Mineralogía de rocas metamórficas de la serie occidental entre los 41°15´S y 41°25´S (Complejo metamórfico de Bahía Mansa): Implicancias geotermobarométricas

GeólogaEl Complejo Metamórfico de Bahía Mansa, entre las latitudes 41º15 S y 41º25 S, corresponde a una intercalación de esquistos máficos y esquistos pelíticos, los que presentan asociaciones mineralógicas variables de anfíbol albita epidota -clinozoisita titanita - cuarzo - clorita y cuarzo - mica blanca - clorita - albita - biotita, respectivamente, las que se asocian a un metamorfismo en la facies esquistos verdes. Con el fin de caracterizar detalladamente la mineralogía de estas rocas y así aportar datos respecto a la historia geotermobarométrica del Complejo Metamórfico de Bahía Mansa entre las latitudes antes señaladas, se lleva a cabo un estudio petrográfico y de química mineral para una serie de muestras, tanto de esquistos máficos como pelíticos. Los resultados obtenidos muestran que, en los esquistos máficos, los anfíboles presentes corresponden a actinolita y magnesihornblenda, mientras que la mayoría de los cristales de plagioclasa estudiados corresponden a albita (Xab>0.9), estas se encuentran muy alteradas a clinozoisita y epidota.; la clorita, por otra parte, presenta predominancia del componente clinocloro. En los esquistos pelíticos, la mica blanca se ubica cercana al campo de la muscovita, mientras que la clorita se concentra cercana al campo de la amesita; la plagioclasa corresponde principalmente a albita (XAb>0.9). Mediante la aplicación de geotermómetros de clorita y de anfíbol-plagioclasa y de geobarómetros de anfíbol y fengita, se obtienen datos de presión y temperatura para estas rocas. Los resultados indican que los esquistos máficos estudiados habrían alcanzado la facies anfibolita, con un peak asociado cercano a 590ºC y 7,5kbar, para luego retrogradar a la facies esquistos verdes; para los esquistos pelíticos, por otra parte, se tiene que estos habrían alcanzado la facies esquistos verdes, grado de biotita, para luego retrogradar al grado de clorita, con un peak asociado cercano a 365ºC y 6 kbar. Se concluye que los esquistos pelíticos estudiados representan niveles más someros del Complejo Metamórfico de Bahía Mansa, mientras que los esquistos máficos representan una componente más profunda.Estudio financiado por Proyecto FONDECYT 113022

Nanoantimicrobianos, estrategia para la erradicación de biopelículas

Las infecciones fúngicas invasivas son causadaspredominantemente por el género Candida.Este patógeno oportunista posee la capacidad de adherirse a superficies tantobióticas como abióticas y formar biopelículas. Las células sésiles de estabiopelícula pueden ser hasta 1000 veces más resistentes a los fármacosantimicrobianos que las células planctónicas. La resistencia que presenta labiopelícula hace que se requieran dosis muy altas de fármacos para sutratamiento. Las nanopartículas (NP) obtenidas por síntesis biológica (síntesisverde) tienen especial interés por ser amigables con el medio ambiente. Unaestrategia emergente es combinar NP como las de plata (NP Ag) con antifúngicos(ATF) utilizados en la clínica, en busca de sinergia y así potenciar laactividad antimicrobiana o reducir la dosis de los mismos. Se realizaronestudios con NP Ag biosintetizadas solas y combinadas con un ATF de referenciacomo la Anfotericina B (AmB), frente al biopelículas maduras de Candida.Se utilizaron las cepas de C. albicans SC5314 y C.tropicalis NCPF 3111 para estudiar el efecto de las NP Ag biosintetizadas yde AmB. Se determinaron las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM). Seformaron las biopelículas maduras (48 h a 37 ºC) en microplaca de 96 pocillos,se evaluó la actividad de las NP Ag, de AmB, y de la combinación entre NPAg+AmB. Se cuantificó la biopelícula de cada una de las cepas de estudiomediante la tinción con cristal violeta, se midió por espectrofotometría a 595nm y la densidad óptica se expresó como unidades de biomasa de la biopelícula(UBB). A partir de los resultados de UBB, se calculó el porcentaje decrecimiento (%C) y el de reducción (%R). Además, la estructura de labiopelícula se observó por microscopía óptica de campo brillante y defluorescencia.Para la cepa C.albicans la CIM de las NP Ag se determinó en 0,84 nM y la de AmB fue de0,25 μg/ml, mientras que la UBB fue de 15,01 ± 0,14. Se determinó, para cadatratamiento, la CIM que reduce el 50% de la biopelícula madura (CIMs50).Las NP Ag a la concentración de 13,5 nM (16 veces más alta que en célulasplanctónicas) mostraron una reducción de la biopelícula del 49% y AmB a 50μg/ml (200 veces más alta que la CIM) redujo un 58% la biopelícula(*p<0,05). La combinación ensayada con las NP Ag (13,5 nM) y con AmB (50μg/ml) erradicó un 54% de la biopelícula madura con respecto a la biopelículacontrol (*p<0,05). A través del análisis de las imágenes obtenidas pormicroscopías se observó que los tratamientos produjeron la reducción de lasuperficie adherida de la biopelícula de esta cepa de C. albicans.Para la cepa C. tropicalis la CIM de AmB se determinóen 0,25 µg/ml. En esta cepa, la UBBfue de 35 ± 0,34. AmB a 50 µg/ml redujo un 54% la biopelícula (*p<0,05). Lacombinación NP Ag+AmB alcanzaron una erradicación del 80% de la biopelículamadura, resultando más efectivo que los tratamientos de los compuestosevaluados por separado (*p < 0,05; #p < 0,05). En este caso,las imágenes obtenidas por las microscopías revelaron que el tratamiento conAmB  produjo una disminución de lasuperficie de la biopelícula y en la combinación entre las NP Ag y AmB estadisminución fue más acentuada aún.En la biopelícula madura de C. albicans, las NP Ag biosintetizadas, solas y combinadas,presentaron una importante actividad antibiopelícula o atibiofilm. En el casode la biopelícula de C. tropicalis sepudo observar que la combinación con las NP Ag produjo una potenciación en la acción de AmB. Estos resultados son alentadorescomo posible estrategia para el tratamiento de infecciones fúngicas resistentespor la formación de biopelículas.Fil: Veas, Vanina Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Páez, Paulina Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Paraje, María Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentin

Nanopartículas de plata biosinterizadas con actividad antifúngica sobre biofilm de Candida tropicalis

La formación de biofilm es un factor de virulencia complejo y su resistencia a losantifúngicos (ATF) frecuentemente utilizados en la clínica hace urgente la búsqueda de nuevas estrategias para combatirlos. Candida tropicalis es una de las especies fúngica aislada frecuentemente en Sudamérica. El uso de la nanotecnología ha sido sin dudas un factor clave en muchos campos y particularmente en la nano-medicina. La investigación en las nanopartículas (NP) como nano-antibióticos muestra resultados prometedores. Las NP obtenidas por síntesis biológica son una alternativa amigable con el ambiente y presentan interés para su exploración como posible antimicrobiano. Este trabajo estudió el efecto ATF de nanopartículas de plata (NP Ag)biosintetizadas, y fueron combinadas con Anfotericina B (AmB), un ATF utilizado para tratar infecciones por Candida, en busca de acciones sinérgicas. Se utilizó AmB (98% pureza), la cepa de referencia C. tropicalis NCPF 3111 y las NPAg biosintetizadas a partir de Penicillium expansum. Se estudió la concentración inhibitoria mínima (CIM) de lasNP Ag (0,42-13,5 nM) y de AmB (0,03-16 µg/ml) de acuerdo con normas del CLSI norma M27-A3. Se combinaron diferentes concentraciones de los compuestos en placa de 96 pocillos, se cuantificó mediante la tinción con cristal violeta (CV) y lectura espectrofotométrica, y se calculó el porcentaje de reducción (%R) sobreun biofilm de 48 h.Resultados: Para las concentraciones ensayadas de NP Ag la CIM se determinó en 0,84 nM y en AmB fue en0,25 µg/ml. Estudios de combinación sub CIM, CIM y supraCIM mostraron distintos %R. Los compuestos solos y su combinación mostraron los siguientes %R: 5% NP Ag (13,5 nM), 54% AmB (50 µg/ml) y la máximareducción fue del 81% para la combinación NP Ag+AmB para estas concentraciones. Las NP Ag biosintetizadas mejoraron la acción ATF de AmB, pudiendo ser una estrategia prometedora para el tratamiento de infecciones fúngicas resistentes por la formación de biofilm.Fil: Veas, Vanina Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Galera, Ivana Laura Delia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; ArgentinaFil: Esteves Vidal, Belén. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; ArgentinaFil: Alborés, Silvana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Universidad de la República; UruguayFil: Páez, Paulina Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Paraje, María Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; ArgentinaXV Congreso Argentino de Microbiología; V Congreso Argentino de Microbiología de Alimentos; V Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos y Cosméticos; XIV Congreso Argentino de Microbiología GeneralBuenos AiresArgentinaAsociación Argentina de Microbiologí

Endothelium trans differentiated from Wharton's jelly mesenchymal cells promote tissue regeneration: potential role of soluble pro-angiogenic factors.

Mesenchymal stem cells have a high capacity for trans-differentiation toward many adult cell types, including endothelial cells. Feto-placental tissue, such as Wharton's jelly is a potential source of mesenchymal stem cells with low immunogenic capacity; make them an excellent source of progenitor cells with a potential use for tissue repair. We evaluated whether administration of endothelial cells derived from mesenchymal stem cells isolated from Wharton's jelly (hWMSCs) can accelerate tissue repair in vivo.Mesenchymal stem cells were isolated from human Wharton's jelly by digestion with collagenase type I. Endothelial trans-differentiation was induced for 14 (hWMSC-End14d) and 30 (hWMSC-End30d) days. Cell phenotyping was performed using mesenchymal (CD90, CD73, CD105) and endothelial (Tie-2, KDR, eNOS, ICAM-1) markers. Endothelial trans-differentiation was demonstrated by the expression of endothelial markers and their ability to synthesize nitric oxide (NO).hWMSCs can be differentiated into adipocytes, osteocytes, chondrocytes and endothelial cells. Moreover, these cells show high expression of CD73, CD90 and CD105 but low expression of endothelial markers prior to differentiation. hWMSCs-End express high levels of endothelial markers at 14 and 30 days of culture, and also they can synthesize NO. Injection of hWMSC-End30d in a mouse model of skin injury significantly accelerated wound healing compared with animals injected with undifferentiated hWMSC or injected with vehicle alone. These effects were also observed in animals that received conditioned media from hWMSC-End30d cultures.These results demonstrate that mesenchymal stem cells isolated from Wharton's jelly can be cultured in vitro and trans-differentiated into endothelial cells. Differentiated hWMSC-End may promote neovascularization and tissue repair in vivo through the secretion of soluble pro-angiogenic factors

Endothelial trans-differentiation of mesenchymal cells isolated from human Wharton's jelly.

<p>A) Confocal microscopy for vimentin (mesenchymal cell marker), KDR and CD31 (endothelial markers) by immunofluorescent staining. Normal mouse IgG was used as a negative control. Nuclei were counter-stained with DAPI (blue). Magnification 40X (CD31 and KDR), 20X (vimentin). Bars 50 µm. B) Vimentin and eNOS protein abundance in hWMSCs (line 1) or hWMSC transdifferentiated into endothelial cells for 14 days (hWMSC-End14d, line 2) or 30 days (hWMSC-End30d, line 3) with endothelial-differentiating medium. Upper panel: Representative western blot for vimentin, eNOS and β-actin (internal reference). Lower panel: densitometric analysis of protein abundance, expressed as ratios for Vimentin/β-actin (<b>▪</b>) or eNOS/β-actin (<b>□</b>). Data are representative of 5 different MSC isolations from Wharton's jelly.</p

Oligonucleotide Primers for Reverse Transcriptase–Polymerase Chain Reaction.

<p>Oligonucleotide Primers for Reverse Transcriptase–Polymerase Chain Reaction.</p

Effect of conditioned medium on wound repair.

<p>Wound closure was quantified in injured mice that received an injection of non-conditioned medium (○), conditioned medium derived from hWMSC (•) or hWMSC-End30d (□) (n = 5 experiments in duplicate). Values are expressed as mean±S.E.M, *p<0.04 vs non-conditioned and conditioned medium derived from hWMSC.</p

Effect of hWMSCs and endothelial-differentiated hWMSC transplantation in a wound-healing model.

<p><b>A</b>) Representative images of wounds at day 1 (top panels) and 12 (lower panels) after injury and subcutaneous injection of hWMSCs, hWMSC trans-differentiated into endothelial cells for 14 days (hWMSC-End14d) or 30 days (hWMSC-End30d), or control (PBS). <b>B</b>) Wound healing quantified in PBS (○), hWMSC (•), hWMSC-End14d (□) or hWMSC-End30d (▪) treated mice (n = 5 independent experiments, in duplicate). Values are expressed as mean±S.E.M, ⁺P<0.05 in hWMSC-End30d v/s hWMSC, hWMSC-End14d, at the corresponding time; **P<0.03 in hWMSC-End30d v/s PBS; *P<0.001 in hWMSC-End30d v/s PBS; # P<0.01 in hWMSC-End30d v/s PBS.</p

L-citrulline formation and NO bioavailability in endothelial-transdifferentiated mesenchymal cells isolated from human Wharton's jelly.

<p>NO synthesis was estimated in hWMSCs or hWMSC transdifferentiated into endothelial cells for 14 days (hWMSC-End14d) or 30 days (hWMSC-End30d). Cells were incubated in the absence (control □) or presence of L-nitroarginine methyl ester (L-NAME, 100 mM, ▪) for 30 minutes. A) L-citrulline formation assay; B), NO detection with the 4,5-diaminofluorescein diacetate probe (DAF-FM-DA, 1 mM, 30 minutes). Values are mean±S.E.M (n = 3), **P<0.01 v/s MSCs; *P<0.05 v/s without L-NAME. Data are representative of 5 different MSC isolations from Wharton's jelly.</p

Histologic analysis of wounds in the wound-healing model.

<p><b>A</b>) Representative photographs of wounds (hematoxilin/eosin staining) 12 days after injury and subcutaneous injection of PBS, hWMSCs, hWMSC-End14d or hWMSC-End30d. Quantification of histological images, for blood vessels area (B) and histological score (C) for each group of mice. Values are mean ± S.E.M (n = 5 independent experiments, in duplicate), *P<0.001 in hWMSC-End30d or hWMSC-End14d v/s MSC; ⁺P<0.05 in hWMSC-End30d or hWMSC-End14d v/s hWMSC. Magnification x40 (-). Ep, epidermis; D, dermis; H, hypodermis.</p