氯化血红素的催化荧光测定

在碱性溶液中氯化血红素转化为高铁血红素，后者可催化过氧化氢氧化荧光供氢体反应，据此建立了氯化血红素的荧光测定方法。对测定条件包括缓冲溶液类型、酸度、荧光供氢体类型及过氧化氢和荧光供氧体的加入量等进行了考察，在0～3．52μg／L范围内，测定氯化血红素的工作曲线为y＝9．62＋94．36x，线性相关系数为0.9992，相对标准偏差为5.8％，检测限为0.01μg／L。另外，通过考察十六烷基三甲基溴化铵的影响，证明该试剂可作为荧光反应的有效终止剂。本文结果为将氯化血红素发展为免疫分析的标记物提供了直接根据

介质环境对辣根过氧化物酶催化荧光反应体系的影响

探讨了缓冲溶液、溶剂和表面活性剂对对羟基苯丙酸-过氧化氢-辣根过氧化物酶反应体系反应平衡及产物荧光性质的影响,表明二聚体荧光产物在溶液中存在酸碱平衡,用荧光滴定法求得其酸离解常数pK_a≈8.3.碱式产物的荧光强于酸式.碱性环境使酶活性降低,反应平衡时间延长.阳离子胶束溴化十六烷基三甲铵(CTMAB)和氯化十六烷基三甲铵(CTMAC)对该体系兼有催化和增敏作用,据此提出一种更为灵敏的测定辣根过氧化物酶的方法

介质环境对辣根过氧化物酶催化荧光反应体系影响

辣根过氧化酶(HRP)催化荧光反应由HRP,H_2O_2以及能被氧化生成荧光物质(或由荧光物质生成非荧光物质)的供氢体(HD)组成,该体系广泛用于环境中H_2O_2以及数目庞大的生化物质测定。对位取代酚类HD以其灵敏、稳定等优点,应用最广。但该类反应存在一个pH不匹配问题,即HRP的最适pH为中性,产物则在碱性介质中表现强烈荧光。为弄清介质环境对该反应体系的影响,探求解决pH不匹配问题及进一步提高分析灵敏度的途径,研究了缓冲溶液(包括类型、酸度、浓度),有机溶剂及多种

胶束增敏酶联免疫吸附法荧光测定人IgG及与均相法测定比较

在荧光免疫分析中,胶束的加入常引起荧光强度增大、光谱位移、荧光寿命和荧光偏振的变化,利用这些变化可以改进自由抗原(Ag)和抗体(Ab)结合抗原的识别,提高分析灵敏度,扩大荧光免疫分析的范围。我们曾详细研究了环境介质对酶联免疫吸附测定(ELISA)荧光指示反应体系的影响,观察到长链烷烃季铵盐胶束对反应兼有催化和增敏作用。本文报导了将胶束增敏作用引入ELISA荧光测定体系,探求解决该体系酶促反应与荧光检测独立进行问题及提高灵敏度的途径,并与作者新近报导的一种均相荧光酶免疫分析法进行了比较

胶束增敏的辣根过氧化物酶催化荧光反应测定葡萄糖的研究

以H_2O_2为底物,辣根过氧化物酶(HRP)可以催化众多供氢体的氧化,广泛应用于环境中H_2O_2及众多临床生化物质的测定。我们曾详细研究了环境介质对对位取代酚类供氢体的酶催化氧化生荧反应,观察到长链烷烃季铵盐胶束对反应具有催化和增敏作用(另文),本文报导胶束增敏体系用于葡萄糖(GS)的测定