适于HIV-1 p24抗原检测试剂的单抗制备与筛选

目的制备抗HIV-1p24单克隆抗体(单抗,McAb),并利用双抗体夹心ELISA法建立HIV-1p24抗原检测试剂。方法以基因工程原核重组抗原HIV-1p24蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规杂交瘤技术和间接ELISA法制备单克隆抗体,单抗经纯化和HRP标记后,利用双抗体夹心ELISA筛选检测p24蛋白的最佳配伍单抗以期建立HIV-1p24抗原检测试剂。结果成功筛选到16株稳定分泌抗HIV-1p24单抗的杂交瘤细胞株,并从中筛选出最佳单抗配伍组合“16G12+2F2b-HRP”,该组合对p24蛋白的检测灵敏度为20pg/mL,对感染性克隆pNL4-3表达的HIV病毒培养上清检测呈阳性,对100份HIV阴性人血清无非特异性反应,显示出良好的检测灵敏度和特异性。结论本研究初步成功地建立了HIV-1p24抗原的检测试剂,并为最终建立HIV第四代诊断试剂(HIV Ag/Ab Assay)奠定了坚实的基础

一种定量检测人血清高敏C反应蛋白的化学发光免疫方法

旨在建立一种可定量检测人血清高敏CRP的化学发光检测方法(High-sensitivity C-reactive protein quantifiable chemiluminescent immunoassay,hs-CRP CLIA)。首先利用亲和层析和离子交换层析技术从肝硬化病人腹水中纯化出高纯度的天然CRP作为免疫原制备了22株CRP单克隆抗体(单抗),其中13株单抗在磷酸胆碱配体捕获ELISA中呈阳性,然后利用方正滴定法筛选出单抗10C5和10C11建立了hs-CRP CLIA。试剂盒评估结果显示:该方法对血清中干扰物质IgG、血红蛋白、甘油三酯等无非特异性反应;该方法检测灵敏度高,在0.04~20.38mg/L范围内定量检测人血清CRP标准品呈良好线性关系(R2>0.993);该方法准确性高、可重复性好,平均回收率为99%,批内差为4.2%~5.8%,批间差为9.0%~11.5%;该方法与进口商品化高敏CRP ELISA试剂盒平行比较检测90份血清标本,结果显示两者有良好的可比性(r=0.968)。综上,建立的hs-CRP CLIA是一种准确、可靠、可定量的高灵敏C反应蛋白检测方法,该方法的临床应用,有利于改善我国心脏病风险评估及肠炎性疾病预后判断

简评记忆脑机制研究中的两场辩论及代表假说

(艾宾浩斯)记忆实验心理学研究整整一个世纪了。本文简溯并试评记忆脑机制研究的简史,特别是本世纪内的两场学术辩论及代表假说。</p

记忆与学习的脑化学研究 Ⅱ.海马内注射胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶对大白鼠暗箱迴避模式记忆的影响

本实验选择了胰凝乳蛋白酶与胰蛋白酶,它们同属水解酶,能够内切蛋白质与肽类底物的某些键位。26只刚成年的雄性大鼠分作三组:生理盐水/不巩固组(NS/NC)、胰蛋白酶/不巩固组(T/NC)与胰凝乳蛋白酶/不巩固组(CT/NC)。 实验结果表明,双侧海马内注射(AP_2L_2H_4与AP_4L_3H_5)胰凝乳蛋白酶与胰蛋白酶后,对暗箱廻避(DBA)模式记忆有不同的影响。胰蛋白酶注射后,该记忆保持明显降低,而胰凝乳蛋白酶注射后仍可巩固。所用的实验剂量大致为半致死剂量的三分之一。</p

记忆与学习的脑化学研究——海马内注射胰蛋白酶与核糖核酸酶对大白鼠暗箱回避模式记忆的影响

问题的提出 记忆与学习的规律及其脑机制的研究,历来是生理心理学中最为活跃而富有成效的研究领域之一。随着分子生物学、神经化学与脑科学研究的近代进展,“记忆之谜”——特别是记忆与学习的脑化学基础(分子基础),正越来越引起心理学、生物学、医药学及有关研究者们的广泛重视与热烈讨论。本世纪三十年代,以美国著名心理学

生理心理学三十年

本文对我国生理心理学研究的三十年作了阶段性的历史回顾。并讨论了若干主要收获、经验教训及一点展望。</p