Μελέτη του ρόλου της έκφρασης του SR-BI σε αστροκύτταρα στον αμυλοειδικό φαινότυπο διαγονιδιακού μοντέλου της νόσου Alzheimer’s

Η νόσος του Alzheimer (Alzheimer's disease, AD) είναι μία προοδευτική νευροεκφυλιστική νόσος που οδηγεί στην μείωση της γνωστικής λειτουργίας του ασθενούς ενώ αποτελεί την κυριότερη μορφή άνοιας. Χαρακτηρίζεται από εναπόθεση Αβ αμυλοειδούς πεπτιδίου (Αβ) και πρωτεΐνης TAU στον εγκέφαλο. Ιδιαίτερα, εναπόθεση Αβ στα αγγεία προκαλεί εγκεφαλική αμυλοειδική αγγειοπάθεια (Celebral Amyloid Angiopathy, CAA), κοινό παθοφυσιολογικό χαρακτηριστικό μεταξύ των ασθενών με AD. Ο μεταβολισμός της χοληστερόλης έχει ενοχοποιηθεί ως ένας από τους εμπλεκόμενους παράγοντες στην AD. Ο scavenger receptor class B type I (SR-BI) είναι υποδοχέας της υψηλής πυκνότητας χοληστερόλης (HDL) και ρυθμίζει την παρουσία λιποπρωτεϊνών, όπως η ApoE στον εγκέφαλο. Ιστοπαθολογική ανάλυση σε εγκεφάλους ασθενών με AD έδειξε έκφραση του SR-BI σε αστροκύτταρα. Σκοπός της εργασίας είναι η διερεύνηση του ρόλου του SR-BI στον αμυλοειδικό φαινότυπο ενός διαγονιδιακού ποντικού μοντέλου της AD (J20). Για το σκοπό αυτό δημιουργήθηκε το GFAP-SR-BI διαγονιδιακό μοντέλο ποντικού (GFAP-SR-BITg ) που υπερεκφράζει τον υποδοχέα SR-BI στα αστροκύτταρα, υπό τον υποκινητή του γονιδίου GFAP, το οποίο διασταυρώθηκε με J20 ποντίκια. Διπλά διαγονιδιακά ποντίκια J20/GFAP-SR-BITg καθώς και J20 μάρτυρες αναλύθηκαν σε ηλικία 11 μηνών ως προς την παρουσία αμυλοειδικών εναποθέσεων στο παρέγχυμα αλλά και στα αγγεία του εγκεφάλου. Παρατηρήθηκε σημαντικά αυξημένη εναπόθεση Αβ στα αγγεία (ένδειξη CAA) των J20/GFAP-SR-BITg ποντικών, ενώ ο σχηματισμός αμυλοειδικών πλακών στο παρέγχυμα του εγκεφάλου δεν μεταβάλλεται σημαντικά .Επίσης ανιχνεύτηκαν κυτταρικοί δείκτες για τους κυτταρικούς πληθυσμούς μικρογλοίας και αστροκυττάρων όπως και δείκτες του μεταβολισμού της χοληστερόλης.Alzheimer's disease (AD), the major cause of dementia, is a progressive neurodegenerative disease leading to cognitive impairment and memory loss. AD is characterized by amyloid and TAU protein deposition. Aβ deposition in vessels leads to cerebral amyloid angiopathy (CAA), a common pathophysiological feature among patients with AD. ApolipoproteinE (ApoE) and cholesterol metabolism have been implicated in AD pathogenesis. Scavenger receptor class B type I (SR-BI) is high density lipoprotein (HDL) receptor -which regulates ApoE in brain. SR-BI’s expression has been detected in astrocytes in AD patients’ brain tissue. The aim of this study is to investigate the role of SR-BI in the AD phenotype of an AD mouse model brain (J20). For this reason a GFAP-SR-BI transgenic mouse model (GFAP-SR-BITg), that over expresses SRBI receptor on astrocytes, under the Gfap gene promoter, was generated and crossed with J20 AD mice. Double transgenic J20/GFAP-SR-BITg and J20 controls were analyzed at the age of 11 months for the presence of Aβ in the parenchyma and brain vessels. An increase in Αβ deposition was detected in J20/GFAP-SR-BITg mice, especially in vessels (CAA indication). Similarly, in the brain of J20/GFAP-SR-BITg mice, specific microglial and astrocytic as well as cholesterol metabolism markers were analyzed

Study of rare types of Charcot-Marie-Tooth disease in greek population

The following thesis aimed to complete the study of rare hereditary neuropathies in the Greek population and contained separate projects in order to cover the wider range possible of these disorders. In total, the work developed in 5 levels which are summarized as follows. The x-linked form of CMT (CMTX)as a result of variants in regulatory regions of the responsible gene was studied; 54 index patients were screened, none of which showed a variant in the examined region. Subsequently, the reported most frequent residual form of the disease,CMT4C was studied, 50 index patients were selected and tested for SH3TC2 gene variants, of which 13 presented variants in the examined region. The autosomal recessive form of the disease with neuromyotonia ,ARAN-NM, was studied, 42index patients were selected and screened for HINT1 gene variants; 4 showed variants in the examined region. At the same time, the CANVAS syndrome was studied where 77index patients were selected and screened for the pathogenic expansion in the RFC1 gene; 5 showed homozygous pathogenic expansion in the examined region. Finally, the axonal types CMT (CMT2) were studied. Sixty index patients were selected and screened for variants in 25 disease-related genes of which 20 presented variants located in 8 of the genes examined. In conclusion, the completion of the present study seems to have succeeded in completing the genetic picture of Greek patients with CMT. At the same time installing state-of the-art technologies in the Laboratory of the Neurogenetic Unit of the 1st Neurological Department ,NKUA and increasing the capability for accurate and in-time diagnosis and genetic counseling.Η παρούσα διδακτορική διατριβή είχε ως στόχο να συμπληρώσει και ολοκληρώσει την συνολικότερη μελέτη σπανίων κληρονομικών νευροπαθειών στον Ελληνικό πληθυσμό και πραγματοποιήθηκε αρθρωτά με σκοπό να καλύψει όσο το δυνατόν μεγαλύτερο φάσμα των διαταραχών αυτών. Συνολικά η εργασία εξελίχθηκε σε 5 επίπεδα τα οποία συνοψίζονται ως εξής. Μελετήθηκε η φυλοσύνδετη μορφή CMTX ως αποτέλεσμα παραλλαγών σε ρυθμιστικές περιοχέςτου υπεύθυνου γονιδίου όπου από επιλέχθηκαν και ελέγχθηκαν 54 ασθενείς δείκτες εκ των οποίων κανείς δεν παρουσίασε παραλλαγή στην εξεταζόμενη περιοχή. Ακολούθως μελετήθηκε η αναφερόμενα συχνότερη υπολειπόμενη μορφή της νόσου η CMT4C όπου επιλέχθηκαν και ελέγχθηκαν 50 ασθενείς δείκτες για παραλλαγές του γονιδίου SH3TC2 εκ των οποίων 13 παρουσίασαν παραλλαγές στην εξεταζόμενη περιοχή. Μελετήθηκε η υπολειπόμενη μπορφή της νόσου με νευρομυοτονία ARAN-NM επιλέχθηκαν και ελέγχθηκαν 42 ασθενείς δείκτες για παραλλαγές του γονιδίου HINT1 εκ των οποίων 4 παρουσίασαν παραλλαγές στην εξεταζόμενη περιοχή. Παράλληλα μελετήθηκε το σύνδρομο CANVAS όπου επιλέχθηκαν και ελέγχθηκαν 77 ασθενείς δείκτες για την παθογονική επέκταση στο γονίδιο RFC1 εκ των οποίων 5 παρουσίασαν παραλλαγές στην εξεταζόμενη περιοχή. Τέλος μελετήθηκαν οι αξονικές μορφές της νόσου CMT2 όπου επιλέχθηκαν και ελέγχθηκαν 60 ασθενείς δείκτες για παραλλαγές σε 25 σχετιζόμενα με τη νόσο γονίδια εκ των οποίων 20 παρουσίασαν παραλλαγές που εντοπίζονται σε 8 από τα γονίδια που εξετάστηκαν. Εν κατακλείδι, η ολοκλήρωση της παρούσας μελέτης φαίνεται ότι κατάφερε να συμπληρώσει σε μεγάλο βαθμο την γενετική εικόνα των Ελλήνων ασθενών με CMT, εγκαθιστώντας συγχρόνως τεχνολογίες αιχμής στο Εργαστήριο της Μονάδας Νευρογενετικής της Α΄Νευρολογικής Κλινικής του ΕΚΠΑ και αυξάνοντας τη δυνατότητα για μελέτες υψηλότερου επιπέδου καθώς και για έγκυρη και έγκαιρη διάγνωση και γενετική συμβουλή

Data on eNOS T786 and G894T polymorphisms and peripheral blood eNOS mRNA levels in Sickle Cell Disease

In this article, we present data on endothelial Nitric Oxide Synthase (eNOS) gene T786C and G894T polymorphisms in Greek steady-state Sickle Cell Disease patients in comparison to healthy controls. Moreover, eNOS mRNA levels were determined in peripheral blood samples from 18 patients and 9 controls. This article complements our recently published article named “Prognostic value of eNOS T786C and G894T polymorphisms in Sickle Cell Disease” (I. Armenis, V. Kalotychou, R. Tzanetea, Z. Kontogeorgiou, D. Anastasopoulou, M. Mantzourani, M. Samarkos, K. Pantos, K. Konstantopoulos, I. Rombos, 2016) [1]

Structural and functional brain changes in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease: insights from a multimodal neuroimaging study

Purpose Brain involvement in X-linked Charcot-Marie-Tooth disease (CMTX) has been previously reported. We studied the brain structural and functional integrity using a multimodal neuroimaging approach in patients with no current central nervous system (CNS) symptoms, in order to further delineate the disease's phenotype. Methods Seventeen CMTX patients with no current CNS symptoms and 24 matched healthy controls underwent brain magnetic resonance imaging (MRI). Structural integrity was evaluated performing Gray matter analysis with voxel-based morphometry (VBM) and tract-based spatial statistics (TBSS) of diffusion tensor imaging (DTI). Functional integrity was evaluated with resting-state functional MRI (rs-fMRI). Results Decreased gray matter density was detected in CMTX patients compared to healthy controls in bilateral hippocampus, left thalamus, left postcentral gyrus, left superior parietal lobule, left cerebellum crus I and II, and vermis VI. DTI analysis showed increased fractional anisotropy and radial diffusivity in the right anterior insula and increased axial diffusivity in right cerebellum crus I in CMTX patients. rs-fMRI revealed decreased spontaneous neural activity on left precentral gyrus in patients compared to healthy controls. Conclusion Advanced magnetic resonance (MR) neuroimaging techniques in CMTX patients revealed structural and functional involvement of multiple motor and extra-motor brain areas. MR neuroimaging techniques have the potential to delineate the CNS phenotype of a peripheral neuropathy like CMTX