N011 Culture et délivrance au niveau du tissu cardiaque de cardiomyocytes issus de cellules souches embryonnaires humaines au moyen de matrices tridimensionelles poreuses à base de polysaccharides

Un intérêt particulier a été porté ces dernières années à la thérapie cellulaire réparatrice cardiaque. Les cellules souches embryonnaires humaines (hES) sont une source prouvée de cardiomyocytes et les premières données in vivo suggèrent leurs capacités fonctionnelles à type d’effet pacemaker ou réparatrices d’infarctus du myocarde. Nous avons étudié un mode de délivrance des cellules hES dans le tissu cardiaque basé sur une matrice 3D servant de support à la fois pour la culture des cellules et pour leur implantation au contact du myocarde.Des matrices poreuses de polysaccharides (pullulane et dextrane) ont été préparées par réticulation chimique permettant de réaliser des films avec des pores de 100 à 200 microns. Les matrices ont été recouvertes de différentes protéines; les cellules hES indifférenciées ont été cultivées sur fibroblastes murins, en milieu supplémenté avec du sérum knock-out et du FGF2. Dans une première partie in vitro, nous avons mis en évidence par q-RT-PCR, observation microscopique et imagerie confocale, la différenciation en cardiomyocytes de cellules hES directement cultivées dans les matrices en présence d’un milieu inducteur de différentiation; les matrices permettaient aussi la culture, l’expansion et la survie à long terme de parties battantes obtenues à partir de corps embryoïdes issus d’hES et isolées manuellement. Nous avons ensuite étudié le devenir des cellules hES dans un modèle de lésions cardiaques par dépôt de films poreux cellularisés sur les cœurs infarcis de souris NOD SCID. L’identification est confirmée pour les cardiomyocytes issus d’ES d’une lignée de cellules hES H9 GFP+ ainsi que d’une lignée de cellules hES dans laquelle l’expression de la GFP est sous contrôle d’un promoteur spécifique du tissu cardiaque, Nkx2.5. Nous avons ainsi mis en évidence la migration des cellules ES à différents stades de différenciation à partir des matrices 3D vers les souris NOD SCID ainsi que leur différenciation en cardiomyocytes. Les données de PCR quantitative sur la base du transgène GFP mettent en évidence une meilleure survie des ES délivrées par l’intermédiaire des matrices 3D en comparaison avec une administration directe. Une étude fonctionnelle comparative est en cours

Charcot-Marie-Tooth disease type 2CC due to NEFH variants causes a progressive, non-length-dependent, motor-predominant phenotype

Objective: Neurofilaments are the major scaffolding proteins for the neuronal cytoskeleton, and variants in NEFH have recently been described to cause axonal Charcot-Marie-Tooth disease type 2CC (CMT2CC). Methods: In this large observational study, we present phenotype–genotype correlations on 30 affected and 3 asymptomatic mutation carriers from eight families. Results: The majority of patients presented in adulthood with motor-predominant and lower limb-predominant symptoms and the average age of onset was 31.0±15.1 years. A prominent feature was the development of proximal weakness early in the course of the disease. The disease progressed rapidly, unlike other Charcot-Marie-Tooth disease (CMT) subtypes, and half of the patients (53%) needed to use a wheelchair on average 24.1 years after symptom onset. Furthermore, 40% of patients had evidence of early ankle plantarflexion weakness, a feature which is observed in only a handful of CMT subtypes. Neurophysiological studies and MRI of the lower limbs confirmed the presence of a non-length-dependent neuropathy in the majority of patients. All families harboured heterozygous frameshift variants in the last exon of NEFH, resulting in a reading frameshift to an alternate open reading frame and the translation of approximately 42 additional amino acids from the 3' untranslated region (3′-UTR). Conclusions: This phenotype–genotype study highlights the unusual phenotype of CMT2CC, which is more akin to spinal muscular atrophy rather than classic CMT. Furthermore, the study will enable more informative discussions on the natural history of the disease and will aid in NEFH variant interpretation in the context of the disease’s unique molecular genetics

Coronary artery surgery: cardiotomy suction or cell salvage?

Coronary artery bypass grafting (CABG) today results in what may be regarded as acceptable levels of blood loss with many institutions avoiding allogeneic red cell transfusion in over 60% of their patients. The majority of cardiac surgeons employ cardiotomy suction to preserve autologous blood during on-pump coronary artery bypass surgery; however the use of cardiotomy suction is associated with a more pronounced systemic inflammatory response and a resulting coagulopathy as well as exacerbating the microembolic load. This leads to a tendency to increased blood loss, transfusion requirement and organ dysfunction. Conversely, the avoidance of cardiotomy suction in coronary artery bypass surgery is not associated with an increased transfusion requirement. There is therefore no indication for the routine use of cardiotomy suction in on-pump coronary artery surgery

Elevation of the antifibrotic peptide N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline: a blood pressure-independent beneficial effect of angiotensin I-converting enzyme inhibitors

Blockade of the renin-angiotensin system (RAS) is well recognized as an essential therapy in hypertensive, heart, and kidney diseases. There are several classes of drugs that block the RAS; these drugs are known to exhibit antifibrotic action. An analysis of the molecular mechanisms of action for these drugs can reveal potential differences in their antifibrotic roles. In this review, we discuss the antifibrotic action of RAS blockade with an emphasis on the potential importance of angiotensin I-converting enzyme (ACE) inhibition associated with the antifibrotic peptide N-acetyl-seryl-aspartyl-lysyl-proline (AcSDKP)

Efficacité différentielle de l'aprotinine et de l'acide tranexamique selon le type de chirurgie cardiaque

Objective: To analyse the effectiveness and toxicity of aprotinin compared with tranexamic acid according to the type of cardiac surgery: coronary artery bypass or valve surgery. Setting: A French general hospital of 700 acute beds. Method: A retrospective study of benefit/risk ratio of aprotinin in adult cardiac surgery, which compare two periods (2000 vs. 2005) where mainly only anti-fibrinolytic treatment changed. Aprotinin was compared with tranexamic acid according to the type of surgery: coronary artery bypass or valve surgery. This study was conducted before the marketing application authorization of aprotinin was suspended. Main outcome measure: Blood loss during the first 24 h after intervention. The second outcome measures were mortality and spontaneous declaration of adverse drug effects. Results: Six hundred and seventy-six patients were included in our study. For coronary artery bypass, aprotinin appeared to be more effective than tranexamic acid to reduce blood loss after intervention (719 ± 41 mL vs. 947 ± 34 mL; p < 0.0001 during the first 24 h). For valvular surgery, there was no difference between the two anti-fibrinolytic drugs to decrease postoperative bleeding. No acute toxic effects were reported through the data bank of the department of cardiovascular surgery. Conclusions: Our preliminary results indicated that tolerance to aprotinin was as good as for tranexamic acid. Concerning its effectiveness, results differed according to the type of surgery. The benefit/risk ratio of aprotinin in our study was positive for coronary artery bypass surgery, but the use of tranexamic acid in valve surgery was as efficient and much less expensive than aprotinin. Our data suggest that even if the marketing application authorization of aprotinin was suspended, this drug should have clinical benefit for coronary artery bypass surgery. Therefore, our study shows that it is difficult to reach an unequivocal result about the use of aprotinin. Further investigations of aprotinin must be conducted in different types of cardiac surgery and among different patients populations like in pediatrics in which its efficiency and safety profiles are not clear. © 2010 Elsevier Masson SAS. All rights reserved.Objectifs Étude de l’efficacité et de la toxicité de l’aprotinine comparativement à l’acide tranexamique selon deux types de chirurgie : pontage coronarien ou chirurgie valvulaire. Contexte Centre hospitalier français de 700 lits. Patients et méthode Étude rétrospective mesurant le rapport bénéfice/risque de l’aprotinine utilisée chez l’adulte en chirurgie cardiaque comparant deux périodes (2000 versus 2005) dont les changements en pratique concernaient essentiellement les traitements hémostatiques. L’aprotinine a été comparée à l’acide tranexamique selon deux types de chirurgie : le pontage coronarien et la chirurgie valvulaire. Cette étude a été effectuée avant le retrait de commercialisation de l’aprotinine. Principal critère d’évaluation Volume de perte sanguine durant les premières 24 heures après l’intervention. Les critères secondaires d’évaluation étaient le taux de mortalité et d’effets indésirables. Résultats Six cent soixante-seize patients ont été inclus dans l’étude. Dans le cas du pontage coronarien, l’aprotinine semblait diminuer les pertes sanguines plus efficacement que l’acide tranexamique (719 ± 41 mL versus 947 ± 34 mL ; p < 0,0001 durant les premières 24 heures). En chirurgie valvulaire, aucune différence significative n’a été observée entre les deux hémostatiques quant à la diminution des saignements postopératoires. Aucun effet indésirable aigu n’a été relevé dans la base de données du département de chirurgie cardiaque. Conclusions Cette étude a montré que l’aprotinine et l’acide tranexamique ont un profil de tolérance similaire. Concernant l’efficacité, nos résultats diffèrent selon le type de chirurgie. Le ratio bénéfice/risque est en faveur de l’aprotinine pour le pontage coronarien, mais l’utilisation de l’acide tranexamique en chirurgie valvulaire est aussi efficace mais beaucoup moins chère que l’aprotinine. Nos résultats suggèrent que même si l’aprotinine a été retirée du marché, elle pouvait présenter un intérêt clinique dans le pontage coronarien. Par conséquent, notre étude a montré qu’il est difficile d’aboutir à un résultat univoque concernant l’utilisation de l’aprotinine. D’autres investigations seraient nécessaires afin d’étudier l’aprotinine dans d’autres types de chirurgie cardiaque et chez différentes populations de patients, notamment chez les enfants dont les profils d’efficacité et de tolérance de l’aprotinine ne sont pas encore établis

Effective limb transduction with phenotypic correction after injection of rAAV8-U7snRNA in GRMD dogs

International audienc

Biodistribution and shedding of rAAV8-U7 snRNA vectors after locoregional injection in the forelimb of GRMD dogs

National audienc