Concentração de proteínas de fase aguda e vitamina D em cães com linfoma multicêntrico

Objetivou-se caracterizar a concentração sérica da vitamina D e das PFAs (Proteínas de Fase Aguda) (alfa-1 glicoproteína ácida, haptoglobina, transferrina, ceruloplasmina, albumina, IgA, IgG e alfa-1 – antitripsina) em cães com linfoma multicêntrico, submetidos ao tratamento quimioterápico com protocolo CHOP (Ciclofosfamida, Doxorrubicina, Vincristina e Prednisona), determinando o valor prognóstico desses marcadores para a doença. Foram avaliadas as concentrações séricas das PFAs, através do método da eletroforese e as concentrações da vitamina D, através da quimioluminescência em dois grupos experimentais, um grupo de 13 cães com linfoma multicêntrico classificados como alto grau pela citologia (GL) durante as semanas T0, T5 e T10 do tratamento com protocolo quimioterápico antineoplásico e em um grupo de 10 animais saudáveis para compor o grupo controle (GC), em coleta única. Para isso, foi realizado o diagnóstico, estadiamento e avaliação de resposta terapêutica dos 13 pacientes com linfoma multicêntrico através de técnicas de citopatologia, histopatologia, imuno-histoquímica do linfonodo periférico acometido. Foi observado que 9 pacientes tiveram resposta completa e 4 pacientes tiveram resposta parcial ao tratamento. Os dados foram analisados através do software R. Os resultados indicam que as diferenças entre as variáveis IgA, haptoglobina e α1-glicoproteína ácida foram significativas entre os grupos, e entre os diferentes momentos da quimioterapia (p< 0,05), indicando que podem ser marcadores sensíveis ao linfoma em cães. A α1-glicoproteína ácida apresentou valor prognóstico para o linfoma, com 63% de especificidade. Porém a vitamina D não apresentou valor prognóstico para o linfoma multicêntrico em cães. Palavras-chave: linfossarcoma; prognóstico; reação de fase aguda; resposta terapêutica; neoplasia hematopoiética

The CÃOCER Project: an Educational Approach for Cancer Prevention in Pet Animals

The CÃOCER projetct started four years ago and comprised several intra and extramural activities with the purpose to aware people of the importance of cancer in animals, focusing mainly in cancer prevention. With this intent, we provided a series of lectures for undergraduates and professionals of veterinary medicine. In addition, we participated in science fairs and exhibitions to disseminate the knowledge regarding cancer prevention for the population from Pirassununga, a city in the country of São Paulo State. Also, we conducted the first campaign of cancer prevention in animals named I Cãopanha of Cancer Prevention in Animals in which preventive physical clinical examinations were done on animals and educational material on cancer prevention was distributed. At last, it was also an objective of this work to perform a statistical survey of cancer cases in animals of Pirassununga. Some undergraduate students of Veterinary Medicine collaborated in this project with or without scholarships. Past four years since its inception, we believe that the project has achievedits initial goals and now our intention is to expand it. For this, we created a website(www.projetocaocer.com.br) that provides articles on cancer prevention in animals.We also wanted to increase the extension of the projetct activities, associating it withthe Brazilian Association of Veterinary Oncology (ABROVET) and the Support ResearchCenter in Veterinary Oncology from USP.O projeto CÃOCER há quatro anos compreende atividades intra e extramurais à USP com a finalidade de conscientizar a população sobre a importância dos cânceres em animais, focando em sua prevenção. Foram realizados ciclos de palestras para alunos de graduação em Medicina Veterinária e profissionais. Participamos de feiras de ciência e exposições para divulgação à população de Pirassununga, e realizamos a I Cãopanha de Prevenção de Câncer em Animais em que foram feitos exames clínicos nos animais e distribuído material educativo referente à prevenção de câncer. Por fim, ainda objetivou-se realizar um levantamento estatístico da casuística de animais portadores de neoplasias atendidos no Hospital Veterinário da FMVZ no campus de Pirassununga da USP. Colaboraram com este projeto diversos alunos de graduação em Medicina Veterinária da FZEA-USP e alunos do ensino médio que obtiveram bolsas pelo Programa de Pré-Iniciação Científica da USP. Passados quatro anos desdeseu início, o projeto atingiu seus objetivos iniciais e agora o intuito é expandi-lo. Para isso criamos um site (www.projetocaocer.com.br) que disponibiliza artigos sobreprevenção do câncer em animais. Pretendemos, também, aumentar as atividades extensionistas do projeto, junto à Associação Brasileira de Oncologia Veterinária e ao NAP de Oncologia Veterinária da Pró-Reitoria de Pesquisa da USP

The potential use of small extracellular vesicles as predictive marker in canine multicentric lymphoma

O linfoma é o tipo mais comum de malignidade hematológica canina, onde a forma multicêntrica é responsável por 75% de todos os casos. O tratamento padrão é o protocolo CHOP de 19 semanas, no qual 85% dos cães alcançam resposta completa / parcial; porém uma grande parcela recidiva a doença em um período de até um ano após o diagnóstico. A avaliação da resposta terapêutica e a compreensão dos mecanismos envolvidos no processo quimioresistência tem sido os maiores desafios do linfoma canino. Diante disso, esse trabalho foi dividido em dois estudos principais: No primeiro estudo investigamos in vivo o potencial de exossomos séricos e seus miRNAs como marcadores preditivos para o linfoma canino. No segundo estudo investigamos in vitro o papel dos exossomos derivados de células quimioresistentes em linhagens humana e canina de neoplasias hematopoiéticas. Para o primeiro estudo foram utilizados vinte e dois cães (8 em Remissão Completa e 14 em Progressão da Doença). Os exossomos isolados dos cães foram avaliados quanto ao tamanho e concentração e foi realizada uma triagem de 95 oncomir em amostras selecionadas de pacientes com RC e DP. Os pacientes com DP apresentaram maior concentração de exossomos séricos no momento do diagnóstico do que os pacientes com RC (D0, P = 0,0277). A análise da curva ROC foi significativa para a concentração de exossomos para predizer a resposta ao CHOP (AUC = 0,8076, P = 0,0203) e sobrevida global (AUC = 0,8333, P = 0,0136). O miR-205 (P = 0,0384) e o miR-222 (P = 0,0578) apresentaram maior frequência no grupo RC e o mir-20a foi mais expresso em pacientes com RC (P = 0,085), enquanto o miR-93 foi mais expresso em pacientes com DP (P = 0,09). No segundo estudo induzimos a quimioresistência utilizando o protocolo CHOP nas células 3132 (linfoma canino de células B) e células Jurkat (leucemia de células T humana). Mostramos que as células resistentes 3132-CR e Jurkat-CR têm um tempo de duplicação mais lento em comparação com suas células ingênuas respectivas. As células 3132 e 3132-CR secretaram uma maior quantidade de exossomos após o tratamento quimioterápico (P = 0,0187), porém não houve diferença na quantidade de exossomos entre as linhagens (P = 0,7661). Houve um aumento na proliferação de células após o tratamento do exossomos em comparação ao controle para 3132 (P &lt;0,001) e Jurkat (P &lt;0,0035). No entanto, não houve diferença na proliferação comparando o tratamento usando exossomos derivados de células nativas e aqueles derivados de células CR para 3132 (P = 0,11) e Jurkat (P = 0,91). A proliferação celular foi maior após 78 horas de tratamento com exossomos para 3132 (P &lt;0,001) e Jurkat (P &lt;0,001). Em conclusão, os resultados gerados por esses estudos podem desencadear avanços na oncologia veterinária pela introdução da abordagem de biópsia líquida e pela compreensão de mecanismos de desenvolvimento de quimioresistência mediados por exossomos.Lymphoma is the most common type of canine hematological malignancy, where the multicentric form is responsible for 75% of all cases. The standard treatment is the 19-week CHOP protocol, in which 85% of dogs achieve complete / partial response; however, a large portion of the disease relapses in a period of up to one year after diagnosis. The evaluation of the therapeutic response and the understanding of the mechanisms involved in the chemoresistance process have been the biggest challenges of canine lymphoma. Therefore, this work was divided into two main studies: In the first study, we investigated in vivo the potential of serum exosomes and their miRNAs as predictive markers for canine lymphoma. In the second study, we investigated in vitro the role of exosomes derived from chemoresistant cells in human and canine lineages of hematopoietic neoplasms. Twenty-two dogs were used for the first study (8 in Complete Remission and 14 in Disease Progression). The exosomes isolated from the dogs were evaluated for size and concentration and a 95 oncomir screening was performed on selected samples from patients with CR and PD. PD patients had a higher concentration of serum exosomes at the time of diagnosis than patients with CR (D0, P = 0.0277). The analysis of the ROC curve was significant for the concentration of exosomes to predict the response to CHOP (AUC = 0.8076, P = 0.0203) and overall survival (AUC = 0.8333, P = 0.0136). MiR-205 (P = 0.0384) and miR-222 (P = 0.0578) had a higher frequency in the CR group and mir-20a was more expressed in patients with CR (P = 0.085), while miR-93 was more expressed in patients with PD (P = 0.09). In the second study, we induced chemoresistance using the CHOP protocol in cells 3132 (canine B-cell lymphoma) and Jurkat cells (human T-cell leukemia). We have shown that resistant cells 3132-CR and Jurkat-CR have a slower doubling time compared to their respective naive cells. Cells 3132 and 3132-CR secreted a greater number of exosomes after chemotherapy (P = 0.0187), but there was no difference in the number of exosomes between strains (P = 0.7661). There was an increase in cell proliferation after treatment of the exosomes compared to the control for 3132 (P &lt;0.001) and Jurkat (P &lt;0.0035). However, there was no difference in proliferation comparing treatment using exosomes derived from native cells and those derived from CR cells for 3132 (P = 0.11) and Jurkat (P = 0.91). Cell proliferation was greater after 78 hours of treatment with exosomes for 3132 (P &lt;0.001) and Jurkat (P &lt;0.001). In conclusion, the results generated by these studies can trigger advances in veterinary oncology through the introduction of the liquid biopsy approach and the understanding of mechanisms of development of chemoresistance mediated by exosomes

A Screening of Epigenetic Therapeutic Targets for Non-Small Cell Lung Cancer Reveals PADI4 and KDM6B as Promising Candidates

Despite advances in diagnostic and therapeutic approaches for lung cancer, new therapies targeting metastasis by the specific regulation of cancer genes are needed. In this study, we screened a small library of epigenetic inhibitors in non-small-cell lung cancer (NSCLC) cell lines and evaluated 38 epigenetic targets for their potential role in metastatic NSCLC. The potential candidates were ranked by a streamlined approach using in silico and in vitro experiments based on publicly available databases and evaluated by real-time qPCR target gene expression, cell viability and invasion assays, and transcriptomic analysis. The survival rate of patients with lung adenocarcinoma is inversely correlated with the gene expression of eight epigenetic targets, and a systematic review of the literature confirmed that four of them have already been identified as targets for the treatment of NSCLC. Using nontoxic doses of the remaining inhibitors, KDM6B and PADI4 were identified as potential targets affecting the invasion and migration of metastatic lung cancer cell lines. Transcriptomic analysis of KDM6B and PADI4 treated cells showed altered expression of important genes related to the metastatic process. In conclusion, we showed that KDM6B and PADI4 are promising targets for inhibiting the metastasis of lung adenocarcinoma cancer cells

Acute phase protein and vitamin D concentration in dogs with multicentric lymphoma

Abstract This study aimed to evaluate the serum concentration of vitamin D (25-Hydroxyvitamin D) and acute phase proteins (APPs; alpha-1 acid glycoprotein, haptoglobin, transferrin, ceruloplasmin, albumin, IgA, IgG and alpha-1 - antitrypsin) as potential biomarkers for prognostic and therapy response in dogs with multicentric lymphoma submitted to the CHOP (Cyclophosphamide, Doxorubicin, Vincristine and Prednisone) chemotherapy protocol. Thirteen dogs with multicentric lymphoma classified as high grade by cytology were included in the treatment group (GL), while ten healthy dogs were included in the control group (GC). Serum was collected in the weeks T0, T5 and T10 of CHOP chemotherapy protocol, for the GL group, and in a single collection, for the GC group. All the collected samples were evaluated for the APPs and vitamin D concentrations through electrophoresis and chemiluminescence methods, respectively. Diagnostic and staging tests were performed for all the dogs in the GL group, and included cytopathology, histopathology and immunohistochemistry of the affected lymph node. Of these dogs, 9 achieved a complete response and 4 a partial response to the treatment. Data analysis was performed with the R software. The results demonstrated that serum concentrations of IgA, haptoglobin and α1-acid glycoprotein were significantly different between the groups and also between the different chemotherapy times analyzed (p</div