Research for the use of ivermectin in slaughter animals. Method development and surveillance

In order to conduct a surveillance study into the occurrence of residues of the veterinary drug ivermectin an analytical procedure based on liquid chromatography was made operational within the laboratory. At the level of the currently lowest Maximum Residue Limit (MRL) of 15 mug/kg for liver the repeatability of the method, expressed as relative standard deviation, was 10% (degrees of freedom (df) whereas the within laboratory reproducibility, also expressed as relative standard deviation, was 6% (vhg 2). With the procedure 107 samples of liver, obtained from calves, cattle, horses, pigs, sheep and goats, were investigated. In four samples ivermectin was detected. In three cases the concentration was less than 15 mug/kg (cow (1), sheep (1) and pig (1)). In one sample, obtained from a sheep, the concentration was 54 mug/kg.The MRL for samples of liver obtained from sheep, pigs and horses is 15 mug/kg, for cattle 40 mug/kg. Even though the number of positive samples, exceeding the MRL, was only 1%, continuation of this study in the near future (3 years) is indicated. The nature of the method means that only a limited laboratory capacity is needed.Ten behoeve van bewakingsonderzoek naar het voorkomen van residuen van het diergeneesmiddel ivermectine werd een analysemethode op basis van vloeistofchromatografie operationeel gemaakt. Op het niveau van de laagste thans geldende Maximale Residu Limiet (MRL) van 15 mug/kg voor lever bleek de herhaalbaarheid van de methode, uitgedrukt als relatieve standaarddeviatie, 10% (9 vrijheidsgraden (vhg)) terwijl de binnen laboratorium reproduceerbaarheid, eveneens uigedrukt als relatieve standaarddeviatie, 6% (vhg 2) bedroeg.Met de methode werden 107 monsters lever, afkomstig van kalveren, volwassen runderen, paarden, schapen, varkens (o.a. zeugen), geiten en een bok onderzocht. In vier monsters werd ivermectine aangetoond. In drie gevallen was het gehalte echter minder dan 15 mug/kg (rund (1), schaap (1) en zeug (1)). In een monster, afkomstig van een schaap, werd 54 mug/kg aangetroffen.De MRL voor monsters lever afkomstig van schapen, varkens en paarden bedraagt 15 mug/kg, voor runderen 40 mug/kg. Het aantal positieve, dat wil zeggen de MRL overschrijdende, monsters bedroeg derhalve slechts 1 (ca. 1%). Hoewel dit percentage niet verontrustend is, is herhaling van dit onderzoek over 3 jaar gewenst. De aard van de analysemethode maakt dat de hiervoor benodigde analytische capaciteit slechts beperkt is

Research for the use of ivermectin in slaughter animals. Method development and surveillance

Ten behoeve van bewakingsonderzoek naar het voorkomen van residuen van het diergeneesmiddel ivermectine werd een analysemethode op basis van vloeistofchromatografie operationeel gemaakt. Op het niveau van de laagste thans geldende Maximale Residu Limiet (MRL) van 15 mug/kg voor lever bleek de herhaalbaarheid van de methode, uitgedrukt als relatieve standaarddeviatie, 10% (9 vrijheidsgraden (vhg)) terwijl de binnen laboratorium reproduceerbaarheid, eveneens uigedrukt als relatieve standaarddeviatie, 6% (vhg 2) bedroeg.Met de methode werden 107 monsters lever, afkomstig van kalveren, volwassen runderen, paarden, schapen, varkens (o.a. zeugen), geiten en een bok onderzocht. In vier monsters werd ivermectine aangetoond. In drie gevallen was het gehalte echter minder dan 15 mug/kg (rund (1), schaap (1) en zeug (1)). In een monster, afkomstig van een schaap, werd 54 mug/kg aangetroffen.De MRL voor monsters lever afkomstig van schapen, varkens en paarden bedraagt 15 mug/kg, voor runderen 40 mug/kg. Het aantal positieve, dat wil zeggen de MRL overschrijdende, monsters bedroeg derhalve slechts 1 (ca. 1%). Hoewel dit percentage niet verontrustend is, is herhaling van dit onderzoek over 3 jaar gewenst. De aard van de analysemethode maakt dat de hiervoor benodigde analytische capaciteit slechts beperkt is.In order to conduct a surveillance study into the occurrence of residues of the veterinary drug ivermectin an analytical procedure based on liquid chromatography was made operational within the laboratory. At the level of the currently lowest Maximum Residue Limit (MRL) of 15 mug/kg for liver the repeatability of the method, expressed as relative standard deviation, was 10% (degrees of freedom (df) whereas the within laboratory reproducibility, also expressed as relative standard deviation, was 6% (vhg 2). With the procedure 107 samples of liver, obtained from calves, cattle, horses, pigs, sheep and goats, were investigated. In four samples ivermectin was detected. In three cases the concentration was less than 15 mug/kg (cow (1), sheep (1) and pig (1)). In one sample, obtained from a sheep, the concentration was 54 mug/kg.The MRL for samples of liver obtained from sheep, pigs and horses is 15 mug/kg, for cattle 40 mug/kg. Even though the number of positive samples, exceeding the MRL, was only 1%, continuation of this study in the near future (3 years) is indicated. The nature of the method means that only a limited laboratory capacity is needed.VH

Studies on the use of medroxyprogesterone-, chloromadinone-, megestrol- and melengestrol-acetate in slaughter animals ; Method validation and surveillance

The results obtained during the investigation of 197 samples of kidney fat for the presence of illegal anabolic compounds are presented. The method used until now was laborious and the sample throughput was low. For this reason a new method was developed. For the compounds mentioned above there is no Maximum Residue Limit (MRL) since their use is prohibited. The limit of determination for the new method is 2.0 mug/kg at which level the within-laboratory reproducibility was 19% for Medroxyprogesterone-acetate, 14% for Megestrol-acetate and 18% for Melengestrol-acetate. For Chloormadinone-acetate only semi quantitative analyses was possible since a suitable isotope enriched internal standard was not yet available. One sample was found positive (0.5%). The identity of medroxyprogesterone-acetate was confirmed by the detection of four diagnostic ions. The concentration, however, was approximately 2mug/kg.Ten behoeve van bewakingsonderzoek werd onderzoek verricht naar de aanwezigheid van residuen van deze stoffen met groeibevorderende werking in monsters niervet. Daar het gebruik van genoemde stoffen voor dit doel niet is toegestaan geldt geen Maximale Residue Limiet (MRL). Vanwege het feit dat bestaande analysemethode arbeids- en tijdsintensief is, werd een nieuwe methode op basis van vaste fase extractie, gas chromatografische scheiding en massaspectrometrische detectie ontwikkeld. De binnen- laboratorium reproduceerbaarheid op het concentratie niveau van 2mug/kg (geaddeerd) bedroeg voor medroxyprogesteron-acetaat, megestrol-acetaat en melengestrol-acetaat respectievelijk 19%, 14% en 18%. Voor chloormadinon-acetaat is vanwege het ontbreken van een interne standaard alleen semi-kwantitatief onderzoek verricht. 197 monsters niervet werden met behulp van de ontwikkelde methode geanalyseerd, een monster (0.5%) werd positief bevonden op medroxyprogestron-acetaat. De aanwezigheid werd bevestigd op basis van de vier karakteristieke ionen. De concentratie aan medroxyprogesteron-acetaat bedroeg ca 2mug/kg

Studies on the use of medroxyprogesterone-, chloromadinone-, megestrol- and melengestrol-acetate in slaughter animals ; Method validation and surveillance

Ten behoeve van bewakingsonderzoek werd onderzoek verricht naar de aanwezigheid van residuen van deze stoffen met groeibevorderende werking in monsters niervet. Daar het gebruik van genoemde stoffen voor dit doel niet is toegestaan geldt geen Maximale Residue Limiet (MRL). Vanwege het feit dat bestaande analysemethode arbeids- en tijdsintensief is, werd een nieuwe methode op basis van vaste fase extractie, gas chromatografische scheiding en massaspectrometrische detectie ontwikkeld. De binnen- laboratorium reproduceerbaarheid op het concentratie niveau van 2mug/kg (geaddeerd) bedroeg voor medroxyprogesteron-acetaat, megestrol-acetaat en melengestrol-acetaat respectievelijk 19%, 14% en 18%. Voor chloormadinon-acetaat is vanwege het ontbreken van een interne standaard alleen semi-kwantitatief onderzoek verricht. 197 monsters niervet werden met behulp van de ontwikkelde methode geanalyseerd, een monster (0.5%) werd positief bevonden op medroxyprogestron-acetaat. De aanwezigheid werd bevestigd op basis van de vier karakteristieke ionen. De concentratie aan medroxyprogesteron-acetaat bedroeg ca 2mug/kg.The results obtained during the investigation of 197 samples of kidney fat for the presence of illegal anabolic compounds are presented. The method used until now was laborious and the sample throughput was low. For this reason a new method was developed. For the compounds mentioned above there is no Maximum Residue Limit (MRL) since their use is prohibited. The limit of determination for the new method is 2.0 mug/kg at which level the within-laboratory reproducibility was 19% for Medroxyprogesterone-acetate, 14% for Megestrol-acetate and 18% for Melengestrol-acetate. For Chloormadinone-acetate only semi quantitative analyses was possible since a suitable isotope enriched internal standard was not yet available. One sample was found positive (0.5%). The identity of medroxyprogesterone-acetate was confirmed by the detection of four diagnostic ions. The concentration, however, was approximately 2mug/kg.V

Uitscheiding van alfa- en beta-trenbolon in de urine van mestkalveren na behandeling met trenboloneacetaat in combinatie met estradiol of zeranol

De uitscheiding van alfa- en beta-trenbolon in de urine van kalveren die behandeld zijn met trenbolonacetaat is bepaald via hoge druk vloeistofchromatografie met UV-detectie bij 350 nm. Uit deze proef blijkt dat de hoofdmetaboliet alfa-trenbolon is, terwijl beta-trenbolon nauwelijks uitgescheiden wordt. De gehalten aan alfa-trenbolon kunnen oplopen tot 30 ug/l en zijn bij een aantal dieren nog 48 dagen na behandeling aantoonbaar. De resultaten laten echter zien dat de urinaire gehalten van trenbolon en/of metabolieten aanzienlijk fluctueren. Als gevolg hiervan zijn deze gehalten minder geschikt om bij mestkalveren te controleren of de vereiste wachttijden na toepassing van Trenboloneacetaat houdende implantaten in acht zijn genomen in geval van (een mogelijk toekomstig) toegestaan legaal gebruik.VH

Chloramphenicol in urine: A Strategy for analysis. 1. Comparison of two immunochemical methods and development of a gaschromatographic method

Om te komen tot een onderzoekmodel voor de analyse van monsters urine op de aanwezigheid van residuen van chlooramfenicol (CAP) werden een gecombineerde hogedruk vloeistofchromatografische (HPLC)/radio-immunochemische (RIA), resp. gaschromatografische (GC) methode ontwikkeld. Orienterende experimenten die moeten leiden tot de ontwikkeling van een GC methode met massaspectrometrische (MS) bevestiging werden in samenwerking met het Laboratorium voor organisch-analytische chemie (LOC) uitgevoerd. De RIA lijkt geschikt als screeningsmethode vanaf een niveau van rond 1 mug CAP/l en hoger. Een enzym-immunoassay, op de markt gebracht onder de naam Quik-Card-R, lijkt een bruikbaar alternatief. De detectiegrens bij onderzoek van monsters nierbekkenvloeistof ligt hiervoor echter hoger dan die van de RIA. De GC-bevestigingsmethode, waarbij het di-trimethylsilyl-CAP derivaat met behulp van een elektron-capture detector (ECD) gedetecteerd wordt heeft voor monsters urine waaraan CAP was toegevoegd een aantoonbaarheidsgrens van ca. 0,5 mug CAP/l. Met behulp van massaspectrometrische detectie kan deze grens mogelijk met ongeveer een factor 10 verlaag worden.Abstract not availableVH

Snelle HPLC-screeningsmethode voor de detectie van Trenbolone(R) en zijn hoofdmetaboliet in urine van geslachte runderen

Een eenvoudige en snelle detectiemethode voor 17beta-trenbolon en zijn hoofdmetaboliet 17alfa-trenbolon wordt beschreven. Hierbij wordt gebruik gemaakt van een HPLC-scheiding op een "normal phase" kolom met UV-detectie bij 350 nm. De absolute detectiegrens ligt in de orde van 0.3-0.4 ng, terwijl de detectielimiet in urinemonsters ligt in de orde van 1-2 mug/l.VH

Evaluation of RIVM-results obtained during the control of 50 veal calves and 50 pigs of residues of clenbuterol

Abstract niet beschikbaarThis report describes the evaluation of RIVM-results obtained during the control of 50 veal calves and 50 pigs of residues of clenbuterol. In 4% of the samples urine from calves the clenbuterol concentration was 1.0 mug/l or more. The analysis of the corresponding samples liver revealed no concentrations above 0.5 mug/kg.VH

1996 surveillance into the occurrence of residues of anabolic steroids, beta-agonists, gestagenes and tranquillizers in animals for slaughter

Gedurende het in 1996 uitgevoerde bewakings- onderzoek 'bijzondere slachtplaatsen' werden 75 monsters urine onderzocht op de aanwezigheid van residuen van anabole steroiden en beta-agonisten. Er werden eveneens 34 monsters runderoog (retina) en 40 monsters lever op residuen van beta-agonisten onderzocht. Verder werden 50 monsters niervet op residuen van gestagenen en 11 monsters nier op residuen van tranquillizers onderzocht. In een monster urine werd clenbuterol aangetroffen en de aanwezigheid hiervan kon in het bijbehorende monster lever worden bevestigd. In geen van de overige monsters konden residuen van een van de gezochte verbindingen worden aangetoond. De 245 onderzochten monsters (afkomstig van 75+34+11=120 dieren) residuen van een der gezochte verbindingen kon worden aangetoond. Een steekproef van vijftig monsters niervet werd onderzocht op de aanwezigheid van gestagenen.During the 1996 surveillance, focusing on special slaughter locations, 75 samples of urine were analysed for the presence of residues of anabolic steroids and beta-agonists, 34 samples of bovine retina and 40 samples of liver for residues of beta-agonists, 50 samples of kidney fat for gestagens and 11 samples of kidney for tranquillizers. In one sample of urine residues of clenbuterol were detected and clenbuterol was confirmed in the sample of liver taken from the same animal. In none of the other samples were any residues of the compounds mentioned detected. One sample out of a total of 245 (originating from 120 animals) was found positive for a beta-agonist. Fifty samples of kidney fax were selected at random for the analysis of gestagens.V

Surveillance for the use of anabolic agents in slaughter animals. Report on an investigation of minced meat for residues of boldenone, ethynylestradiol, medroxyprogesterone, chlormadinone and megesterol

This report describes the results obtained in an investigation of 99 samples minced beef for the presence of illegal xenobiotic anabolic steroids. In five samples (5%) the presence of medroxyprogesterone was detected in a range of 0.9 to 5.6 mug/kg. The identity of the residues was confirmed by gas chromatography-mass spectrometry in accordance with the EC-criteria for reference methods. The concentrations detected do not pose a serious risk for the consumer.VH