Differential Expression of CRH, UCN, CRHR1 and CRHR2 in Eutopic and Ectopic Endometrium of Women with Endometriosis.

Endometriosis is considered as a benign aseptic inflammatory disease, characterised by the presence of ectopic endometrium-like tissue. Its symptoms (mostly pain and infertility) are reported as constant stressors. Corticotropin releasing hormone (CRH) and urocortin (UCN) are neuropeptides, strongly related to stress and inflammation. The effects of CRH and UCN are mediated through CRHR1 and CRHR2 receptors which are implicated in several reproductive functions acting as inflammatory components. However, the involvement of these molecules to endometriosis remains unknown. The aim of this study was to examine the expression of CRHR1 and CRHR2 in endometriotic sites and to compare the expression of CRHR1 and CRHR2 in eutopic endometrium of endometriotic women to that of healthy women. We further compared the expression of CRH, UCN, CRHR1 and CRHR2 in ectopic endometrium to that in eutopic endometrium of women with endometriosis. Endometrial biopsy specimens were taken from healthy women (10 patients) and endometrial and endometriotic biopsy specimens were taken from women with endometriosis (16 patients). Τhe expression of CRH, UCN, CRHR1, and CRHR2 was tested via RT-PCR, immunohistochemistry and Western blotting. This study shows for the first time that CRH and UCN receptor subtypes CRHR1β and CRHR2α are expressed in endometriotic sites and that they are more strongly expressed (p<0.01) in eutopic endometrium of women with endometriosis compared to healthy women endometrium at the mRNA and protein level. CRH, UCN, CRHR1 and CRHR2 mRNA were also more highly expressed in ectopic rather than eutopic endometrium (CRH, UCN, CRHR2α: p<0.01, CRHR1β: p<0.05) and protein (CRH and UCN: p<0.05, CRHR1 and CRHR2: p<0.01) in women with endometriosis. These data indicate that CRH and UCN might play an immunoregulatory role in endometriotic sites by affecting reproductive functions such as decidualization and implantation of women with endometriosis

Μελέτη της έκφρασης, της ρύθμισης και του βιολογικού ρόλου του εκλυτικού παράγοντα της κορτικοτροπίνης (CRH, corticotropin releasing hormone) στην ενδομητρίωση

Endometriosis is one of the most important benign chronic diseases affecting the 6-10% of women of reproductive age, being mainly associated with pelvic pain, adhesion formation and infertility. Endometriosis is characterised by the ectopic presence of endometrial stroma and epithelium. Endometriosis has been proven to be both an estrogen-dependent and a chronic inflammatory disease. In that context, endocrine/paracrine influences and immunological aspects have been investigated. Thus, several growth factors, cytokines, immune cells and hormones in eutopic and ectopic endometrium, are considered to be involved in the pathophysiology of endometriosis-related infertility.CRH (Corticotropin Releasing Hormone) is a 41-amino acid neuropeptide, synthesised in the hypothalamus, regulating the hypothalamus-pituitary-adrenal axis and its expression and biological functions are mediated by its membrane receptors, CRH-R1 (α, β, γ, c-h) and CRH-R2 (α, β, γ). CRH receptors are also activated by other endogenous agonists, such as urocortin (UCN), which is a 40-amino acid peptide belonging to the corticotropin-releasing hormone family and is structurally related to CRH. Apart from the central nervous system, CRH and its receptors are expressed in several sites of the female reproductive system, including the endometrial glands, decidualized stroma, trophoblast, syncytiotrophoblast and placental decidua. CRH and UCN are secreted at inflammatory sites, acting as proinflammatory factors. Reproductive CRH has been shown to serve as an autocrine and paracrine modulator and to participate in decidualization, embryo implantation and maintenance of human pregnancy. In addition, CRH and UCN mRNA have been found to be expressed by endometriotic cells, while endometriotic lesions show a strongly positive staining reaction for CRH and UCN. The expression and function of CRH and UCN have also been found to be impaired in eutopic endometrium of women with endometriosis. These data suggest a crucial role of CRH and UCN in pathogenesis of endometriosis. However, the relative expression of CRH, UCN and their receptors in eutopic and ectopic endometrium of endometriotic women and in eutopic endometrium of healthy women and women with endometriosis have never been investigated. Additionally, CRH receptors and in particular their subtypes have never been identified in endometriotic lesions. In this current study, the relative expression levels of these molecules in eutopic and ectopic endometrium of endometriotic and healthy women have been investigated, indicating a potential role of CRH receptors in infertility profile of endometriotic women. As a result it is shown, in this current study, that CRHR1 and CRHR2 are expressed in endometriotic tissue and their expression levels are higher in eutopic endometrium of women with endometriosis compared to their expression levels in eutopic endometrium of healthy women. Moreover, CRH, UCN CRHR1 and CRHR2 have been found to be more abundantly expressed in ectopic rather than eutopic endometrium of the same endometriotic women.As endometriosis is characterized by the release of several growth factors and expression of integrins, cadherins and lectins that regulate cell migration, invasion, angiogenesis, immune functions and apoptosis, galectins, which are characterized as members of a large family of animal lectins which bind b-galactoside should play an important role in this inflammatory disease. Galectins have strongly been implicated in inflammation and may be useful targets for anti-inflammatory therapy. As far as the immune system concerned, galectins are found in activated macrophages and B cells. They play a vital role in T cell homeostasis and survival. Galectin-1 plays a major role in initiation, activation and resolution of inflammatory responses and can act as a pro-inflammatory or an anti-inflammatory cytokine. Galectin-1 induces inhibition of cell growth and cell-cycle arrest and promotes the apoptosis of activated immune cells. Galectin-1 has been found to be expressed in human endometrium and decidua apart from other tissues but it has not been investigated in endometriotic tissue and in this current study it was a motivation in order to examine the galectin-1 expression in eutopic endometrium and in endometriotic tissue and compare it to that in eutopic endometrium of endometriotic women and healthy women. So, as a result, in this study, it is shown that galectin-1 shows much higher expression levels at the late secretory phase of eutopic endometrium and its expression levels are higher in ectopic endometrium compared to eutopic endometrium of endometriotic and healthy women. Moreover, the evaluation of its regulation by CRH, UCN and FasL was performed in Ishikawa cell line and peripheral macrophages as to possibly set new light concerning galectin-1 inflammatory role in endometriosis and infertility. So, as a result, it is shown that CRH, UCN and CSF-1 upregulate galectin-1 expression in both the cells types and the upregulative effect of the former one is mediated by CRHR1.Colony stimulating factor- 1 is a secreted cytokine, characterized as a haematopoietic growth factor which influences hematopoietic stem cells to differentiate into macrophages or other related cell types. Macrophages and other cells of the female reproductive tract are also regulated by locally produced CSF-1. CSF-1 plays an important role in placental growth and differentiation. As endometriosis is an inflammatory disease, there are several cytokines and growth factors that are implicated in this immune-disequilibrium status. As secretory cells, monocytes and macrophages are vital to the regulation of immune responses and the development of inflammation. These cytokines are produced by peritoneal macrophages, lymphocytes, mesothelial cells and endometriosis implants. Furthermore, women with endometriosis are characterised by increased number of peritoneal macrophages and by increased expression of CSF-1 compared to healthy ones. So, it was of quite interest, to examine the possible co-localization of galectin-1 and macrophage expression in endometriotic tissue, the CSF-1 expression in eutopic and ectopic endometrium of endometriotic and healthy women and how CSF-1 is regulated by CRH, UCN and CSF-1 in Ishikawa cell line and peripheral macrophages. In this current study, it is shown that there is a co-localization of macrophages and galectin-1 in ectopic sites. CSF-1 has been found to be much more highly expressed in ectopic endometrium compared to eutopic endometrium of endometriotic and healthy women. CRH, UCN and exogenously added CSF-1 have been shown to upregulate CSF-1 expression in Ishikawa cell line and macrophages and the upregulative effect of the former one is mediated by CRHR1.Fas ligand is a type-II transmembrane protein that belongs to the tumor necrosis factor (TNF family. Its binding with its receptor induces apoptosis. Fas ligand/receptor interactions play an important role in the regulation of the immune system. FasL is expressed on the surface of fetal cytotrophoblasts as well as maternal decidual cells of the placenta and maternal endometrium. Abnormalities of maternal immune tolerance to the fetal semi-allograft and vise versa have been implicated in several pregnancy malfunctions such as recurrent early miscarriage, pre-eclampsia and eclampsia. CRH produced locally by decidual cells and extravillous trophoblasts acts in an autocrine/paracrine fashion, through CRH-R1, to stimulate FasL expression and to potentiate the ability of these cells to cause apoptosis of activated maternal T lymphocytes in order proper decidualization to occur. As FasL is implicated in inflammatory processes, it has been found that Fas is expressed randomly in both eutopic and ectopic endometrial tissues. Higher expression of FasL by endometriotic tissues contributes to their survival and the development of endometriosis. It has been suggested that the levels of soluble/active FasL are higher in serum and peritoneal fluid in women with moderate to severe endometriosis than in women with early‐stage disease or in healthy women. Consequently, ectopic endometrial cells escaping from immune surveillance in the peritoneal cavity of women with endometriosis may contribute to the maintenance of the disease, so it was of high importance to study how FasL is regulated by stress neuropeptides such as CRH and UCN and by an important macrophage factor such as CSF-1, in Ishikawa cell line and peripheral macrophages. As a result, in this study it is shown that CRH, UCN and CSF-1 upregulate FasL expression in both the cell types and the upregulative effect of the former one is mediated by CRHR1.In conclusion, the findings of this current study point to a new inflammatory- modulatory pathway in which CRH, UCN, CRHR1 and CRHR2 are involved acting by an autocrine/paracrine pathway in eutopic and ectopic endometrium potentially affecting the pathogenesis of endometriosis and the infertility profile of endometriotic women. These results suggest that a new therapeutic intervention could potentially based on blockage of CRH, UCN and their receptors leading to the improvement of the quality of endometriotic women’s life. Furthermore, it is proposed that galectin-1 could play a vital role in the pathogenesis of the disease. In addition, CRH, UCN and CSF-1 have been found to upregulate galectin-1, CSF-1 and FasL expression in Ishikawa cell line and macrophages. As all the peptides causing these upregulative effects and the molecules that are regulated by them are implicated in inflammation procedures such as endometriosis and in reproductive functions such as decidualization and implantation, these results could possibly set new light to the immune disequilibrium of endometriosis and the infertility profile of endometriotic women. Finally, this study results suggest that the potential use of antalarmin could be further considered in accessing the immune disequilibrium noticed in eutopic and ectopic endometrium of women with endometriosis.Η ενδομητρίωση είναι μια από τις πιο σημαντικές χρόνιες ασθένειες που εμφανίζεται στο 10% περίπου των γυναικών της αναπαραγωγικής ηλικίας. Τα βασικότερα συμπτώματα αυτής της ασθένειας είναι ο πόνος στην πυελική περιοχή, ο σχηματισμός συμφύσεων και η υπογονιμότητα. Η ενδομητρίωση χαρακτηρίζεται από την εμφάνιση ενδομητριοτικού ιστού (στρώμα και επιθήλιο) σε έκτοπες –μη φυσιολογικές θέσεις. Η ενδομητρίωση είναι ορμονοεξαρτώμενη και φλεγμονώδης νόσος. Πληθώρα αυξητικών παραγόντων, κυτοκινών, κυττάρων που σχετίζονται με την ανοσοβιολογική απόκριση αλλά και ορμονών συνδέονται με την παθοφυσιολογία της νόσου και την υπογονιμότητα που χαρακτηρίζει την συγκεκριμένη ασθένεια.H εκκριτική ορμόνη της κορτικοτροπίνης, CRH( corticotropin releasing hormone) είναι ένα νευροπεπτίδιο 41 αμινοξέων, αρμόδιο για τις ενδοκρινείς, ανοσολογικές, και συμπεριφορικές αποκρίσεις των θηλαστικών σε συναισθηματικούς παράγοντες (stress). Η ορμόνη αυτή συντίθεται κυρίως στον υποθάλαμο, και ο πιο σημαντικός ρόλος της είναι η ρύθμιση του υποθάλαμο-υποφυσιακού επινεφριδιακού άξονα HPA( hypothalamic-pituitary-adrenal axis). Η CRH εμπλέκεται στην ρύθμιση του καρδιοαγγειακού, γανστρενετρικού, ανοσολογικού και αναπαραγωγικού συστήματος. Η δράση και έκφραση της CRH επιτελείται μέσω της σύνδεσης της με ειδικούς μεμβρανικούς υποδοχείς που συνδέονται με G πρωτεΐνες και την αδενυλική κυκλάση. Τρεις τύποι υποδοχέων έχουν βρεθεί μέχρι σήμερα και είναι οι εξής: CRHR1,CRHR2, CRHR3. Εκτός από την CRH , το πεπτίδιο της UCN(urocortin), που έχει πρόσφατα απομονωθεί και ανήκει στην οικογένεια των CRH νευροπεπτιδίων, προσδένεται πολύ ισχυρά στους CRH υποδοχείς. Εκτός από την έκφραση και τον λειτουργικό ρόλο της CRH στο κεντρικό νευρικό σύστημα και στους περιφερικούς ιστούς , είναι σημαντικό να αναφερθούμε και στον ρόλο της CRH στο ανοσοποιητικό σύστημα. Η CRH έχει αντι-φλεγμονώδεις ιδιότητες οι οποίες προκύπτουν μέσα από αλληλεπιδράσεις του ανοσοποιητικού συστήματος και του άξονα ΗΡΑ. Η CRH παράγεται επίσης σε περιφερικές θέσεις φλεγμονής στον άνθρωπο και τον επίμυ. Η CRH, σε αντίθεση με την συστηματική της έμμεση ανοσοκατασταλτική δράση, πιστεύεται ότι δρα ως αυτοκρινής ή παρακρινής προ-φλεγμονώδης ρυθμιστής . Η τοπικά παραγόμενη CRH έχει δράσεις προ-φλεγμονώδους κυτοκίνης, ενεργοποιεί δηλαδή τις φλεγμονώδεις δράσεις των κυτοκινών και άλλων ρυθμιστών, ενώ η ανοσοεξουδετέρωσή της οδηγεί σε καταστολή της φλεγμονής. H CRH παράγεται σχεδόν από όλους τους ιστούς που συνδέονται με τη γυναικεία αναπαραγωγή, συμπεριλαμβανομένων των ωοθηκών, της μήτρας, της βλαστοκύστης και του πλακούντα. Η CRH που σχετίζεται με την αναπαραγωγή είναι μία μορφή CRH ιστών (CRH που βρίσκεται στους περιφερειακούς ιστούς) ανάλογη με την ανοσοαντιδρώσα μορφή της CRH που ανιχνεύεται σε περιφερειακές φλεγμονώδεις εστίες. Η ανοσοαντιδρώσα CRH που σχετίζεται με το αναπαραγωγικό σύστημα συμμετέχει σε διάφορες αναπαραγωγικές λειτουργίες όπως η ωορρηξία, η φθαρτοποίηση, η εμφύτευση του εμβρύου και η εγκυμοσύνη. Η ανοσοαντιδρώσα CRH έχει προ-φλεγμονώδεις ιδιότητες στις ανοσολογικές αποκρίσεις και σχετίζεται με την παραγωγή και λειτουργία κυτοκινών και αυξητικών παραγόντων σε διάφορους ιστούς του αναπαραγωγικού συστήματος. Επιπρόσθετα, η CRH και η UCN εκφράζονται σε κύτταρα ενδομητρίωσης και ενδομητριοτικές εστίες. Η έκφραση και η λειτουργία της CRH και της UCN έχει βρεθεί να είναι μειωμένη στο εύτοπο ενδομήτριο γυναικών με ενδομητρίωση και αυτό υποδεικνύει έναν πολύ σημαντικό ρόλο της CRH και της UCN στην παθογένεση της ενδομητρίωσης. Στην παρούσα διδακτορική διατριβή μελετήθηκε η έκφραση των υποδοχέων της CRH σε ιστούς ενδομητρίωσης- έκτοπο ενδομήτριο, καθώς και έγινε σύγκριση της έκφρασης όλων αυτών των μορίων(CRH, UCN και των υποδοχέων τους) σε εύτοπο-φυσιολογικό ενδομήτριο υγιών γυναικών αλλά και σε εύτοπο και έκτοπο ενδομήτριο γυναικών με ενδομητρίωση. Έτσι, σε αυτή την μελέτη της διδακτορικής διατριβής βρέθηκε για πρώτη φορά ότι οι υποδοχείς CRHR1β και CRHR2α εκφράζονται σε ιστούς ενδομητρίωσης και η έκφραση τους είναι υψηλότερη στο εύτοπο ενδομήτριο των γυναικών με ενδομητρίωση σε σχέση με το εύτοπο ενδομήτριο υγιών γυναικών. Επίσης η έκφραση των CRH, UCN, CRHR1 και CRHR2 βρέθηκε να είναι μεγαλύτερη στο έκτοπο ενδομήτριο σε σχέση με αυτή στο εύτοπο ενδομήτριο γυναικών που πάσχουν από ενδομητρίωση.Καθώς η ενδομητρίωση είναι μία φλεγμονώδης νόσος και χαρακτηρίζεται από την έκφραση πολλών αυξητικών παραγόντων, ιντεγκρινών, καντχερινών και λεκτινών που ρυθμίζουν την μετακίνηση των κυττάρων, την εισβολή κυττάρων, την αγγειογένεση, ανοσολογικές λειτουργίες και την απόπτωση, οι galectins, που είναι μέλη μιας μεγάλης οικογένειας λεκτινών, θα μπορούσαμε να υποθέσουμε ότι παίζουν πολύ σημαντικό ρόλο στην φλεγμονώδη αυτή νόσο, την ενδομητρίωση. Οι galectins είναι άρρηκτα συνδεδεμένες με διάφορες φλεγμονώδεις καταστάσεις και θα μπορούσαν να χρησιμοποιηθούν ως αντι-φλεγμονώδη θεραπεία. Σε ότι αφορά στο ανοσοβιολογικό σύστημα, οι galectins εκφράζονται από ενεργοποιημένα μακροφάγα και Β λεμφοκύτταρα. Παίζουν σημαντικό ρόλο στην ομοιόσταση και επιβίωση των Τ λεμφοκυττάρων. Πιο συγκεκριμένα η galectin-1 , η οποία μελετήθηκε στην συγκεκριμένη διδακτορική διατριβή, παίζει πολύ σημαντικό ρόλο στην έναρξη, την ενεργοποίηση και το τέλος των φλεγμονών αντιδράσεων και λειτουργεί ως προ- ή αντί- φλεγμονώδης κυτοκίνη. Η galectin-1 μπλοκάρει την ανάπτυξη των κυττάρων και επάγει την απόπτωση την ενεργοποιημένων κυττάρων του ανοσοποιητικού. Επίσης έχει βρεθεί ότι εκφράζεται στο ανθρώπινο ενδομήτριο και φθαρτό αλλά δεν έχει μελετηθεί ποτέ ως τώρα η έκφραση της στην ενδομητρίωση και αυτό αποτέλεσε ένα κίνητρο για την παρούσα διδακτορική διατριβή. Έτσι λοιπόν στην συγκεκριμένη διδακτορική διατριβή, αφού επιβεβαιώθηκε η έκφραση της στην εκκριτική φάση του φυσιολογικού ενδομητρίου και πιο συγκεκριμένα ότι είναι αρκετά αυξημένη η έκφραση της στην ‘late secretory phase’, βρέθηκε ότι η galectin-1 εκφράζεται σε εστίες ενδομητρίωσης και η έκφραση της είναι υψηλότερη στο έκτοπο ενδομήτριο από ότι στο φυσιολογικο- εύτοπο ενδομήτριο των γυναικών με ενδομητρίωση καθώς και ακόμα ότι είναι υψηλότερη η έκφρασή της στο ευτοπο ενδομήτριο γυναικών με ενδομητρίωση σε σχέση με το εύτοπο ενδομήτριο των υγιών γυναικών. Επίσης, στην συγκεκριμένη διδακτορική διατριβή παρουσιάζεται και η ρύθμιση της galectin-1 από τα εξής μόρια: CRH, UCN και CSF-1 στην κυτταρική σειρά Ishikawa cell line (επιθηλιακό αδενοκαρκίνωμα ενδομητρίου) καθώς και σε περιφερειακά μακροφάγα. Τα προαναφερθέντα μόρια λοιπόν αυξάνουν την έκφραση της galectin-1 σε σχέση με τον χρόνο διέγερσης της από αυτά και η επαγωγή της έκφρασης της galectin-1 από την CRH επιτελείται μέσω του υποδοχέα της, CRHR1. Αυτά λοιπόν τα αποτελέσματα, θα μπορούσαμε να υποθέσουμε ότι έχουν μεγάλη σημασία για τον ανοσοβιολογικό ρόλο της galectin-1 στην ενδομητρίωση.Ο CSF-1(colony stimulating factor), που χαρακτηρίζεται ως παράγοντας διέγερσης αποικιών μακροφάγων, παίζει σημαντικό ρόλο στην διαφοροποίηση των αιμοποιητικών βλαστοκυττάρων σε μακροφάγα ή άλλους τύπους κυττάρων. Τα μακροφάγα και άλλοι τύποι κυττάρων του γυναικείου αναπαραγωγικού συστήματος ρυθμίζονται από τον τοπικά παραγόμενο CSF-1. Ο CSF-1 πάιζει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη και διαφοροποίηση του πλακούντα. Η ενδομητρίωση είναι μία φλεγμονώδης νόσος, τα μακροφάγα έχουν πολύ σημαντικό ρόλο στην ανοσοβιολογική απόκριση και πολλές από τις κυτοκίνες που σχετίζονται με την ενδομητρίωση παράγονται από τα μακροφάγα του περιτοναίου και εστίες ενδομητρίωσης. Οι γυναίκες που πάσχουν από ενδομητρίωση παρουσιάζουν αυξημένο αριθμό περιτοναϊκών μακροφάγων και αυξημένη έκφραση του CSF-1 σε σύγκριση με τις υγιείς γυναίκες. Στην συγκεκριμένη διδακτορική διατριβή παρουσιάζεται ο συνεντοπισμός της έκφρασης των μακροφάγων και της galectin-1 σε εστίες ενδομητρίωσης. Επίσης επιβεβαιώνεται η έκφραση του CSF-1 στην ενδομητρίωση και παρατηρήθηκε ότι η έκφραση του CSF-1 είναι μεγαλύτερη στις εστίες ενδομητρίωσης- έκτοπο ενδομήτριο σε σχέση με την έκφραση του στο αντίστοιχο εύτοπο- φυσιολογικό ενδομήτριο. Επίσης, παρατηρήθηκε ότι η έκφραση του CSF-1 είναι μεγαλύτερη στο ευτοπο-φυσιολογικό ενδομήτριο των γυναικών με ενδομητρίωση απο ότι στο ευτοπο ενδομήτριο των υγιών γυναικών. Ακόμα παρουσιάζεται η επαγωγή της έκφρασης του CSF-1 από τα εξής μόρια: CRH, UCN και CSF-1 στην κυτταρική σειρά Ishikawa cell line (επιθηλιακό αδενοκαρκίνωμα ενδομητρίου) καθώς και σε περιφερειακά μακροφάγα. Τα προαναφερθέντα μόρια λοιπόν αυξάνουν την έκφραση του CSF-1 σε σχέση με τον χρόνο διέγερσης της από αυτά και η επαγωγή της έκφρασης του CSF-1 από την CRH επιτελείται μέσω του υποδοχέα της, CRHR1. Αυτά λοιπόν τα αποτελέσματα θα μπορούσαν να συνεισφέρουν περεταίρω στην κατανόηση του ρόλου του CSF-1 και των μακροφάγων στην ενδομητρίωση.Ο Fas είναι μία τύπου-ΙΙ διαμεμβρανική πρωτεΐνη που ανήκει στην οικογένεια παραγόντων νέκρωσης όγκου (TNF- tumour necrosis factor family). Η σύνδεσή του με τον υποδοχέα του επάγει την απόπτωση. Η σύνδεση του Fas/FasL(συνδέτη / υποδοχέα) παίζει σημαντικό ρόλο στη ρύθμιση του ανοσοποιητικού συστήματος. Ο FasL εκφράζεται στην επιφάνεια των εμβρυϊκών και μητρικών τροφοβλαστικών κυττάρων καθώς και σε κύτταρα του φθαρτού και του ενδομητρίου. Διάφορες μη φυσιολογικές καταστάσεις σε ό,τι αφορά sτην ανοσοανοχή της μητέρας καθώς και του εμβρυικού ημιμοσχεύματος έχουν συσχετιστεί με διάφορες δυσλειτουργίες στην εγκυμοσύνη όπως η αποβολη του εμβρύου, η προεκλαμψία και η εκλαμψία. H CRH που παράγεται τοπικά από τα κύτταρα του φθαρτού και την τροφοβλάστη λειτουργεί με αυτοκρινή ή παρακρινή τρόπο μέσω του CRHR1 και διεγείρει την έκφραση του FasL, δίνοντας την δυνατότητα σε αυτά τα κύτταρα να προκαλέσουν απόπτωση των μητρικών Τ λεμφοκυττάρων ώστε να επιτευχθεί επιτυχής φθαρτοποίηση. Ο FasL , καθώς συμμετέχει στις φλεγμονώδεις αντιδράσεις, έχει βρεθεί ότι εκφράζεται από το εύτοπο και το έκτοπο ενδομήτριο. Η υψηλή έκφραση του FasL στις εστίες ενδομητρίωσης συνεισφέρει ώστε να επιβιώνει και να αναπτύσσεται ο ιστός της ενδομητρίωσης- έκτοπο ενδομήτριο. Επίσης έχει βρεθεί ότι η έκφραση του FasL είναι υψηλότερη σε γυναίκες που πάσχουν από ενδομητρίωση προχωρημένου σταδίου σε σχέση με χαμηλότερου σταδίου ή τις υγιείς γυναίκες. Με δεδομένα όλα τα παραπάνω , στην παρούσα διδακτορική διατριβή μελετήθηκε η ρύθμιση του FasL στην κυτταρική σειρά Ishikawa και σε περιφερειακά μακροφάγα και βρέθηκε ότι τα εξής μόρια: CRH, UCN και CSF-1 αυξάνουν την έκφραση του σε σχέση με τον χρόνο και η επαγωγή της έκφρασης του από την CRH επιτελείται μέσω του υποδοχέα της, CRHR1.Συμπερασματικά, τα ευρήματα της παρούσας διδακτορικής διατριβής, στοχεύουν σε ένα νέο ανοσορυθμιστικό μονοπάτι, στο οποίο τα μόρια CRH, UCN, CRHR1 και CRHR2 λειτουργούν με αυτοκρινή ή παρακρινή τρόπο στο εύτοπο και έκτοπο ενδομήτριο με πιθανή την εμπλοκή τους στην παθογένεια της ενδομητρίωσης και το προφίλ υπογονιμότητας των γυναικών με ενδομητρίωση. Μέσα από αυτά τα αποτελέσματα διαφαίνεται η πιθανή χρήση θεραπευτικών μεθόδων για την ενδομητρίωση που θα μπορούσαν να εμπεριέχουν το μπλοκάρισμα των μορίων CRH, UCN, CRHR1 και CRHR2 στοχεύοντας στην βελτίωση της ποιότητας ζωής των γυναικών με ενδομητρίωση. Επιπροσθέτως, το ότι η galectin-1 εκφράζεται στην ενδομητρίωση, καταδεικνύει την πιθανή εμπλοκή της στην παθογένεση της ενδομητρίωσης. Έπειτα, βρέθηκε σε αυτή την μελέτη ότι τα εξής μόρια: CRH, UCN και CSF-1 αυξάνουν την έκφραση των galectin-1, CSF-1 και FasL. Καθώς αυτά τα μόρια που προκαλούν την επαγομένη αυτή έκφραση και τα μόρια που ρυθμίζονται από αυτά συμμετέχουν σε φλεγμονώδεις καταστάσεις, όπως η ενδομητρίωση αλλά και σε αναπαραγωγικές διαδικασίες όπως η φθαρτοποίηση και η εμφύτευση του εμβρύου, αυτά τα αποτελέσματα θα μπορούσαν να διαφωτίσουν περεταίρω την έλλειψη ισσοροπημένης ανοσοβιολογίας της ενδομητρίωσης και του προφίλ υπογονιμότητας

Un récit ininterrompu de la beauté de la nature, de l’amour et de sa protection par l’homme, sources de fécondité et de préservation de la biodiversité dans les manuels scolaires de littérature, refuges de littérature de jeunesse, moyens de créer une conscience écologique de masse et un accompagnement spirituel aux élèves de l’école primaire grecque (1975-2023)

This thesis studies representations of nature in Greek elementary school anthologies from 1975 to the present day, and is structured around three essential axes: methodological, structural and thematic. a) With regard to the methodological path followed, this concerns the choice of subject, the delimitation of the corpus and the chosen method. From the point of view of the chosen theme, the three main thematic elements of the thesis are 1) representations of nature, which are discussed on a daily basis because of the dangers it faces, 2) the importance of Greek elementary school textbooks, which are mirrors of the exercise of power and whose uniqueness makes it possible to note the emphasis on cultural values selected and transmitted to pupils, and 3) the importance of the year 1975, which is a constructed place of memory of current Greek society. As far as the corpus is concerned, it consists of all the school Anthologies used from 1975 to 2023.As for the chosen method, it is based on thematic categorizations, thematic groupings, of all information related to the main theme of the thesis. These thematic categories, arranged vertically in columnar tables, were then analyzed horizontally, through seven successive levels of thematic synthesis, which enabled the quasi-final articulation of the thesis to emerge. Quasi-final because it was the commentary on the discoveries, accompanied by bibliographical support, that led to the construction of the final thematic architecture of the thesis, as it appears in its final title. b) As far as the structure of the thesis is concerned, the main objective was to focus from the outset on the study of the theme selected in the Anthologies, avoiding, from the outset, bibliographical research and the creation of a theoretical overview. The reason for this is simple: to avoid creating a theoretical framework before analyzing the content and highlighting the thematic architecture of the thesis, which would inevitably lead to the reproduction of positions already adopted. Thus, once the thematic architecture had been constructed, the theoretical overview was built on the discoveries made through content analysis, and comprises three parts devoted to 1) the exercise of power: from disorder to order and from order to disorder, 2) to domination and the imposition of ruling-class decisions, in education, in the control of school curricula and textbooks, (re)constructing Places of Memory and collective and cultural representations, as well as a refuge for children's literature, 3) to man's perpetual search for and expression of nature, the nourishment of its belated protection, a source of education, but also of potential violence? For this reason, the main body of the thesis is devoted exclusively to the aforementioned discoveries, to their presentation from a quantitative and qualitative point of view, and to their commentary, supported and enlightened by the bibliography. c) As far as the thematic architecture of the thesis is concerned, it is discovered that the editors of the School Anthologies, in an uninterrupted manner from 1975 to 2023, attempt, through the instrumentalization of the protection of nature and biodiversity, to create a mass ecological consciousness and to provide spiritual guidance to Greek elementary school pupils. The representations of nature thus revolve around two essential themes: 1) the beauty of nature as recounted, an appeal to emotion, the cultivation of aesthetics and the expression of a scientific reality; and 2) the care for nature embodied in the coexistence of the ephemeral and the timeless, encyclopedic and scientific knowledge, and the mutual protection between nature and its human protectors. Table of contents A non-stop narration of the beauty of nature, of love and its protection by man, sources of fertility and preservation of biodiversity in Literature textbooks, refuges of children's literature, means of creating mass ecological awareness and spiritual guidanceto Greek primary school pupils (1975-2023)Introduction (Page 25)First introductory part: basic, necessary and systematic structural information relating to the presentation and justification of the central theme, the corpus, the method of content analysis, the problematic and the thematic architecture (Page 27).Second Introductory Part: selected elaboration of the Thesis with the principal aim of facilitating understanding of the structural and thematic significance of its various parts. (Page 34)A) Choice of an inevitably general central theme, a defined corpus and a selected methodological content analysis. (Page 35)B) Categorization in the corpus of all passages referring to the central theme selected (Page 35)C) Presentation and commentary of the findings made thanks to the previous categorization. (Page 36)D) Translation into Greek of bibliographic extracts in foreign languages (Page 37)E) Introduction in an appendix, placed immediately after the general conclusion of the Thesis, of elements to enrich the presentation and commentary of the data. (Page 39)F) Incorporation of 13 research guides, deemed necessary to facilitate organized and systematic research of the contents of the Thesis by future researchers. (Page 41)G) Creating a beautiful interface (Page 42)H) Orientation of all the thematic units of the Thesis, which led to the final selection of the central theme (the final title), as stated on the front cover of the Thesis. (Page 47)Third introductory part: presentation and study of the historical, institutional, political, social, economic and cultural conditions in which the present research work takes place, as well as introduction of a theoretical overview which explains and grounds the theoretical choices which appear in the commentary on each thematic section of the Thesis. (Page 50)A) Exercise of power: from disorder to order and from order to disorder (Page 57)a) From disorder to order (Page 67)1) An end (Page 67) 2) A beginning (Page 70)b) Economic crises and bankruptcies (Page 72)c) Covid-19: A pandemic that reflects the power of the State, but is also a lever for rediscovering nature (Page 74)B) Domination and imposition of the decisions of the ruling class, in education, in the control of the creation and publication of School Curricula, as well as school textbooks, sources of construction and maintenance of Places of Memory, of collective and cultural representations, as well as refuge for children's and teenage literature in primary school. (Page 77)a) The institution of education: action by the adult generations on those not yet ready for social life (Page 80)b) Education in the Greek constitutions (1844 - 2019): 175 years of caring for a public good (Page 87) 1) The Pædeia "is placed under the strict supervision of the State". (Page 89)2) The Pædeia "is financed exclusively by the State". (Page 90)3) School attendance is compulsory, but the duration of this obligation is different. (Page 91)4) The Pædeia constitutes a fundamental mission of the State, delimiting and maintaining the space for introducing pupils to the knowledge and values that underpin the national identity of the Greeks and contribute to the "making" of future citizens. (Page 92) c) School curricula as compass for daily teaching practice. (Page 97) d) The school textbook, a unique teaching tool and the undisputed creator of places of memory of the Greek nation, of collective and cultural representations of Greek society, as well as a nest of children's and teenage literature. (Page 103)1) An important means of transmitting knowledge and interpreting events and phenomena (Page 105) 2) Chisels of places of memory and of collective and social representations (Page 109) 3) Home to literature for children and teenagers (Page 118) 3.1) Attempts at periodization and acquisition of a pedagogical interest (Page 118)3.2) From the introversion of 1975 to the extraversion of 2003, a source of numerical reduction (Page 124)3.3) The 1975 Anthologies contain more children's literature on representations of nature... or perhaps not? (Page 149)C) Man's perpetual search for and expression of nature, the nourishment of its belated protection, consist a source of education, but also of potential violence? (Page 163)a) Uninterrupted philosophical thoughts and artistic preoccupations (Page 167)b) Belated protection of an endangered natural environment, but also a source of renewable and non-renewable energy (Page 173)1) Continuous but incomplete protection of nature (Page 174)2) Key supplier of energy sources (Page 177) c) Environmental education in primary schools, a tool for acquiring knowledge, skills and initiatives to solve and prevent environmental problems (Page 182)1) International decisions founders of environmental education in Greece (Page 182)2) The Greek reality, an expression of awareness, activation and efforts made by students to stand up to environmental problems. (Page 186)2.1) Defining the cognition of an incomplete but optimistic framework (Page 186)2.2) Anthologies with random and thematically targeted references, contributing to an interdisciplinary approach to environmental education (Page 190) 2.2.1) Random interpolated references (Page 190) 2.2.2) Targeted thematic references (Page 193)d) Nature protection as a purpose and/or as a means (Page 194)1) Protecting nature is a long-term goal, linking the present and the future. (Page 201)2) Men play an important role by participating freely in decision-making and are not oppressed by political and economic groups. (Page 205)2.1) Declaring the need to protect nature and sustainable development through the dialectic between a powerful state and "weak citizens". (Page 206)2.2) Proclaiming the need to protect nature and sustainable development in school textbooks through the sovereignty of "Pædeia" over "weak pupils". (Page 216)Conclusion of the third introductory section (Page 219)Part 1Beauty: from an appeal to emotion and cultivating aesthetic culture to the expression of a scientific reality (Page 223)Introduction to Part One (Page 224)Chapter 1: The beauty of nature through the alternation of the seasons: from their uniqueness to the division of time into two and the dominance of winter and summer (Page 225)A) Spring, joyous, festive, decorated, praised and sung (Page 226)B) Summer, beautiful, fragrant and fertile (Page 241) C) The two dominant seasons of the year (Page 248)Chapter 2: The beauty of nature: its splendor illuminated by the sun and the stars, perfumed by flowers, painted by poets and writers, is demonstrated by the richness of its flora and fauna, on land, in the sky and in the sea (Page 259). A) Magnificent, majestic (Page 261) B) The sun, its beacon of light (Page 270) C) The sky, vast and full of brightly colored celestial bodies (Page 287) D) The fragrance of flowers in full bloom (Page 297) E) Bright colors (page 305) F) Enchanting flora, fauna and subsoil (Page 318) G) Ornate, fragrant and melodious earth (Page 345) H) Infinite crystalline sea (Page 370)Conclusion of Part One (Page 381) Part 2 Care: Coexistence of the ephemeral and the timeless, encyclopedic knowledge and mutual protection (Page 393)Introduction to second part (Page 394)Chapter 1: Man constantly loves and cares for nature, which rewards him with its fruits. (Page 395)A) Love, care, maintenance of nature and enjoyment of its fruits are timeless. (Page 396) B) Vegetables that still thrive, sources of gustatory pleasure (Page 434)Chapter 2: Nature and man: harmonious cohabitants and eternal defenders of biodiversity and ecosystems (Page 445) A) Nature constantly protects and protects itself (Page 446)B) Perpetual biodiversity and timeless ecosystems (Page 465) a) Biodiversity: admirable long-term cooperation, a driving force for balance (Page 467) 1) Birds: complementing and protecting each other and craftiness to achieve balance in nature (Page 481) 2) Marine mammals or cetaceans: adaptability, the result of long evolution or accident (Page 493) b) Ecosystems: synergy, a factor in fructification and local characteristics (Page 496)1) Land habitats: interaction, mutual accommodation, mutual respect (Page 509) 2) Aquatic habitats: serenity, magic, beauty accompanied by man, who both disturbs it and receives its fruits (Page 526) 3) "Hybrid" habitats: wealth, euphoria, identity (Page 530)3. 1) Beauty and fruitfulness, cooperation and enjoyment of goods (Page 533) 3.2) Admirable Greek land, an element of national and local identity (Page 535)Conclusion of the second part (Page 543)Conclusion of the Thesis (Page 544) Chapter 1: First part of the conclusion: Thematic review (Page 544)Chapter 2: Second part of the conclusion: a contribution to science. A mine of information for teachers and a life lesson for everyone. (Page 559) Chapter 3: Third part of the conclusion: "window" to the future. Continuation of the research along the thematic and methodological path mapped out (Page 561) Appendices (Page 567)Chapter 1 of the appendices: methodological itinerary (Page 567)A) First stage of categorization: linear annotation of data. (Page 572) B) Second stage of categorization: start of thematic categorization and emergence of the thematic structure (Page 574) c) Third stage of categorization: improving thematic categorization through horizontal synthesis and the emergence of a thematic architecture (Page 581) D) Fourth stage of categorization: evolution and improvement of the thematic orientation of the different sections of the thesis. (Page 590) E) Fifth categorization stage: synthetic refinement of the thematic architecture (Page 602) F) Sixth categorization stage: further compositional refinement of the thematic architecture when the table contains a large amount of data requiring further thematic synthesis. (Page 602) G) Seventh categorization stage: if necessary, additional synthetic categorization, due to the large amount of data. (Page 621) Chapter 2: auxiliaries, which complement, extend, enrich and are added to the basic positions and interpretations of the commentary (Page 637) A) Anthology covers (Page 637) B) Official documents (Page 643) a) Digital archives of analytical programmes 1899 - 1999 (Page 643) b) Environmental education (Page 661) c) Cover of the Environmental Education Teacher's Manual (Page 672) d) COP (Conference of the Parties) (Page 673)e) Low Emission Zones | Montpellier Méditerranée Métropole. (Page 675) C) Works of visual art, manuscripts, translations, paintings, musical works, photographs, posters, literary works, etc., which, in the present scientific work, have been used both as bibliographical support and as a means of giving an account of aesthetics (Page 683) a) Photograph from the archives of Rimbaud's poem Le Dormeur du val. (Page 683) b) Translation of Arthur Rimbaud's poem Le Dormeur du val by St. G. Cloris. (Page 683) c) Baudelaire Charles, IV. - Correspondences (Page 684) d) Beethoven, Symphony No. 6, Pastoral (Page 685) e) Letter to Theo Van Gogh (Page 685) f) La Mer - Charles Trenet (Page 686) g) Photograph of the cover of Jules Verne's book 20,000 Leagues Under the Sea (page 688) h) "La Madeleine" by Marcel Proust (Page 689) i) Francis Jammes' Cherries (Page 690) j) Poets inspired by the beauty of the sea (Page 690)1) Konstantinos P. Cavafy: The voice of the sea (extract) (Page 690) 2) Odysseus Elytis: Little green sea (Page 691)3) Kostas Karyotakis: Praise for the sea (Page 692)4) Katerina Vergetaki: Eternal lovers (Page 693)5) Ioannis Polemis: The Wood of the Cross (Page 694) k) Fontana di Trevi (Page 695) D) The earth is our home. How young people are protecting our planet (Page 696) Ε) The Anguilla flag (Page 704) Chapter 3: Translations of bibliographical references (Page 705) Chapter 4: Children's literature on the theme of nature (Page 745) Chapter 5: Search guides (Page 766) A) Index of authors of extracts in anthologies (Page 766)B) Wildlife index (Page 777) C) Flora index (Page 783) D) Natural phenomena index (Page 791) E) Nature sounds index (Page 801) F) Index to natural colors (Page 803) G) Index to nature's fragrances (Page 806) H) Index to the beauty of nature (Page 808) I) Index of concepts and notions (Page 813) J) Qualitative content analysis tables (Page 827) K) Statistical tables for quantitative content analysis (Page 829) L) Bar charts (Page 831) M) Photographs, paintings (Page 837)Corpus (Page 839) Bibliography Chapter 1: In Greek (Page 841)Chapter 2: In a foreign language (Page 869)Chapter 3: Webography (Page 889)Glossary of unknown words (Page 906)Summaries (Page 909) Chapter 1: in Greek (Περίληψη) (Page 909) Chapter 2: in French (Résumé) (Page 958) Chapter 3: in English (Abstract) (Page 1016) Chapter 4: in Italian (Sommario) (Page 1026)Η παρούσα διατριβή μελετά τις αναπαραστάσεις της φύσης στα ελληνικά ανθολόγια του δημοτικού σχολείου από το 1975 έως σήμερα και δομείται γύρω από τρεις βασικούς άξονες: μεθοδολογικό, δομικό και θεματικό. α) Όσον αφορά τη μεθοδολογική πορεία που ακολουθήθηκε, αυτή αφορά την επιλογή του θέματος, την οριοθέτηση του σώματος και τη μέθοδο που επιλέχθηκε.Από την άποψη του επιλεγμένου θέματος, τα τρία βασικά θεματικά στοιχεία της διατριβής είναι: 1) οι αναπαραστάσεις της φύσης, οι οποίες συζητούνται καθημερινά λόγω των κινδύνων που αντιμετωπίζει, 2) η σημασία των ελληνικών σχολικών εγχειριδίων του δημοτικού σχολείου, τα οποία αποτελούν καθρέφτη της άσκησης της εξουσίας και η μοναδικότητα, των οποίων επιτρέπει να σημειωθεί η έμφαση που δίνεται στις πολιτισμικές αξίες που επιλέγονται και μεταδίδονται στους μαθητές, και 3) η σημασία του έτους 1975, το οποίο αποτελεί κατασκευασμένο τόπο μνήμης της σημερινής ελληνικής κοινωνίας. Όσον αφορά το σώμα κειμένων, αποτελείται από όλα τα σχολικά ανθολόγια που χρησιμοποιήθηκαν από το 1975 και μέχρι σήμερα, εν έτη 2023. Όσον αφορά την επιλεγείσα μέθοδο, αυτή βασίζεται σε θεματικές κατηγοριοποιήσεις, θεματικές ομαδοποιήσεις, όλων των πληροφοριών που συνδέονται με το κύριο θέμα της διατριβής. Αυτές οι θεματικές κατηγορίες, τοποθετημένες κάθετα σε πίνακες με στήλες, αναλύθηκαν στη συνέχεια οριζόντια, μέσω επτά διαδοχικών επιπέδων θεματικής σύνθεσης, τα οποία επέτρεψαν τον προσδιορισμό της οιονεί τελικής άρθρωσης της διατριβής. Οιονεί-τελική, διότι ήταν ο σχολιασμός των ευρημάτων, συνοδευόμενος από βιβλιογραφική υποστήριξη, που οδήγησε στην κατασκευή της τελικής θεματικής αρχιτεκτονικής της διατριβής, όπως αυτή εμφανίζεται στον τελικό τίτλο της. β) Σε ό,τι αφορά τη δομή της διατριβής, βασικός στόχος ήταν να επικεντρωθεί εξαρχής στη μελέτη του θέματος που επιλέχθηκε στα Ανθολόγια, αποφεύγοντας εξαρχής τη βιβλιογραφική έρευνα και τη δημιουργία μιας θεωρητικής επισκόπησης. Ο λόγος είναι απλός: να αποφευχθεί η δημιουργία ενός θεωρητικού πλαισίου πριν από την ανάλυση του περιεχομένου και την ανάδειξη της θεματικής αρχιτεκτονικής της διατριβής, η οποία θα οδηγούσε αναπόφευκτα στην αναπαραγωγή ήδη υιοθετημένων θέσεων. Έτσι, αφού κατασκευάστηκε η θεματική αρχιτεκτονική, η θεωρητική επισκόπηση οικοδομήθηκε με βάση τις ανακαλύψεις που έγιναν μέσω της ανάλυσης περιεχομένου και περιλαμβάνει τρία μέρη αφιερωμένα σε, 1) την άσκηση της εξουσίας : από την αταξία στην τάξη και από την τάξη στην αταξία, 2) στην κυριαρχία και την επιβολή των αποφάσεων της άρχουσας τάξης, στην εκπαίδευση, στον έλεγχο των σχολικών προγραμμάτων και των σχολικών βιβλίων, στην (ανα)κατασκευή Τόπων Μνήμης και συλλογικών και πολιτισμικών αναπαραστάσεων, καθώς και καταφύγιο για την παιδική λογοτεχνία, 3) στην αέναη αναζήτηση και έκφραση της φύσης από τον άνθρωπο, την τροφή της καθυστερημένης προστασίας της, πηγή παιδείας, αλλά και δυνητικής βίας;Για το λόγο αυτό, το κύριο μέρος της διατριβής αφιερώνεται αποκλειστικά στις ανακαλύψεις αυτές, στην παρουσίασή τους από ποσοτική και ποιοτική άποψη και στον σχολιασμό τους, υποστηριζόμενο και διαφωτιζόμενο από τη βιβλιογραφία. γ) Όσον αφορά τη θεματική αρχιτεκτονική της διατριβής, ανακαλύφθηκε ότι οι συγγραφείς των Σχολικών Ανθολογίων, αδιάλειπτα από το 1975 έως το 2023, επιχειρούν, μέσω της εργαλειοποίησης της προστασίας της φύσης και της βιοποικιλότητας, να δημιουργήσουν μια μαζική οικολογική συνείδηση και να προσφέρουν πνευματική καθοδήγηση στους μαθητές των ελληνικών δημοτικών σχολείων. Οι αναπαραστάσεις της φύσης περιστρέφονται έτσι γύρω από δύο βασικά θέματα: 1) την ομορφιά της φύσης που αφηγείται με τρόπο που απευθύνεται στο συναίσθημα, στην καλλιέργεια της αισθητικής και στην έκφραση μιας επιστημονικής πραγματικότητας και 2) τη φροντίδα που δίνεται στη φύση και που ενσαρκώνεται από τη συνύπαρξη του εφήμερου και του διαχρονικού, από την εγκυκλοπαιδική και επιστημονική γνώση και από την αμοιβαία προστασία μεταξύ της φύσης και των ανθρώπινων προστατών της.Cette thèse étudie les représentations de la nature dans les anthologies de l’école primaire grecque de 1975 à nos jours et s’articule autour de trois axes essentiels, méthodologique, structurel et thématique. a) En ce qui concerne le parcours méthodologique suivi, il s’agit du choix du sujet, de la délimitation du corpus et de la méthode choisie. Du point de vue du thème choisi, les trois principaux éléments thématiques de la thèse sont 1) les représentations de la nature, qui sont discutées quotidiennement en raison des dangers auxquels elle est confrontée, 2) l’importance des manuels scolaires grecs de l’école primaire, qui sont des miroirs de l’exercice du pouvoir et dont l’unicité permet de constater la mise en exergue des valeurs culturelles sélectionnées et transmises aux élèves ainsi que 3) l’importance de l’année 1975 qui est un lieux de mémoire construit de la société grecque actuelle. Pour ce qui est du corpus délimité, il s’agit de la totalité des Anthologies scolaires utilisées de 1975 à 2023. Quant à la méthode choisie, elle est fondée sur des catégorisations thé

Galectin-1 overexpression in endometriosis and its regulation by neuropeptides (CRH, UCN) indicating its important role in reproduction and inflammation.

Endometriosis is an inflammatory disease of women of reproductive age featured by the presence of ectopic endometrium and is strongly related to infertility. Galectins, carbonhydrate-binding proteins, have been found to have pro- or anti-inflammatory roles in the reproductive tract and in pathological conditions concerning infertility. Galectin-1, which is expressed at endometrium and decidua, plays a major role in implantation and trophoblast invasion. Also, the neuropeptides, corticotropin releasing hormone (CRH) and urocortin (UCN) and their receptors are expressed in eutopic and ectopic endometrium showing a differential expression pattern in endometriotic women compared to healthy ones. The aim of this study was to examine the galectin-1 expression in endometriotic lesions and compare its expression in eutopic endometrium of endometriotic and healthy women. Furthermore, we examined the effect of CRH and UCN in galectin-1 expression in Ishikawa cell line and macrophages and investigated the implication of CRHR1 in these responses. Eutopic and ectopic endometrium specimens, Ishikawa cell line and mice macrophages were used. Immunohistochemistry and western blot analysis were performed in order to identify galectin-1 expression in ectopic and eutopic endometrium of women with and without endometriosis and the regulatory effect of CRH and UCN on galectin-1 expression. This study presents for the first time that galectin-1 is overexpressed in endometriotic lesions compared to eutopic endometrium of endometriotic women and is more abundantly expressed in eutopic endometrium of disease women compared to healthy ones. Furthermore, it is shown that CRH and UCN upregulate galectin-1 expression in Ishikawa cell line and macrophages and this effect is mediated through CRHR1. These results suggest that galectin-1 might play an important role in endometriosis pathology and infertility profile of women suffering from endometriosis by being at the same time regulated by CRH and UCN interfering in the immune disequilibrium which characterizes this pathological condition

Galectin-1 is upregulated in macrophages upon CRH and UCN stimulation and this is mediated through CRHR1.

<p>Western blot immunodetection of galectin-1 (14 kDa) protein expression in macrophages, regulated by CRH and UCN neuropeptides. GAPDH (37 KDa) was used as a house keeping gene. <b>3a:</b> In mice macrophages, galectin-1 expression is upregulated by CRH mostly at 24 hrs and Antalarmin effect is stronger at 24 hrs. <b>3b:</b> In mice macrophages, galectin-1 expression is mostly upregulated by UCN at 24 hrs.</p

Galectin-1 overexpression in late secretory phase of eutopic endometrium and in endometriotic sites.

<p><b>1a:</b> Immunohistochemical expression of galectin-1 expression through the different phases of the menstrual cycle of the endometrium (A: proliferative, B: early secretory phase, C: late secretory phase) showing a higher expression pattern at the late secretory phase of the endometrium(C), *p<0.05. <b>1b:</b> Western blot immunodetection of galectin-1 (14 kDa) protein expression in eutopic and ectopic endometrium. Galectin-1 is overexpressed in eutopic endometrium of endometriotic women (ee) when compared to eutopic endometrium of healthy women (he), *p<0.05 and galectin-1 shows an abundant expression in ectopic endometrium (e) when compared to eutopic endometrium of the same endometriotic women (ee), **p<0.01. GAPDH (37 KDa) was used as a house keeping gene.</p

IRS Score results.

<p>We have found that 7/16(43,75%) ectopic endometrium samples showed strong CRH expression and 9/16(69,2%) ectopic endometrium samples showed moderate CRH expression compared to 2/16(12,5%) eutopic endometrium samples of strong CRH expression and 14/16(87,5%) eutopic endometrium samples of moderate CRH expression. Concerning the UCN expression in eutopic and ectopic endometium of the same patients, we have found that 5/16(31,25%) ectopic endometrium samples showed strong UCN expression and 11/16(68,75%) ectopic endometrium samples showed moderate UCN expression compared to 1/16(6,25%) eutopic endometrium samples of strong UCN expression and 15/16(93,75%) eutopic endometrium samples of moderate UCN expression.</p

Galectin-1 is upregulated in Ishikawa cell line upon CRH and UCN stimulation and this is mediated through CRHR1.

<p>Western blot immunodetection of galectin-1 (14 kDa) protein expression in Ishikawa cell line, regulated by CRH and UCN neuropeptides. GAPDH (37 KDa) was used as a house keeping gene. <b>2a:</b> In Ishikawa cell line, galectin-1 expression is upregulated by CRH, showing a higher expression at 8 hrs and 24 hrs of stimulation. When antalarmin is added, galectin-1 shows an impaired expression mostly at 24 hrs of stimulation. <b>2b:</b> In Ishikawa cell line, galectin-1 is upregulated by UCN, showing a higher expression at 8 hrs of stimulation.</p