Uso e implementación de TIC por los docentes de biología: Sede Leónidas Anastasi (Drago) del Ciclo Básico Común (Universidad de Buenos Aires)

Las nuevas tecnologías de la información y la comunicación (TIC) pueden actuar como recursos potentes para la enseñanza de las Ciencias Biológicas en nuestros cursos del Ciclo Básico Común (CBC) de la Universidad de Buenos Aires (UBA). Sin embargo, hemos observado que en el grupo de docentes de Biología hay cierta resistencia e incluso a veces se percibe forzada su implementación en el aula. Esta actitud podría conducir a que el uso de la tecnología pierda su sentido didáctico, pasando a ser un añadido o anexo, en vez de estar integrado y formar parte del proceso de enseñanza. Con el objeto de mejorar la enseñanza promoviendo la implementación de la tecnología en futuras estrategias de intervención docente en las aulas de Biología del CBC, nos propusimos: realizar una investigación exploratoria descriptiva que permitiera conocer la situación actual de los docentes de Biología en nuestra Sede Leónidas Anastasi (Drago) en cuanto al uso e implementación de las nuevas tecnologías en las aulas. Los resultados obtenidos de las entrevistas llevadas a cabo dan cuenta que hay un incremento en la incorporación de los recursos tecnológicos y TIC; no obstante, también se logra develar la presencia de problemáticas, como son la adquisición de la infraestructura tecnológica y la cultura de su utilización, más allá de los ofrecimientos de capacitación que haya. Nuestro desafío es proyectar, en una segunda instancia y a partir de los resultados obtenidos en esta investigación, políticas de acción tanto formadoras como promovedoras de diseños de propuestas didácticas que integren TIC para la enseñanza de Biología en el CBC-Drago. Por tal motivo consideramos de suma importancia este primer abordaje exploratorio puesto que estamos convencidos que las propuestas didácticas serias deben gestarse a partir de conocer primero las necesidades de cada contexto socio institucional docente.The new information and communications technology (ICT) can act as powerful teaching respurce of Biological Sciences at our CBC courses at the University of Buenos Aires (UBA). However, we have observed that in the group of biology teachers there is some resistance and sometimes even it is perceived as forced its implementation in the classroom. This attitude could lead to that the use of technology loses its didactic sense, becoming an addition or annex, instead of being integrated and become part of the teaching process. In order to improve teaching by promoting the implementation of technology in future strategies of educational intervention in the CBC Biology classroom, we proposed: make a descriptive exploratory research to allow to know the current situation of Biology teachers in our Leonidas Headquarters Anastasi site (Drago) in the use and implementation of new technologies in the classroom. The results show that there is a significant increase in the incorporation of technology and ICT resources; however, it does not ignore the presence of problems, such as the acquisition of technological infrastructure and culture of use, beyond the existing training offers. Our challenge is to project, in a second instance and from the results obtained in this investigation, action policies both forming and promotive of didactic proposal designs that integrate ICT for teaching biology in the CBC-Drago. We consider important to account this first exploratory approach because we believe that the educational proposals should be appropriate to the needs of each partner institution teaching context.Fil: Sturla, Andrés. Universidad de Buenos Aires. Ciclo Básico Común; ArgentinaFil: Baldoni, Gabriela. Universidad de Buenos Aires. Ciclo Básico Común; ArgentinaFil: Todaro, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Ciclo Básico Común; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Garofalo, Sofia Judith. Universidad de Buenos Aires. Ciclo Básico Común; Argentin

Laminin Modulates the Stem Cell Population in LM05-E Murine Breast Cancer Cells Through the Activation of the MAPK/ERK Pathway

PURPOSE: We investigated the effects of laminin on the fraction of cells with self-renewing capacity in the estrogen-dependent, tamoxifen-sensitive LM05-E breast cancer cell line. We also determined whether laminin affected the response to tamoxifen. MATERIALS AND METHODS: The LM05-E breast cancer cell line was used as a model for all experiments. Aldehyde dehydrogenase (ALDH) activity, clonogenic and mammosphere assays were performed to measure the effects of laminin on modulation of the stem cell subpopulation. Pluripotent gene expression was analyzed by RT-PCR. The involvement of the MAPK/ERK pathway was determined using specific inhibitors. The effects of laminin on the response to tamoxifen were determined and the involvement of alpha-6 integrin was investigated. RESULTS: We found that pre-treatment with laminin leads to a decrease in cells with the ability to form mammospheres that was accompanied by a decrease in ALDH activity. Moreover, exposure of mammospheres to laminin reduced the capacity to form secondary mammospheres and decreased the expression of Sox-2, Nanog and Oct-4. We previously reported that 4-OH-tamoxifen leads to an increase in the expression of these genes in LM05-E cells. Treatment with signaling pathway inhibitors revealed that the MAPK/ERK pathway mediates the effects of laminin. Finally, laminin induced tamoxifen resistance in LM05-E cells through alpha 6 integrin. CONCLUSIONS: Our results suggest that the final number of cells with self-renewing capacity in estrogen-dependent breast tumors may result from the combined effects of endocrine treatment and microenvironmental cues.Fil: Berardi, Damian Emilio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; ArgentinaFil: Raffo, Diego Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; ArgentinaFil: Todaro, Laura Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; ArgentinaFil: Simian, Marina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de San Martin. Instituto de Nanosistemas; Argentin

Alterations in Progesterone Receptor Isoform Balance in Normal and Neoplastic Breast Cells Modulates the Stem Cell Population

To investigate the role of PR isoforms on the homeostasis of stem cells in the normal and neoplastic mammary gland, we used PRA and PRB transgenic mice and the T47D human breast cancer cell line and its derivatives, T47D YA and YB (manipulated to express only PRA or PRB, respectively). Flow cytometry and mammosphere assays revealed that in murine breast, overexpression of PRB leads to an increase in luminal and basal progenitor/stem cells. Ovariectomy had a negative impact on the luminal compartment and induced an increase in mammosphere-forming capacity in cells derived from WT and PRA mice only. Treatment with ICI 182,780 augmented the mammosphere-forming capacity of cells isolated from WT and PRA mice, whilst those from PRB remained unaltered. T47D YB cells showed an increase in the CD44+/CD24Low/- subpopulation; however, the number of tumorspheres did not vary relative to T47D and YA, even though they were larger, more irregular, and had increased clonogenic capacity. T47D and YA tumorspheres were modulated by estrogen/antiestrogens, whereas YB spheres remained unchanged in size and number. Our results show that alterations in PR isoform balance have an impact on normal and tumorigenic breast progenitor/stem cells and suggest a key role for the B isoform, with implications in response to antiestrogens.Fil: Recouvreux, María Sol. University of California at Los Angeles. School of Medicine; Estados Unidos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Díaz Bessone, María Inés. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentina. Universidad Nacional de San Martín; ArgentinaFil: Taruselli, María Agustina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Todaro, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Lago Huvelle, María Amparo. Universidad Nacional de San Martín; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Sampayo, Rocío Guadalupe. University of California at Berkeley; Estados Unidos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Bissell, Mina J.. Lawrence Berkeley National Laboratory; Estados UnidosFil: Simian, Marina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentina. Universidad Nacional de San Martín; Argentin

CtBP1 associates metabolic syndrome and breast carcinogenesis targeting multiple miRNAs

Metabolic syndrome (MeS) has been identified as a risk factor for breast cancer. C-terminal binding protein 1 (CtBP1) is a co-repressor of tumor suppressor genes that is activated by low NAD+/NADH ratio. High fat diet (HFD) increases intracellular NADH. We investigated the effect of CtBP1 hyperactivation by HFD intake on mouse breast carcinogenesis. We generated a MeS-like disease in female mice by chronically feeding animals with HFD. MeS increased postnatal mammary gland development and generated prominent duct patterns with markedly increased CtBP1 and Cyclin D1 expression. CtBP1 induced breast cancer cells proliferation. Serum from animals with MeS enriched the stem-like/progenitor cell population from breast cancer cells. CtBP1 increased breast tumor growth in MeS mice modulating multiple genes and miRNA expression implicated in cell proliferation, progenitor cells phenotype, epithelial to mesenchymal transition, mammary development and cell communication in the xenografts. These results define a novel function for CtBP1 in breast carcinogenesis.Fil: de Luca, Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Dalton, Guillermo Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Scalise, Georgina Daniela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Moiola, Cristian Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Porretti, Juliana Carla. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Massillo, Cintia Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Kordon, Edith Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Fisiología, Biología Molecular y Neurociencias; ArgentinaFil: Gardner, Kevin. National Institutes of Health; Estados UnidosFil: Zalazar, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; ArgentinaFil: Flumian, Carolina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Todaro, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología ; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vazquez, Elba Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Meiss, Roberto. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires; ArgentinaFil: de Siervi, Adriana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental. Fundación de Instituto de Biología y Medicina Experimental. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentin

All-trans retinoic acid and protein kinase C α/β1 inhibitor combined treatment targets cancer stem cells and impairs breast tumor progression

Breast cancer is the leading cause of cancer death among women worldwide. Blocking a single signaling pathway is often an ineffective therapy, especially in the case of aggressive or drug-resistant tumors. Since we have previously described the mechanism involved in the crosstalk between Retinoic Acid system and protein kinase C (PKC) pathway, the rationale of our study was to evaluate the effect of combining all-trans-retinoic acid (ATRA) with a classical PCK inhibitor (Gö6976) in preclinical settings. Employing hormone-independent mammary cancer models, Gö6976 and ATRA combined treatment induced a synergistic reduction in proliferative potential that correlated with an increased apoptosis and RARs modulation towards an anti-oncogenic profile. Combined treatment also impairs growth, self-renewal and clonogenicity potential of cancer stem cells and reduced tumor growth, metastatic spread and cancer stem cells frequency in vivo. An in-silico analysis of “Kaplan–Meier plotter” database indicated that low PKCα together with high RARα mRNA expression is a favorable prognosis factor for hormone-independent breast cancer patients. Here we demonstrate that a classical PKC inhibitor potentiates ATRA antitumor effects also targeting cancer stem cells growth, self-renewal and frequency.Fil: Berardi, Damian Emilio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentina. University of Chicago; Estados Unidos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ariza Bareño, Lizeth Aixa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Amigo, Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería. Fundación Favaloro. Instituto de Medicina Traslacional, Trasplante y Bioingeniería; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Cañonero, Luciana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Pelagatti, Maria de las Nieves. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Motter, Andrea Nora. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Taruselli, María Agustina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Díaz Bessone, María Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentina. Universidad Nacional de San Martín; ArgentinaFil: Cirigliano, Stéfano Martín. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Edelstein, Alexis. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Peters, María Giselle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Diament, Miriam. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Urtreger, Alejandro Jorge. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Todaro, Laura Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentin

Variación del ADN Mit en poblaciones de Trimerotropis pallidipennis (Orthoptera) polimórficas para inversiones pericéntricas

Las poblaciones sudamericanas de Trimerotropis pallidzpennis(Orthoptera) son polimórficas para 3-7 inversiones pericéntricas y exhiben una distribución clinal en sus frecuencias. La estructura genética en cada población local es tal, que se ajusta significativamente a las frecuencias cromosómicas esperadas de acuerdo a su ubicación geográfica y a las condiciones climáticas. Este y otros resultados, llevaron a proponer un modelo que involucra variación gradual en coeficientes de selección acompañando las variables ambientales y a descartar la posibilidad de que estas clinas fueran zonas híbridas producto del contacto primario o secundario de poblaciones diferenciadas. El presente trabajo muestra el análisis de la variación en sitios de restricción de 5 poblaciones de nuestro país, 3 de ellas ubicadas sobre un gradiente altitudínal y otras 2 alejadas geográficamente. Se propone: a) obtener genealogías genéticas entre las distintas variantes mitocondriales asociadas a su distribución geográfica (filogeografia) y b) calcular las distancias de sustitución nucleotídica intra- e interpoblacionales. Ambos objetivos pretenden confirmar el modelo selectivo propuesto y definir si estamos en presencia o no de zonas híbridas. De las 7 enzimas analizadas, 4 mostraron variación. Se observaron 14 genotipos compuestos o haplotipos, que entre sí se diferencian en 13 sitios de restricción. Los haplotipos se intrerconectaron de la manera más parsimoniosa constituyendo una “red filogenética”. Esta red consta de dos clados cuyos centros tienen los haplotipos más frecuentes, por lo que se consideraron más antiguos. La misma muestra que las moléculas más similares genéticamente son los que se encuentran en localidades vecinas y que no existe diferenciación geográfica marcada entre grupos de haplotipos o clados. No se observó paralelismo entre distancias de sustitución nucleotídica y distancias cromosómicas. Estos resultados se contradicen con la diferenciación en ADNmit esperada en zonas híbridas primarias o secundarias y refuerza el modelo selectivo propuesto para la especie. Se discuten además los resultados filogeográficos obtenidos con las posibles rutas de migración propuestas para la especie.Fil: Todaro, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Rol de la molécula de adhesión NCAM en patologías neurodegenerativas y neuroproliferativas humanas y experimentales

La NCAM pertenece a la familia de las inmunoglobulinas siendo su función más conocida la promoción de la adhesión homofílica entre células vecinas, como neuronas, astrocitos y células musculares, y de la adhesión heterofilicas entre estas células y proteínas de las matrices extracelulares. Tiene tres isoformas principales: 120, 140 y 180 kDa. Sólo la NCAM de 120 kDa carece de los dominios citoplasmático y transmembrana y se encuentra unida por anclaje fosfatidilinositol. Una caracteristica de Ia NCAM es presentar cadenas homo poliméricas de ácido siálico (PSA) unidas covalentemente. La expresión de PSA NCAM es muy abundante en el sistema nervioso central durante el desarrollo embrionario y las primeras etapas postnatales pero en el adulto su expresión disminuye. La presencia de PSA en la NCAM adulta impide la adhesión celular y estimula la remodelación y plasticidad tisular. Además la NCAM puede encontrarse en forma soluble, puesto que se ha descrito su presencia en diferentes fluidos biológicos, proponiéndola como marcador soluble para algunas patologías tumorales como el cáncer de pulmón a células pequeñas y en patologías neurodegenerativas como la esquizofrenia. Nuestro obietivo fue estudiar la relación de la molécula NCAM con procesos tumorales y neurodegenerativas humanos y experimentales. A) Para ello estudiamos la participación de NCAM en el comportamiento biológico de la línea celular LP07, derivada de un tumor de pulmón murino de origen epitelial glandular con componente neuroendocrino. La expresión se evaluó en homogenatos y cultivos primarios tumorales, detectándose distintas isoformas de NCAM,cuya expresión varia a lo largo del crecimiento tumoral. Por otro lado, la disminución de metástasis experimentales con anti NCAM sugiere que esta molécula favorecería la colonización del órgano blanco. El tratamiento de NCAM in vitro con anticuerpos específicos disminuyó la adhesividad, la migración y la proliferación celular al mismo tiempo que induce la reorganización del citoesqueleto de actina compatible con una reversión epitelio mesenquimática, característica de la célula tumoral. B) Hemos estudiado el rol de NCAM sérica como marcadora tumoral en pacientes con patología cerebral benigna y maligna. Para ello en un primera etapa estudiamos por western blot y densitometría los niveles de todas las isoformas de NCAM sérica en individuos sanos apareados por edad y sexo, observando que las isoformas de bajo PM difieren con la edad de los individuos. Determinamos los niveles de las distintas isoformas de NCAM presentes en el suero de pacientes con tumores primarios del SNC: gliomas (n=34), metástasis única (n=27), tumores benignos (n=22). Las muestras de suero de cada paciente se analizaron por western blot y densitometría. La concentración de NCAM se asoció a los parámetros clínico-patológicos indicadores de pronóstico, así como con la evolución clínica de cada paciente. Se detectaron bandas específicas de alto (≥130kDa) y bajo PM (<130kDa). Se encontró que el cociente ≥130kDa /<130kDa está aumentado en los pacientes con tumores cerebrales vs controles sanos (diferencias independientes de edad y sexo). No se encontró diferencia entre pacientes con tumores benignos o malignos NCAM sérico mostró una especificidad del 80% y una sensibilidad del 60%, con un VP+ del 60% y VP- del 80% para identificar pacientes con tumores cerebrales. En una segunda muestra post cirugía fue posible encontrar una disminución de los valores séricos de NCAM en 9 de 12 pacientes analizados. C) Hemos medido los niveles de NCAM sérico en pacientes con déficit cognitivo como la Demencia tipo Alzheimer (DTA). Las patologías neurodegenerativas presentan niveles séricos elevados de todas las isoformas de NCAM. Además se observó un aumento especifico de la NCAM <130kDa asociada al grado de deterioro cognitivo de los pacientes DTA por lo tanto podría ser útil como marcador de seguimiento del paciente, lo cual facilitaría el diagnostico y el tratamiento en etapas tempranas.NCAM is an adhesion molecule which belongs to the immunoglobulin superfamily and mediates both homophilic binding between neighbour cells like neurons, astrocites and muscular cells; and heterophilic binding between these cells and proteins from the extracellular matrix. NCAM presents three major isoforms: 120, 140 and 180 kDa. Only NCAM 120 kDa is linked to the membrane via a glycosyl-phosphatidyl inositol (GPI) anchor and lacks citoplamic and transmembrane domains. NCAM has sialic acid (PSA) homo polymeric chains covalently bond. PSA NCAM expression is highly expressed in central nervous system during embrionary development and post natal early stages but the PSA expression is down regulated in adult tissues. The presence of PSA NCAM in adults prevents cellular adhesion and stimulates tissular remodelling and plasticity. In addition NCAM exist in a soluble form, since its presence has been described in several biological fluids. Some authors proposed soluble NCAM as a diagnostic marker for tumoral pathologies like small cells lung cancer (SCLC) and neurodegeneratives pathologies including squizofrenia. Our objective was to study the relationship between NCAM molecule and experimental and human tumoral and neurodegenerative processes. A) We study the roll of NCAM in biological behaviour of the cellular line LPO7, derived from a murine lung tumor with neuroendocrine component. The NCAM expression was evaluated in homogenates and tumoral primary cultures. Several NCAM isoforms were detected whose expression varies through tumoral growth. On the other hand, decrease of experimental metastasis with anti NCAM suggests that this molecule is implicated in target organ colonization. In vitro NCAM treatment with specific antibodies diminishes adhesion, migration and cellular proliferation while induces actine cytoskeleton reorganization, compatible with mesenchematic epithelial reversion. B) We have study the roll of serum NCAM as a tumoral marker in patients with benign and malign brain pathology. First, we determine the levels of serum NCAM isoforms in healthy individuals paired by sex and age by western blot and densitometry. Low Molecular Weigh NCAM bands (100-130kDa) decreased significantly with age independently of sex. Then, we determine NCAM isoforms levels in serum from primary brain tumor patients: gliomas (n=34), brain metastsis (n=37) and benign tumors (n=22). NCAM values were associated with clinico-pathological prognostic parameters, as well as clinical evolution of each patient. There were detected specific bands of high (≥130 kDa) and low molecular weigh (<130 kDa). It was observed that the ratio ≥130 /<13O kDa is increased in patients vs control. It was no differences between benign and maligns tumors. NCAM showed a sensitivity of 60% and a specificity of 80%. The PV+ was about 60% and the PV- was 80% for brain tumors patients’ identification. In a post surgery sample we detected decreased serum values of NCAM in 9 of 12 patients. C) We have measure serum NCAM levels in patients with cognitive deficit like Dementia of Alzheimer Type (DAT).DAT patients presented values of all isoforms significantly higher than healthy controls of similar age. Only low molecular weight NCAM isoforms were associated with GDS, which may be useful as follow up marker. This marker would allow the diagnostic and treatment in early stages.Fil:Todaro, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Is the Epithelial-to-Mesenchymal Transition Clinically Relevant for the Cancer Patient?

Abstract: Epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) is a transdifferentiation process by which a fully differentiated epithelial cell acquires mesenchymal traits, and therefore, mesenchymal abilities such as motility and invasiveness. It is a pivotal physiological process involved in embryogenesis (Type 1 EMT) and in wound healing and tissue remodeling (Type 2 EMT), which, some authors claim, but there are still some controversies, has also been co-opted by tumor cells to increase their malignant potential (Type 3 EMT). Many biomarkers of Type 3 EMT have been characterized and classified into functional categories (i.e., extracellular proteins, cell surface molecules, cytoskeletal markers, transcriptional factors, and, recently, micro RNAs). The extra and intracellular signals that lead to EMT are only starting to be understood, but there is a consensus that Ras and TGF-beta signaling must converge with NF-kB in order to achieve a full EMT. The most classical experimental model is the induction of EMT by TGF-beta in cultures of epithelial cells. Other pathways involving GSK3b, and Wnt/beta-catenin, are also implicated. Ultimately, every EMT-inducing pathway will activate any of the E-cadherin transcriptional repressors (ZEB1, ZEB2, Twist, Snail or Slug). Although in the pre-clinical setting, EMT has also been related to an accelerated tumor progression and to an increased resistance to conventional chemotherapy. In this sense, several groups are beginning to use EMT as a predictive marker of response to treatment. Finally, two chemicals targeting TGF-beta are in clinical trials and many laboratories have initiated studies to use other EMT-related molecules as a therapeutic target for the cancer patient with some modest, but encouraging results.Fil: Krasnapolski, Martin Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncologia "Angel H. Roffo"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Todaro, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncologia "Angel H. Roffo"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Bal, Elisa Dora. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncologia "Angel H. Roffo"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentin

Decrease of N-CAM adhesion molecule in serum of advanced Alzheimer's patients

Fil: Sacerdote de Lustig, Eugenia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Kohan, S.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Todaro, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Famulari, A.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Dominguez, R.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Farias, E.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaUnidad documental simpl

Breast cancer stem cells are involved in Trastuzumab resistance through the HER2 modulation in 3D culture

Breast cancer human cells culture as spheroids develop autophagy and apoptosis, which promotes Trastuzumab resistance in HER2 overexpressing cells. Our aim was to study the association of the hostile environment developed in 3D with the breast cancer stem cells population and the HER2 modulation.Human mammary adenocarcinoma cell lines were cultured as spheroids using the hanging drop method. We generated hypoxia conditions by using a hypoxic chamber and CoCl2 treatment. Breast cancer stem cells were measured with mammosphere assays, the analysis of CD44+CD24low population by flow cytometry and the pluripotent gene expression by RT-qPCR. HER2 expression was evaluated by flow cytometry and Western blot. MTS assays were conducted to study cell viability.Hostil environment developed in spheroids, defined by hypoxia and autophagy, modulated the response to Trastuzumab. In HER2+ cells with acquired resistance, we observed an increase in the breast cancer stem cell population. In BT474 spheroids, Trastuzumab induced the acquisition of resistance, along with an increase in breast cancer stem cells. Also, in 3D culture conditions we determined a modulation in the HER2 expression.Moreover, breast cancer stem cells showed enhanced HER2 expression. Finally, cells without HER2 gene amplification cultured as spheroids were sensitive to Trastuzumab, diminishing HER2 expression and cancer stem cells.Our findings show that 3D architecture is able to modulate breast cancer stem cell population and HER2 distribution, modifying the cell response to Trastuzumab.Fil: Rodríguez, Cristina Elisa. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Berardi, Damian Emilio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Abrigo, Marianela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Todaro, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Bal, Elisa Dora. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; ArgentinaFil: Fiszman, Gabriel Leon. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; Argentin