Oligomeric Status and Nucleotide Binding Properties of the Plastid ATP/ADP Transporter 1: Toward a Molecular Understanding of the Transport Mechanism

Background: Chloroplast ATP/ADP transporters are essential to energy homeostasis in plant cells. However, their molecular mechanism remains poorly understood, primarily due to the difficulty of producing and purifying functional recombinant forms of these transporters. Methodology/Principal Findings: In this work, we describe an expression and purification protocol providing good yields and efficient solubilization of NTT1 protein from Arabidopsis thaliana. By biochemical and biophysical analyses, we identified the best detergent for solubilization and purification of functional proteins, LAPAO. Purified NTT1 was found to accumulate as two independent pools of well folded, stable monomers and dimers. ATP and ADP binding properties were determined, and Pi, a co-substrate of ADP, was confirmed to be essential for nucleotide steady-state transport. Nucleotide binding studies and analysis of NTT1 mutants lead us to suggest the existence of two distinct and probably inter-dependent binding sites. Finally, fusion and deletion experiments demonstrated that the C-terminus of NTT1 is not essential for multimerization, but probably plays a regulatory role, controlling the nucleotide exchange rate. Conclusions/Significance: Taken together, these data provide a comprehensive molecular characterization of a chloroplas

Veel financiële routes van Nederland naar doorsluislanden

Nederland heeft een van de grootste voorraden aan inkomende en uitstaande buitenlandse directe investeringen ter wereld. Deze staan vooral op de balans van bijzondere financiële instellingen. Over 2016 rapporteert De Nederlandse Bank (DNB) een uitgaande stroom van 132 miljard euro aan dividenden uit kapitaaldeelnemingen, 16 miljard euro aan rente binnen concernverband en 36 miljard euro aan diensten (vooral royalty’s). Dit zijn respectievelijk vergoedingen voor eigen vermogen (dividenden), vreemd vermogen (rente) en eigendomsrechten (royalty’s)

Belastingmaatregelen tegen NL doorsluisland, voldoende impact?

Zestig procent van de royalty’s die via Nederland lopen gaat direct naar belastingparadijs Bermuda. Uitgaande rentes worden minder doorgesluisd naar belastingparadijzen: ongeveer 20%. Daarnaast stroomt zo’n 25% van de uitgaande rentes naar andere doorsluislanden, zoals Ierland, Luxemburg en Zwitserland. De conditionele bronbelasting op rente en royalty’s, die naar verwachting in 2021 zal ingaan, houdt de inkomensstromen naar andere doorsluislanden niet tegen. Om ook deze landen onder de bronbelasting te laten vallen is een ruimere toepassing nodig. Daarnaast blijft voor een effectieve bestrijding van belastingontwijking internationale coördinatie van belastingwetgeving noodzakelijk