Иммуногенетические особенности патогенеза хронических вирусных гепатитов

В обзоре представлены результаты последних исследований процессов межклеточного взаимодействия иммунокомпетентных клеток при хронических вирусных гепатитах, опосредованных цитокинами. Рассмотрены данные о функциональном полиморфизме генов цитокинов и их рецепторов при различных соматических заболеваниях, возможности связи аллельного полиморфизма генов цитокинов и также тяжести вирусных гепатитов и их последствий.This review gives results of modern investigations of the processes of immune-competent cells intercellular relation at cytokine-mediated chronic viral hepatites. There are highlighted the data about functional polymorphism of cytokines’ genes and their receptors with different diseases, a possibility of connection of allelic polymorphism of cytokines’ genes and severity of consequences of viral hepatitis

Поліморфізм генів SMAD7 (RS4939827) і EIF3H (RS16892766) як критерій швидкості фіброзу у хворих на хронічні гепатити С і В

The purpose of the study was to assess the possibility of the relationship between the gene polymorphism of SMAD family member 7 (SMAD7C> T), the eukaryotic translation initiation factor (eIF3hC> A) and the degree of liver fibrosis in a pilot project in patients with chronic hepatitis B and chronic hepatitis C. Differences in the frequencies of alleles of the SMAD7 gene in the ethnically homogeneous group of residents of the Odessa region in patients with chronic hepatitis C and chronic hepatitis B compared to healthy individuals (p <0.05) were found. The presence of correlations was established: in patients with chronic hepatitis C, there is a direct weak correlation between the degree of fibrosis and SMAD7 genotypes (p <0.01); in patients with chronic hepatitis B, there is a direct strong correlation between the fibrosis degree and SMAD7 genotypes (p <0.01). The correlation between the degree of liver fibrosis and certain genotypes of SMAD7 in patients with chronic hepatitis C and chronic hepatitis B permits to use the information obtained as one of the criteria for the rate of fibrotic processes progression in the liver.У статті вивчено взаємозв'язок між поліморфізмом генів SMAD7, eIF3h і ступенем фіброзу печінки в пілотному проекті у хворих на хронічний гепатит С та хронічний гепатит В. Встановлено відмінності по частотах алелей гена SMAD7 у хворих на хронічний гепатит С та хронічний гепатит В у порівнянні з практично здоровими особами. Виявлено кореляційні зв'язки: прямий слабкий у хворих на хронічний гепатит С між ступенем фіброзу і генотипами SMAD7; у хворих на хронічний гепатит В – прямий сильний між ступенем фіброзу і генотипами SMAD7. Наявність взаємозв'язку ступеня фіброзу печінки і певних генотипів SMAD7 у хворих на хронічний гепатит С та хронічний гепатит В дозволяє використовувати отриману інформацію як один із критеріїв швидкості прогресування фібротичних процесів печінки

The influence of genetic factors on clinical course and outcomes of сhronic hepatitis c and B

В огляді вітчизняної та іноземної літератури за останні 5 років представлені результати останніх досліджень процесів міжклітинної взаємодії імунокомпетентних клітин при хронічних гепатитах В та С, опосередкованих цитокінами. Розглянуті дані про функціональний поліморфізм генів цитокінів та їх рецепторів при різних соматичних захворюваннях, можливість звязку алельного поліморфізму генів цитокінів та тяжкості й наслідками вірусних гепатитів.The review of the national and foreign literature over the past 5 years describe the results of researches of processes intercellular interactions of immune cells in chronic hepatitis B and C, mediated by cytokines. There are data on functional polymorphism of cytokine genes and their receptors in various somatic diseases and the possibility of connection allelic polymorphism of cytokine genes and the severity and outcomes of viral hepatitis

Анализ ассоциации полиморфизма генов цитокинов IL-10, IL-4 И TNF с субпопуляционным составом лимфоцитов периферической крови у больных хроническим гепатитом В в зависимости от степени фиброза печени

Установлен уровень статистической значимости определенных генотипов цитокинов, показателей клеточного иммунитета и степени фиброза печени у больных хроническим гепатитом В (ХГВ), принадлежащих к этнически однородной группе жителей Одесского региона, в сравнении со здоровыми лицами. У пациентов с гомозиготным генотипом СС IL-4 и гомозиготным генотипом GG TNF-α отмечаются меньшие фибротические изменения в печени, чем у носителей гетерозиготного генотипа СТ (р<0,01) и генотипа GА. У больных ХГВ с большей степенью фиброза чаще встречались генотипы АА TNF-α и СТ IL-4, соответственно можно предположить профиброгенную роль этих комбинаций. У пациентов с меньшими изменениями показателей клеточного иммунитета (снижение содержания CD3+, CD4+, CD16+, CD19+) отмечается меньшая степень фиброза печени (р<0,01).To study gene polymorphisms of IL-10 (G1082A), IL-4 (C589T) and TNF-α (G308A) and cellular immunity (CD3 +, CD4 +, CD8 +, CD16 +, CD19 +) in patients with chronic hepatitis В (CHВ) and healthy persons belonging to ethnically homogeneous group of residents of the Odessa region, as well as identifying possible association of certain genotypes and the degree of liver fibrosis. The study includes 41 patients with CHВ. The control group includes of 30 people who did not have diseases of the hepatobiliary system. Traditional diagnostic methods were used by the provided protocol. Polymorphism amplification was investigated using respective portions of the genome by PCR. The structure of the primers used, are described in the GenBank. Evaluation of morphological changes in the liver (the degree of activity and severity of fibrotic changes) was determined on a scale METAVIR using a non-invasive method Fibrotest It is established a certain level of statistical significance of certain genotypes of cytokines, cellular immunity and the degree of liver fibrosis. Patients with homozygous CC genotype IL-4 had low level of fibrotic changes in the liver than in carriers of the heterozygous СT genotype (p<0.01). Patients with homozygous genotype GG TNF-α had low level of liver fibrosis than in carriers of the heterozygous genotype GA (p<0.01). Patients with smaller changes in cellular immunity (reduction of CD3+, CD4+, CD16+, CD19+) had low level of liver fibrosis (p<0.01)

Аналіз імунологічних і біохімічних показників у хворих на хронічний гепатит С в залежності від генотипу вірусу

В статье представлены исследования биохимических, генетических и иммунологических показателей у 100 больных хроническим гепатитом С, проживающих в Одесском регионе. Проведен корреляционный анализ между этими показателями и генотипом вируса с целью выявления возможных маркеров тяжести течения заболевания.The pathogenic features of chronic hepatitis C are determined by interaction of two main factors: human body’s characteristics and the structure of HCV (pathogen). The body’s features include the nature of the immune response. There is an interrelation between HCV genotypes, the nature of the immune response, and progression of liver fibrosis. However, studies on the immunological indices, cytokine profile depending on the genotype are few. The objective: to analyze the immunological and biochemical indices in the patients with chronic hepatitis C (CHC), depending on the viral genotype. Materials and methods. There were examined 100 patients with chronic hepatitis, aged 18 -62 y.o., were examined. All patients were evaluated traditional biochemical indices. In order to confirm the diagnosis the PCR, qualitative and quantitative determination of viral RNA and the genotype of the hepatitis C virus was carried out in all patients. Results. To assess the interrelation between nonparametric (hepatitis C virus genotype) and parametric (biochemical and immunological indices) data, a Spearman rank correlation coefficient was used. The following regularities were revealed: • a weak positive (direct) association between the virus genotype and the percentage of CD3 +, CD4 + and CD16 + (in patients with chronic hepatitis C caused by genotypes 1a and 1b, fewer amount of CD3 +, CD4 + and CD16 + was observed than in patients with chronic hepatitis C caused by 2 and 3 genotypes ); • a weak negative (inverse) interrelation between the virus genotype and the percentage of CD8 + and CD19 + (patients with chronic hepatitis C caused by genotypes 1a and 1b have a higher number of CD8 + and CD19 + than patients with chronic hepatitis C caused by 2 and 3 genotypes); • moderate negative (inverse) interrelation between the virus genotype and the activity of ALT and AST (in the patients with chronic hepatitis C caused by genotypes 1a and 1b, transaminase activity is higher than in the patients with chronic hepatitis C caused by 2 and 3 genotypes). Conclusion. As a result of the pilot studies, it can be assumed that the genotype of virus 1a and 1b causes more pronounced changes in biochemical indices and immunological status indices than the virus of its third genotype. Perhaps the genotype of the virus affects the rate of progression of fibrosis, which will be the subject of our further research.У статті представлені дослідження біохімічних, генетичних та імунологічних показників у 100 хворих на хронічний гепатит С, які проживають в Одеському регіоні. Проведений кореляційний аналіз між цими показниками та генотипом вірусу з метою виявлення можливих маркерів тяжкості перебігу захворювання

Ассоциация полиморфизма генов цитокинов IL-4 И IL-10 с их количеством у больных хроничным гепатитом С

Установлен определенный уровень статистической значимости ассоциации генотипов цитокинов IL-4 и IL-10 с их количественным содержанием и степенью фиброза печени у больных хроническим гепатитом С, принадлежащих к этнически однородной группе жителей Одесского региона, в сравнении со здоровыми лицами. В результате проведенного пилотного исследования можно предположить, что генотип СС IL-4 обладает противовоспалительной активностью, так как он доминирует у больных со степенью фиброза F0–F1. Возможно, комбинации генотипов ТТ IL-4 и АА IL-10 ассоциируются с профиброгенным эффектом, так как они обнаружены у пациентов с фиброзом F2–F3. Выраженность изменений в цитокиновом профиле при хроническом гепатите С оказывает влияние на течение патологического процесса. Увеличение содержания IL-4 и IL-10 при хроническом гепатите С может быть маркером выраженных морфологических изменений печеночной ткани и высокой активности воспалительного процесса.Aim is to study association of gene polymorphisms IL-10 (G1082A), IL-4 (C589T), concentration of these cytokines in blood of the patients with chronic hepatitis C (CHC) and the degree of liver fibrosis, comparison of these results with results of investigation of healthy persons belonging to ethnically homogeneous group of residents of the Odessa region. Materials and methods. The study includes 100 patients with chronic hepatitis C. The control group includes 30 people who did not have diseases of the hepatobiliary system. Polymorphism amplification was investigated using respective portions of the genome by PCR. The structure of the primers used are described in the GenBank. Evaluation of morphological changes in the liver (the degree of activity and severity of fibrotic changes) was determined on a scale METAVIR using a noninvasive method Fibrotest. Results. It is established a certain level of statistical significance of genotypes of cytokines, quantity of cytokines and the degree of liver fibrosis. Patients with homozygous CC genotype IL-4 had low level of fibrotic changes. Patients with homozygous GG genotype IL-10 had low level of fibrotic changes. There is moderate positive association between IL-4 genotypes and IL-4 content: higher content of IL-4 is noted in carriers of the CC genotype, less IL-4 in carriers of the TT genotype. There is moderate positive association between IL-4 genotypes and IL-10 content: higher content of IL-10 is noted in carriers of the HS genotype, less IL-10 in carriers of the TT genotype (p<0.01). Conclusion. As a result of the pilot study, it can be assumed that the IL-4 CC genotype has antiinflammatory activity, since it dominates in patients with fibrosis F0-F1. Probably, combinations of genotypes of TT IL-4 and AA-IL-10 are associated with a profibrogenic effect, as they are found in patients with F2–F3 fibrosis. The severity of changes in the cytokine profile in chronic hepatitis C affects the course of the pathological process. The increase in IL-4 and IL-10 in chronic hepatitis C can be a marker of pronounced morphological changes in the hepatic tissue and a high activity of the inflammatory process

Роль сигнальних шляхів у патогенезі HCV-інфекції

The aim of the study was to evaluate the association of SMAD7 gene polymorphism with morphological changes in the liver in chronic viral hepatitis of various etiologies. The study involved 31 patients with chronic hepatitis of mixed etiology (B + C). Molecular genetic studies included the determination of polymorphic variants of the gene SMAD family member 7 (SMAD7 C>T). As a result of the pilot studies, it can be assumed that the genetic component of severe fibrosis in patients with hepatitis of various etiologies is not significantly different: in all groups under study, the degree of F3 fibrosis is associated with СT allele SMAD family member 7. This index can be used as an additional criterion in the diagnosis and prognosis of chronic liver disease.Метою дослідження було оцінити зв’язок поліморфізму гена SMAD7 з морфологічними змінами печінки при хронічному вірусному гепатиті різної етіології. Матеріали та методи. У дослідженні взяли участь 31 пацієнт з хронічним гепатитом змішаної етіології (B + C). Молекулярно-генетичні дослідження включали визначення поліморфних варіантів гена family members factor SMAD7 (SMAD7 C>T). Результати. У результаті пілотних досліджень можна припустити, що генетичний компонент тяжкого фіброзу у пацієнтів з гепатитом різної етіології суттєво не відрізняється: у всіх досліджуваних групах ступінь фіброзу F3 асоціюється із СТ алелем family members factor SMAD7. Цей показник може бути використаний як додатковий критерій діагностики та прогнозу хронічних захворювань печінки

Relationshipof clinical course, biochemical and immunological changes in patients with chronic hepatitis B+C

Recent studies have shown that parenteral viral hepatitis is one of the main causes of chronic diffuse liver diseases. The number of patients not only with chronic hepatitis C and B, but also patients with hepatitis of mixed etiology is increasing annually. At the same time, there is a potentiating effect of the association of HBV and HCV with a high risk of developing progressive forms of chronic viral hepatitis or hepatocellular carcinoma. Correlation of the clinical course, biochemical indices in patients with viral mixed infection of the liver have not been studied enough. In the studies of a number of authors, it has been shown that with mixed infection, erased and latent forms of the disease are rarely observed. The aim of the study is to study the immune status and biochemical parameters in patients with chronic hepatitis B+C for a more accurate assessment of the severity of the pathological process. Materials and methods. 62 patients with chronic hepatitis B+C were examined. All the patients under examination were monitored in the hepatological center of the Odessa Municipal Infectious Hospital (Ukraine). The assessment of the severity of the patients' condition was carried out using biochemical indicators. Confirmation of the diagnosis based on determination (qualitatively and quantitatively) HCV RNA and HBV DNA by polymerase chain reaction. Subpopulations of B- and T-lymphocytes (CD19+, CD16+, CD8+, CD4+, CD3+) were determined by the immunofluorescence method using a set of polyclonal and monoclonal antibodies to establish differential antigens of human lymphocytes using the Eurostar immunofluorescence microscope. Results and discussions. When analyzing the main clinical syndromes in dynamics, it was found that in patients with chronic hepatitis B+C with initial of fibrosis (F0-F1), less pronounced changes in the general condition were observed than in patients with moderate (F2) and advanced fibrosis (F3). The presence of a correlation between the degree of fibrosis and immunological indices in patients with chronic hepatitis B+C allows us to use the information obtained as one of the additional criteria for the severity of the pathological process. The expressiveness of changes of immune status indicators can serve as an additional criterion for the degree of morphological abnormalities in liver tissue

Possibilities of predicting the rate of progression of liver fibrosis in patients with chronic hepatitis B

По последним оценкам ВОЗ, хроническая инфекция, вызванная вирусом гепатита В (HBV), является одной из основных причин смерти и инвалидизации больных с инфекционной патологией. Ежегодно в мире регистрируется от 780 тыс. до 1 млн летальных исходов в результате цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы. Патогенетические особенности течения и исходов хронического гепатита В определяются иммунологическими, генетическими факторами хозяина, а также молекулярно-биологической структурой вируса. Целью выполненного пилотного исследования явилось изучение полиморфных локусов генов цитокинов SMAD7 (rs4939827), TNFα (rs1800620), IL-10 (rs1800896), IL-4 (rs2243250) и степени структурных изменений печени на основании неинвазивной методики Fibrotest у больных хроническим гепатитом В в рамках поиска возможных предикторов предрасположенности к быстрому прогрессированию фиброза печени. Материал и методы. В пилотное исследование был включен 41 пациент с ХГВ. Оценка морфологических изменений (стадия фиброза) проводилась методом неинвазивной диагностики Fibrotest, которая является альтернативой пункционной биопсии печени. Результаты. Было высказано предположение, что гомозиготные аллели СС IL-4 (rs2243250), GG TNFα (rs1800620), СС SMAD family member 7 (rs4939827) обладают протективным влиянием на течение хронического гепатита В, так как эти варианты аллельного полиморфизма генов цитокинов обнаружены преимущественно у пациентов с ХГВ со степенью фиброза F0–F1. Гетерозиготные генотипы СТ IL-4 (rs2243250) и GА TNFα (rs1800620), мутантный гомозиготный генотип ТТ SMAD family member 7 (rs4939827) имеют профибротическое влияние на течение ХГВ, так как они обнаружены преимущественно у пациентов с ХГВ со степенью фиброза F3. Обсуждение. Установленная взаимосвязь стадии фиброза печени по шкале METAVIR и полиморфизма генов цитокинов SMAD 7 (rs4939827), TNFα (rs1800620) и IL-4 (rs2243250) позволила сделать предположение о возможности создания прогностической шкалы для оценки индивидуального риска быстрого прогрессирования фиброза печени. Предложенная шкала за счет комплексной оценки полиморфизм аллелей генов цитокинов и стадии фиброза печени по шкале METAVIR дает возможность с высокой степенью достоверности осуществить индивидуальную оценку риска прогрессирования хронического гепатита и, возможно, составить персонифицированный план терапии пациента. Кодирование изученных полиморфизмов и последующий подсчет могут быть автоматизированы, что не требует значительных финансовых вложений.According to recent WHO estimates, chronic HBV infection is one of the leading causes of death and disability in patients with infectious diseases. From 780 thousand to 1 million deaths are annually recorded in the world as a result of cirrhosis of the liver and hepatocellular carcinoma. Pathogenetic features of the course and outcomes of chronic hepatitis B are determined by the immunological, genetic factors of the host, as well as the molecular biological structure of the virus. The aim of the pilot study was to study the polymorphic loci of the cytokine genes SMAD 7 (rs4939827), TNFα (rs1800620), IL-10 (rs1800896), IL-4 (rs2243250) and the degree of structural changes in the liver based on the non-invasive Fibrotest technique in patients with chronic hepatitis B as part of a search for possible predictors of predisposition to the rapid progression of liver fibrosis. Material and methods. The pilot study included 41 patients with chronic hepatitis B. Assessment of morphological changes (stage of fibrosis) was carried out by the method of non-invasive diagnosis of Fibrotest, which is an alternative to puncture biopsy of the liver. Results. It has been suggested that homozygous SS alleles IL-4 (rs2243250), GG TNFα (rs1800620), SS SMAD family member 7 (rs4939827) have a protective effect on the course of chronic hepatitis B, as these variants of allelic polymorphism of cytokine genes were found mainly in patients with CHB with a degree of fibrosis F0-F1. The heterozygous genotypes CT IL-4 (rs2243250) and GA TNFα (rs1800620), the mutant homozygous TT genotype SMAD family member 7 (rs4939827) have a profibrotic effect on the course of chronic hepatitis B, as they are found mainly in patients with chronic hepatitis B with degree of fibrosis F3. Discussion. The established relationship between the liver fibrosis stage according to the METAVIR scale and the polymorphism of the cytokine genes SMAD 7 (rs4939827), TNFα (rs1800620) and IL-4 (rs2243250) made it possible to create a prognostic scale for assessing the individual risk of rapid progression of liver fibrosis. The proposed scale, due to a comprehensive assessment of the polymorphism of cytokine gene alleles and the stage of liver fibrosis using the METAVIR scale, makes it possible to carry out an individual assessment of the risk of progression of chronic hepatitis and, possibly, draw up a personalized treatment plan for the patient. Coding of the studied polymorphisms and subsequent counting can be automated, which does not require significant financial investments

Results of antifibrotic therapy in patients with chronic hepatitis B+C

Вступ. Сучасні схеми противірусної терапії хворих на хронічні вірусні гепатити забезпечують або тривале пригнічення реплікації збудника (наприклад, аналоги нуклеозидів при хронічному гепатитів В), або повну елімінацію вірусу (як препарати прямої противірусної дії при хронічному гепатиті С). Але противірусні засоби не справляють суттєвого впливу на повне відновлення біохімічних процесів та попередження подальшого прогресу морфологічних змін печінки. Все вище зазначене спонукає до продовження пошуку нових терапевтичних стратегій, які пов’язані зі впливом на процеси фіброгенезу. Метою роботи є оцінка можливості впливу препарату «Bicyclol» на фібротичні зміни у хворих на хронічний гепатит В+С з використанням неінвазивної шкали швидкості фіброзоутворення. Матеріали і методи. Проведено обстеження в динаміці 62 хворих на хронічний гепатит В+С (ХГВ+С). Всім хворим була призначена тривала противірусна терапія (пегільований інтерферон 48 тижнів). В основній групі (І група) хворим на ХГВ+С після завершення противірусного лікування інтерфероном призначали препарат «Bicyclol», а контрольна група (ІІ група) –дотримувалася принципів правильного харчування та приймала традиційні гепатопротектори. На підставі виявлених кореляційних зв’язків було запропоновано неінвазивну шкалу для оцінки індивідуального ризику швидкості прогресування фіброзу печінки. Результати дослідження. На фоні застосування противірусної схеми лікування у більшості хворих на ХГВ+С спостерігалась нормалізація показників цитолізу, але у деяких хворих вона була нетривалою. Лікування препаратом «Bicyclol» сприяло подальшому зниженню показників цитолізу, у переважної більшості хворих на ХГВ+С активність АлАТ та АсАТ досягла верхньої границі норми. У хворих на ХГВ+С, які отримували тільки базисне лікування без протифібротичного компонента, спостерігалась тенденція до збереження підвищеного рівня трансаміназ. Висновки. Таким чином, використання гепатопротектора «Bicyclol» протягом 12 місяців забезпечує зниження цитолізу в печінці, супроводжується зменшенням виразності фіброзу, а у деяких пацієнтів – зворотним його розвитком. Застосування запропонованої прогностичної шкали дозволяє оцінити необхідність раннього призначення протифібротічної терапії.Introduction. Modern antiviral therapy regimens for patients with chronic viral hepatitis aim to achieve either long-term suppression of pathogen replication (e. g., nucleoside analogs in chronic hepatitis B) or complete elimination of the virus (such as direct-acting antiviral drugs in chronic hepatitis C). However, antiviral agents do not have a significant impact on the complete restoration of biochemical processes or the prevention of further progression of morphological changes in the liver. These limitations emphasize the ongoing need for new therapeutic strategies that target the processes of fibrogenesis. The aim of the work is to assess the possibility of the effect of the drug «Bicyclol» on fibrotic changes in patients with chronic hepatitis B+C using a non-invasive scale of the rate of fibrosis. Materials and methods. An analysis of the dynamics of 62 patients with chronic hepatitis B and C (HCV+C) was conducted. All patients received long-term antiviral therapy consisting of pegylated interferon for 48 weeks. In the main group (Group I), patients with chronic hepatitis B and C were prescribed the drug «Bicyclol» after completing antiviral treatment with interferon. The control group (Group II) followed the principles of proper nutrition and took traditional hepatoprotectors. Based on the identified correlations, a non-invasive scale was proposed to assess the individual risk of liver fibrosis progression. Research results. Against the background of the use of an antiviral treatment regimen, the normalization of cytolysis indicators was observed in most patients with CHB+C, but in some patients it was short-lived. Treatment with the drug «Bicyclol» contributed to a further decrease in cytolysis indicators, in the vast majority of patients with CHB+C, the activity of ALT and AST reached the upper limit of the norm. In patients with CHB+C who received only basic treatment without an antifibrotic component, a tendency to maintain an elevated level of transaminases was observed. Conclusions. Thus, the use of the hepatoprotector «Bicyclol» for 12 months ensures a decrease in cytolysis in the liver, is accompanied by a decrease in the severity of fibrosis, and in some patients – its reverse development. The use of the proposed prognostic scale makes it possible to assess the need for early appointment of antifibrotic therapy