The influenza virus neuraminidase inhibitor produced by Staphylococcus aureus

The glycoproteinic complex has been isolated from the Staphylococcus aureus culture fluid possessing an activity inhibiting influenza virus neuraminidase. Two fractions have been further purified containing different monosugars components, the first one has been shown to contain mannose, glucose, rhamnose, glucosamine, and galactosamine, while rhamnose is absent in the second fraction, A component of fraction 1 inhibits the neuraminidase activity and at the same time enhances the virus hemagglutinating activity more strongly comparing to the fraction 2. Some chemical modifications of the substances of the fractions studied (periodate oxidation, protease pretreatment, and delipidization) prove the carbohydrate component of the complex to be responsible for its antineuraminidase activity. The protease pretreatment decreases twice the antineuraminidase activity of the fraction 2 having no influence on this activity of the fraction 1.З культурального середовища золотистого стафілокока (S. aureus) виділено гліколіпопротеїновий комплекс з активністю, що гальмує ней рамінідазу вірусу грипу. Очищено дві фракції з різним вмістом моносахаридів. Показано, що фракція І міс­тить манозу, глюкозу, рамнозу, глюкозамін та галактозамін; друга – всі ці моносахариди, крім рамнози. Речовина з фракції 1 гальмує нейрамінідазну активність та одночасно посилює гемаглютинативну активність вірусу значно сильніше, ніж речовина з фракції 2. Ряд хімічних модифікацій вивчених речовин (перйодатне окислення, обробка протеазою та деліпідизація) підтверджують роль вуглеводного компонента комплексу у здійсненні його антинейрамінідазної дії; обробка протеазою вдвічі знижує антинейрамінідазну активність фракції 2, не впливаючи на таку ж активність фракції 1.Из культуральной среды S. aureus выделен гликолипопротеиновый комплекс с активностью, ингибирующей нейраминидазную активность вируса гриппа. Получены две фракции с различным содержанием моносахаридов, первая из которых включает маннозу, глюкозу, рамнозу, глюкозамин и галактозамин; вто­рая – все эти моносахариды, кроме римнозы. Вещество, содержащееся во фракции I, ингибирует нейраминидазную активность и в то же время усиливает гемагглютинирующую активность вируса гриппа значительно более выражению, чем вещество из фракции 2. Ряд химических модификаций изучаемых фракций (перйодатное окисление, обработка протеазой и делипидизация) доказывает роль углеводного компонента ком­плекса в его антинейраминидазной активности; при этом обработка протеазой вдвое снижает антинейраминидазную активность фракции 2, не влияя на подобную активность фракции 1

Characterization of lipids A of Ralstonia solanacearum lipopolysaccharides

The analysis of fatty acid profiles of lipopolysacharides has shown that R. solanacearum strains tested may be divided into two groups. The first group is represented by R. solanacearum strains (5712, 7945, 7955 and 8110) the lipids A of which contained hydroxylated fatty acids with long chains: 3-hydroxytetradecanoic, 2-hydroxyhexadecanoic and 2-hydroxyoctadecanoic. The second group was represented by R. solanacearum strains the lipids A of which contained hydroxylated fatty acids with short chains: 3-hydroxydecanoic, 2-hydroxydodecanoic and 3-hydroxydodecanoic. 3-hydroxytetradecanoic acid was observed in a small amount. A comparative analysis of the fatty acid composition and biological activity gives a possibility to suppose that 3-hydroxytetradecanoic, 2-hydroxyhexadecanoic and 2-hydroxyoctadecanoic acids may be responsible for the toxicity and pyrogenicity of the lipopolysaccharides tested.Аналіз жирнокислотних профілів ліпополісахаридів свідчить про те, що досліджені иітами R. solanacearum можна поділити на дві групи. Перша група представлена штамами R. sola­nacearum (5712, 7945, 7955 і 8110), ліпіди А яких містять оксикислоти з довгими вуглецевими ланцюгами: 3-окситетра-деканову, 2-оксигексадеканову та 2-оксиоктадеканову. В другу групу входять штами R. solanacearum, у ліпідах А яких присутні оксикислоти з короткими ланцюгами: 3-оксидеканова, 2-оксидодеканова та 3-оксидодеканова. 3-окситетрадеканову кислоту знайдено в незначній кількості. Порівняльний аналіз жирнокислотного складу та біологічної активності дає підставу припустити, що 3-окситетрадеканова, 2-оксигекса-деканова та 2-оксиоктадеканова кислоти можуть відповідати за токсичність та пірогенність досліджуваних ліпополіса­харидів.Анализ жирнокислотных профилей липополисахаридов выявил, что исследованные штаммы R. solanacearum могут быть разделены на две группы. Первая группа представлена штам­мами R. solanacearum (5712, 7945, 7955 и 8110), липиды А которых содержат оксикислоты с длинными цепями: 3-окси-тетрадекановую, 2-оксигексадекановую и 2-оксиоктадекановую. Во вторую группу входят штаммы R. solanacearum, в липидах А которых присутствуют оксикислоты с короткими цепями: 3-оксидекановая, 2-оксидодекановая и 3-оксидодекановая. 3-окситетрадекановая кислота обнаружена в незначительном количестве. Сравнительный анализ жирнокислотного состава и биологической активности дает основание предпо­ложить, что 3-окситетрадекановая, 2-оксигексадекановая и 2-оксиоктадекановая кислоты могут отвечать за токсич­ность и пирогенность исследованных липополисахаридов

Characterization of lipids A of Ralstonia solanacearum lipopolysaccharides

The analysis of fatty acid profiles of lipopolysacharides has shown that R. solanacearum strains tested may be divided into two groups. The first group is represented by R. solanacearum strains (5712, 7945, 7955 and 8110) the lipids A of which contained hydroxylated fatty acids with long chains: 3-hydroxytetradecanoic, 2-hydroxyhexadecanoic and 2-hydroxyoctadecanoic. The second group was represented by R. solanacearum strains the lipids A of which contained hydroxylated fatty acids with short chains: 3-hydroxydecanoic, 2-hydroxydodecanoic and 3-hydroxydodecanoic. 3-hydroxytetradecanoic acid was observed in a small amount. A comparative analysis of the fatty acid composition and biological activity gives a possibility to suppose that 3-hydroxytetradecanoic, 2-hydroxyhexadecanoic and 2-hydroxyoctadecanoic acids may be responsible for the toxicity and pyrogenicity of the lipopolysaccharides tested.Аналіз жирнокислотних профілів ліпополісахаридів свідчить про те, що досліджені иітами R. solanacearum можна поділити на дві групи. Перша група представлена штамами R. sola­nacearum (5712, 7945, 7955 і 8110), ліпіди А яких містять оксикислоти з довгими вуглецевими ланцюгами: 3-окситетра-деканову, 2-оксигексадеканову та 2-оксиоктадеканову. В другу групу входять штами R. solanacearum, у ліпідах А яких присутні оксикислоти з короткими ланцюгами: 3-оксидеканова, 2-оксидодеканова та 3-оксидодеканова. 3-окситетрадеканову кислоту знайдено в незначній кількості. Порівняльний аналіз жирнокислотного складу та біологічної активності дає підставу припустити, що 3-окситетрадеканова, 2-оксигекса-деканова та 2-оксиоктадеканова кислоти можуть відповідати за токсичність та пірогенність досліджуваних ліпополіса­харидів.Анализ жирнокислотных профилей липополисахаридов выявил, что исследованные штаммы R. solanacearum могут быть разделены на две группы. Первая группа представлена штам­мами R. solanacearum (5712, 7945, 7955 и 8110), липиды А которых содержат оксикислоты с длинными цепями: 3-окси-тетрадекановую, 2-оксигексадекановую и 2-оксиоктадекановую. Во вторую группу входят штаммы R. solanacearum, в липидах А которых присутствуют оксикислоты с короткими цепями: 3-оксидекановая, 2-оксидодекановая и 3-оксидодекановая. 3-окситетрадекановая кислота обнаружена в незначительном количестве. Сравнительный анализ жирнокислотного состава и биологической активности дает основание предпо­ложить, что 3-окситетрадекановая, 2-оксигексадекановая и 2-оксиоктадекановая кислоты могут отвечать за токсич­ность и пирогенность исследованных липополисахаридов

Structure and gene cluster of the O antigen of E. Coli L-19, a candidate for a new O-serogroup

Escherichia coli L-19 isolated from a healthy individual did not agglutinate with any of 21 polyvalent antisera that cover 174 E. coli O-serogroups. The strain was studied in respect to the O-antigen (O-specific polysaccharide, OPS) structure and genetics. The LPS was isolated by phenol–water extraction of bacterial cells and cleaved by mild acid hydrolysis to yield the OPS. The OPS was studied by sugar and methylation analyses, along with 1D and 2D 1 H and 13C NMR spectroscopy. The established structure of the linear tetrasaccharide repeating unit was found to be unique among known bacterial polysaccharide structures. A peculiar component of the L-19 OPS was an amide of glucuronic acid with 2-amino-1,3-propanediol (2-amino-2-deoxyglycerol) (GroN). The O-antigen gene cluster of L-19 between the conserved genes galF and gnd was sequenced, and gene functions were tentatively assigned by a comparison with sequences in the available databases and found to be in agreement with the OPS structure. Except for putative genes for synthesis and transfer of GroN, the sequences in the L-19 O-antigen gene cluster were little related to those of reference strains of the 174 known E. coli O-serogroups. The data obtained suggest that L-19 can be considered as a candidate for a new E. coli O-serogroup

Structure and gene cluster of the O antigen of E. Coli L-19, a candidate for a new O-serogroup

Escherichia coli L-19 isolated from a healthy individual did not agglutinate with any of 21 polyvalent antisera that cover 174 E. coli O-serogroups. The strain was studied in respect to the O-antigen (O-specific polysaccharide, OPS) structure and genetics. The LPS was isolated by phenol–water extraction of bacterial cells and cleaved by mild acid hydrolysis to yield the OPS. The OPS was studied by sugar and methylation analyses, along with 1D and 2D 1 H and 13C NMR spectroscopy. The established structure of the linear tetrasaccharide repeating unit was found to be unique among known bacterial polysaccharide structures. A peculiar component of the L-19 OPS was an amide of glucuronic acid with 2-amino-1,3-propanediol (2-amino-2-deoxyglycerol) (GroN). The O-antigen gene cluster of L-19 between the conserved genes galF and gnd was sequenced, and gene functions were tentatively assigned by a comparison with sequences in the available databases and found to be in agreement with the OPS structure. Except for putative genes for synthesis and transfer of GroN, the sequences in the L-19 O-antigen gene cluster were little related to those of reference strains of the 174 known E. coli O-serogroups. The data obtained suggest that L-19 can be considered as a candidate for a new E. coli O-serogroup

Functional properties of individual sub-domains of the fibrin(ogen) αC-domains

Background: Fibrinogen is a large polyfunctional plasma protein consisting of a number of structural and functional domains. Among them, two αC-domains, each formed by the amino acid residues Аα392–610, are involved in fibrin polymerization, activation of fibrinolysis, platelet aggregation, and interaction with different cell types. Previous study revealed that each fibrinogen αC-domain consists of the N-terminal and C-terminal sub-domains. The major objections of the present study were to test functional role of these sub-domains in the above mentioned processes. Methods: To achieve these objections, we used specific proteases to prepare two truncated forms of fibrinogen, fibrinogen desAα505–610 and fibrinogen desAα414–610, missing their N-terminal and both N- and C-terminal sub-domains, respectively. Results: Our study with these truncated forms using turbidity measurements and electron microscopy revealed that the N- and C-terminal subdomains both contribute to protofibril formation and their lateral aggregation into fibers during fibrin polymerization process. These two sub-domains also contributed to platelet aggregation with the N-terminal sub-domains playing a more significant role in this process. At the same time, the C-terminal sub-domains make the major contribution to the plasminogen activation process. Further, our experiments revealed that the C-terminal sub-domains are involved in endothelial cell viability and migration of cancer cells. Conclusions: Thus, the results obtained establish the functional role of individual sub-domains of the αC-domains in fibrin polymerization, activation of fibrinolytic system, platelet aggregation, and cellular interactions. General significance: The present study expands our understanding of the functional role of individual fibrinogen domains and their specific portions in various fibrin(ogen)-dependent processes