Functional postnatal maturation of the medial olivocochlear efferent-outer hair cell synapse

The organ of Corti, the auditory mammalian sensory epithelium, contains two types of mechanotransducer cells, inner and outer hair cells (IHCs and OHCs, respectively). IHCs are involved in conveying acoustic stimuli to the central nervous system while OHCs are implicated in the fine tuning and amplification of sounds. OHCs are innervated by medial olivocochlear (MOC) cholinergic efferent fibers. The functional characteristics of the MOC-OHC synapse during maturation were assessed by electrophysiological and pharmacological methods in mouse organs of Corti at postnatal days (P)11-13, hearing onset in altricial rodents, and at P20-22 when the OHCs are morphologically and functionally mature. Synaptic currents were recorded in whole-cell voltage-clamped OHCs while electrically stimulating the MOC fibers. A progressive increase in the number of functional MOC-OHC synapses, as well as in their strength and efficacy was observed between P11-13 and P20-22. At hearing onset, the MOC-OHC synapse presented facilitation upon MOC fibers high-frequency stimulation which disappeared at mature stages. In addition, important changes were found in the VGCC that are coupled to transmitter release. Ca2+ flowing in through L-type VGCCs contribute to trigger ACh release together with P/Q- and R-type VGCCs at P11-13 but not at P20-22. Interestingly, N-type VGCCs were found to be involved in this process at P20-22 but not at hearing onset. Moreover, the degree of compartmentalization of calcium channels with respect to BK channels and presynaptic release components significantly increased from P11-13 to P20-22. These results suggest that the MOC-OHC synapse is immature at the onset of hearing.Fil: Vattino, Lucas Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Wedemeyer, Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Elgoyhen, Ana Belen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Farmacologia; ArgentinaFil: Katz, Eleonora. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentin

Developmental synaptic changes at the transient olivocochlear-inner hair cell synapse

In the mature mammalian cochlea, inner hair cells (IHCs) are mainly innervated by afferent fibers that convey sound information to the CNS. During postnatal development, however, medial olivocochlear (MOC) efferent fibers transiently innervate the IHCs. The MOC-IHC synapse, functional from postnatal day 0 (P0) to hearing onset (P12), undergoes dramatic changes in the sensitivity to acetylcholine (ACh) and in the expression of key postsynaptic proteins. To evaluate whether there are associated changes in the properties of ACh release during this period, we used a cochlear preparation from mice of either sex at P4, P6-P7, and P9-P11 and monitored transmitter release from MOC terminals in voltage-clamped IHCs in the whole-cell configuration. The quantum content increased 5.6× from P4 to P9-P11 due to increases in the size and replenishment rate of the readily releasable pool of synaptic vesicles without changes in their probability of release or quantum size. This strengthening in transmission was accompanied by changes in short-term plasticity properties, which switched from facilitation at P4 to depression at P9-P11. We have previously shown that at P9-P11, ACh release is supported by P/Q- and N-type voltage-gated calcium channels (VGCCs) and negatively regulated by BK potassium channels activated by Ca2+ influx through L-type VGCCs. We now show that at P4 and P6-P7, release is mediated by P/Q-, R- and L-type VGCCs. Interestingly, L-type VGCCs have a dual role: they both support release and fuel BK channels, suggesting that at immature stages presynaptic proteins involved in release are less compartmentalized.Fil: Kearney, Graciela Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Zorrilla de San Martín, Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Vattino, Lucas Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Elgoyhen, Ana Belen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Farmacologia; ArgentinaFil: Wedemeyer, Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Katz, Eleonora. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentin

Acid-sensing ion channels 1a (ASIC1a) inhibit neuromuscular transmission in female mice

Acid-sensing ion channels (ASIC) open in response to extracellular acidosis. ASIC1a, a particular subtype of these channels, has been described to have a postsynaptic distribution in the brain, being involved not only in ischemia and epilepsy, but also in fear and psychiatric pathologies. High-frequency stimulation of skeletal motor nerve terminals (MNTs) can induce presynaptic pH changes in combination with an acidification of the synaptic cleft, known to contribute to muscle fatigue. Here, we studied the role of ASIC1a channels on neuromuscular transmission. We combined a behavioral wire hanging test with electrophysiology, pharmacological, and immunofluorescence techniques to compare wild-type and ASIC1a lacking mice (ASIC1a −/− knockout). Our results showed that 1) ASIC1a −/− female mice were weaker than wild type, presenting shorter times during the wire hanging test; 2) spontaneous neurotransmitter release was reduced by ASIC1a activation, suggesting a presynaptic location of these channels at individual MNTs; 3) ASIC1a-mediated effects were emulated by extracellular local application of acid saline solutions (pH = 6.0; HEPES/MES-based solution); and 4) immunofluorescence techniques revealed the presence of ASIC1a antigens on MNTs. These results suggest that ASIC1a channels might be involved in controlling neuromuscular transmission, muscle contraction and fatigue in female mice.Fil: Urbano Suarez, Francisco Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Lino, Noelia Gisele. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: González Inchauspe, Carlota María Fabiola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Gonzalez, Laura Elisabeth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Colettis, Natalia Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Vattino, Lucas Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Wunsch, Amanda M.. University of Iowa; Estados UnidosFil: Wemmie, John A.. University of Iowa; Estados UnidosFil: Uchitel, Osvaldo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; Argentin

Functional and molecular properties of the medial olivocochlear efferent synapses during postnatal development

En el órgano de Corti, el epitelio sensorial del sistema auditivo de los mamíferos ubicado dentro de la cóclea, se encuentran las células ciliadas internas y externas (CCIs y CCEs, respectivamente). Ambos tipos celulares se despolarizan en respuesta a la llegada de estímulos sonoros, pero sus funciones están claramente diferenciadas. Las CCIs, los fonorreceptores propiamente dichos, transducen los estímulos sonoros en señales eléctricas que son enviadas al sistema nervioso central (SNC) mientras que las CCEs, debido a su propiedad electromótil dependiente del voltaje, están principalmente involucradas en la amplificación y la sintonización fina de estos estímulos. La actividad de las CCEs es modulada a través del sistema olivococlear medial (MOC, por sus siglas en inglés), una inervación eferente que se origina en el sistema nervioso central (SNC), a nivel del tallo cerebral. La sinapsis entre las fibras MOC y las CCEs (sinapsis MOC-CCE) es colinérgica e inhibitoria, ya que está mediada por el receptor colinérgico nicotínico α9α10 que se encuentra funcionalmente acoplado a canales de K+ dependientes de Ca2+ del tipo SK2, resultando en la hiperpolarización y consecuente disminución de la actividad de las CCEs. En el presente trabajo se estudiaron las características moleculares y funcionales de la sinapsis MOC-CCE a través de la realización de registros electrofisiológicos en configuración whole-cell en las CCEs presentes en preparaciones del órgano de Corti del ratón, en respuesta a la estimulación eléctrica de las fibras MOC. En primer lugar, mediante un abordaje experimental farmacológico, se estudiaron las propiedades funcionales y moleculares de la sinapsis MOC-CCE durante el desarrollo postnatal. Más precisamente, en los días postnatales (P)11-13, coincidente con el comienzo de la audición en roedores altriciales, y en P20-22, edad en la cual el sistema auditivo de estos animales ha madurado. Se demostró que tanto la composición molecular de los canales iónicos que sostienen o modulan la liberación de acetilcolina en la sinapsis MOC-CCE así como las propiedades de la transmisión sináptica sufren cambios entre dichos períodos. También se encontraron evidencias de que hay cambios en el grado de compartimentalización de las proteínas presinápticas involucradas en la liberación del neurotransmisor entre ambos períodos, lo que sugiere una maduración sináptica incompleta al momento del comienzo de la audición. En segundo lugar, se estudiaron las implicancias sobre la transmisión sináptica de una mutación puntual en la subunidad α9 del receptor colinérgico que media la sinapsis eferente MOC-CCE y que le confiere a la misma una ganancia de función. Para ello se utilizó una línea de ratones transgénicos (L9’T) desarrollada previamente en nuestro laboratorio, en la que se observó una mayor protección ante el trauma acústico en respuesta a intensidades elevadas de sonido. Valiéndonos de evidencias previas de nuestro laboratorio que indican que la sinapsis MOC-CCE presenta facilitación de corto término en respuesta a altas frecuencias de estimulación, se analizó el patrón de actividad sináptica en respuesta a trenes de estimulación de distinta duración y frecuencia, dentro del rango fisiológico de disparo de las fibras MOC. Se demostró que la plasticidad de corto término en los ratones L9’T se encuentra alterada, en consistencia con el fenómeno global de respuestas aumentadas en la vía eferente relacionada a la mayor protección ante el trauma acústico previamente descripta.In mammals, the auditory sensory epithelium within the cochlea contains two types of mechanotransducer cells, inner and outer hair cells (IHCs and OHCs, respectively). Even though both cell types depolarize in response to incoming sound stimuli, they have different functions. The IHCs, the phonoreceptors proper, are involved in conveying acoustic stimuli to the central nervous system (CNS) while the OHCs are implicated in the fine tuning and amplification of incoming sounds. The OHCs respond to variations in membrane voltage with changes in their length, a phenomenon known as electromotility, causing an enhancement of basilar membrane motion thus increasing the activity of the IHCs in response to sounds. OHCs activity is regulated through the medial olivocochlear (MOC) system, an efferent innervation that originates in the brainstem. The synapse between MOC fibers and the OHCs (MOC-OHC synapse) is cholinergic and inhibitory. This synapse is mediated by the nicotinic cholinergic receptor α9α10 functionally coupled to SK2 Ca2+-dependent K+ channels. Thus, acetylcholine (ACh) released from the MOC presynaptic terminals causes OHCs to hyperpolarize, consequently reducing their electromotile activity. In this work we studied the molecular and functional characteristics of the MOC-OHC synapse in the mouse organ of Corti. The research project was carried out by performing “whole-cell” recordings in the OHCs upon electrical stimulation of MOC fibers. The molecular and functional characteristics of the MOC-OHC synapse during postnatal developmentwere first assessed by combining electrophysiological and pharmacological methods. Synaptic currents were recorded from mice at two developmental stages: around the onset of hearing, postnatal days (P)11-13 in altricial rodents, and at P20-22, when the auditory system of these animals is already mature. We demonstrated that the molecular composition of the ion channels supporting or modulating ACh release at the MOC-OHC synapse undergo significant changes during postnatal development. Moreover, we found strong evidences suggesting changes in the compartmentalization of the presynaptic proteins coupled to ACh release between the two developmental stages studied, indicating that at the onset of hearing the MOC-OHC synapse is still immature. Secondly, we evaluated the properties of a transgenic mouse model developed in our laboratory, the L9’T mice, which bears a point mutation in the α9 subunit of the α9α10 nAChR. This mutation in the α9α10 nAChR greatly enhances and prolongs the inhibitory postsynaptic currents thereby changing the dynamics of the MOC-OHC synapse. Previous work from our laboratory showed that the MOC-OHC synapse presents short-term facilitation in response to high-frequency stimulation. We therefore analyzed the synaptic responses of L9’T mice upon MOC fiber stimulation with different frequencies within their physiological firing range, and found that transgenic L9’T mice showed altered short-term synaptic plasticity patterns. These results are in agreement with the observed global enhanced responses in the efferent pathway that lead to an increased protection against acoustic trauma in this mouse model.Fil: Vattino, Lucas Gabriel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

A point mutation in the alpha9alpha10 nAChR alters short-term synaptic plasticity of medial olivocochlear- hair cell (MOC-HC) synapses

IHCs convey acoustic information to the central nervous system while OHCs are responsible for the mechanical amplification of sound. IHCs receive a transient MOC innervation since birth to the onset of hearing, while MOC fibers synapse onto OHCs from the first postnatal week throughout adulthood. The MOC-HC synapse is inhibitory and mediated by a9a10 nicotinic receptors (nAChRs). We analyzed the properties of synaptic transmission of a knock-in mouse (Kin) with a point mutation in the a9 nAChR subunit (L9´T) that prolongs MOC inhibition (Taranda et. al 2009). Synaptic currents (IPSCs) were recorded in IHCs and OHCs of isolated mouse cochleas at postnatal day 9-13 during electrical stimulation of MOC fibers. In previous studies we showed that high frequency stimulation causes synaptic depression in MOC-IHC synapses, whereas it causes facilitation in MOC-OHC synapses. We found that in both wt and Kin IHCs, 100Hz-trains applied to the MOC fibers caused depression of IPSC amplitudes (S10/S1: 21% and 10% in Kin and wt mice, respectively) whereas 10Hz-trains caused depression only in Kin mice (S10/S1:60%). Accordingly, the ready releasable pool size was smaller in Kin mice (wt:3.7±0.9 Kin:2.7±0.8). Preliminary experiments in OHCs show that high frequency stimulation (40-80 Hz) caused 3-fold more facilitation in Kin than in wt mice. These results show that a modification in the postsynaptic nAChR alters the short term plasticity pattern of MOC-HC synapses.Fil: Wedemeyer, Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Vattino, Lucas Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Ballestero, Jimena Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Katz, Eleonora. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular; ArgentinaFil: Elgoyhen, Ana Belen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Cátedra de Farmacología. 3º Cátedra de Farmacología; ArgentinaXXX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Neurociencias; ISN Small Conference and CourseMar del PlataArgentinaSociedad Argentina de Investigación en Neurosciencia

Amyotrophic lateral sclerosis-immunoglobulins selectively interact with neuromuscular junctions expressing P/Q-type calcium channels

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disease characterized by a gradual loss of motoneurons. The majority of ALS cases are associated with a sporadic form whose etiology is unknown. Several pieces of evidence favor autoimmunity as a potential contributor to sporadic ALS pathology. To gain understanding concerning possible antigens interacting with IgGs from sporadic ALS patients (ALS-IgGs), we studied immunoreactivity against neuromuscular junction (NMJ), spinal cord and cerebellum of mice with and without the Ca V2.1 pore-forming subunit of the P/Q-type voltage-gated calcium (Ca 2+) channel. ALS-IgGs showed a strong reactivity against NMJs of wild-type diaphragms. ALS-IgGs also increased muscle miniature end-plate potential frequency, suggesting a functional role for ALS-IgGs on synaptic signaling. In support, in mice lacking the Ca V2.1 subunit ALS-IgGs showed significantly reduced NMJ immunoreactivity and did not alter spontaneous acetylcholine release. This difference in reactivity was absent when comparing N-type Ca 2+ channel wild-type or null mice. These results are particularly relevant because motoneurons are known to be early pathogenic targets in ALS. Our findings add further evidence supporting autoimmunity as one of the possible mechanisms contributing to ALS pathology. They also suggest that serum autoantibodies in a subset of ALS patients would interact with NMJ proteins down-regulated when P/Q-type channels are absent. © 2011 International Society for Neurochemistry.Fil: Gonzalez, Laura Elisabeth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Kotler, Monica Lidia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Vattino, Lucas Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Conti, Eugenia. Hospital Británico de Buenos Aires; ArgentinaFil: Reisin, Ricardo C.. Hospital Británico de Buenos Aires; ArgentinaFil: Mulatz, Kirk J.. University of British Columbia; CanadáFil: Snutch, Terrance P.. University of British Columbia; CanadáFil: Uchitel, Osvaldo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; Argentin

Enhanced hair cell postsynaptic responses alter release from presynaptic efferent neurons to prolong inhibition of the cochlea

Gain control of the auditory system operates at multiple levels. Cholinergic medial olivocochlear (MOC) fibers that originate in the brainstem and make direct synaptic contacts at the base of the outer hair cells (OHCs) are the final targets of several feedback loops from both the periphery and higher processing cen ters. Efferent activation inhibits somatic electromotil ity of OHCs, an active amplification system within the mammalian cochlea. This is mediated by the activa tion of a calcium permeable α9α10 ionotropic cho linergic nicotinic receptor (nAChR) functionally cou pled to calcium activated SK potassium channels. The strength of cochlear inhibition is driven by the rate of MOC activity and short term facilitation at the MOC OHC synapse (Ballestero et al., 2011).The present work shows that a knockin mouse with a mutation in the α9α10 nAChR (L9’;T) with increased channel gating (Taranda et al., 2009) greatly prolongs hair cell evoked inhibitory postsynaptic currents (IPSCs). Long-term presynaptic compensatory mechanisms lead to reduced quantum content (IHC wt =1.29 ± 0.21; L9’;T= 0.83 ± 0.12, n=5- 6. OHC wt =0.23 ± 0.04, L9’;T = 0.14 ± 0.02, n=12-15). However, upon high frequency stimulation of MOC-OHC synapses, L9’;T mice exhibited more facilitation leading to greatly prolonged synaptic responses (S2 /S1- 40Hz: wt = 1.37 ± 0.16, L9’;T = 3.47 ± 0.44, n = 6-8, p 5 min) as compared to their wt littermates (≤1 s). These results indicate that the properties of the MOC-OHC synapse directly determine the efficacy of the MOC feedback to the cochlea being a main player in the “gain control” of the auditory periphery.Fil: Vattino, Lucas Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Ballestero, Jimena Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Maison, Stéphane F.. Harvard Medical School; Estados UnidosFil: Di Guilmi, Mariano Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Taranda, Julian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Liberman, Charles M.. Harvard Medical School; Estados UnidosFil: Fuchs, Paul A.. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Katz, Eleonora. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Elgoyhen, Ana Belen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Farmacología; Argentina41St Annual MidWinter MeetingSan DiegoEstados UnidosAssociation for Research in Otolaryngolog