Rompiendo paradigmas en la observación microscópica. Comunicación Preliminar

Las observaciones microscópicas de los microorganismos, como bacterias, suelen hacerse con objetivos de mayor aumento y de inmersión. Las fotomicrografías con aquellos microscopios que tienen incorporada una cámara fotográfica, permiten usualmente visualizar los microorganismos en dos planos y las imágenes generalmente a 1000 aumentos. Éstas se encuentran principalmente en un atlas o como fotografías sueltas ilustrando manuales. Las imágenes a más de 1000 aumentos suelen requerir el uso de microscopios electrónicos de transmisión o de barrido (scanning). Con este último se obtiene imágenes tridimensionales, en muchos casos de gran ayuda para el mejor conocimiento de los microorganismos

Bioactives Actinomycetes of marine sediment from the central coast of Peru

En el presente trabajo evaluamos la actividad antibacteriana y antifúngica de actinomycetes marinos sobre patógenos de origen clínico. Asimismo, fueron evaluadas la capacidad de producir enzimas extracelulares como carbohidrasas, lipasas y proteasas. Los Actinomycetes fueron aislados de sedimentos colectados entre setiembre a diciembre del 2005 de las Bahías de Ancón (Lima) e Independencia (Ica) de 34 y 100 m de profundidad. El aislamiento se realizó en Agar Caseína - Almidón (ACA) y Agar Marino (AM) con adición de Cicloheximide (10 μg/mL). Las evaluaciones antimicrobianas fueron realizadas frente a bacterias patógenas antibiótico-multirresistentes y hongos de origen clínico; en tanto, para evaluar su actividad multienzimática se utilizaron sustratos poliméricos diversos. Se aislaron un total de 62 actinomycetes, de los cuales 31 (50%) mostraron actividad antibacteriana frente a Staphylococcus aureus, 36 (59%) frente a Pseudomonas aeruginosa y 23 (37%) a ambos patógenos. Las cepas de actinomycetes I-400A y M10-77 identificadas en cada caso como Streptomyces y Thermoactinomyces fueron las que exhibieron mayor actividad inhibitoria frente a P. aeruginosa y S. aureus respectivamente. Asimismo, 13 actinomycetes (20,97%) mostraron actividad antifúngica frente a cultivos de Candida albicans cepa 1511 y 17 (27,42%) frente a Candida albicans cepa 1511MIC; sin embargo, ningún actinomycete presentó actividad inhibitoria frente a Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus y Trichophyton mentagrophytes. La mayoría de los actinomycetes mostraron tener actividad multienzimática capaz de hidrolizar compuestos poliméricos como el tween-80 (96%), la gelatina (95%), almidón (93%), lecitina (88%) y la caseína (74%). Extractos del compuesto activo obtenidos de la cepa M10-77 con etil acetato rindieron notable actividad inhibitoria contra S. aureus. Se concluye que el sedimento marino es fuente de Actinomycetes con gran capacidad de producir sustancias bioactivas de importancia médica-farmacológica e industrial.In the present research we evaluated the antibacterial and antifungical activity of marine actinomycetes over pathogen of clinical origin. Likewise, it was evaluated the capacity to produce extracellular enzymes like carbohidrases, lipases and proteases. The Actinomycetes were isolated from sediments collected between September to December 2005 of Ancón (Lima) and Independencia (Ica) Bays at depths of 34 and 100 m. The isolation was performed in Casein - Starch Agar (CSA) and Marine Agar (AM) with addition of Cicloheximide (10 μg/mL). The antimicrobial evaluations were done comparing them with pathogenic antibiotic-multiresistant bacteria and fungi from clinical origin; in as much, to evaluate their multienzimatic activity several polimeric substrates were used. A total of 62 actinomycetes were isolated, 31 of there (50%) showed antibacterial activity in opposite to Staphylococcus aureus, 36 (59%) in opposite to Pseudomonas aeruginosa and 23 (37%) to both pathogens. Strains of actinomycetes I-400A and M10-77 identified in each case like Streptomyces and Thermoactinomyces exhibited higher inhibitory activity against S. aureus and P. aeruginosa respectively. Also, 13 actinomycetes (20,97%) showed to antifungical activity against cultures of Candida albicans strain 1511 and 17 (27,42%) with Candida albicans strain 1511MIC; nevertheless, no actinomycete displayed inhibitory activity to the growth of Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus and Trichophyton mentagrophytes. Most Actinomycetes showed to have multienzymic activity able to hydrolysis polymerics compounds like the tween-80 (96%), gelatin (95%), starch (93%), lecitine (88%) and casein (74%). Extracts of the active compound obtained from the strain M10-77 with ethyl acetate produced a notable inhibitory activity against S. aureus. We conclude that the marine sediment is source of Actinomycetes with great capacity to produce bioactives substances of medical-pharmacological and industrial relevance

Streptococcus pneumoniae isolated during 2002-2006: serotypes and antibiotics resistance. Correlation with existing vaccines

Objetivos: Identificar los serotipos de S. pneumoniae aislados, correlacionándolos con los incluidos en las vacunas existentes y su resistencia antimicrobiana. Diseño: Estudio descriptivo, observacional y longitudinal. Lugar: Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrión, Facultad de Medicina, UNMSM. Material biológico: Cepas de Streptococcus pneumoniae. Intervenciones: Cuarenta Streptococcus pneumoniae de nuestro cepario, aislados entre el 2002 y 2006, fueron serotipificados en el Instituto de Salud Carlos III en Madrid –España; 15 fueron invasivos, 11 aislados de infecciones localizadas, 6 de portadores y 8 eran multiresistentes. Principales medidas de resultados: Protección de las vacunas existentes en nuestro medio a las infecciones causadas por Streptococcus pneumoniae. Resultados: Hubo 14 serotipos diferentes y los serogrupos más identificados fueron 23, 19 y 6. El 28,6% estaba contenido en la vacuna 7–valente, 42,9% en la 9–valente, 50% en la 11–valente y el 71,4% en la 23–valente; 57,5% fue resistente a la penicilina y 30% a eritromicina. El grupo de Streptococcus invasivo resultó más sensible a los antibióticos que los otros grupos. Los serotipos asociados a multirresistencia fueron 19F y 23F. Conclusiones: Ninguna de las vacunas protege a todas las infecciones causadas por Streptococcus pneumoniae, en nuestro medio.Objectives: To identify isolated S. pneumoniae serotypes correlating them with those covered by existing vaccines and determining antimicrobial resistance. Design: Descriptive, observational and longitudinal study. Setting: Daniel A Carrion Tropical Medicine Institute, School of Medicine, UNMSM. Biologic material: Streptococcus pneumoniae stocks. Interventions: Forty Streptococcus pneumoniae stocks isolated between 2002 and 2006 were serotyped at Carlos III Health Institute in Madrid, Spain; 15 were invasive, 11 isolated from localized infections, 6 from carriers and 8 were multiresistant. Main outcome measures: Protection of local existing vaccines to Streptococcus pneumoniae infections. Results: There were 14 different serotypes and most identified groups were 23, 19 and 6, 28,6% contained in the 7–valent vaccine, 42,9% in the 9-valent, 50% in the 11-valent and 71,4% in the 23-valent; 57,5% were resistant to penicillin and 30% to erythromycin. The invasive Streptococcus group proved to be more sensitive to antibiotics than the other groups; 19F and 23F serotypes were multiresistant. Conclusions: In our environment none of the studied vaccines protected all the infections caused by Streptococcus pneumoniae. Resistance to penicillin was high

Neonatal infections etiology and antimicrobial sensitivity

OBJETIVO: Determinar los gérmenes más frecuentes causantes de infecciones en recién nacidos hospitalizados y la susceptibilidad antimicrobiana. MATERIAL Y MÉTODOS: Revisión de historias clínicas del Servicio de Neonatología del Instituto de Salud del Niño (Lima, Perú) y resultados de cultivos positivos y antibiogramas, desde junio de 1999 hasta mayo de 2002. RESULTADOS: Durante el periodo de estudio hubo 94 pacientes con sepsis confirmada; de ellos se obtuvo 161 muestras (sangre, orina, catéteres EV, entre otras). Los gérmenes más frecuentes fueron: Staphylococcus epidermidis (38,3%), Staphylococcus aureus (12%), Klebsiella sp (10%), Alcaligenes fecalis (4,6%), Acinetobacter sp (4%) y Pseudomonas aeruginosa (4%). S. epidermidis mostró sensibilidad de 100% a vancomicina, 90% a cefotaxima, 50% a amikacina y ampicilina y 37% a oxacilina. Klebsiella mostró sensibilidad de 100% a ciprofloxacina e imipenen, 44% a ceftriaxona, 20% a ceftazidima y 14% a ampicilina; la resistencia a amikacina fue del 100%. S. aureus mostró sensibilidad de 100% a vancomicina, 57% a cefotaxima y 33% a oxacilina. CONCLUSIONES: Las bacterias gram positivas son las más frecuentes como causa de sepsis neonatal. In vitro, los gérmenes más frecuentes muestran resistencia mayor de 50% a ampicilina y amikacina; y vancomicina es el antibiótico al cual muestran mayor susceptibilidad las especies de Staphylococcus.OBJECTIVE: To determine the most frequent bacteria causing infection in hospitalized newborns, and their antimicrobial sensitivity. MATERIAL AND METHODS: Review of the clinical files of Neonatology Division, Children’s Health Institute (Lima, Peru) and identification of the positive cultures and antibiograms from June 1999 until May 2002. RESULTS: During this three year period there were 94 patients with confirmed sepsis from whom 161 samples were obtained (blood, urine, IV catheters, and others ). The most frequently isolated bacteria were: Staphylococcus epidermidis (38,3%), Staphylococcus aureus (12%), Klebsiella sp (10%), Alcaligenes fecalis (4,6%), Acinetobacter sp (4%) and Pseudomonas aeruginosa (4%). S. epidermidis showed 100% sensitivity to vancomycin, 90% to cefotaxime, 50% to amikacin and ampicillin and 37% to oxacillin. Klebsiella showed 100% sensitivity to ciprofloxacin and imipenem, 44% to ceftriaxone, 20% to ceftazidime and 14% to ampicillin; bacterial resistance to amikacin was 100%. S. aureus showed 100% sensitivity to vancomycin, 57% to cefotaxime and 33% to oxacillin. CONCLUSIONS: Gram positive bacteria are the most frequent cause of neonatal sepsis. In vitro, 50% of the most frequent bacteria showed resistance to ampicillin and amikacin. The Staphylococcus species showed greater in vitro sensitivity to vancomycin

Identificación de Arcobacter en niños y adultos con/sin diarrea y en reservorios animales: aves, ganado vacuno y porcino, peces y mariscos

Objetivos: Conocer la prevalencia de Arcobacter en niños y adultos con/sin diarrea y en animales: aves, ganado vacuno y porcino, peces y mariscos. Diseño: Estudio transversal descriptivo. Institución: Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrión, Facultad de Medicina, UNMSM, Instituto Nacional de Salud del Niño, Instituto Materno Infantil de San Bartolomé y Hospital Arzobispo Loayza. Material biológico: Aislamientos bacterianos de humanos y animales. Intervenciones: Búsqueda activa de Arcobacter sp. en humanos y animales. Principales medidas de resultados: Porcentajes. Resultados: De 197 niños incluidos en el estudio, 100 tenían diarrea y de estos en dos (2%) se aisló A. butzleri; entre los niños sin diarrea, no se aisló el germen. De 232 adultos, 52 tuvieron diarrea y 180 no; el único aislamiento se obtuvo de este último grupo. Los animales con mayor prevalencia de Arcobacter sp. fueron los bovinos (25%) y porcinos (29,2%). Entre las especies marinas con prevalencias altas: choro 24% (12/50) y langostinos 22% (11/50). Conclusiones: De acuerdo a los resultados de este estudio, Arcobacter resultó una bacteria zoonótica potencialmente patógena para el ser humano, en particular para los niños, así como hubo presencia de este agente en especies animales utilizadas para el consumo humano

Aeromonas IN CHILDREN LESS THAN 5 YEAR-OLD WITH ACUTE DIARRHEA

OBJETIVO: Determinar la importancia de Aeromonas como agente diarreogénico en niños meno- res de 5 años, así como comparar su frecuencia con la de otros enteropatógenos. MATERIAL Y MÉTODOS: Entre 1998 y 1999, se tomó 285 muestras de heces de niños con diarrea aguda, en 5 Centros Hospitalarios, las que fueron enviadas al Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrión en el medio de transporte Cary Blair, para su procesamiento e identificación de Aeromonas por el método Aerokey II. RESULTADOS: Aeromonas fue la bacteria más aislada entre los enteropatógenos, sobre todo en niños menores de 2 años y en verano, y la Aeromonas caviae fue la especie más frecuente. Aeromonas fue aislada en la mayoría de los casos del agar TCBS, por lo que empleamos discos de O/129 para diferenciarla de Vibrio cholerae. Todas las Aeromonas fueron sensibles in vitro a furazolidona y neomicina. CONCLUSIONES: Aeromonas fue el prin- cipal agente etiológico de la diarrea aguda acuosa, en niños menores de 5 años.OBJECTIVE: To determine Aeromonas importance as diarrhea agent in children less than 5 year- old and compare its frequency with other enteropathogens. MATERIAL AND METHODS: Between 1998 and 1999 285 fecal samples were taken from children with acute diarrhea in 5 hospitals, which were then sent to Daniel A. Carrión Institute of Tropical Medicine in Cary Blairs transportation medium for processing by Aerokey II method. RESULTS: Aeromonas was the most frequent bacteria isolated among enteropathogens, mainly in children less than 2-year old and in summer, and Aeromonas caviae was the most frequent species. Aeromonas was mainly isolated in agar TCBS, employing O/129 disks to differentiate it from Vibrio cholerae. All Aeromonas were sensitive in vitro to furazolidone and neomycin. CONCLUSIONS: Aeromonas was the main etiological agent of aquous acute diarrhea in children less than 5 year-old

Actividad in vitro de diez plantas medicinales sobre diez cepas diferentes de Streptococcus pneumoniae

Objetivos: Determinar la efectividad antibacteriana de diez plantas medicinales frente a Streptococcus pneumoniae. Diseño: Estudio experimental Institución: Instituto de Medicina Tropical, UNMSM. Material biológico: Aislamientos bacterianos de Streptococcus pneumoniae, plantas medicinales. Intervenciones: Los extractos de 10 plantas medicinales fueron puestos en contacto in vitro mediante el método de disco difusión con 10 cepas de Streptococcus pneumoniae. Principales medidas de resultados: Actividad de las plantas medicinales sobre las cepas de Streptococcus pneumoniae. Resultados: Almendro y Bellaco caspi fueron las únicas plantas que dieron pequeño halo de inhibición con algunas cepas; con almendro se inhibió 2 cepas y con Bellaco caspi se inhibió 7 cepas y 3 resultaron resistentes. Estos resultados no tuvieron relación con el serotipo del neumococo ni con los antibióticos utilizados en los antibiogramas realizados previamente. Conclusiones: Bellaco caspi podría ser una alternativa para atacar al neumococo en la nasofaringe; pero, por haber presentado resistencia a 3 cepas de Streptococcus pneumoniae, antes de usarlo sería conveniente desarrollar un antibiograma de los neumococos contra las plantas medicinales. En los experimentos será recomendable emplear diferentes cepas de una misma bacteria

Identificación de especies de Malassezia aisladas de piel sana en pobladores de Lima, Perú

Objective: To identify Malassezia species in healthy skin seborrhea areas in Lima inhabitants. Design: Cross-sectional study. Setting: Daniel Alcides Carrion Tropical Medicine Institute, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Peru. Participants: Asymptomatic persons. Interventions: Skin samples were collected from 129 asymptomatic residents of several districts of Lima city using Mariat and Adan-Campos’ technique. Malassezia isolation was performed in modified Dixon medium and incubated at 32° C for 7 days. Colonies were identified by macro and micro morphological characteristics and typing was determined by biochemical and physiological properties using Guillot’s technique. Main outcome measures: Malassezia species, participants’ gender, age and anatomical region. Results: Malassezia spp was isolated in 43.4% of the residents, 49.2% in men and 37.5% in women. From various body regions 68 cultures were positive: scalp 31 (45.6%), back 36 (52.9%) and frontal region 1 (1.5%). Isolates most common age group (47.2%) was that of adolescents-young (14-25 year-old). M. slooffiae was found in 83.8% and M. obtusa in 16.2% of cases. Conclusions: Malassezia spp. was present in healthy human skin. M. slooffiae was the predominant species in positive cases (83.8%) followed by M. obtusa (16.2%).Objetivo: Identificar las especies de Malassezia en zonas seborreicas de piel sana en población limeña. Diseño: Estudio descriptivo transversal. Lugar: Instituto de Medicina Tropical ‘Daniel Alcides Carrión’, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú. Participantes: Pobladores asintomáticos. Intervenciones: Empleando la técnica de Mariat y Adan-Campos, se recolectó muestras de piel de 129 pobladores asintomáticos de diversos distritos de la ciudad de Lima. El aislamiento de Malassezia se realizó en medio Dixon modificado e incubado a 32ºC por 7 días, la identificación de las colonias por sus características macro y micromorfológicas, y la tipificación mediante el estudio de las propiedades bioquímicas y fisiológicas según la técnica de Guillot y col. Principales medidas de resultados: Especie de Malassezia, sexo, edad y región anatómica. Resultados: Se aisló Malassezia spp en 43,4% de los pobladores, obteniéndose 49,2% en varones y 37,5% en mujeres. De las diferentes regiones corporales, 68 cultivos fueron positivos: cuero cabelludo 31 (45,6%), espalda 36 (52,9%) y región frontal 1 (1,5%). El grupo etario con mayor frecuencia de aislamientos (47,2%) fue el de 14 a 25 años (adolescentes jóvenes). M. slooffiae fue encontrado en 83,8% y M. obtusa en 16,2% de los casos. Conclusiones: Se encontró Malassezia spp. en la piel humana sana. M. slooffiae fue la especie predominante de los casos positivos (83,8%) seguido de M. obtusa (16,2%)