Inverse correlation between Skp2 and p27(Kip1) in normal endometrium and endometrial carcinoma

Copyright (c) 2010 Taylor & Francis. This is an electronic version of an article published in "GYNECOLOGICAL ENDOCRINOLOGY, Volume 26, Issue 3, pages 220-229 (2010)". GYNECOLOGICAL ENDOCRINOLOGY is available online at: https://doi.org/10.3109/09513590903215482Cyclin-dependent-kinase (cdk) inhibitor, p27<SUKip1</SU (p27), has been shown to participate in progestin-induced growth suppression of normal endometrial glands. To analyse the molecular mechanisms regulating p27 protein, we examined immunohistochemical expression of the SCF<SUSkp2</SU (Skp1-Cullin-F-box protein) complex factors, i.e. Skp1, Cul1 and Skp2, and compared them with that of p27, steroid receptors and Ki-67. In normal endometrial glands, the expression of Skp2 was observed in the proliferative phase, whereas that of p27 was observed in the secretory phase. Cultured normal endometrial glandular cells showed that progesterone induced the down-regulation of Skp2 along with up-regulation of p27. In endometrial carcinomas, the inverse topological correlation between Skp2 and p27 was evident in 39/66 (59%) cases, and the expression of Skp2 showed a strong correlation with Ki-67. These findings suggest that the expression of SCF<SUSkp2</SU complex changes during the menstrual cycle in normal endometrium and the SCF<SUSkp2</SU ubiquitin-proteasome pathway may also work in endometrial carcinomas.</.ArticleGYNECOLOGICAL ENDOCRINOLOGY. 26(3):220-229 (2010)journal articl

The proximal C-terminus of alpha(1C) subunits is necessary for junctional membrane targeting of cardiac L-type calcium channels

In cardiac myocytes, LTCCs (L-type calcium channels) form a functional signalling complex with ryanodine receptors at the JM (junctional membrane). Although the specific localization of LTCCs to the JM is critical for excitation-contraction coupling. their targeting mechanism is unclear. Transient transfection of GFP (green fluorescent protein)-alpha(1S) or GFP-alpha(1C) but not P/Q-type calcium channel alpha(1A), in dysgenic (alpha(1S)-null) GLT myotubes results in correct targeting of these LTCCs to the JMs and restoration of action-potential-induced Ca2+ transients. To identify the sequences of alpha(1C) responsible for JM targeting, we generated a range of alpha(1C)-alpha(1A) chimaeras, deletion mutants and alanine substitution mutants and studied their targeting properties in GLT myotubes. The results revealed that amino acids L-1681 QAGLRTL(1688) and P(1693)EIRRAIS(1700), predicted to form two adjacent alpha-helices in the proximal C-terminus, are necessary for the JM targeting of alpha(1C). The efficiency of restoration of action-potential-induced Ca2+ transients in GLT myotubes was significantly decreased by mutations in the targeting motif. JM targeting was not disrupted by the distal C-terminus of alpha(1C) which binds to the second alpha-helix. Therefore we have identified a new structural motif in the C-terminus of alpha(1C) that mediates the targeting of cardiac LTCCs to JMs independently of the interaction between proximal and distal C-termini of alpha(1C).ArticleBIOCHEMICAL JOURNAL. 448:221-231 (2012)journal articl

Two mechanistically distinct effects of dihydropyridine nifedipine on Ca(V)1.2 L-type Ca2+ channels revealed by Timothy syndrome mutation

Dihydropyridine Ca2+ channel antagonists (DHPs) block Ca(V)1.2 L-type Ca2+ channels (LTCCs) by stabilizing their voltage-dependent inactivation (VDI); however, it is still not clear how DHPs allosterically interact with the kinetically distinct (fast and slow) VDI. Thus, we analyzed the effect of a prototypical DHP, nifedipine on LTCCs with or without the Timothy syndrome mutation that resides in the I-II linker (LI-II) of Ca(V)1.2 subunits and impairs VDI. Whole-cell Ba2+ currents mediated by rabbit Ca(V)1.2 with or without the Timothy mutation (G436R) (analogous to the human G406R mutation) were analyzed in the presence and absence of nifedipine. In the absence of nifedipine, the mutation significantly impaired fast closed-and open-state VDI (CSI and OSI) at -40 and 0 mV, respectively, but did not affect channels' kinetics at -100 mV. Nifedipine equipotently blocked these channels at -80 mV. In wild-type LTCCs, nifedipine promoted fast CSI and OSI at -40 and 0 mV and promoted or stabilized slow CSI at -40 and -100 mV, respectively. In LTCCs with the mutation, nifedipine resumed the impaired fast CSI and OSI at -40 and 0 mV, respectively, and had the same effect on slow CSI as in wild-type LTCCs. Therefore, nifedipine has two mechanistically distinct effects on LTCCs: the promotion of fast CSI/OSI caused by LI-II at potentials positive to the sub-threshold potential and the promotion or stabilization of slow CSI caused by different mechanisms at potentials negative to the subthreshold potential.ArticleEUROPEAN JOURNAL OF PHARMACOLOGY. 685(1-3):15-23 (2012)journal articl

Analysis of the cosmic-ray intensity fluctuations around 11 ka by 36Cl measurements in the ice core

第2回極域科学シンポジウム　氷床コアセッション 11月16日（水） 国立極地研究所 2階大会議室前フロ

Variations of cosmogenic Cl-36 in the ice core

第2回極域科学シンポジウム　氷床コアセッション 11月16日（水） 国立極地研究所 2階大会議

Non-destructive determination of K values in pork using near infrared spectroscopy

畜肉は、と殺後の一定期間の熟成を経て、食用とされる。その期間は畜種と様々な要因により異なるが、5℃に貯蔵した場合、豚肉では4～6日間とされる。豚肉は死後硬直を経て、自己消化により肉質がやわらかくなり、うまみや香りを増して熟成し、はじめて風味のある食肉になる。つまり豚肉においては、肉が新鮮であることが、おいしさを主要因とした場合の肉の品質に直結するわけではない。豚肉にとって鮮度とは、その自己消化や熟成の進行程度とも言い換えることができる。 豚肉の自己消化の程度は、と殺後の経過時間や保存状態に大きく影響される。そのため、様々な状態の豚肉が流通することになり、もとは同一の豚肉であっても消費者に異なる評価をされる可能性がある。流通現場において、あるいは消費者として、目の前の肉の貯蔵履歴や、それら要因によりもたらされた肉の状態を知ることは不可能に近く、目の前の豚肉の保存期間や熟成の程度を、簡便に推定できるのであれば、肉質評価の上で参考になるものと思われる。 そこで本研究では、簡便に豚肉鮮度を評価する手法の開発を目的として、近赤外分光法により、非破壊的に、鮮度恒数K値を分析する方法を検討した。まず、豚3頭から採取した肩ロース肉を細かく切り分けたものを、4℃で様々な期間貯蔵することにより、幅広いK値の分布幅を持つ試料群を作成し、その試料群を光ファイバープローブ(測定範囲:680 -1,235 nm)を搭載した近赤外分光計により測定するとともに、湿式分析によりATP関連物質の含有量とK値を求めた。そして、それらの結果を、装置付属の解析ソフトを用いて重回帰分析することにより、豚肉の鮮度推定式として、目的変数にK値、二次微分スペクトルの波長としては、713 および 1181 nmが選択された、以下に示す較正方程式を得た。 K値 (%)= 22.1 + 2546.9 d2log (1/R713)- 161.6 d2log (1/R1181) この方程式を別個体由来の2つの試料群で評価したところ、K値の平均値が低く、値の分布も低いものから幅広い試料群との間に、より高い精度が認められた。このことから、この方程式はK値40%以下の試料に、より適用される可能性が考えられた。 また本研究では、鮮度指標としてK値を採用したが、と殺後24時間経過した豚肉試料においては、K値の計算式: K値 (%)=(HxR+Hx)/(ATP+ADP+AMP+IMP+HxR+Hx)×100におけるATP、ADPおよびAMPが殆ど存在しないことが、本実験でも確認された。そのため、既に報告されている修正K値(mK値): mK値 (%)=(HxR+Hx)/(IMP+HxR+Hx)×100をK値のかわりに豚肉の鮮度判定恒数として解析に利用することにより、より精度の高い較正方程式が得られる可能性も推察された。 さらに、豚肉の品質を総合的なおいしさから評価する観点から見ると、真空包装した豚肉を4℃で30日間保存した研究においては、と殺後20日目の豚肉が官能的に最も優れていたとの報告があり、そして、この時点での肉試料中のATP関連物質としてはHxRが最も多く、Hxも増加途上にあったことから、豚肉の総合的なおいしさを非破壊的に分析する上では、K値やmK値以外にも、HxRやHxの含有量が解析上の目的変数として有効である可能性が推察された