Treatment of epithelial 293T cells with thymocyte extract to induce RAG gene expression

This thesis reports an in vitro reprogramming approach with pig thymocyte extracts to induce expression of two lymphoid-specific recombination activating enzyme genes, RAG1 and RAG2, in human kidney epithelial 293T cells. RAG2 was upregulated in extract-treated cells 8 days after extract treatment, suggesting that some functional changes may have taken place in 293T cells exposed to thymocyte extract. RAG2 upregulation was detected in high (22mg/ml) protein concentration thymocyte extract-treated cells. However, induced expression of RAG2 was transient and decreased to basic level within 23 days. This transient expression might be explained by the nature of RAG expression in vivo, or it might indicate, most likely, incomplete reprogramming. Furthermore, upregulation of RAG2 was not accompanied by RAG1 expression or changes in morphology and growth pattern of 293T cells. Thus, we conclude that although RAG2 upregulation is observed in extract-treated cells, further work is required to establish a proof-of-concept that RAG enzyme-initiated T cell receptor gene rearrangement can be manipulated experimentally in non-lymphocytic cells

Sosionomin (AMK) rooli, tehtävät ja työnkuva Tampereen kaupungin aikuissosiaalityössä

Opinnäytetyön tarkoituksena oli tutkia sosionomin (AMK) roolia sosiaaliohjaajana Tampereen kaupungin aikuissosiaalityössä, sillä sosiaaliohjaajien ja sosiaalityöntekijöiden välisestä työnjaosta ja tehtävänkuvista ei ole valtakunnallisesti yhtenäistä näkemystä. Tarkoituksena oli selvittää, miten sosiaalihuoltolain määritelmä sosiaaliohjauksesta vastaa käytäntöä ja miten työtehtävät jakautuvat sosiaaliohjaajien ja sosiaalityöntekijöiden kesken sekä minkälaisina sosiaaliohjaajat kokevat ammatti-identiteettinsä ja ammatillisen kasvun mahdollisuudet työssään. Tavoitteena oli jäsentää sosiaaliohjaajan roolia aikuissosiaalityössä sekä sitä, miten sosiaaliohjaajan osaamista voitaisiin hyödyntää parhaalla mahdollisella tavalla sosiaalityön kokonaisuudessa. Lisäksi tarkasteltiin, onko tarkoituksenmukaista erottaa sosiaaliohjaus sosiaalityöstä aikuissosiaalityön ympäristössä. Opinnäytetyö toteutettiin laadullisena tutkimuksena, jossa aineistonkeruumenetelmäksi valikoitui teemahaastattelu eli puolistrukturoitu haastattelu. Haastateltavien valikoitumisessa käytettiin harkinnanvaraista lumipallo-otantaa. Haastattelut litteroitiin ja analysoitiin sisällönanalyysiä käyttäen analyysivetoisesti. Vuodenvaihteessa 2021–2022 toteutettu Tampereen kaupungin organisaatiouudistus on siirtänyt sosiaaliohjaajia sote-keskuksiin, minkä vuoksi sosiaaliohjaajan työnkuvan voidaan nähdä olevan tällä hetkellä murroksessa. Tutkimustulosten perusteella sosiaaliohjaajan työnkuva nähdään laajana ja moninaisena, jota määrittelee pitkälti asiakkaan yksilölliset tarpeet. Sosiaaliohjaajan rooli nähtiin tärkeänä aikuissosiaalityössä, erityisesti asiakkaan äänen esiin tuojana. Sosiaaliohjaajat pitivät työtään tärkeänä, joka näkyi vahvana ammatti-identiteettinä. Tutkimustuloksista nousi esiin myös työnjakoon liittyviä haasteita ja kehitysideoita. Haasteita olivat työntekijöiden vaihtuvuus, rekrytointivaikeudet ja työnjaon haasteet, jotka johtivat sosiaalityöntekijöiden työtehtävien ohjautumiseen sosiaaliohjaajille. Epäkohtina voidaan nähdä sosiaaliohjaajien osaamisen puutteellinen tunnistaminen sekä se, ettei sosiaaliohjausta tunnusteta sosiaalityöksi. Heikot uralla etenemisen mahdollisuudet ja sosiaaliohjaajien palkka koetaan riittämättömäksi työn vaativuuteen nähden. Näitä epäkohtia ratkaisemalla voidaan parantaa aikuissosiaalityön tuottavuutta esimerkiksi pidempien työsuhteiden avulla. Samalla luodaan realistisempaa näkemystä sosiaaliohjaajien ja sosiaalityöntekijöiden välisestä tarkoituksenmukaisesta työnjaosta ja tehtävänkuvista, jotta molempien ammattiryhmien osaaminen voitaisiin hyödyntää parhaalla mahdollisella tavalla.The purpose of this bachelor’s thesis was to study the role of a Bachelor of Social Services as a social counsellor in adult social work services in the city of Tampere. The aim of this study was to examine how the definition of social counselling in the social welfare act meets the practice and how work assignments are distributed between social counsellors and social workers. Further, the aim was to study how social counsellors experience their occupational identity and opportunities for professional growth. The purpose was to structure the role of a social counsellor. The study was qualitative in nature and based on interviews with social counsellors who work in the adult social work services in the city of Tampere. The data were collected through eight semi-structural interviews, which were transcribed and analysed using qualitative content analysis. The study found that the job description of a social counsellor is seen as broad and varied, the role is seen as important. Further, the results showed strong occupational identity amongst the social counsellors and revealed challenges and development ideas regarding division of labour. Challenges consisted of turnover of employees, recruitment difficulties and challenges with division of labour which led to the duties of social workers to be directed to social counsellors. As for the defects, there was lack of competence recognition of the social counsellors, along with the fact that social counselling was not recognised as social work. Further, lack of career development and low payment in comparison to the demanding job were seen as defects

Epigenetic Reprogramming of OCT4 and NANOG Regulatory Regions by Embryonal Carcinoma Cell Extract

Analyses of molecular events associated with reprogramming somatic nuclei to pluripotency are scarce. We previously reported the reprogramming of epithelial cells by extract of undifferentiated embryonal carcinoma (EC) cells. We now demonstrate reprogramming of DNA methylation and histone modifications on regulatory regions of the developmentally regulated OCT4 and NANOG genes by exposure of 293T cells to EC cell extract. OCT4 and NANOG are transcriptionally up-regulated and undergo mosaic cytosine-phosphate-guanosine demethylation. OCT4 demethylation occurs as early as week 1, is enhanced by week 2, and is most prominent in the proximal promoter and distal enhancer. Targeted OCT4 and NANOG demethylation does not occur in 293T extract-treated cells. Retinoic acid-mediated differentiation of reprogrammed cells elicits OCT4 promoter remethylation and transcriptional repression. Chromatin immunoprecipitation analyses of lysines K4, K9, and K27 of histone H3 on OCT4 and NANOG indicate that primary chromatin remodeling determinants are acetylation of H3K9 and demethylation of dimethylated H3K9. H3K4 remains di- and trimethylated. Demethylation of trimethylated H3K9 and H3K27 also occurs; however, trimethylation seems more stable than dimethylation. We conclude that a central epigenetic reprogramming event is relaxation of chromatin at loci associated with pluripotency to create a conformation compatible with transcriptional activation