The South American Plains Vizcacha, Lagostomus maximus, as a Valuable Animal Model for Reproductive Studies

The vast majority of our understanding of the mammalianreproductive biology comes from investigations mainlyperformed in mice, rats and humans. However, evidencegathered from non-conventional laboratory models, farm andwild animals strongly suggests that reproductive mechanismsshow a plethora of different strategies among species. Forinstance, studies developed in unconventional rodents suchas guinea pigs and hamsters, that share with humans someendocrine and reproductive characters, have contributed to abetter understanding of human physiology and disease [1,2]. Abetter knowledge on the variety of mechanisms that regulatereproduction could lead to improve early diagnosis, treatment,or novel strategies development to ameliorate fertility andguarantee a successful reproduction. In this letter, we brieflyintroduce Lagostomus maximus, an unconventional rodentwhose neuro-endocrinology and reproduction in general haveattracted significant interest in recent years in view of its unusualreproductive traits.Fil: Dorfman, Verónica Berta. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Inserra, Pablo Ignacio Felipe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Leopardo, Noelia Paola. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Halperin, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Vitullo, Alfredo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentin

Prolactin is a strong candidate for the regulation of luteal steroidogenesis in vizcachas (Lagostomus maximus)

Prolactin (PRL) is essential for the maintenance of the corpora lutea and the production of progesterone (P4) during gestation of mice and rats, which makes it a key factor for their successful reproduction. Unlike these rodents and the vast majority of mammals, female vizcachas (Lagostomus maximus) have a peculiar reproductive biology characterized by an ovulatory event during pregnancy that generates secondary corpora lutea with a consequent increment of the circulating P4. We found that, although the expression of pituitary PRL increased steadily during pregnancy, its ovarian receptor (PRLR) reached its maximum in midpregnancy and drastically decreased at term pregnancy. The luteinizing hormone receptor (LHR) exhibited a similar profile than PRLR. Maximum P4 and LH blood levels were recorded at midpregnancy as well. Remarkably, the P4-sinthesizing enzyme 3β-HSD accompanied the expression pattern of PRLR/LHR throughout gestation. Instead, the luteolytic enzyme 20α-HSD showed low expression at early and midpregnancy, but reached its maximum at the end of gestation, when PRLR/LHR/3ß-HSD expressions and circulating P4 were minimal. In conclusion, both the PRLR and LHR expressions in the ovary would define the success of gestation in vizcachas by modulating the levels of 20α-HSD and 3ß-HSD, which ultimately determine the level of serum P4 throughout gestation.Fil: Proietto, Sofia. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cortasa, Santiago Andrés. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Corso, María Clara. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Inserra, Pablo Ignacio Felipe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; ArgentinaFil: Charif, Santiago Elías. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Schmidt, Alan Raul. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Di Giorgio, Noelia Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Lux Lantos, V.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Vitullo, Alfredo Daniel. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dorfman, Verónica Berta. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Halperin, Julia. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico. Departamento de Estudios Biomédicos y Biotecnológicos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

First record of an infection by tissue cyst-forming coccidia in wild vizcachas (Lagostomus maximus, Rodentia) of Argentina

Endoparasites of the Sarcocystidae family share the ability to form tissue cysts in their intermediate hosts, ultimately leading to pathogenesis in the definitive hosts that include various mammals, reptiles and birds. In our research on the endocrinology of the female vizcachas (Lagostomus maximus), we have found abnormal cystic structures in the ovaries of some individuals. So far, no cases of infection by tissue cyst-forming parasites have been reported in this species. To evaluate whether this autochthonous wild rodent is an intermediate host of an undescribed endoparasite, histological sections from various organs were examined. Pinhead-sized tissue cysts were found in the ovaries, mammary glands, uterus, pituitary, brain, adrenals and spleen, of both pregnant and non-pregnant females. The presence of cysts in the adult brain and embryonic tissue is indicative of the ability of the parasite to cross both the blood-brain and placental barriers. The infected brains exhibited a lower cyst density than that seen in other organs. Regardless of their location in superficial or deep tissue, the cysts were surrounded by a layer of connective tissue. Histologically, the cyst wall consisted of an outer layer of fibroblasts and collagen fibers, and an inner, granular-looking layer composed of host nucleated cells surrounding thousands of spindle-shaped bradyzoites. Outside the cysts, the host cellular structures showed normal appearance. The remarkable morphological similarities between the cysts studied here with those reported in naturally infected rabbits from an area neighboring the one inhabited by the vizcachas point to Besnoitia sp. as a plausible candidate. More studies will be necessary to confirm the identity of the parasite. Nevertheless, this is the first report of L. maximus as an intermediate host for a tissue cyst-forming coccidia.Fil: Cwirenbaum, Ruth Ana. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Schmidt, Alejandro Raúl. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Cortasa, Santiago Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Corso, María Clara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Vitullo, Alfredo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Dorfman, Verónica Berta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Halperin, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentin

Efecto protector del azul de metileno en la retinopatía del prematuro experimental

Introducción: La hipoxia-isquemia por asfixia perinatal (AP) es causa de lesiones en la retina, pudiendo llevar a la ceguera por retinopatía proliferativa isquémica (RPI). En estudios previos hemos demostrado neurodegeneración, gliosis y neovascularización compatibles con la ROP, e identificado que el sistema nitrérgico está involucrado en su fisiopatología. Objetivos: Analizar la aplicación de azul de metileno como potencial estrategia terapéutica, dado que inhibe a la enzima óxido nítrico sintasa. Métodos: Se estudió la actividad enzimática y expresión de nNOS mediante Western blot, histoquímica de NADPHd e inmunohistoquímica contra nNOS, en la retina de animales de 30 días en un modelo de AP. Resultados: Se observó que a los 30 días postnatal, la nNOS aumenta significativamente su actividad y expresión en aquellos animales sometidos a AP al ser comparados con el grupo control (CTL). En el grupo AP tratado con azul de metileno (AZM) no se encontraron diferencias significativas en la actividad de NOS constitutiva con respecto al grupo CTL, mientras que su expresión evaluada por western blot fue menor. Los estudios realizados con histoquímica para NADPHd e inmunohistoquímica contra nNOS refuerzan estos resultados. Conclusiones: El NO es un radical libre que participa como neurotóxico en el desarrollo de la ROP por AP. La aplicación de azul de metileno como estrategia terapéutica, tiene un potente efecto bloqueante en la actividad de la enzima NOS constitutiva, y en la expresión de la misma. Este hallazgo alienta estudios futuros más exhaustivos para evaluar el uso del azul de metileno con el fin de atenuar o evitar el daño retiniano.Introduction: Hipoxia-ischemia by perinatal asphyxia (PA) is cause of retinal lesions, and can produce blindness by ischemic proliferative retinopathy (IPR). Previously, we have demonstrated retinal neurodegeneration, gliosis and neovascularization. Furthermore, we have identified the involvement of the nitregic system in it physiopatology. Objectives: Studying the participation of nitric oxide (NO) through the neuronal isoform of the enzyme nitric oxide sinthase (nNO) as trigger of the structural and molecular alterations previously observed by our group of research, and analyzing the application of methylene blue (MB) a therapeutic strategy. Methods: The studies were performed in retina by using enzymatic activity, NADPHd histochemical method and immunohistochemistry against nNOS. The studies were applied in three diferent groups (control, PA and MB) of 30 postnatal day animals. Results: At 30 postnatal day, we observed a significant increase of nNOS ativity and expression in retinas of those animals subjected to PA, when compared with the control group. In the group treated with methylene blue we did not found significant diferences in constitutive NOS activity, meanwhile it expression evaluated by western blot was lower than controls. The histochemical and immunohistochemical studies support these results. Conclusions: NO, is a free radical that act as a neurotoxic agent, seems to have a crucial role in the development of ROP after PA. The application of methylene blue as a therapeutic strategy showed a strong protective efect inhibiting the constitutive NOS activity and it expression. This founds stimulates future studies with the aim of using MB in order to avoid or decrease retinal damage.Fil: Rey Funes, Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Fernández, J. C.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología; ArgentinaFil: Ibarra, Mariano Esteban. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Peña, Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Contartese, Daniela Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Inserra, Pablo Ignacio Felipe. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: López, Juan José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Dorfman, Verónica Berta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Loidl, Cesar Fabian. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Variation in progesterone receptors and GnRH expression in the hypothalamus of the pregnant South American plains vizcacha, Lagostomus maximus (Mammalia, Rodentia)

In mammals, elevated levels of progesterone (P4) throughout gestation maintain a negative feedback over the hypothalamic-hypophyseal-gonadal (H-H-G) axis, avoiding preovulatory follicular growth and preventing ovulation. Recent studies showed that in the South American plains vizcacha (Lagostomus maximus) folliculogenesis progresses to preovulatory stages during gestation, and an ovulatory process seems to occur at midgestation. The aim of this work was to analyze hypothalamic gonadotropin-releasing hormone (GnRH) and P4 receptors (PR) expression and luteinizing hormone (LH) secretion and correlate these with the functional state of the ovary in nonovulating and ovulating females and gestating females with special emphasis in the supposedly ovulating females at midgestation. We investigated P4 and LH serum levels as well as the distribution, localization, and expression of PR and GnRH in the hypothalamus of L. maximus at different time points during gestation and in nongestating, ovulating and nonovulating, females. A significant increment in GnRH, P4, and LH was detected in midpregnant vizcachas with respect to early-pregnant and to ovulating females. PR was also significantly increased in midpregnant animals. PR was detected in neurons of the preoptic and hypothalamic areas. Coexistence of both PR and GnRH in neurons of medial preoptic area and supraoptic nucleus was detected. Midpregnant animals showed increased number of PR immunoreactive cells at median eminence, localized adjacently to GnRH immunoreactive fibers. High expression of hypothalamic GnRH and PR, despite an increased level of P4, was correlated with the presence of antral, preovulatory follicles, and luteinized unruptured follicles at midgestation that suggest a possible role of the H-H-G axis in the modulation of ovulation during gestationFil: Dorfman, Verónica Berta. Universidad Maimónides. Area de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y Diagnósticos; ArgentinaFil: Saucedo, Lucia. Universidad Maimónides. Area de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y Diagnósticos; ArgentinaFil: Di Giorgio, Noelia Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); ArgentinaFil: Inserra, Pablo Ignacio Felipe. Universidad Maimónides. Area de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y Diagnósticos; ArgentinaFil: Fraunhoffer Navarro, Nicolas Alejandro. Universidad Maimónides. Area de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y Diagnósticos; ArgentinaFil: Leopardo, Noelia Paola. Universidad Maimónides. Area de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y Diagnósticos; ArgentinaFil: Halperin, Julia. Universidad Maimónides. Area de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y Diagnósticos; ArgentinaFil: Lux, Victoria Adela R.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental (i); ArgentinaFil: Vitullo, Alfredo Daniel. Universidad Maimónides. Area de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y Diagnósticos; Argentin

Hypothalamic GnRH expression and pulsatility depends on a balance of prolactin receptors in the plains vizcacha, Lagostomus maximus

In mammals, gestation is considered a physiological hyperprolactinemia status. Prolactin (PRL) is one of the modulators of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) neurons function. The South American plains vizcacha (Lagostomus maximus) is a unique model to study the regulation of hypothalamic GnRH neurons by direct and indirect steroid-dependent pathways. The aim was to characterize the hypothalamic expression of endocrine markers in vizcacha during gestation as well as their response to experimental induced hyperprolactinemia. The possible involvement of PRL regulatory pathways on GnRH in the context of hypothalamic and pituitary reactivation in mid-gestating vizcachas was discussed. Using two in vivo approaches, we determined changes in the hypothalamic expression and distribution of prolactin receptor (PRLR), tyrosine hydroxylase (TH), and dopamine type 2 receptor. A significant increment in the number of tuberoinfundibular dopaminergic (TIDA) neurons was determined in the arcuate nucleus from early to term pregnancy. On the other hand, at preoptic area, the number of both TH+PRLR+ and GnRH+PRLR+ double-labeled neurons significantly decreased at mid-pregnancy probably allowing the recovery of GnRH expression indicating that both types of neurons may represent the key points of PRL indirect and direct pathways modulating GnRH. Moreover, in a model of induced hyperprolactinemic vizcachas, the inhibitory effect of PRL on GnRH at both expression and delivery levels were confirmed. These results suggest the concomitant participation of both PRL regulatory pathways on GnRH modulation and pinpoint the key role of PRL on GnRH expression enabling the recovery of the hypothalamic activity during the gestation in this species.Fil: Cortasa, Santiago Andrés. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Schmidt, Alejandro Raúl. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Proietto, Sofia. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Corso, María Clara. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Inserra, Pablo Ignacio Felipe. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Di Giorgio, Noelia Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Lux, Victoria Adela R.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Vitullo, Alfredo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Halperin, Julia. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dorfman, Verónica Berta. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Hypothermia prevents gliosis and angiogenesis development in an experimental model of ischemic proliferative retinopathy

PURPOSE: To develop a time course study of vascularization and glial response to perinatal asphyxia in hypoxic-ischemic animals, and to evaluate hypothermia as possible protective treatment. METHODS: We used retinas of 7-, 15-, 21-, and 30-day-old male Sprague-Dawley rats that were exposed to perinatal asphyxia at either 37°C (PA) or 15°C (HYP). Born to term animals were used as controls (CTL). We evaluated the thickness of the most inner layers of the retina (IR), including internal limiting membrane, the retinal nerve fiber layer, and the ganglion cell layer; and studied glial development, neovascularization, adrenomedullin (AM), and VEGF by immunohistochemistry, immunofluorescence, and Western blot. RESULTS: A significant increment in IR thickness was observed in the PA group from postnatal day (PND) 15 on. This alteration was concordant with an increased number of new vessels and increased GFAP expression. The immunolocalization of GFAP in the internal limiting membrane and perivascular glia of the IR and in the inner processes of Müller cells was coexpressed with AM, which was also significantly increased from PND7 in PA animals. In addition, VEGF expression was immunolocalized in cells of the ganglion cell layer of the IR and this expression significantly increased in the PA group from PND15 on. The retinas of the HYP group did not show differences when compared with CTL at any age. CONCLUSIONS: This work demonstrates that aberrant angiogenesis and exacerbated gliosis seem to be responsible for the increased thickness of the inner retina as a consequence of perinatal asphyxia, and that hypothermia is able to prevent these alterations.Fil: Rey Funes, Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia ; ArgentinaFil: Dorfman, Verónica Berta. Universidad Maimónides. Area de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ibarra, Mariano Esteban. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia ; ArgentinaFil: Peña, Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia ; ArgentinaFil: Contartese, Daniela Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia ; ArgentinaFil: Goldstein Raij, Jorge. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Departamento de Ciencias Fisiológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Acosta, Juan Manuel. Universidad Católica de Cuyo - Sede San Juan. Facultad de Ciencias Médicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Larráyoz, Ignacio M.. Centro de Investigación Biomédica de La Rioja; EspañaFil: Martínez Murillo, Ricardo. Consejo Superior de Investigaciones Cientificas; España. Instituto Cajal. Departamento de Neurobiología Molecular, Celular y del Desarrollo; EspañaFil: Martínez, Alfredo. Centro de Investigación Biomédica de La Rioja; España. Consejo Superior de Investigaciones Cientificas; EspañaFil: Loidl, Cesar Fabian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia ; Argentina. Universidad Católica de Cuyo - Sede San Juan. Facultad de Ciencias Médicas; Argentin

Modelo de hipotermia experimental en murinos para estudios de lesión medular

Introducción: Los ensayos de hipotermia sistémica en murinos son costosos, debido a la complejidad de los sistemas. El objetivo de este estudio fue evaluar si el modelo de hipotermia sistémica exógena utilizado en nuestro laboratorio para la hipotermia ocular es útil para reducir significativamente la temperatura de la médula espinal en ratas adultas. Materiales y Métodos: Se utilizaron 36 ratas Sprague-Dawley albinas macho de 60 días, distribuidas en dos grupos: grupo normotermia a 24 °C (n = 18) y grupo hipotermia (n = 18) en cámara fría a 8 °C durante 180 minutos. Resultados: La temperatura rectal promedio fue de 37,71 ± 0,572 °C en el grupo normotermia y 34,03 ± 0,250 °C en el grupo hipotermia (p <0,0001). La temperatura medular promedio fue de 38,8 ± 0,468 °C en el grupo normotermia y de 36,4 ± 0,290 °C en el grupo hipotermia (p <0,0001). Conclusiones: El uso de hipotermia sistémica en ratas de laboratorio parece ser un método prometedor para evaluar los mecanismos fisiológicos y patológicos que se desencadenan en la médula espinal. La exposición al frío en cámara genera hipotermia medular significativa en ratas adultas. Los resultados sugieren que podría ser un modelo adecuado de hipotermia medular de bajo costo

Expression of Cold-Inducible Proteins in Rat Spinal Cord Subjected to Systemic Hypothermia

Introducción: La lesión traumática de la médula espinal es la principal causa de discapacidad motora en el mundo, y representa una prioridad para la Organización Mundial de la Salud. Se estudió, a nivel estructural y bioquímico, el efecto de la hipotermia sobre la expresión de la CIRBP (proteína activada por frío) en el asta anterior de la médula de ratas Sprague-Dawley albinas macho de 60 días, planteándola como terapéutica posible. Materiales y Métodos: Se dividió a 24 ratas en dos grupos: normotermia a 24 °C (n = 6) e hipotermia a 8 °C (n = 18), durante 180 min, sacrificadas a las 12, 24 y 48 h después del tratamiento. Se utilizó Western blot e inmunohistoquímica para la CIRBP. Resultados: Se observó un aumento progresivo de la expresión de la CIRBP de 12 a 48 h en las motoneuronas del asta anterior. Los valores fueron estadísticamente significativos entre los grupos de 24 h y 48 h comparados con los de los controles. Conclusiones: Este modelo experimental resultó eficaz, accesible y económico para generar hipotermia sistémica y abre un abanico de estrategias terapéuticas. El aumento en la expresión de las proteínas inducibles por frío en la médula espinal de ratas permite, por primera vez, estudiar el beneficio que aporta la hipotermia a nivel molecular, lo que resulta de suma importancia para estudios de terapéuticas en las lesiones medulares.Introduction: Traumatic spinal cord injury is the main cause of motor disability in developed and underdeveloped countries, being a priority interest to the WHO. The effect of hypothermia on the expression of CIRBP (cold-activated protein) in the anterior grey column of 60-day-old male albino Sprague-Dawley rats was studied at the structural and biochemical levels and proposed as a possible therapeutic approach. Materials and Methods: 24 rats were randomly divided into two groups; normothermia (n = 6), at 24° C, and hypothermia, (n = 18) at 8° C for 180 minutes and euthanized at 12, 24, and 48 h post-treatment. Western blot and immunohistochemistry for CIRBP were used. Results: A progressive increase in the expression of CIRBP was observed from 12 to 48 hours, with statistically significant values after 24 and 48 hours compared to controls. Conclusion: This experimental model demonstrated efficacy, accessibility, and economy to generate systemic hypothermia, which provides a novel range of therapeutic strategies. The increase in the expression of cold-inducible proteins in the rats’ spinal cords allows us to study the benefit of hypothermia at the molecular level for the first time, being of utmost importance for therapeutic studies in spinal cord injuries.Fil: Sarotto, Aníbal José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Rey Funes, Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Dorfman, Verónica Berta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Maimónides. Área de Investigaciones Biomédicas y Biotecnológicas. Centro de Estudios Biomédicos, Biotecnológicos, Ambientales y de Diagnóstico; ArgentinaFil: Contartese, Daniela Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; ArgentinaFil: Larráyoz, Ignacio M.. Center for Biomedical Research of La Rioja; EspañaFil: Martínez, Alfredo. Center for Biomedical Research of La Rioja; EspañaFil: Toscanini, María Agustina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Nanobiotecnología. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Loidl, Cesar Fabian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Biología Celular y Neurociencia "Prof. Eduardo de Robertis". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Biología Celular y Neurociencia; Argentin

Contusión medular en ratas tratadas con hipotermia sistémica. Expresión de proteínas inducibles por frío experimental

Introducción: La lesión traumática de la médula espinal es la principal causa mundial de discapacidad motora y una prioridad para la OMS. El objetivo de esta investigación fue estudiar el efecto de la hipotermia terapéutica tras una contusión medular. Materiales y Métodos: Se utilizaron ratas macho a las que se les generó una contusión medular. Se formaron cuatro grupos (6 animales por grupo): a) de control, b) con lesión en normotermia (24 °C, sacrificados 12 h después de la lesión, c) con lesión en normotermia (24 °C, sacrificados 24 h después de la lesión) y d) lesión en hipotermia (8 °C, durante 180 min, sacrificados 24 h después de la lesión). Se estudió la expresión de la CIRBP, la caspasa-3 y la Neu-N. Resultados: La lesión medular aumentó ligeramente la expresión de CIRBP a las 24 h y, de manera importante, la de caspasa-3, todo acompañado por imágenes de motoneuronas dañadas en el asta anterior. En los animales tratados con hipotermia, se observó una alta expresión de CIRBP y niveles muy bajos de caspasa-3, que no se distinguen de los controles. El número de motoneuronas viables se restauró parcialmente. Conclusiones: Este modelo experimental resultó eficaz para inducir una lesión medular, demostró la protección neuronal mediada por hipotermia. El aumento de la expresión de CIRBP en la médula espinal de ratas con lesión e hipotermia comparado con el del grupo normotérmico abre el camino para un posible uso de sustancias que incrementen la CIRBP como terapéutica para las lesiones medulares contusivas.Introduction: Traumatic spinal cord injury is the leading cause of motor disability worldwide, and the WHO considers it a priority. This study sought to investigate the effects of therapeutic hypothermia following spinal cord contusion. Materials and Methods: Male rats that underwent experimental spinal cord contusion were used. For this purpose, four experimental groups were created (n=6 per group): a) control, b) lesion in normothermia (24°C, sacrificed 12h after the injury), c) lesion in normothermia (24°C, sacrificed 24h after the injury), and d) hypothermic injury (8°C for 180 min, sacrificed 24h after the injury). The expression of cold-inducible RNA-binding protein (CIRBP), Caspase-3, and NeuN was studied. Results: At 24 hours, spinal cord damage raised CIRBP expression slightly while also increasing Caspase-3 significantly. All of this was accompanied by images of damaged motor neurons in the anterior horn. In animals treated with hypothermia, high expression of CIRBP and very low levels of Caspase-3 were observed, which were indistinguishable from controls. Furthermore, the number of viable motor neurons was partially restored. Conclusions: The experimental model developed in this study was effective at inducing spinal cord injury, demonstrating neuronal protection through hypothermia. The increased expression of CIRBP in the spinal cord of rats with injury and hypothermic treat-ment when compared to the normothermic group suggests the possibility of using substances that increase CIRBP as therapies for the treatment of contusive spinal cord injuries