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Búsqueda y selección de una proteasa fúngica con potencial aplicación en la restauración de documentos históricos en el archivo de bogotá
Título en ingles: Screening for a fungal protease with potential in the biorestoration of historical valuable documents in Bogota Archive Resumen: Se ha buscado y seleccionado sistemáticamente una proteasa que pudiese ser usada en la eliminación “limpia” de encolantes sobre soportes documentales con valor de patrimonio histórico de forma eficiente y económica, a partir de la colección de hongos filamentosos del Archivo de Bogotá. De 74 morfotipos viables evaluados sobre placas selectivas, 32 morfotipos presentaron formación de halos de hidrólisis evidentes sobre placas diferenciales. De ellos, se evaluó el perfil isoenzimático de 8 morfotipos provenientes de muestreos documentales directos y de 2 morfotipos proteolíticos promisorios provenientes de un trabajo previo. Los 10 morfotipos seleccionados fueron representativos de los géneros Penicillium, Stachybotrys, Chaetomium, y Eladia. Luego de inducir la producción de proteasas extracelulares en medios líquidos diferenciales bajo tres fases de fermentación, se realizaron isoelectroénfoques analíticos tendientes a la observación de isoformas en el gradiente de pH establecido (3.0-10.0). Solo los morfotipos 8D (Chaetomium sp.) y 21D (Eladia saccula) presentaron una isoforma alcalina extrema, de puntos isoeléctricos 8.5 y 8.8, respectivamente, susceptible de selección con miras a su purificación y caracterización parcial de forma económica y eficiente. Los demás morfotipos, representativos de los géneros Penicillium sp., y Stachybotrys sp., presentaron unicamente isoformas proteolíticas en el rango acido de pH con puntos isoeléctricos que oscilan entre 4.0 y 5.0. Palabras clave: biodeterioro; hongo filamentoso; proteasa; halo de hidrólisis; punto isoeléctrico. Abstract: Studies on a protease as an efficient, environmental friendly and relatively economical remover of residual proteins for historical valuable documents were performed and was selected for this work, from the filamentous fungi collection of the Bogota Archive. 32 morphotypes of 74 evaluated show hydrolytic activities over differential solid media. From them, 8 morphotypes obtained directly from documental samples and representative of the genera Penicillium and Stachybotrys were selected and their isoenzyme profile were tested. Also 2 previous morphotypes with promisorius proteolytic activities and representative of the genera Chaetomium and Eladia were analysed. Extracelullar proteases production was induced in differential liquid media on three fermentation steps and analitycal isoelectrofocusing were performed over pH 3.0-10.0 ranges. Only the morphotypes 8D (Chaetomium sp.), and 21D (Eladia sp.), showed an alkaline isoform with pIs 8.5 and 8.8, respectly, suceptible of selection for its purification and characterization through efficient and economical way. The others morphotypes only showed acid isoforms with pIs in the range of 4.0 and 5.0. Key words: biodeterioration; filamentous fungi; protease; hydrolytic halo; isoelectric poin
Biodeterioro de la fuente de lavapatas, parque arqueológico de San Agustín-Huila. Colombia
The San Agustín Archaeological Park (Department of Huila - Colombia), declared a World Heritage Site by UNESCO in 1985, is a magical place filled with funerary structures, sculptures (guardians) and icons related to the region and communities that inhabit it. Such as the Fountain of Lavapatas(300m2), discovered in 1937. This site is living testimony of the techniques of engineering used by pre-Columbian rock sculptors to create figures with human and animal form, and achieve the complex labyrinth of canals that characterize it. Several interdisciplinary conservation projects have been carried out on the fountain to guarantee its preservation, focusing efforts on identifying types of deterioration caused by the presence of water, the outdoor climate, and biological degradation. This research project, which falls within the Program for the Integral Conservation of the Fountain, allowed the identification of the most important types of biodegradation, their mechanisms and physical appearance on the rocks, contributing to the search of conservation measures that will reduce the impact of deterioration.O parque arqueológico de San Agustín-Huila (Colômbia), declarado pela UNESCO em 1985 como património da Humanidade, é um lugar mágico com estruturas funerárias, elementos escultóricos (guardas) e ícones para a comunidade da região, como a Fonte de Lavapatas (300m2), descoberta em 1937. Este lugar é um testemunho da engenharia dos escultores pré-colombianos para talhar a pedra (figuras com formas humanas e animais) e para obter o complexo labirinto de canais hídricos que a caracteriza. A Fonte foi objecto de projectos interdisciplinares de conservação a fim de garantir a sua salvaguarda, centrando-se na identificação dos mecanismos de deterioração causados por factores como a água, o meio ambiente e a biodeterioração. Ao abrigo do Programa Integral de Conservação para o parque, a presente investigação conseguiu identificar os principais agentes de biodeterioração, os seus mecanismos de acção e a sua aparência física nas rochas, contribuindo para a procura de medidas adequadas de conservação para reduzir o impacto da biodeterioração.El parque arqueológico de San Agustín-Huila (Colombia) declarado por la UNESCO en 1985 como patrimonio de la humanidad, es un lugar mágico con estructuras funerarias, elementos escultóricos (guardines) e íconos para la comunidad de la región, como la Fuente de Lavapatas (300m2) descubierta en 1937. El lugar es testimonio de la ingeniería de los escultores precolombinos para tallar la roca (figuras en formas humanas y animales) y obtener el complejo laberinto de canales hídricos que la caracteriza. La Fuente ha sido motivo de proyectos de conservación interdisciplinarios para garantizar su salvaguarda, enfocando los esfuerzos a establecer mecanismos de deterioro por factores como el agua, el medioambiente, la intemperie y el biodeterioro. En el marco del Programa Integral de Conservación para el parque, la presente investigación permitió identificar los principales agentes de biodeterioro, mecanismos de acción e indicadores sobre la roca de la fuente, apoyando la búsqueda certera de medidas de mitigación del impacto biológico
Búsqueda y selección de una proteasa fúngica con potencial aplicación en la restauración de documentos históricos en el Archivo de Bogotá
Studies on a protease as an efficient, environmental friendly and relatively economical remover of residual proteins for historical valuable documents were performed and was selected for this work, from the filamentous fungi collection of the Bogota Archive. 32 morphotypes of 74 evaluated show hydrolytic activities over differential solid media. From them, 8 morphotypes obtained directly from documental samples and representative of the genera Penicillium and Stachybotrys were selected and their isoenzyme profile were tested. Also 2 previous morphotypes with promisorius proteolytic activities and representative of the genera Chaetomium and Eladia were analysed. Extracelullar proteases production was induced in differential liquid media on three fermentation steps and analitycal isoelectrofocusing were performed over pH 3.0-10.0 ranges. Only the morphotypes 8D (Chaetomium sp.), and 21D (Eladia sp.), showed an alkaline isoform with pIs 8.5 and 8.8, respectly, suceptible of selection for its purification and characterization through efficient and economical way. The others morphotypes only showed acid isoforms with pIs in the range of 4.0 and 5.0.Se ha buscado y seleccionado sistemáticamente una proteasa que pudiese ser usada en la eliminación limpia de encolantes sobre soportes documentales con valor de patrimonio histórico de forma eficiente y económica, a partir de la colección de hongos filamentosos del Archivo de Bogotá. De 74 morfotipos viables evaluados sobre placas selectivas, 32 morfotipos presentaron formación de halos de hidrólisis evidentes sobre placas diferenciales. De ellos, se evaluó el perfil isoenzimático de 8 morfotipos provenientes de muestreos documentales directos y de 2 morfotipos proteolíticos promisorios provenientes de un trabajo previo. Los 10 morfotipos seleccionados fueron representativos de los géneros Penicillium, Stachybotrys, Chaetomium, y Eladia. Luego de inducir la producción de proteasas extracelulares en medios líquidos diferenciales bajo tres fases de fermentación, se realizaron isoelectroénfoques analíticos tendientes a la observación de isoformas en el gradiente de pH establecido (3.0-10.0). Solo los morfotipos 8D (Chaetomium sp.) y 21D (Eladia saccula) presentaron una isoforma alcalina extrema, de puntos isoeléctricos 8.5 y 8.8, respectivamente, susceptible de selección con miras a su purificación y caracterización parcial de forma económica y eficiente. Los demás morfotipos, representativos de los géneros Penicillium sp., y Stachybotrys sp., presentaron unicamente isoformas proteolíticas en el rango acido de pH con puntos isoeléctricos que oscilan entre 4.0 y 5.0