A closer look at multiple-clone Plasmodium vivax infections: detection methods, prevalence and consequences

The naturally occurring clonal diversity among field isolates of the major human malaria parasite Plasmodium vivax remained unexplored until the early 1990s, when improved molecular methods allowed the use of blood samples obtained directly from patients, without prior in vitro culture, for genotyping purposes. Here we briefly review the molecular strategies currently used to detect genetically distinct clones in patient-derived P. vivax samples, present evidence that multiple-clone P. vivax infections are commonly detected in areas with different levels of malaria transmission and discuss possible evolutionary and epidemiological consequences of the competition between genetically distinct clones in natural human infections. We suggest that, when two or more genetically distinct clones are present in the same host, intra-host competition for limited resources may select for P. vivax traits that represent major public health challenges, such as increased virulence, increased transmissibility and antimalarial drug resistance.CNPqMount Sinai School of Medicin

Plasmodium vivax: Microsatellite analysis of multiple-clone infections

We used mixtures of genomic DNA from two genetically distinct isolates from Brazil, 42M and 312M, to investigate how accurately 12-locus microsatellite typing describes the overall genetic diversity and characterizes multilocus haplotypes in multiple-clone Plasmodium vivax infections. We found varying PCR amplification efficiencies of microsatellite alleles; for example, from the same 1:1 mixture of 42M and 312M DNA we amplified predominantly 312M-type alleles at 10 loci and 42M-type alleles at 2 loci. All microsatellite alleles were accurately scored in 1:0.5 and 1:0.25 312M:42M DNA mixtures, even when minor peak heights did not meet previously suggested criteria for minor allele detection in multiple-clone infections. Relative proportions of major and minor alleles were unaffected by multiple displacement amplification of template DNA prior to PCR-based microsatellite typing. Although microsatellite typing may detect minor alleles in clone mixtures, amplification biases may lead to inaccurate assignment of predominant haplotypes in multiple-clone P. vivax infections. (C) 2008 Elsevier Inc. All rights reserved.Fundacao de Apoio a Pesquisa do Estado de Sao Paulo (FAPESP)[07/51199-0]Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnologico (CNPq)[470570/2006-7

Удосконалення способу захисту бетонних підлог у птахівничих будівлях

The object of the study was concrete floors in a poultry house with different types of litter. The paper addressed the problem of reducing microorganism contamination of concrete floors in poultry houses to prevent biological corrosion. Corrosion of the surface of the concrete floor in the form of the formation of calcium oxalate monohydrate crystals was established by scanning electron microscopy; microscopic fungi: A. pullulans, F. sporotrichioides, and A. niger were detected. The TPD MS method established that concrete samples obtained in a room with straw lose moisture by 51.52 % more, with granules – by 342.42 % (р≤0.05), with shavings by 6.06 %, compared to control. CO from concrete samples is released less with sawdust litter by 86.40 %, with straw – by 83.49 %, with shavings – by 76.69 %, with granules – by 69.90 % (р≤0.05). The CO2 content in concrete samples from the room with sawdust was lower by 86.88 % (р≤0.05), with straw – by 55.73 %, with shavings – by 38.52 %, with granules – by 23.77 %, compared to control without litter. Microbiological studies have established that 48 hours after disinfection, the total number of colonies of microorganisms on a concrete floor with a sawdust litter likely decreased by an average of 90.19 %, straw – by 91.62 %, shavings – by 79.76 %, granules – by 82.88 % (р≤0.05), in the control – by 83.73 %. It can be argued that the disinfectant destroys microorganisms on the concrete surface regardless of the type of substrate. The peculiarity of the experiment was the use of scanning electron microscopy and TPD MS methods to study structural changes in concrete. The research is distinguished by the use of a powdered disinfectant to reduce microbial damage to a concrete floor with different types of litter. The results of the experiment could be used in the aggressive environment of poultry houses to reduce the impact on concrete structuresОб’єктом дослідження були бетонні підлоги у пташнику з різними типами підстилки. В дослідженні вирішувалась проблема зменшення контамінації мікроорганізмами бетонних підлоги у птахівничих приміщеннях для попередження біологічної корозії. Встановлено методом скануючої електронної мікроскопії корозію поверхні бетонної підлоги у вигляді утворення кристалів моногідрату оксалату кальцію та виявлені мікроскопічні гриби: A. pullulans, F. sporotrichioides та A. niger. Методлом TPD MS встановлено, що зразки бетону отримані у приміщенні з соломою втрачають вологу на 51,52 % більше, з гранулою – на 342,42 % (р≤0,05), зі стружкою на 6,06 %, порівняно з контролем. СО зі зразків бетону виділяється менше з підстилкою тирса на 86,40 %, з соломою – на 83,49 %, зі стружкою – на 76,69 %, з гранулою – на 69,90 % (р≤0,05). Вміст СО2 у зразках бетону з приміщення з тирсою був менший на 86,88 % (р≤0,05), з соломою – на 55,73 %, зі стружкою – на 38,52 %, з гранулою – на 23,77 %, порівняно з контролем без підстилки. Мікробіологічними дослідженнями встановлено, що через 48 годин після проведення дезінфекції загальна кількість колоній мікроорганізмів на бетонній підлозі з підстилкою тирса вірогідно зменшилась в середньому на 90,19 %, солома – на 91,62 %, стружка – на 79,76 %, гранула – на 82,88 % (р≤0,05), в контролі – на 83,73 %. Можна стверджувати, що дезінфектант знищує мікроорганізми на поверхні бетону не залежно від виду підстилки. Особливістю експерименту є застосуванням методів скануючої електронної мікроскопії та TPD MS для дослідження структурних змін в бетоні. Проведене дослідження відрізняється застосуванням порошкоподібного дезінфектанту для зменшення мікробного ураження бетонної підлоги з різними типами підстилок. Результати експерименту можна застосовувати в умовах агресивного середовища птахівничих приміщень для зменшення впливу на бетонні конструкці