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EnquĂŞteonderzoek Literatuur : leesgewoontes, leesverwachtingen, kennis bij studenten T&L academiejaar 2018-2019
Tijdens het academiejaar 2018-2019 werd op initiatief van de opleiding Taal-en Letterkunde een enquête gehouden onder haar studenten. Meer bepaald was het de bedoeling om zicht te krijgen hoe studenten Taal-en Letterkunde in brede zin met literatuur omgaan. In de enquête werd gepeild naar leespraktijken (algemene media, fictie en non-fictie), leesverwachtingen en – in beperkte mate – naar literaire kennis
Construction of a set of vectors allowing inducible production of siRNA in Schizosaccharomyces pombe.
RNA interference (RNAi) is a sequence-specific gene silencing mechanism. It is induced by the formation of dsRNA that are recognised by the Dicer complex and processed into 21-23 long oligonucleotides called siRNA (short interfering RNA). Subsequently, RISC (RNA-Inducing Silencing Complex) binds siRNA that targets the complex towards its homologous mRNA (DYKXHOORN et al., 2003) which is eventually degraded.
In contrast to budding yeast, the entire pathway is conserved in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe, making it a valuable organism to both study physiological RNAi and to use it as a inducible gene knock-down tool.
In an attempt to apply this method in the fission yeast, we are using three different approaches to produce siRNA. In each case, a vector containing a regulatable promoter activated in presence of tetracycline (tTA') (GOSSEN et al., 1995) is generated and the ura4 marker required for growth on medium lacking uracil serves as reporter. First, a vector expressing the full lenght antisens RNA of ura4 (800 nucleotides) (RAPONI and ARNDT, 2003) is used. Second, we are trying to generate much shorter dsRNA where both strands are linked by either a short hairpin of 25 nucleotides (BRUMMELKAMP et al., 2002) or a longer one of 350 nucleotides (SCHRAMKE and ALLSHIRE, 2003). The ability of these different dsRNA to induce silencing of ura4 will be presented
Etablissement et caractérisation de nouveaux modèles in vitro de barrière hémato-encéphalique (de la recherche fondamentale à la recherche appliquée)
La barrière hémato-encéphalique (BHE), localisée au niveau des capillaires cérébraux, est une composante cruciale de l unité neuro-glio-vasculaire car elle est responsable du maintien de l homéostasie cérébrale. En limitant l accès de nombreuses molécules au parenchyme cérébral, cette structure protège efficacement le système nerveux central (SNC) de composés toxiques, mais empêche ainsi de nombreux médicaments d atteindre leur cible. La difficulté à étudier les caractéristiques et la perméabilité de la BHE in vivo a mené lesscientifiques à développer différents modèles in vitro de BHE. Notre modèle, qui consiste en une coculture decellules endothéliales de capillaires cérébraux et de cellules gliales, a été largement caractérisé : il exprime les caractéristiques de la BHE in vivo et s est avéré utile dans l étude des interactions cellulaires au sein de la BHEen conditions physiologiques et pathologiques. Le modèle de coculture initialement développé a été complété par l addition de péricytes cérébraux afin de former des tricultures. En effet, les péricytes apparaissent aujourd hui comme des acteurs importants de la BHE, mais sont souvent absents des modèles in vitro. Réunir les trois principales populations cellulaires formant la BHE (cellules endothéliales, cellules gliales et péricytes cérébraux) semble nécessaire afin de reproduire encore plus finement la configuration retrouvée in vivo, dans le but de comprendre les interactions cellulaires ayant cours au sein de la BHE en conditions physiologiques et pathologiques. Sur la base de notre coculture originelle, deux tricultures ont été mises en place : alors que dans la première les péricytes sont cultivés à distance des cellules endothéliales, ces deux types cellulaires sont étroitement associés dans le second. Les deux modèles ont été caractérisés en terme de morphologie et d expression de marqueurs endothéliaux, de perméabilité paracellulaire et d expression de pompes d efflux, démontrant qu ils représentent tous deux des modèles pertinents de BHE. Ils permettront d étudier la contribution des péricytes au phénotype de BHE et à sa réponse en conditions pathologiques, prenant en considération la composante glio-vasculaire. Dans la majorité des cas, l utilisation des modèles in vitro de BHE au cours des processus de découverte de médicaments vise à prédire si de potentielles molécules thérapeutiques à visée cérébrale peuvent atteindre le SNC, permettant leur effet pharmacologique au niveau de leur cible centrale. Cependant, ces modèles neprésentent généralement pas un débit suffisant pour évaluer rapidement la perméabilité du grand nombre de composés générés par l industrie pharmaceutique lors des étapes précoces de la découverte de médicaments.The blood-brain barrier (BBB), located at the level of brain capillaries, is a crucial component of the neurogliovascular unit where it is responsible for brain homeostasis maintenance. By limiting the access of molecules to the brain parenchyma, it effectively protects the central nervous system (CNS) from harmful substances, but at the same time represents a major hurdle for potential neuropharmaceuticals to reach their central target. The difficulty to study BBB features and permeability in vivo led to the development of different in vitro BBB models. Our model, consisting of a coculture of brain capillary endothelial cells and glial cells, has been extensively characterized: it provides a robust model exhibiting in vivo BBB characteristics and hasproved useful in elucidating the cellular interactions at the level of the BBB in physiological and pathological conditions.The initially developed coculture model was completed by the addition of brain pericytes to design threecell culture models. Indeed, pericytes now appear as important actors of BBB formation and maintenance, but are often absent of in vitro BBB models. Gathering the three major cell populations forming the BBB endothelial cells, glial cells and pericytes seems important to more accurately reproduce in vivo configuration, with the aim of understanding cellular interactions in physiological and pathological conditions. On the basis of our original coculture model, two different three-cell culture models were designed: while pericytes were cultured distant from endothelial cells in the first model, both were closely associated in the second one. Both models were characterized in terms of endothelial marker expression and morphology, paracellular permeability and expression of efflux pumps, demonstrating that they provide reliable in vitro BBB models. They maybe useful in deciphering the contribution of pericytes to the BBB phenotype and in the response of BBB to injury, taking into account the gliovascular component. In most cases, the intended use of in vitro BBB models in drug discovery is to predict whether investigational drugs are likely to achieve relevant CNS exposure to elicit the desired pharmacological effect. However, in vitro BBB models usually do not allow high enough through put to efficiently evaluate the large number of compounds generated by pharmaceutical companies in early drug discovery stages.ARRAS-Bib.electronique (620419901) / SudocSudocFranceF
Gloria Swanson (1897-1983). El retrat d’un ascens i un desterrament cinematogrà fic
Abstract not availabl
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