The use of doxorubicine at low doses for elevation of LAK-activity toward explants and cells of MC-rhabdomyosarcoma and В16 melanoma resistant to doxorubicin

Aim: To study the influence of doxorubicin at low doses on antitumor action of activated (LAK) and non-activated lymphocytes from lymph nodes toward tumor cells of mice bearing doxorubicin-resistant and doxorubicin-sensitive transplantable MC-rhabdomyosarcoma and B16 melanoma. Materials and Methods: The study was carried out on BALB/c mice bearing MC-rhabdomyosarcoma and С57BL/6 mice bearing В16 melanoma. Explants, tumor cells and lymphocytes were cultivated in diffusion chambers, filters were stained with hematoxylin by Karachi, and morphology of preparations was examined. Results: At the day 7 of tumor growth in mice bearing resistant MC-rhabdomyosarcoma, non-activated lymphocytes pretreated with low-dose doxorubicin possess the highest antitumor activity, and in mice bearing doxorubicin-resistant B16 melanoma the highest antitumor activity was detected for lymphocytes after combined cultivation with IL-2 and doxorubicin. At the day 14 of tumor growth, LAK obtained from lymphocytes pretreated with doxorubicin possess the highest cytotoxic activity toward resistant tumor cells both of MC-rhabdomyosarcoma and B16 melanoma. There was no such effect in the case of sensitive tumors. Conclusion: To elevate antitumor activity of LAK toward MC-rhabdomyosarcoma and B16 melanoma cells, low doses of doxorubicin could be used at certain conditions of LAK generation.Цель: изучить влияние малых доз доксорубицина на противоопухолевое действие активированных (ЛАК) и неактивированных лимфоцитов лимфатических узлов по отношению к опухолевым клеткам мышей с резистентными и чувствительными к доксорубицину перевивной МХ-рабдомиосаркомой и меланомой В16. Материалы и методы: исследования проведены на мышах линии BALB/c с МХ-рабдомиосаркомой и С57BL/6 c меланомой В16. Эксплантаты, опухолевые клетки и лимфоциты культивировали в диффузионных камерах и окраской фильтров гематоксилином по Караччи. Исследовали морфологическую картину полученных препаратов с учетом критериев роста опухоли. Результаты: сопоставление результатов противоопухолевой активности активированных и неактивированных лимфоцитов, полученных в различных условиях, показало следующее. На 7-е сутки у мышей з резистентной МХ-рабдомиосаркомой наибольшей противоопухолевой активностью обладали неактивированные лимфоциты, предварительно обработанные малыми дозами докорубицина, а у мышей з резистентной меланомой В16 — лимфоциты после сочетанного культивирования с ИЛ-2 и доксорубицином. На 14-е сутки роста опухоли наибольшей цитотоксической активностью обладали ЛАК, полученные из лимфоцитов, предварительно обработанных доксорубицином, в отношении резистентных опухолевых клеток как перевивной МХ-рабдомиосаркомы, так и меланомы В16. Относительно чувствительных клеток указанных опухолей такой эффект не отмечался. Выводы: для усиления противоопухолевой активности ЛАК по отношению к клеткам МХ-рабдомиосаркомы и меланомы В16, резистентных к доксорубицину, могут быть использованы малые дозы доксорубицина при соблюдении определенных условий получения ЛАК

Expression of E-cadherin in drug resistant human breast cancer cells and their sensitivity to lymphokine-activated lymphocytes action

Aim: To analyze the correlation between the elevated sensitivity of drug resistant breast cancer cells to the action of lymphokine-activated lymphocytes (LAK) and expression of E-cadherin and other marker proteins by cancer cells and lymphocytes. Methods: Breast tumor explants were cultured with autologous lymphocytes in double diffusion chambers. The results were evaluated by morphological criteria of explants growth. Expression level of proteins on tumor cells was analyzed using immunohistochemical method on paraffin embedded sections, and by indirect immunofluorescence — on lymphocytes. Results: Significant decrease of E-cadherin expression and significant increase of nuclear antigen of proliferating cells expression have been detected on drug resistant malignant human breast tumor (DRHBT) cells compared with drug sensitive breast tumor (DSHBT) cells. Autologous LAK possessed the highest antitumor activity against DRHBT cells that was associated with high expression level of soybean lectin receptor. Conclusion: Malignant drug resistant tumors are characterized by reverse relation between E-cadherin expression level and their proliferative activity. Marked antitumor action of LAK against these tumors is associated with high expression level of soybean lectin receptor on the lymphocytes

Expression of CD40 by the cells of benign and malignant breast tumors and antitumor action of autologous lymphocytes against chemoresistant and chemosensitive tumors

Aim: To study the expression of CD40 by cells of benign and malignant tumors of mammary gland, and to compare the efficacy of lymphocytes antitumor activity against drug resistant and sensitive breast tumors in relevance to CD40 expression. Methods: Breast tumor explants were cultured with autologous lymphocytes in double diffusion chambers. The results were evaluated by morphological criteria of explants growth. Expression level of molecules on tumor cells was analyzed using immunohistochemical method (paraffin embedded slides), and on lymphocytes — by the method of indirect immunofluorescence. Results: The highest level of CD40 expression was detected on cells of chemoresistant malignant breast tumors, and the lowest one — on cells of benign breast tumors. The decreased CD40 expression on lymphocytes from patients with drug resistant breast cancer was compared with that on lymphocytes of the patients with drug sensitive breast cancer. The study of antitumor activity of autologous lymphokine activated killer cells (LAK) has shown their pronounced antitumor activity against drug resistant malignant breast tumors. Conclusion: Marked antitumor activity of LAK from the patients with drug resistant breast cancer is associated with high expression level of CD40 on tumor cells and with its decreased expression on lymphocytes.Цель: изучение частоты экспрессии CD40 клетками злокачественных и доброкачественных опухолей молочной железы и сравнение эффективности противоопухолевого действия лимфоцитов в зависимости от экспрессии CD40 в отношении резистентных и чувствительных опухолей молочной железы. Методы: культивирование эксплантатов опухолей молочной железы с аутологичными лимфоцитами в двойных диффузионных камерах. Оценку результатов проводили на основании морфологических критериев роста эксплантатов. Для определения экспрессии молекул на опухолевых клетках использовался иммуногистохимический метод (парафиновые срезы), а на лимфоцитах — метод непрямой иммунофлуоресценции. Результаты: наиболее высокий уровень экспрессии молекул CD40 отмечен на клетках резистентных злокачественных опухолей молочной железыпо сравнению с опухолями, чувствительными к химиопрепаратам, а наиболее низкий — на клетках доброкачественных опухолей. Установлено снижение экспрессии CD40 лимфоцитами больных со злокачественными резистентными опухолями молочной железы по сравнению с лимфоцитами больных с чувствительными опухолями. На лимфоцитах больных с доброкачественными опухолями уровень экспрессии CD40 был значительно выше по сравнению со злокачественными. Изучение противоопухолевой активности аутологичных ЛАК показало, что противоопухолевое действие у больных со злокачественными опухолями, резистентными к химиопрепаратам, было более выражено. Выводы: выраженная противоопухолевая активность ЛАК больных со злокачественными опухолями, резистентными к химиопрепаратам, ассоциируется с высоким уровнем экспрессии CD40 на опухолевых клетках и со снижением его экспрессии на лимфоцитах

Предикторы и маркеры функционального состояния спортсменов при тренировках в среднегорье.

Проанализированы результаты комплексного лабораторного обследования 12 членов сборной команды Украины по одному из циклических видов спорта в динамике среднегорной подготовки. Установлено, что тренировки в условиях недостатка кислорода в окружающем воздухе в сочетании с гипоксией нагрузки приводят к стимуляции эритроцитарного звена крови, что обусловит улучшение кислородтранспортной функции. Одновременно у части спортсменов несколько ухудшается функциональное состояние органов гепато–панкреато–дуоденальной зоны, что указывает на недовосстановление и диктует необходимость соответствующей фармакологической коррекции. Со стороны показателей иммунологического гомеостаза наблюдается снижение параметров, отображающих естественную резистентность организма, что также вызывает необходимость в проведении профилактических мероприятий. При длительности среднегорной подготовки 16 дней отмечается снижение величины индекса анаболизма, что свидетельствует о недостаточном развитии адаптационных механизмов спортсменов в условиях гипоксии и, следовательно, индивидуализации сроков такого тренировочного сбора. Ключевые слова: гомеостаз, физические нагрузки, циклические виды спорта, тренировки в среднегорье. = The results of comprehensive laboratory examination of 12 members of the national team of Ukraine in one of the cyclic sports in the dynamics of the attitude training. Was founded that training in lack of oxygen in the ambient air in conjunction with hypoxia loads lead to stimulation of erythrocyte blood level that will cause improved oxygen–transport function. At the same time on the part of athletes somewhat worse functional state of hepatopancreatoduodenal zone that indicating of reduce the rate of recovery and necessitates complies with pharmacological correction. On the part of the immunological homeostasis decrease parameters which display the natural resistance of the body that dictates the need for measures to reduce the incidence of athletes. When preparing the medium–duration 16 days marked decrease in the value of the index anabolism, indicating that the lack of development of adaptive mechanisms athletes under hypoxic conditions and dictates the terms of the individualization of training camp. Key words: homeostasis, physical activity, cyclic sports, workout in the altitude training

Predictors and Markers Functional Condition of Sportsmen during Attitude Training

Проанализированы результаты комплексного лабораторного обследования 12 членов сборной команды Украины по одному из циклических видов спорта в динамике среднегорной подготовки. Установлено, что тренировки в условиях недостатка кислорода в окружающем воздухе в сочетании с гипоксией нагрузки приводят к стимуляции эритроцитарного звена крови, что обусловит улучшение кислородтранспортной функции. Одновременно у части спортсменов несколько ухудшается функциональное состояние органов гепато–панкреато–дуоденальной зоны, что указывает на недовосстановление и диктует необходимость соответствующей фармакологической коррекции. Со стороны показателей иммунологического гомеостаза наблюдается снижение параметров, отображающих естественную резистентность организма, что также вызывает необходимость в проведении профилактических мероприятий. При длительности среднегорной подготовки 16 дней отмечается снижение величины индекса анаболизма, что свидетельствует о недостаточном развитии адаптационных механизмов спортсменов в условиях гипоксии и, следовательно, индивидуализации сроков такого тренировочного сбора.The results of comprehensive laboratory examination of 12 members of the national team of Ukraine in one of the cyclic sports in the dynamics of the attitude training. Was founded that training in lack of oxygen in the ambient air in conjunction with hypoxia loads lead to stimulation of erythrocyte blood level that will cause improved oxygen–transport function. At the same time on the part of athletes somewhat worse functional state of hepatopancreatoduodenal zone that indicating of reduce the rate of recovery and necessitates complies with pharmacological correction. On the part of the immunological homeostasis decrease parameters which display the natural resistance of the body that dictates the need for measures to reduce the incidence of athletes. When preparing the medium–duration 16 days marked decrease in the value of the index anabolism, indicating that the lack of development of adaptive mechanisms athletes under hypoxic conditions and dictates the terms of the individualization of training camp