constant of aDR5ScFv was 2.12×10-2.Furthermore,aDR5ScFv could recognize eDR5 specifically and inhibit the growth of SW480 cells in a dose-dependent manner(aDR5ScFv final concentrations of 0.225,0.45,0.9,1.2 mg/ml correspond to SW480 viabilities of 97.7%,70.9%,70.1%,23.6%).Western blotting showed the binding of aDR5ScFv to DR5 was specific.Thus,we concluded that binding of aDR5ScFv to DR5 is specific and aDR5ScFv had strong activity.福建省自然科学基金(C0710046

ERK干扰质粒的构建及对胃癌细胞株BGC823 DcR3表达的影响

目的探讨胃癌发展的分子机制,通过构建ERK1/2shRNA真核表达载体,体外研究其对人胃癌细胞株BGC823ERK1/2蛋白及DcR3表达水平的影响。方法应用PRNAT-U6.1/Neo载体构建ERK1/2基因shRNA重组质粒,经脂质体法导入BGC823细胞中,分别设置对照组、干扰组和U0126抑制剂组。Westernblot法检测转染后BGC823细胞及抑制剂使用后ERK1/2蛋白的表达变化,荧光显微镜检测质粒自带GFP基因的表达情况确认转染效率,ELISA法检测各组细胞上清中DcR3分泌蛋白的表达特点。结果成功构建ERK1/2基因shRNA重组质粒。证明了ERK1/2蛋白的表达与DcR3的分泌水平在BGC823细胞株中呈正相关。结论 ERK1/2干扰质粒明显降低BGC823细胞的ERK1/2蛋白表达水平,ERK信号通路对DcR3的分泌具有重要调控作用,为其下游调控机制的研究奠定了基础

The influence of self-control on deception

自我控制是欺骗识别中一种重要的动机线索。但无论是在识别欺骗中,自我控制扮演的动机线索角色,还是在欺骗行为中,自我控制扮演的监管机制的角色,其认知机制和神经基础还不完全清楚。自我控制能力与自我控制资源对欺骗的影响也是不一样的,而这些影响的神经基础也还没有完全破解。因此,有必要结合行为、事件相关电位（ERP）及功能性磁共振（f MRI）等多种技术手段来考察识别欺骗和欺骗行为中自我控制能力和自我控制资源在欺骗中的作用及其心理机制。旨在探求在识别欺骗中是识别他人自我控制能力,还是识别他人自我控制资源在起主要作用;欺骗行为中是自我控制能力,还是自我控制资源在起主要作用;自我控制资源对欺骗行为的影响是符合能量耗竭观,还是符合能量保存观。</p

The influence of self-control in the perceived of deception and deception

欺骗判断与欺骗行为有着不同的心理机制,正确认识二者之间的关系有助于增强人际间的信任和团队的长远利益。采用行为学实验从两种视角下考察自我控制对欺骗的影响。实验1采用材料评定的方法考察了识别他人自我控制能力状况对欺骗判断的影响,结果发现对比高自我控制能力的人,被试更倾向于认为低自我控制能力的人更有可能为了自己的利益产生欺骗行为和欺骗倾向。实验2采用颜色Stroop任务考察了识别他人自我控制资源衰竭状况对欺骗判断的影响,结果发现当识别他人自我控制资源衰竭时,在评价他人为自己利益去欺骗、为他人利益去欺骗以及在特定情境中欺骗倾向上,没有发现任何显著的主效应或交互作用。实验3采用视觉-感知任务来考察不同水平的自我控制能力对欺骗行为的影响,结果发现,对比高自我控制组,低自我控制组有更多的欺骗行为和欺骗倾向。实验4采用颜色Stroop任务和视觉-感知任务来考察自我控制资源对欺骗行为的影响,结果发现,对比控制组,自我控制资源衰竭组有更多的欺骗行为和欺骗倾向。这些研究结果表明,在进行欺骗判断时,相比自我控制资源状况,个体会优先识别他人的自我控制能力水平来判断其是否具有欺骗动机或欺骗倾向。在欺骗行为中,高自我控制能力的个体,能够更好地抑制自私动机,更多的考虑长远利益,出于自身利益去欺骗的可能性会更小;自我控制资源充足的个体,更有可能会经得住诱惑,自私自利的欺骗行为发生的可能性也会更小