Isolation, identification and mechanisms of action of isolated compounds from Cecropia glazioui Sneth

A Cecropia glazioui Sneth, conhecida popularmente como embaúba, é utilizada na medicina popular para asma e "pressão alta". Estudos anteriores mostraram que: * O tratamento com extrato aquoso (EA) da C. glazioui nativa da Serra do Mar (1g/kg/dia, v.o.) diminuiu a pressão arterial sistólica de ratos após 7 dias. *A participação do EA originou a fração butanólica (FBu), 5 vezes mais ativa que o EA. *A atividade hipotensora da FBu foi relacionada a inibição do influxo de cálcio em músculo liso, mas o composto ativo não foi identificado. Este trabalho teve como objetivos: isolar os componentes, identificar os compostos hipotensores e estudar os mecanismos moleculares pela ação da Cecropia glazioui...(au).BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe

Mechanism of action of alkaloids isolated from Geissospermum laeve (Vellozo) Baillon (Pau-Pereira) in skeletal muscle

I. O Geissospermum laeve (Vellozo) Baillon conhecido no sudeste brasileiro como pau-pereira, é uma planta de casca amarga utilizada na medicina popular como febrífuga, tônica e hepatoprotetora. II. O Geissospermum laeve (Vellozo) Baillon é rico em alcalóides dos quais a geissospermina é a mais abundante. Também foram identificados a geissoschizina e a geissoschizolina (pereirina} como majoritários. III. A literatura descreve que os alcalóides do G. laeve têm ação curarizante. IV. Este trabalho objetivou isolar os alcalóides majoritários da casca do caule de G. laeve e estudar o mecanismo de ação daqueles com atividade na contração da musculatura esquelética. V. O material vegetal foi obtido de plantas do acervo do Jardim Botânico do Rio de Janeiro. VI. O pó das cascas secas foi extraído com etanol e por partiçoes sucessivas com clorofórmio / água em diferentes pH foi obtido um extrato rico em alcalóides. VII. Do extrato clorofórmico foram obtidos cristais identificados com análise química instrumental como geissospemina. VIII. Do extrato ácido foi obtida uma mistura de alcalóides denominada FAT. IX. A FAT foi purificada em CLAE fornecendo 4 frações ativas na preparação nervo frênico / músculo diafragma de camundongo. A fração mais ativa foi novamente purificada em CLAE e coluna de sílica gel fornecendo uma única fração ativa denominada F(4E)98-102. X. A geissospermina (3 a 100 mg/mL) bloqueou irreversivelmente as contrações do diafragma obtidas por estímulo direto e indireto. XI. Registros eletrofislológicos intracelulares mostraram que a geissospermina despolariza a membrana das fibras musculares, sem afetar especificamente a transmissão neuromuscular. XII Em miobolas de músculos de ratos recém nascidos, a geissospermina aumentou a condutância da membrana, impedindo o registro de correntes por "patch-clamp". Este efeito foi independente da presença de ACh e não foi bloqueado pela tetrodotoxina (300 nM). XIII. A F(4E)98-102 bloqueou a transmissão neuromuscular no diafragma de camundongo. O efeito foi revertido após lavagem mas não pela incubação de neostigmina. XIV. A F(4E)98-102 (1O a 30 mg/mL) diminuiu a amplitude dos potenciais em miniatura da placa terminal sem alterar a polaridade da membrana celular. A maior dose bloqueou a transmissão neuromuscular. XV. A incubação da F(4E)98-102 (1 a 10 mg/mL) em culturas de miobola diminuiu a freqüência de aberturas do canal iôníco associado ao receptor nicotínico e diminuiu ...(au).BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe

Antisecretory actions of Baccharis trimera (Less.) DC aqueous extract and isolated compounds: Analysis of underlying mechanisms

Ethnopharmacological relevance: Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae) is a species native to South America used in Brazilian folk medicine to treat gastrointestinal and liver diseases, kidney disorders and diabetes. Previous studies from this laboratory confirmed the antacid and antiulcer activities of the plant aqueous extract (AE) in rat and mouse models.Aim of the study: To investigate the mechanisms involved in the antacid action of AE and isolated compounds from Baccharis trimera.Materials and methods: AE was assayed in vivo in cold-restraint stress gastric ulcers and in pylorus-ligated mice. Nine fractions (F2-F10) previously isolated from AE were assayed in vitro on acid secretion measured as [(14)C]-aminopyrine ([(14)C]-AP) accumulation in rabbit gastric glands, and on gastric microsomal H(+), K(+)-ATPase preparations. Chlorogenic acids (F2, F3, F6, F7), flavonoids (F9), an ent-clerodane diterpene (F8) and a dilactonic neo-clerodane diterpene (F10) have been identified in these fractions.Results: Intraduodenal injection of AE (1.0 and 2.0 g/kg) in 4 h pylorus-ligated mice decreased the volume (20 and 50%) and total acidity (34 and 50%) of acid secretion compared to control values. Administered orally at the same doses AE protected against gastric mucosal lesions induced in mice by restraint at 4 C. Exposure of isolated rabbit gastric glands to fractions F8 (10-100 mu M) and F9 (10-300 mu g/ml) decreased the basal [(14)C]-AP uptake by 50 and 60% of control (Ratio = 6.2 +/- 1.1), whereas the remaining fractions were inactive. in the presence of the secretagogues F2 and F4 (30-300 mu g/ml) decreased the [(14)C]-AP uptake induced by histamine (His) with a 100-fold lower potency than that of ranitidine. F5 and F6 reduced the [(14)C]-AP uptake stimulated by carbachol (CCh), but they were 10 to 20-fold less potent than atropine. F8 (diterpene 2) and F9 (flavonoids) decreased both the His- and CCh-induced [(14)C]-AP uptake, whereas F10 (diterpene 1) was inactive against the [(14)C]-AP uptake stimulated by secretagogues. Diterpene 2 was the most active of all tested compounds being 7-fold less potent than ranitidine and equipotent to atropine in reducing acid secretion in vitro. This compound also reduced the gastric H(+), K(+)-ATPase activity by 20% of control, while the remaining fractions were inactive on the proton pump in vitro.Conclusions: the results indicate that Baccharis trimera presents constituents that inhibit gastric acid secretion by acting mainly on the cholinergic regulatory pathway. the plant extract also contains compounds that exert moderate inhibition of the histaminergic regulatory pathway of acid secretion and the gastric proton pump. Altogether these active constituents appear to provide effective inhibition of acid secretion in vivo, which may explain the reputed antiulcer activity of the plant extract. (C) 2011 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fundo de Auxilio aos Docentes e Alunos (FADA-UNIFESP)Fundacao de Apoio Institucional Rio Solimoes (UNI-SOL)Universidade Federal de São Paulo, Escola Paulista Med, Dept Pharmacol, Nat Prod Sect, São Paulo, BrazilAmazon Biotechnol Ctr, Lab Pharmacol & Toxicol, Manaus, Amazonas, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Escola Paulista Med, Dept Pharmacol, Nat Prod Sect, São Paulo, BrazilWeb of Scienc

A comparative study of two clerodane diterpenes from Baccharis trimera (Less.) DC. on the influx and mobilization of intracellular calcium in rat cardiomyocytes

Baccharis trimera (Less.) D.C. (Asteraceae) is a medicinal species native to South America and used in Brazilian folk medicine to treat gastrointestinal and liver diseases, kidney disorders and diabetes. the aqueous extract (AE) of the aerial parts of this species presented two mainly constituents: the ent-clerodane diterpene (Fig. 1) and the neo-clerodane diterpene (Fig. 2). the objective of this work was to study their activities on the blockade of Ca2+-induced contractions in KCL-depolarized rat portal vein preparations, and on the influx and mobilization of cytosolic calcium in rat cardiomyocytes by fluorescence measurements. the results showed that both the neo- and the ent-clerodane diterpenes reduced the maximal contractions induced by CaCl2, in KO depolarized rat portal vein preparations, without modifying the EC50. the data on the concentration of cytosolic calcium ([Ca2+](c)) showed that, while the neo-clerodane diterpene stimulates the mobilization of [Ca2+](c) in rat cardiomyocytes, this effect was not observed with the ent-clerodane diterpene. On the other hand, the influx of calcium was not altered by the neo-clerodane diterpene, but was reduced in the presence of the ent-clerodane diterpene, indicating that this compound induces a blockade of the voltage-dependent calcium channels. (C) 2014 Elsevier GmbH. All rights reserved.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Fed Univ São Paulo UNIFESP, Dept Pharmacol, Sch Med, BR-04044020 São Paulo, BrazilInst Bot, São Paulo, BrazilFed Univ São Paulo UNIFESP, Dept Pharmacol, Sch Med, BR-04044020 São Paulo, BrazilWeb of Scienc