Análises químicas e citotóxicas de três variedades de própolis brasileiras (própolis verde, própolis jataí e própolis marrom) e sua atividade in vitro anti-Sporothrix brasiliensis

In this study, we described the antifungal activity of three Brazilian propolis extracts: brown, green and from jataí bees against Sporothrix brasiliensis. The extracts were obtained from ethanolic extraction and their chemical composition was determined by high-performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry. The cellular toxicity was measured in MDBK (Madin-Darby Bovine Kidney) cells and quantified by the MTT assay (3- (4,5 dimethylthiazol-2yl -2,5-diphenyl-2H bromine tetrazolato). For antifungal activity, the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) were determined by broth microdilution. The results showed that cell toxicity was not observed at lower concentrations (0.097 to 0.39μg/ml) for all extracts in comparison to cell control. Among the chemical compounds identified, caffeic acid, p-coumaric acid, chlorogenic acid, ferulic acid and rutin were quantified. In antifungal activity, green and jataí did not exhibit activity against the isolates (MIC and MFC greater than 0.78mg/ml). However, all isolates of S. brasiliensis were sensitive to brown propolis (MIC of 0.09 to 0.78mg/ml), including the standard strain (P<0.001). Among the Brazilian propolis studied, the brown propolis showed activity against the S. brasiliensis isolates and more studies should be undertaken in order to evaluate its promising use in the treatment of sporotrichosis.Neste estudo, descreveu-se a atividade antifúngica de três extratos de própolis brasileiras: marrom, verde e de abelhas jataí (Tetragonisca angustula), contra Sporothrix brasiliensis. Os extratos foram obtidos de extração etanólica, e a sua composição química foi determinada por cromatografia líquida de alta eficiência, acoplada à espectrometria de massa. A toxicidade celular foi medida em células MDBK (Madin-Darby Bovine Kidney), avaliada por observação microscópica e quantificada pelo ensaio MTT (3- (4,5-dimetiltiazol-2-ilo -2,5-difenil-2H bromo tetrazolato). Para a atividade antifúngica, determinou-se a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração fungicida mínima (CFM) por meio de microdiluição em caldo. Os resultados mostraram que a toxicidade celular não foi observada em concentrações menores (0,097 a 0,39μg/ml). Entre os compostos químicos identificados, foram quantificados o ácido cafeico, ácido p-cumárico, ácido clorogênico, ácido ferúlico e a rutina. Na atividade antifúngica, as própolis verde e jataí não apresentaram atividade contra os isolados (CIM e CFM maior que 0,78mg/ml), porém todos os isolados de S. brasiliensis foram sensíveis à própolis marrom (CIM de 0,09 a 0,78mg/ml), incluindo a cepa padrão (P<0,001). Entre as própolis brasileiras estudadas, a marrom mostrou atividade contra S. brasiliensis, e mais estudos devem ser realizados para avaliar seu uso promissor no tratamento da esporotricose

Características da produção de leite no Sul do Brasil

This paper aimed to describe milk production in Southern Rio Grande do Sul state, Brazil, and to identify factors that affect milk quality at this region. The average age of regional dairy farmers is 49, and 67.9% has not concluded elementary school. Dairy farming is carried out on properties with an average of 26.06 hectares and 8.4 lactating cows. Most of them (32.83%) yield 50 to 100 L/day. Among the properties, 13.21% yield up to 30 L/day, and only 1.89% produces over 500 milk liters a day. Average yield was 6.8 L/day. Regarding to milking procedure, 39.3% farmers milk manually the animals, only 14.2% performed pre-milking teat disinfection, and 53.9% uses a single cloth to dry all animal teats. For infrastructure, 52.8% milks animals in wooden cowsheds. We observed that the average somatic cell count (SCC) was within legal parameters, presenting negative correlation with milk production (r = -0.23) and lactose content (r = -0.39). However, the total bacterial count (TBC) was above legal parameters. Education level seems to interfere in management and milk quality, because the less educated groups are, the less adequate are infrastructure, management, and product quality. Data show that there is a lower quality milk production where poor management techniques are adopted and owner education level affects milk quality. Este trabalho teve como objetivo descrever a produção de leite no Sul do Rio Grande do Sul, Brasil, e identificar os fatores que afetam a qualidade do leite na região. A idade média dos produtores de leite da região é de 49 anos, e 67,9% não concluíram o ensino fundamental. A atividade leiteira é realizada em propriedades com média de 26,06 hectares e 8,4 vacas em lactação. A maioria dos produtores (32,83%) produz entre 50 a 100 litros de leite por dia. Entre as propriedades, 13,21% produz até 30 L/dia, e apenas 1.89% produz mais de 500 litros de leite por dia. A produtividade média foi de 6,8 L/vaca/dia. No que diz respeito ao procedimento de ordenha, 39,3% dos produtores de leite ordenha seus animais manualmente, apenas 14,2% realizam desinfecção dos tetos antes da ordenha, e 53,9% usa um único pano para secar todos os tetos dos animais. Com relação à infra-estrutura, 52,8% dos produtores ordenham seus animais em estábulos de madeira. Observou-se que a contagem média de células somáticas (CCS) ficou dentro dos parâmetros legais, apresentando correlação negativa com a produção de leite (r = -0,23) e teor de lactose (r = -0,39). No entanto, a contagem bacteriana total (CBT) ficou acima dos parâmetros legais. O nível de escolaridade parece interferir na adoção de técnicas adequadas de ordenha e, consequentemente, na qualidade do leite, porque os produtores menos instruídos trabalham em uma infra-estrutura mais precária e obtém um produto de menor qualidade. Os dados mostram que há produção de leite de menor qualidade em estabelecimentos onde o nível de escolaridade do proprietário é baixo e são adotadas técnicas inadequadas de manejo de ordenha. Portanto, a instrução do proprietário afeta a qualidade do leite

Composición química y actividad in vitro de propóleo verde y jataí de brasil en aislamientos clínicos de Sporothrix brasiliensis

O objetivo deste estudo foi avaliar a composição química e a atividade antifúngica da própolis Brasileira Verde (abelhas Apis mellifera) e Jataí (abelhas Tetragonisca angustula) frente ao Sporothrix brasiliensis provenientes de isolados clínicos de cães, gatos e humanos. Os produtos apícolas foram preparados nas formas de extratos hidroalcoólicos, e a composição química foi determinada pela cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas. A atividade antifúngica sobre S. brasiliensis (n: 20) foi determinada através da técnica de microdiluição em caldo (M38-A2 do Clinical and Laboratory Standards Institute), adaptado para o uso de produtos naturais. Os extratos apícolas foram testados nas concentrações de 50 a 1,56 mg/mL, e o itraconazol utilizado como controle antifúngico foi testado nas concentrações de 16 a 0,03 μg/mL. Os testes foram realizados em duplicatas e os resultados expressos em concentração inibitória mínima (CIM). Na análise química, foi observada um maior conteúdo fenólico total em relação ao conteúdo flavonóide total, para ambos os extratos, havendo um maior conteúdo fenólico na própolis verde. Dos seis ácidos fenólicos e nove flavonóides detectados pela cromatografia, foram quantificados rutina, ácido cafeico, ácido clorogênico, ácido ferúlico e ácido p-cumárico, sendo este o último presente em altas concentrações para ambas as amostras, especialmente na própolis verde. Ao avaliar a atividade antifúngica sobre S. brasiliensis, nenhum dos extratos apresentou atividade inibitória nas concentrações testadas (CIM >50 mg/mL). Os isolados clínicos apresentaram sensibilidade in vitro ao itraconazol nas CIM >16 a 0,25 μg/mL. Entretanto, foram observadas cepas resistentes ao itraconazol.The aim of this study was to evaluate the chemical composition and antifungal activity of Green (bee Apis mellifera) and Jataí (bee Tetragonisca angustula) Brazilian propolis against Sporothrix brasiliensis obtained from clinical isolates of dogs, cats and humans. The products were prepared as hydroalcoholic extracts, and the chemical composition was analyzed by high efficiency liquid chromatography coupled with a mass spectrometer. The antifungal activity on S. brasiliensis (n: 20) was determined through the broth microdilution technique (M38-A2 document of Clinical and Laboratory Standards Institute), adapted to natural products. The extracts were tested from the concentrations of 1.56 to 50 mg/mL, and itraconazole was used as antifungal control from 0.03 to 16 μg/mL. The tests were performed in duplicate and the results were expressed in minimal inhibitory concentrations (MIC). In the chemical analysis, a higher total phenolic content in relation to total flavonoid content was observed for both extracts, with a higher phenolic content in the green propolis. Among the six phenolic acids and nine flavonoids detected by chromatography, rutin, cafeic acid, chlorogenic acid, ferulic acid and p-coumaric acid were the compounds quantified, being this last compound present in high concentrations for both samples, mainly in green propolis. In the antifungal activity on S. brasiliensis, none of the extracts showed inhibitory activity in the tested concentrations (MIC >50 mg/mL). The clinical isolates showed in vitro sensibility to itraconazole in the MIC up to 16 to 0,25 μg/mL, but itraconazole-resistant isolates were observed.El objetivo del estudio fue evaluar la composición química y la actividad antifúngica de propóleos Brasileños Verde (abejas Apis mellifera) y Jataí (abejas Tetragonisca angustula) contra Sporothrix brasiliensis a partir de aislados clínicos de perros, gatos y seres humanos. Los productos fueron preparados en forma de extractos hidroalcohólicos y la composición química fue determinada por cromatografia líquida de alta resolución acoplada a espectrometría de masas. La actividad antifúngica contra S. brasiliensis (n: 20) fue determinada por la técnica de microdilución en caldo (M38-A2 do Clinical and Laboratory Standards Institute), adaptado para el uso de productos naturales. Los extractos de propóleos fueron evaluados en concentraciones de 50 a 1,56 mg/mL y el itraconazol utilizado como un control antifúngico fue testado en concentraciones de 16 a 0,03 μg/mL. Los tests fueron realizados por duplicado y los resultados se expresaron como concentración inhibitoria mínima (CIM). En el análisis químico, un mayor contenido total fenólico en relación al contenido total de flavonoides se observó para ambos extractos, con un mayor contenido fenólico en propóleo verde. De los seis ácidos fenólicos y nueve flavonoides detectados por cromatografía, los compuestos cuantificados fueron rutin, ácido clorogénico, ácido cafeico, ácido ferúlico y ácido p-cumárico. Este último compuesto estaba presente en altas concentraciones para ambas muestras, especialmente en propóleo verde. Al evaluar la actividad antifúngica contra S. brasiliensis, ninguno de los extractos mostraron actividad inhibitoria en las concentraciones (CIM >50 mg/mL). Los aislados clínicos mostraron susceptibilidad in vitro al itraconazol en las CIM > 16 a 0,25 μg/mL. Sin embargo, se observaron aislados resistentes a itraconazol

Handling milking as a risk factor in the occurrence of microorganisms in raw milk

Milk is naturally a good provider of a whole range of nutrients, however an inadequate milking may significantly interfere on its nutritional and microbiological quality. The main purpose of this study was to isolate and identify microorganisms from bulk tanks of southern Rio Grande do Sul state, Brazil and establish a correlation between animal management and presence of pathogens in the milk. To this end, raw milk samples were collected from different dairy herds and submitted to microbiological analyses. Mean bacterial counts were Staphylococcus sp. (5,32x106 CFU/mL), S. aureus (1,33x105 CFU/mL) and enterobacteria (1,82x107 CFU/mL). The major pathogens isolated and their respective frequency were Escherichia coli (27.8%), Streptococcus agalactiae (6.2%), S. dysgalactiae (37.2%), S. uberis (16.8%), Candida sp. (15.7%), Aspergillus sp. (5.8%), Trichosporum sp. (3.6%) and Cryptococcus sp. (1.5%). In addition, it was identified an Odds Ratio of 3.2 for S. agalactiae regarding manual milking and 3.1 when a single cloth towel was used for drying the udder. For S. bovis the Odds Ratio was 2.8 in properties milking their animals in stalls wood. Somatic cell count (SCC) was significantly higher (p=0,003) in milk samples manually extracted in comparison with machine milking. Likewise, manual milking resulted in the increase in S. aureus counts (p=0.04). Pre-dipping practice have contributed for a significant reduction (p=0.04) in the Staphylococcus sp. counts. Taken together, our results show that the adoption of poor management practices can negatively interfere in the microbiological quality of milk increasing the risks of occurrence of pathogens and their counts