Role of ABCB1 and glutathione S‑transferase gene variants in the association of porphyria cutanea tarda and human immunodeficiency virus infection

In Argentina, porphyria cutanea tarda (PCT) is strongly associated with infection with human immunodefi-ciency virus (HIV); however, whether the onset of this disease is associated with HIV infection and/or the antiretroviral therapy has not been determined. The ABCB1 gene variants c.1236C>T, c.2677G>T/A and c.3435C>T affect drug efflux. The GSTT1 null, GSTM1 null and GSTP1 (c.313A>G) gene variants alter Glutathione S-transferase (GST) activity, modifying the levels of xenobiotics. The aim of the present study was to evaluate the role of genetic variants in initia-tion of PCT and to analyze the genetic basis of the PCT-HIV association. Control individuals, and HIV, PCT and PCT-HIV patients were recruited, PCR-restriction fragment length polymorphism was used to genotype the ABCB1 and GSTP1 variants, and multiplex PCR was used to study the GSTM1 and GSTT1 variants. The high frequency of c.3435C>T (PCT and PCT-HIV) and c.1236C>T (PCT) suggested that the onset of PCT were not specifically related to HIV infection or antiret-roviral therapy for these variants. c.2677G>T/A frequencies in the PCT-HIV patients were higher compared with the other groups, suggesting that a mechanism involving antiretroviral therapy served a role in this association. PCT-HIV patients also had a high frequency of GSTT1 null and low frequency for GSTM1 null variants; thus, the genetic basis for PCT onset may involve a combination between the absence of GSTT1 and the presence of GSTM1. In conclusion, genes encoding for proteins involved in the flow and metabolism of xenobiotics may influence the PCT-HIV association. The present study is the first to investigate the possible role of GST and ABCB1 gene variants in the triggering of PCT in HIV-infected indi-viduals, to the best of our knowledge, and may provide novel insights into the molecular basis of the association between PCT and HIV.Fil: Pagnotta, Priscila Ayelén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Melito, Viviana Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Lavandera, Jimena Veronica. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas. Cátedra de Bromatología y Nutrición; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Parera, Victoria Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Rossetti, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Zuccoli, Johanna Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Buzaleh, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentin

Implication of glutathione stransferases gene variants on acute intermittent porphyria onset

Acute Intermittent Porphyria (AIP) is a result of a partial and primary deficiency in Porphobilinogen deaminase (PBG-D), the third enzyme in the heme pathway. The presence of the mutation is not enough for the manifestation of AIP that can be triggered by therapeutic drugs, so genetic variants in cell detoxification system could be involved in AIP onset. Glutathione-S-transferases (GST) are Phase II enzymes involved in detoxification of reactive oxygen species, environmental carcinogens, metabolism of steroid hormones and chemotherapeutic agents. Some polymorphisms in this gene affect GST activity, acting on the level of hormones and xenobiotics: GSTT1 null, GSTM1 null and GSTP1 (rs1695, c.313 A>G). The aim was to analyze these risk variants in relation with AIP onset. The study was performed in Control individuals (non porphyric) and in AIP patients carrying PBG-D mutation that at the moment of the diagnosis were symptomatics (S-AIP) or without clinical/biochemical manifestations (latent group, L-AIP). GSTT1 and GSTM1 were amplified by multiplex PCR, and GSTP1 variant by PCR-RFLP.The homozygote deletion frequencies for GSTT1 null were: 8.3% (Control), 20.5%(sAIP), 6.1% (lAIP) and 10.5% (PCT). Frequencies for GSTM1 null were: 41.7% (Control), 51.3% (sAIP), 45.5% (lAIP).GSTP1allelic frequencies for non-wild type (G) variant were: 0.42 (Control), 0.47 (S-AIP), 0.35 (L-AIP); genotypic frequencies were: AA: 29.2%, AG: 58.3% and GG: 12.5% (Control); AA: 33.3%, AG: 38.5% and GG: 28.2% (S-AIP); AA: 30%; AG: 70% and GG: 0% (L-AIP); and AA: 25%, AG: 60% When the combination of risk alleles were calculated, results showed: 0 alleles: 45.5%, 1 allele: 45.5%, 2 alleles: 9% and 3 alleles: 0% (Control); 0: 27%, 1: 46%, 2: 24.3% and 3: 2.7% (sAIP); and 0: 50%, 1: 50%, 2: 0% and 3: 0% (lAIP). In S-AIP, null GSTT1 was significantly high respect to control (p<0.05) and L-AIP (p<0.01); GSTM1 gene frequency were higher but no significant than the other cohorts. GG genotype frequency was significantly high for the GSTP1 respect to others groups (p< 0.01). A high frequency for the presence of 2 risk alleles was observed for the sAIP group with respect to L-AIP and Control. These results suggest a possible implication of GSTM1, GSTT1 and GSTP1 in the manifestation of AIP.Fil: Pagnotta, Priscila Ayelén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Zuccoli, Johanna Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Manrique Bojorquez, Nancibel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Parera, Victoria Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Rossetti, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Batlle, Alcira Maria del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Melito, Viviana Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Buzaleh, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaLXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; IX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas y VI Reunión Científica Regional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratorio.Mar del PlataArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalSociedad Argentina de BiologíaSociedad Argentina de ProtozoologíaAsociación Argentina de NanomedicinasAsociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratori

Metabolismo do hemo: as duas faces dos efeitos da acumulação de precursores e porfirinas

Las Porfirias son enfermedades metabólicas consecuencia de fallas en la biosíntesis del Hemo, caracterizadas por un patrón específico de acumulación y excreción de intermediarios, responsables de su patofisiología. En las Porfirias Agudas el exceso de ácido -aminolevúlico (ALA) produce una sintomatología neuroabdominal asociada al daño oxidativo por formación de especies reactivas de oxígeno (ROS), originadas por autooxidaxión del ALA. En las Cutáneas la sintomatología es producto de la acumulación de porfirinas, que como el ALA, induce la formación de ROS. Su desencadenamiento se precipita por factores endógenos (ayuno, estrés, hormonas) y/o exógenos (fármacos), en particular algunos anestésicos.Se presenta una revisión de los estudios bioquímicos y genéticos en pacientes con diferentes Porfirias obtenidos en el CIPYP, durante los últimos 38 años, que permitieron ampliar nuestro conocimiento sobre las bases moleculares de estas patologías.Se describen los logros resultantes del empleo de modelos experimentales de Porfiria, inducida farmacológica o genéticamente, que contribuyeron a la clasificación de algunas drogas como prohibidas para pacientes con Porfiria. Finalmente, las porfirinas generadoras de ROS y por ende inductoras de muerte celular tienen su aplicación para combatir infecciones por organismos hemo-deficientes como Trypanosoma cruzi y también ser utilizadas como fotosensibilizadores en la terapia fotodinámica (TFD).Porphyrias comprise a group of metabolic disorders of the heme biosynthesis pathway resulting in a specific accumulation and excretion of intermediates which are responsible for their pathophysiology. Acute porphyrias are characterized by acute neurovisceral symptoms due to the overproduction and accumulation of d-aminolevulinic acid (ALA) which leads to an oxidative damage resulting from the formation of reactive oxygen species (ROS). In cutaneous porphyrias, the symptomatology is a result of porphyrin accumulation which also induces ROS moulding. In both cases, their clinical signs are precipitated by endogenous factors (stress, hormones, low calories intake) and/or exogenous drugs, in particular some anaesthetics. A review of the biochemical and genetic results obtained from patients with different porphyrias, diagnosed at the CIPYP during the last 38 years is presented here, aimed at obtaining additional evidence about the molecular nature of these disorders. The achievements obtained from experimental porphyria models –pharmacologically or genetically induced– are also described, which contributed to the classification of some drugs as prohibited for their use in porphyric patients. Finally, as porphyrins produce ROS and therefore cellular death, they can be used to treat infections by heme-deficient organisms like Trypanosoma cruzi and also as photosensitizers in photodynamic therapy (TFD).As Porfirias são doenças metabólicas decorrentes de falhas na biossíntese do Hemo, caracterizadas por um padrão específico de acumulação e excreção de intermediários responsáveis de sua patofisiologia. Nas Porfirias Agudas, o excesso de ácido δ-aminolevulínico (ALA) produz uma sintomatologia neuroabdominal associada ao dano oxidativo por formação de espécies reativas de oxigênio (ROS), decorrentes da auto-oxidação do ALA. Nas Cutâneas a sintomatologia é produto da acumulação de porfirinas, que como o ALA, induzem a formação de ROS. Seu desencadeamento precipita-se por fatores endógenos (jejum, estresse, hormônios) e/ou exógenos (fármacos), especialmente alguns anestésicos. Apresenta-se uma revisão dos estudos bioquímicos e genéticos em pacientes com diferentes Porfirias obtidos no Centro de Investigações de Porfirias e Porfirinas (CIPYP), durante os últimos 38 anos, que permitiram ampliar o conhecimento sobre as bases moleculares destas patologias. Descrevem-se as conquistas resultantes do uso de modelos experimentais de Porfiria, induzida farmacológica ou geneticamente, que contribuíram à classificação de algumas drogas como proibidas para pacientes com Porfiria. Afinal, as porfirinas geradoras de ROS e, por conseguinte, indutoras de morte celular têm sua aplicação para combater infecções por organismos hemo-deficientes como Trypanosoma cruzi e também ser utilizadas como fotossensibilizadores na terapia fotodinâmica (TFD).Fil: Rossetti, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Buzaleh, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Parera, Victoria Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Fukuda, Haydee. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Lombardo, Maria Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Lavandera, Jimena Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Gerez, Esther Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Melito, Viviana Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Zuccoli, Johanna Romina. Porphyrias Research Centre; EspañaFil: Ruspini, Silvina Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Puente, Vanesa Rocío. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Diez, Berenice Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Teijo, Maria Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Cervino, Nadia Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Varela, Laura Sabina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Guolo, Marcelo Nestor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Batlle, Alcira María del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentin

Volatile anaesthetics: Effects on respiratory chain. Regulation of nitric oxide synthase

Las mitocondrias juegan un papel vital en el metabolismo energético; En el interior se produce la fosforilación oxidativa en la cadena de transporte de electrones y la generación de equivalentes de reducción por el ciclo del ácido tricarboxílico (TCA). La deficiencia de hemo producida por una síntesis reducida o un catabolismo acelerado provocaría un daño celular grave. Anteriormente, demostramos que los agentes porfirinogénicos afectaban a varios metabolismos en cerebro de ratones cepa CF1 y y en un modelo genético murino de Porfiria intermitente aguda (AIP). El objetivo general de esta tesis fue estudiar los mecanismos por los cuales los anestésicos volátiles alteran el metabolismo mitocondrial. Los objetivos específicos fueron: I) Dilucidar el efecto de los anestésicos volátiles sobre la cadena respiratoria mitocondrial en el encéfalo de ratón. II) Comparar los resultados en animales con otros fármacos porfirinogénicos y en condiciones patológicas del precursor del metabolismo del hemo, ácido 5-aminolevulic (ALA). III) Evaluar, en el encéfalo del ratón, la posible relación entre la biosíntesis del hemo, el ciclo del ácido tricarboxílico y la cadena respiratoria. IV) Analizar la participación de la isoforma mitocondrial de la Óxido nítrico sintasa (mtNOS) en la regulación de la cadena respiratoria. Se observaron alteraciones bioquímicas en los complejos de la cadena respiratoria que variaban según la cepa de ratones y la mutación. Los cambios observados en las actividades del ciclo de TCA darían como resultado una deficiencia de los equivalentes de reducción del donante, NADH y FADH2, y podrían justificar las alteraciones en las actividades de los complejos de la cadena respiratoria informados anteriormente. Los resultados refuerzan nuestra resultados previos y apoyan la hipótesis de que habría más de un factor para explicar la patogénesis de los ataques agudos de la PAI además de confirmar la porfirinogenicidad de los anestésicos volátiles.The mitochondria play a vital role in energy metabolism; inside this organele occur oxidative phosphorylation in the electron transport chain and the generation of reduction equivalents by the tricarboxylic acid (TCA) cycle. Heme deficiency produced by a reduced synthesis or an accelerated catabolism would trigger severe cell damage. Previously we demonstrated that porphyrinogenic agents affected several brain metabolisms in encephalon CF1 and Acute intermittent Porphyria (AIP) genetic mice model.The general aim of this Thesis was to study the mechanisms by which volatile anesthetics alter mitochondrial metabolism: For this purpose, it was proposed: I) To elucidate the effects of volatile anesthetics on the mitochondrial respiratory chain in mouse encephalon. II) To compare the results in animals treated with other porphyrinogenic drugs and under pathological conditions of high levels of the heme metabolism precursor, 5-aminolevulic acid (ALA). III) To evaluate, in the mouse encephalon, the possible relationship between heme biosynthesis, the tricarboxylic acid cycle and the respiratory chain. IV) To analize the participation of the mitochondrial isoform of nitric oxide synthase (mtNOS) in the regulation of the respiratory chain. Biochemical alterations in the different complexes of respiratory chain that varied according to the strain of mice and mutation were observed. The changes detected in the activities of TCA cycle would result in a deficiency of the donor reduction equivalents, NADH and FADH2, and could justify the alterations in the activities of respiratory chain complexes. Results reinforce our previous reports and support the hypothesis that there would be more than one factor to explain the pathogenesis of acute attacks. Also, data support the porphyrinogenicity of volatile anaesthetics.Fil: Zuccoli, Johanna Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentin

An Improved Technique for Genotyping the <i>ABCB1</i> Gene Variant of Exon 21

The Multidrug Resistance protein (ABCB1, MDR1) is involved in the transport of xenobiotics and antiretroviral drugs. Some variants of the ABCB1 gene are of clinical importance; among them, exon 12 (c.1236C>T, rs1128503), 21 (c.2677G>T/A, rs2032582), and 26 (c.3435C>T, rs1045642) have a high incidence in Caucasians. Several protocols have been used for genotyping the exon 21 variants, such as allele-specific PCR-RFLP using adapted primer to generate a digestion site for several enzymes and automatic sequencing to detect the SNVs, TaqMan Allele Discrimination assay and High-Resolution Melter analysis (HRMA). The aim was to describe a new approach to genotype the three variants c.2677G>T/A for the exon 21 doing only one PCR with the corresponding primers and the digestion of the PCR product with two restriction enzymes: BrsI to identify A allele and BseYI to differentiate between G or T. An improvement of this methodology was also described. The proposal technique here described is demonstrated to be very efficient, easy, fast, reproducible, and cost-effective

Inverse shifting PCR based prenatal diagnosis of hemophilia-causative inversions involving int22h and int1h hotspots from chorionic villus samples

Almost one half of severe hemophilia A cases are caused by intron 22 (Inv22) and intron 1 (Inv1) factor VIII gene inversions worldwide. To improve the analysis of the presence of Inv22 and Inv1 from chorionic villus-extracted DNA samples, we applied a recently published approach, inverse shifting-PCR (IS-PCR). Prenatal diagnosis accomplished in two cases showed that IS-PCR is a robust and reliable tool to provide rapid information for genetic counseling for hemophilia-affected families.Fil: Radic, Claudia Pamela. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rossetti, Liliana Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex"; ArgentinaFil: Zuccoli, Johanna Romina. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Abelleyro, Miguel Martin. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Larripa, Irene Beatriz. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: de Brasi, Carlos Daniel. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Investigaciones Hematológicas "Mariano R. Castex"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Effects of volatile anaesthetics on heme metabolism in a murine genetic model of Acute Intermittent Porphyria: A comparative study with other porphyrinogenic drugs

Background: Acute Intermittent Porphyria (AIP) is an inherited disease produced by a deficiency of Porphobilinogen deaminase (PBG-D). The aim of this work was to evaluate the effects of Isoflurane and Sevoflurane on heme metabolism in a mouse genetic model of AIP to further support our previous proposal for avoiding their use in porphyric patients. A comparative study was performed administering the porphyrinogenic drugs allylisopropylacetamide (AIA), barbital and ethanol, and also between sex and mutation using AIP (PBG-D activity 70% reduced) and T1 (PBG-D activity 50% diminished) mice. Methods: The activities of 5-Aminolevulinic synthetase (ALA-S), PBG-D, Heme oxygenase (HO) and CYP2E1; the expression of ALA-S and the levels of 5-aminolevulinic acid (ALA) were measured in different tissues of mice treated with the drugs mentioned. Results: Isoflurane increased liver, kidney and brain ALA-S activity of AIP females but only affected kidney AIP males. Sevoflurane induced ALA-S activity in kidney and brain of female AIP group. PBG-D activity was further reduced by Isoflurane in liver male T1; in AIP male mice activity remained in its low basal levels. Ethanol and barbital also caused biochemical alterations. Only AIA triggered neurological signs similar to those observed during human acute attacks in male AIP being the symptoms less pronounced in females although ALA-S induction was greater. Heme degradation was affected. Discussion: Biochemical alterations caused by the porphyrinogenic drugs assayed were different in male and female mice and also between T1 and AIP being more affected the females of AIP group. General significance: This is the first study using volatile anaesthetics in an AIP genetic model confirming Isoflurane and Sevoflurane porphyrinogenicity.Fil: Ruspini, Silvina Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Zuccoli, Johanna Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Lavandera, Jimena Veronica. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martinez, Maria del Carmen. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Olivieri, Leda María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Gerez, Esther Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Batlle, Alcira Maria del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Buzaleh, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentin

Study on the Role of ABCB1 and Glutathione S-transferase Gene Variants in the Association of Porphyria Cutanea Tarda and Human Immunodeficiency Virus Infection

Porphyrias are a group of metabolic disorders due to alterations in heme biosynthesis. Porphyria Cutanea Tarda (PCT) is a hepatic cutaneous Porphyria resulting from an acquired or inherited deficiency of Uroporphyrinogen decarboxylase. Triggering factors are involved in the onset of this disease. In Argentina, PCT is strongly associated to infection with human immunodeficiency virus (HIV); however, whether the onset of this disease is associated with HIV infection and/or the antiretroviral therapy has not been determined. Our investigation was focused to study the involvement of genetic variants in the development of Porphyrias. In this work, the aim was to evaluate the role of ABCB1 and GST genetic variants in the association between PCT and HIV. This article summarized the main reports about the role of drug metabolism in the onset of PCT, in particular those related with cytochrome P-450 gene variants. Moreover, we extensively described our results about the involvement of ABCB1 transporter and Glutathione S-transferases (GSTs) variants in the association PCT-HIV. We focused our investigation on the ABCB1 gene variants: Exon 12 (rs1128503, NM_000927.5: c.1236C>T), exon 21 (rs2032582, NM_000927.5: c.2677G>T/A) and exon 26 (rs1045642, NM_000927.5: c.3435C>T), that affect drug efflux. The genotypification of GSTT1 null, GSTM1 null and GSTP1 (rs1695, NM_000852.4: c.313A>G), gene variants that alter activity, modifying xenobiotics levels was also analyzed. The high frequency of c.3435C>T (PCT and PCT-HIV) and c.1236C>T (PCT) suggested that the onset of PCT was not specifically related to HIV infection or antiretroviral therapy for these variants. c.2677G>T/A frequencies in the PCT-HIV patients were higher compared with the other groups, suggesting that a mechanism involving antiretroviral therapy had a role in this association. PCT-HIV patients also had a high frequency of GSTT1 null and low frequency for GSTM1 null variants; thus, the genetic basis for PCT onset may involve a combination between the absence of GSTT1 and the presence of GSTM1. When the gene variants studied were analyzed in a whole, PCT-HIV patients had more risk alleles than Controls, PCT or HIV groups. In conclusion, genes encoding for proteins involved in the flow and metabolism of xenobiotics may influence the PCT-HIV association, providing novel insights into the molecular basis of the association between PCT and HIV.Fil: Pagnotta, Priscila Ayelén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Melito, Viviana Alicia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Lavandera, Jimena Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas; ArgentinaFil: Buscalia, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Parera, Victoria Estela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Rossetti, Maria Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Zuccoli, Johanna Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Buzaleh, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentin

Pleiotropic effects of 5-aminolevulinic acid in mice brain

5-Aminolevulinic acid (ALA) seems to be responsible for the neuropsychyatric manifestations of Acute Intermittent Porphyria (AIP). The aim was to study the effect of ALA on different metabolisms in mice brain to enhance our knowledge about the action of this heme precursor on the central nervous system. Heme metabolism, cholinergic system, defense enzyme system and nitric oxide metabolism were evaluated in encephalon mice receiving a single (40 mg/kg) or multiple doses of ALA (40 mg/kg, 14 days). We have found ALA accumulation in encephalon. ALA also altered the brain cholinergic system. After one dose of ALA, a decrease in Superoxide dismutase activity and a reduction of glutathione levels were detected, while malondialdehyde levels and Catalase activity were increased. Heme oxygenase was also increased as an antioxidant response to protect this organ against the injury. All Nitric Oxide Synthase isoforms were induced by ALA, being these changes more significant in glial cells for the inducible isoform. In conclusion, ALA affected several metabolisms in encephalon. Data indicate that a rapid response to oxidative stress was developed; however, in long term intoxication, the redox balance was probably restored minimizing oxidative damage.Fil: Lavandera, Jimena Veronica. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Departamento de Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rodriguez, Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Ruspini, Silvina Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Meiss, Roberto. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: Zuccoli, Johanna Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Martinez, Maria del Carmen. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gerez, Esther Noemi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Batlle, Alcira María del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; ArgentinaFil: Buzaleh, Ana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias. Universidad de Buenos Aires. Centro de Investigaciones sobre Porfirinas y Porfirias; Argentin