Use of Bayesian Inference to Correlate In Vitro Embryo Production and In Vivo Fertility in Zebu Bulls

The objective of this experiment was to test in vitro embryo production (IVP) as a tool to estimate fertility performance in zebu bulls using Bayesian inference statistics. Oocytes were matured and fertilized in vitro using sperm cells from three different Zebu bulls (V, T, and G). The three bulls presented similar results with regard to pronuclear formation and blastocyst formation rates. However, the cleavage rates were different between bulls. The estimated conception rates based on combined data of cleavage and blastocyst formation were very similar to the true conception rates observed for the same bulls after a fixed-time artificial insemination program. Moreover, even when we used cleavage rate data only or blastocyst formation data only, the estimated conception rates were still close to the true conception rates. We conclude that Bayesian inference is an effective statistical procedure to estimate in vivo bull fertility using data from IVP

Temporal histologic evaluation of the endometrium of Nelore cows (Bos Taurus Indicus) in Southeast Brazil treated with Cloprostenol Sodium at the postpartum

Abstract: Uterine histological analysis by serial biopsies are an important tool not only for a better understanding and evaluation of physiological events involved in the process of uterine involution, but also for the identification and monitoring of pathological process that may compromise reproductive life. This study describes a temporal histological changes in endometrial tissues from multiparous Nelore cows in Southeast Brazil treated or not treated with Cloprostenol sodium 1 and 4 days postpartum (DPP), to determine if the treatment promotes histological endometrial involution. Cloprostenol sodium was administered on 1 and 4 DPP and endometrial biopsies were collected 1, 7, 14, 28, and 42 DPP using a Yomann´s biopsy instrument. The presence or absence of myometrial and endometrial tissue and its integrity, number of endometrial glands (classification 0 to 3), edema, hemorrhage, vascular congestion and type of epithelial cell was assessed. The average number of leukocytes was recorded. There was observed difference between groups on the number of endometrial glands (P≤ 0.05) at one-time point.  In addition, the degree of inflammation was reduced (P≤ 0.05) on time points. Cloprostenol sodium did not alter the histological appearance of uterine tissue during the postpartum period or reduce the period of uterine involution. Additionally, serial biopsies did not affect the fertility of the animals

Influence of lineage of oocyte donor on the yield and morphology of oocytes recovered by ultrasound-guided follicular aspiration in nellore cows

The objective of this study was to investigate the influence of lineage of oocytes donors on the number and quality of oocytes obtained through ultrasound-guided follicular aspiration in Nellore breed cows derived from two lineages of bulls (Karvadi; K and Taj-Mahal; T). Both maternal (Km and Tm) and paternal (Kp and Tp) lineages, as well as their combinations were investigated. Oocyte aspirations were repeatedly performed with an aspiration interval of 15 days in 56 donor females. Recovered cumulus oocyte-complexes (COCs) were counted, morphologically examined and classified into seven categories (grades from I to VII) according to the number of layers of the cumulus oocyte and cytoplasm appearance. The mean number of oocytes retrieved from donors of lineage Tp-Tm was significantly higher (28.23±1.92, P<0.05) than those obtained from lineages Kp-Tm, Kp-Km, and Tp-Km (21.34±1.32, 21.28±1.73, and 16.72±1.31, respectively). There was no significant difference in the mean number of recovered oocytes between donors of lineages Kp-Km and Kp-Tm, whereas animals of lineage Tp-Km yielded the lowest number of oocytes. Higher mean number of grade III oocytes was recovered from donors of lineage Kp than lineage Tp (10.11±0.66 versus 8.79±0.58, respectively), with more grade III oocytes being obtained in both lineages as compared to the others. Paternal lineage did not influence the quality of recovered oocytes in any other category, but both Kp and Tp yielded a great mean number of oocytes graded as I, II, and III (3.14±0.21; 4.93±0.33, and 10.11±0.66 versus 3.19±0.21, 5.59±0.44, and 8.79±0.58, respectively) than those classified as IV, V, VI, and VII. However, when considering the data from the maternal lineage significantly more oocytes (P<0.05) of grade I, II and III were obtained from Taj-Mahal (11.67 ± 0.67, 5.9±0.42 and 3.64±0.25, respectively) than for lineage Karvadi, with similar results for oocytes of grades IV, V, VI, and VII. Similarly to the paternal lineage, the number of oocytes of grade III was superior (P<0.05) when compared to other categories for both lineages. In conclusion, we demonstrate here a direct influence of lineage of oocyte donor on the production and quality of oocytes obtained through ultrasound-guided follicular aspiration in Nellore cows.El objetivo de este estudio fue investigar la influencia del linaje de las donadoras de ovocitos en el número y la calidad de los ovocitos obtenidos por aspiración folicular guiada por ecografía en animales de la raza Nelore, descendientes de dos linajes de toros (Karvadi, K y Taj-Mahal, T). Fueron evaluados los linajes maternos (Km y Tm) paternos (Kp y Tp) y sus combinaciones. Fueron realizadas varias aspiraciones de ovocitos en un intervalo de 15 días en 56 donadoras. Los ovocitos fueron contados, analizados morfológicamente y clasificados en siete categorías (grados I a VII) en función del número de células del cumulus y el aspecto del citoplasma. El número medio de ovocitos recuperados de donadoras del linaje Tp-Tm fue significativamente mayor (28,23 ± 1,92, P<0,05) que los de los linajes Kp-Tm, Kp-Km y Tp-Km (21,34±1,32, 21,28±1,73 y 16,72±1,31), respectivamente. No hubo diferencia significativa en el número medio de ovocitos recolectados de las donadoras Kp-Km y Kp-Tm, mientras que los animales Tp-Km produjeron la menor cantidad de ovocitos. Fueron recuperados más ovocitos (P<0,05) de grado III del linaje donador Kp que del linaje Tp (10,11±0,66 contra 8,79±0,58, respectivamente), con mayor número de ovocitos grado III obtenidos en esos dos linajes en comparación con los demás. El linaje paterno no afectó la calidad de los ovocitos en ninguna de las categorías, pero ambos linajes Kp y Tp produjeron un gran número de ovocitos de grados I, II y III (3,14±0,21, 4,93±0,33 y 10,11±0,66 contra 3,19±0,21, 5,59±0,44 y 8,79±0,58, respectivamente) de los clasificados como grado IV, V, VI y VII. Sin embargo, cuando fueron considerados los datos del linaje materno, se obtuvieron más ovocitos (P<0,05) para los grados I, II y III a partir del linaje de Taj-Mahal (11,67±0,67, 5,9±0,42 y 3,64±0.25, respectivamente) que del linaje Karvadi, con resultados similares a los ovocitos de los grados IV, V, VI y VII. Del mismo modo que el linaje paterno, el número de ovocitos de grado III fue mayor (P<0,05) en comparación con las categorías para ambos linajes. En conclusión, se demostró la influencia directa del linaje de las donadoras de ovocitos en el número y la calidad de los ovocitos obtenidos por aspiración folicular guiada por ecografía en vaquillas Nelore.O objetivo deste estudo foi investigar a influência da linhagem da doadora de oócito sobre o número e qualidade morfológica de oócitos obtidos através de aspiração folicular guiada por ultrassom em animais da raça Nelore, descendentes de duas linhagens de touros (Karvadi; K e Taj-Mahal; T). As linhagens maternas (Km e Tm) e paternas (Kp e Tp), e suas combinações, foram avaliadas. As aspirações de oócitos foram repetidamente realizadas em um intervalo de 15 dias em 56 doadoras. Os oócitos obtidos foram contados, analisados morfologicamente e classificados em sete categorias (graus I a VII), de acordo com o número de células do cumulus e aparência do citoplasma. O número médio de oócitos recuperados das doadoras da linhagem Tp-Tm foi significativamente maior (28,23 ± 1,92, P<0,05) do que os das linhagens Kp-Tm, Kp-Km, and Tp-Km (21,34±1,32; 21,28±1,73 e 16,72±1,31, respectivamente). Não houve diferença significativa no número médio de oócitos colhidos entre as doadoras das linhagens Kp-Km e Kp-Tm, enquanto que animais da linhagem Tp-Km produziram o mais baixo número de oócitos. Um maior número (P<0,05) de oócitos de grau III foi recuperado das doadoras da linhagem Kp do que da linhagem Tp (10,11±0,66 versus 8,79±0,58, respectivamente), com uma maior quantidade de oócitos de grau III sendo obtida em ambas as linhagens quando comparado com as demais. A linhagem paterna não influenciou na qualidade dos oócitos aspirados em nenhuma das categorias, mas ambas as linhagens Kp e Tp produziram um maior número de oócitos de graus I, II e III (3,14±0,21; 4,93±0,33 e 10,11±0,66 versus 3,19±0,21; 5,59±0,44 e 8,79±0,58, respectivamente) do que aqueles classificados como de graus IV, V, VI e VII. Entretanto, quando os dados da linhagem materna foram considerados, mais oócitos (P<0.05) de graus I, II e III foram obtidos da linhagem Taj-Mahal (11,67 ± 0,67; 5,9±0,42 e 3,64±0,25, respectivamente) do que para a linhagem Karvadi, com resultados similares para os oócitos de graus IV, V, VI e VII. Da mesma forma que a linhagem paterna, o número de oócitos de grau III foi superior (P<0,05) quando comparado com as categorias, nas duas linhagens. Concluindo, demonstramos a influência direta da linhagem da doadora de oócito sobre o número e qualidade dos oócitos obtidos pela aspiração folicular guiada por ultrassom em vacas da raça Nelore

A refrigeração no diagnóstico de Salmonella spp. utilizando o método microbiológico tradicional e reação em cadeia da polimerase em carcaças de frango

A pesquisa de Salmonella em carcaças de aves tem mostrado resultados discrepantes, dependendo se as amostras foram colhidas ainda na indústria, imediatamente após o chiller ou no comércio varejista, quando se encontram submetidas à refrigeração por vários dias. Técnicas mais sensíveis, tais como a Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR), podem fornecer dados importantes sobre o efeito do resfriamento sobre as células do patógeno, comparando seus resultados com os da metodologia microbiológica convencional (MC). Foram colhidas 130 carcaças de frango, sendo que 65 foram obtidas ainda na indústria (pós-chiller) e imediatamente analisadas e 65 carcaças embaladas e estocadas a 5°C por 72 horas (simulando o varejo), sendo então realizada a pesquisa do patógeno por ambas as técnicas. do total analisado (130 amostras), a PCR foi capaz de detectar 58 positivas (44,6%) e a MC 50 (38,5%). Ambas as técnicas detectaram um número superior de amostras positivas para Salmonella em carcaças colhidas ainda na indústria, quando comparadas às do varejo. A PCR detectou 50,77% de positividade em amostras da indústria e 38,46% em amostras do varejo. Para a MC, esses valores foram de 46,15% (indústria) e 30,77% (varejo). Concluímos que o resfriamento das carcaças a 5°C por 72 horas pode ser um fator limitante na detecção de Salmonella quando a pesquisa do patógeno se faz pela metodologia microbiológica convencional.The survey of Salmonella in poultry carcasses has shown conflicting results, depending on whether the samples were taken yet in the factory, immediately after the chiller or retail market, when they are subjected to refrigeration for several days. More sensitive techniques such as Polymerase Chain Reaction (PCR) can provide important data on the effect of cooling on the cells of the pathogen by comparing their results with those of conventional microbiological methods (CM). It was collected 130 chicken carcasses, wich 65 were obtained yet in the industry (post-chiller) and immediately analyzed and 65 carcasses packaged and stored at 5°C for 72 hours (simulating retail), and then research of the pathogen was performed by both techniques. of the analyzed total (130 samples), PCR was able to detect 58 positive (44.6%) and CM, 50 (38.5%). Both techniques detected a higher number of samples positive for Salmonella on carcasses collected yet in the factory when compared to those of retail. The PCR detected 50.77% of positive industry samples and 38.46% of retail samples. CM for these values was 46.15% (factory) and 30.77% (retail). We conclude that the cooling of the carcasses for at 5°C for 72 hours can be a limiting factor in the detection of Salmonella when the pathogen research is done by conventional microbiological methods.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

In vitro production of bovine embryos using Sigma antioxidant supplement®, α-tocopherol and L-ascorbic acid

This study tested the effect of Sigma antioxidant supplement®, α-tocopherol (vitamin E) and L-ascorbic acid (vitamin C) in the culture medium of bovine embryos. In experiment 1, in vitro produced bovine zygotes were cultured in Human Tubal Fluid (HTF): Eagle’s Basic Medium (BME) with: Group 1 – 50 µm vitamin C; Group 2 – 200 µm vitamin E; Group 3 – 25 µm vitamin C and 100 µm vitamin E; Group 4 – 1 µl/ml Sigma antioxidant supplement®; and the Control group – HTF:BME only. In experiment 2, embryos were cultured in high or low oxygen tension with HTF:BME + Sigma antioxidant supplement® or in HTF:BME alone (Control). The data were analyzed using ANOVA followed by Tukey’s test. The results of experiment 1 showed a negative effect (P 0.05) the number of blastocysts produced compared with the control group (30.1 ± 0.5%). During experiment 2, there was no effect (P > 0.05) from the culture medium or the O2 concentrations used, indicating that the reduction of the O2 concentration did not improve blastocyst production

Mercury concentrations in south atlantic swordfish, Xiphias gladius, Caught off the Coast of Brazil

This study evaluated the concentrations of mercury in fillets (anterior, middle, and end regions) from the swordfish, Xiphias gladius, and the relationships between mercury concentration and fish weight, as well as the region of collection. Of a total of 697 swordfish analyzed, 11 had mercury concentrations above 1 mg/kg, 421 were between 0.5 and 1.0 mg/kg, and 265 were below 0.5 mg/kg. The anterior and posterior regions had greater concentrations of mercury than the middle region, and fish caught off the northern coast of Brazil had a higher concentration than those caught off the southern coast. © 2013 Springer Science+Business Media New York

The effect of fetal calf serum concentrations upon the in vitro Bos taurus indicus X Bos taurus taurus crossbred embryo production and the cytoplasmic lipid accumulation

The aim was to test the supplementation of five different concentrations of fetal calf serum (FCS) upon the in vitro production (IVP) and cytoplasmic lipid accumulation in Nelore and Simmental crossbred bovine embryos. The addition of serum started on D3 of embryo culture. Nelore oocytes were submitted to in vitro maturation, in vitro fertilization with Simmental semen, and in vitro cultured. From D1 to D3 it was used the SOFaa media + 0.5% BSA without serum (Base Media). From D4 to D7 the embryos were divided into four experimental groups according to the concentration of serum that was added to the Base media: Group 0-0%: without serum; Group 0 – 2.5%: 2.5% of serum; Group 0-5%: 5% of serum; and Group 0-10%: 10% of serum. As for the Control group it was used Base Media + 2.5% of serum from D1 to D7. Statistical analysis was done with ANOVA followed by the Tukey test (P0.05) when assessing cleavage (72.74±3.18%, 84.18±0.74%, 68.46±2.35%, 75.72±1.77%, 81.07±3.38%), blastocyst formation (32.62±0.59%, 27.27±0.93%, 27.04±2.25%, 30.31±1.31%, 37.13±1.50%), development stage (5.16±1.12, 5.01±1.10, 5.06±1.02, 4.98±0.99, 5.21±1.04) and embryo quality (2.80±1.39, 2.89±1.36, 2.99±1.33, 2.78±1.42, 2.65±1.39), for the groups Control, 0-0%, 0-2.5%, 0-5% e 0-10%, respectively. However, the increase of serum concentration in the embryo culture media showed an increase of medium and large, lipid droplets. Nevertheless, for the groups with lower concentrations of serum (0-0% e 0-2.5%) the number of small lipid droplets was similar to the ones with higher concentrations (0-5% e 0-10%). We can conclude that it is possible to perform the IVP with no supplementation of serum in culture media, without producing any negative effect upon the production, development, and embryo quality.El objetivo fue estudiar la suplementación de cinco diferentes concentraciones de suero fetal bovino (SFB) en la producción in vitro (PIV) y la acumulación de lípidos citoplasmáticos en embriones bovinos obtenidos desde el cruce de Nellore con el Simmental. Ovário de matadero de vacas fueron utilizados para obtener los ovocitos y fueron madurados in vitro. Después de la fecundación in vitro con semen de un toro Simmental, los cigotos posibles se talaron y se transferirán a las placas de cultivo. De D1 a D3 fue utilizado el SOFaa + 5% de BSA con 0% de SFB. De D4 a D7 los embriones fueron divididos en cuatro grupos de acuerdo con la concentración de SFB en el medio de cultura: Grupo 0-0%: SOFaa + 5% de BSA (medio base); Grupo de 0-2,5%: medio base + 2,5% de SFB, 0-5% Grupo: medio base + 5% de SFB y Grupo 0-10%: medio base + 10% de SFB. Como control se utilizó un sistema de cultivo que contiene 2,5% de suero fetal bovino de D1 a D7. Para análisis estadística fue usado ANOVA seguido del Test de Tukey (P 0,05) y la escisión (72,74 ± 3,18%, 84,18 ± 0,74%, 68,46 ± 2,35%, 75,72 ± 1,77%, 81,07 ± 3,38%), la formación de blastocistos (32,62 ± 0,59%, 27,27 ± 0,93%, 27,04 ± 2,25%, 30,31 ± 1,31%, 37,13 ± 1,50%), la etapa de desarrollo (5,16 ± 1,12, 5,01 ± 1,10, 5,06 ± 1,02, 4,98 ± 0,99, 5,21 ± 1,04) y el grado de calidad de embriones (2,80 ± 1,39, 2,89 ± 1,36, 2,99 ± 1,33, 2,78 ± 1,42, 2,65 ± 1,39), respectivamente para el grupo de control, 0-0%, 0-2.5%, 0-5% y 0-10%. Sin embargo, al aumentar la concentración de SFB en el centro de desarrollo del embrión, se observó un aumento en la acumulación de gotitas de lípidos medianas y grandes. Sin embargo, en aquellos con menores concentraciones de suero (0-0% y 0-2,5%) el número de pequeñas gotitas de lípidos fue similar a los grupos con mayores concentraciones (0-5% y 0-10%). Se concluye que la PIV es posible sin la suplementación del medio de cultivo con suero fetal bovino, sin afectar la producción, el desarrollo y la calidad del embrión.O objetivo deste trabalho foi estudar a suplementação de cinco diferentes concentrações de soro fetal bovino (SFB), a partir do terceiro dia do cultivo embrionário, sobre a produção in vitro (PIV) e o acúmulo lipídico citoplasmático de embriões bovinos oriundos do cruzamento da raça Nelore com a raça Simental. Ovários de abatedouro de vacas Nelore foram utilizados para a obtenção dos oócitos que foram maturados in vitro. Decorrida a fertilização in vitro com o sêmen de um touro Simental, os possíveis zigotos foram desnudos e transferidos para as placas de cultivo. Do D1 ao D3 utilizou-se o meio SOFaa + 5% BSA com 0% de SFB. Do D4 ao D7 os embriões foram distribuídos em quatro grupos experimentais de acordo com a concentração de SFB adicionada ao meio de cultivo: Grupo 0-0%: SOFaa + 5% BSA (meio base), Grupo 0 – 2,5%: Meio base + 2,5% de SFB, Grupo 0-5%: Meio base + 5% de SFB e Grupo 0-10%: Meio Base acrescido de 10% de SFB. Como grupo controle foi utilizado um sistema de cultivo contendo 2,5% de SFB do D1 ao D7. Para análise estatística utilizou-se ANOVA seguido do Teste de Tukey (P0,05) quanto a clivagem (72,74±3,18%, 84,18±0,74%, 68,46±2,35%, 75,72±1,77%, 81,07±3,38%), a formação de blastocistos (32,62±0,59%, 27,27±0,93%, 27,04±2,25%, 30,31±1,31%, 37,13±1,50%), o estágio de desenvolvimento (5,16±1,12, 5,01±1,10, 5,06±1,02, 4,98±0,99, 5,21±1,04) e grau de qualidade embrionária (2,80±1,39, 2,89±1,36, 2,99±1,33, 2,78±1,42, 2,65±1,39), respectivamente para os grupos controle, 0-0%, 0-2,5%, 0-5% e 0-10%. Apesar disso, com o aumento da concentração do SFB no meio de cultivo embrionário, foi observada uma elevação no acúmulo de gotas lipídicas médias e grandes. No entanto, nos grupos com menores concentrações de soro (0-0% e 0-2.5%) o número de gotas lipídicas pequenas foi similar ao dos grupos com maiores concentrações (0-5% e 0-10%). Conclui-se que é possível a PIV sem a suplementação do meio de cultivo com SFB, não afetando a produção, o desenvolvimento e a qualidade embrionária.Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP

A substituição do meio TCM pelo meio BARC, suplementado com SFB, BSA ou PVA, para maturação de oócitos bovinos in vitro, não incrementa a subsequente produção de blastocistos

This study was carried out to assess the influence of bovine embryo culture medium Beltsville Agriculture Research Center (BARC), supplemented with FCS, BSA or PVA, on the in vitro oocyte maturation, evidenced by cleavage rate and blastocysts production at different developmental stages. Three experiments were performed, as follows: exp.1: addition of FCS to BARC medium at concentrations of 0, 5 and 10%; exp. 2: addition of BSA to BARC medium at concentrations of 0, 4 and 8 mg/ml; exp. 3: addition of PVA to BARC medium at concentrations of 0, 0.5 and 1.0 mg/ml. TCM 199 supplemented with bicarbonate, pyruvate, gentamicin sulfate, FSH, LH and FCS was used as control group. Oocytes obtained from cow ovaries at slaughterhouse were selected in PBS, and then matured in BARC medium supplemented with FSH, LH and gentamicin sulfate, according to the experimental design. Percoll gradient was used for sperm selection and TALP medium for IVF. In vitro embryo culture was in SOF-m medium; a humidified atmosphere with 5% CO2, in air, at 38.7oC was used for all steps. The number of oocytes reaching blastocyst, expanded blastocyst, and hatched blastocyt stages was recorded, respectively at 72 and 168 h post-insemination. ANOVA and Bonferroni t test were used to determine differences among groups. Differences of P<0.05 were taken as significant. Higher percentage (P<0.05) of cleaved oocytes was observed in group TCM + FCS than for the other groups matured in BARC supplemented with FCS or BSA, regardless the concentration used. However, the cleavage rate was similar between groups BARC plus PVA with 1 mg/ml (85.7%) and TCM + FCS (90.8%). Significant difference was found among groups for the production of blastocysts, with the control group yielding a higher number of blastocysts (results ranging from 47.4 to 51.4%, in comparison with groups using BARC + FCS (4.1 to 19.7%), BSA (1.4 to 5.6%) and PVA (5.7 to 10.6%). In conclusion, BARC medium supplemented with different macromolecules did not promote a beneficial effect on in vitro oocyte maturation, resulting in lower rate of cleavage and blastocyst production when compared with TCM + FCS medium.El presente trabajo tuvo como objetivo verificar la influencia del medio de cultivo de embriones bovinos "Beltsville Agriculture Research Center” (BARC), complementado con SFB, BSA o PVA, en la maduración in vitro de ovocitos, evidenciado a través de la tasa de fecundación y formación de blastocistos en diferentes etapas de desarrollo. Se realizaron tres experimentos, a saber: EXP 1: SFB añadido al medio BARC en concentraciones de 0, 5 y 10%; EXP 2: BSA añadido al medio BARC en concentraciones de 0, 4 y 8 mg/ml; EXP. 3: PVA se utilizó en el medio BARC en concentraciones de 0, 0.5 y 1 mg/ml. El medio de cultivo TCM 199 con piruvato, gentamicina, FSH, LH y SFB se utilizó como grupo control. Los ovocitos, obtenidos de ovarios de vacas enviadas al matadero, se seleccionaron en medio PBS y luego fueron madurados en medio BARC con FSH, LH, gentamicina y distintas macromoléculas. La selección del esperma se hizo con gradiente de Percoll, utilizando el medio TALP para la fecundación in vitro. Los embriones fueron cultivados en medio SOF modificado; ovocitos yembriones fueron incubados a 38,7°C, 5% de CO2 en aire y atmosfera húmeda. El número de ovocitos que fertilizaron y alcanzaron los estadios de blastocisto, blastocisto expandido y blastocisto eclosionado, respectivamente, se registraron 72 y 168 horas post inseminación. Análisis de varianza y la prueba t de Bonferroni se utilizaron para el análisis estadístico, con P<0.05. Porcentaje más alto (P<0.05) de ovocitos que clivaram fue observada en el grupo TCM + SFB que en los grupos madurados en medio BARC con SFB o BSA, independientemente de la concentración utilizada. Sin embargo, la tasa de fecundación fue similar entre grupos BARC + PVA con 1 mg/ml (85,7%) y TCM + SFB (90,8%). Diferencia significativa (P<0.05) se encontró entre los grupos para el desarrollo de blastocistos, con el grupo TCM + SFB produciendo un mayor número de blastocistos, en diferentes estadios (resultados que van desde 47,4 a 51,4%) en comparación con los grupos utilizando BARC + SFB (4,1 a 19,7%), BSA (1,4 a 5,6%) y PVA (5,7 a 10,6%). En conclusión, el medio BARC complementado con diferentes macromoléculas no fue eficiente en la promoción de una adecuada maduración de ovocitos bovinos in vitro, resultando en una tasa de fecundación y producción de blastocistos baja, en comparación con el medio TCM con SFB.O presente trabalho teve como objetivo verificar a influência do meio de cultivo de embriões bovinos “Beltsville Agriculture Research Center” (BARC), suplementado com SFB, BSA e PVA, separadamente, sobre a maturação de oócitos in vitro, evidenciada pela taxa de clivagem e formação de blastocistos em diferentes estágios de desenvolvimento. Três experimentos foram efetuados, de acordo com o seguinte delineamento experimental: exp.1: SFB foi adicionado ao meio BARC nas concentrações de 0, 5 e 10%; exp. 2: BSA foi adicionada ao meio BARC nas concentrações de 0, 4 e 8 mg/mL; exp. 3: PVA foi adicionado ao meio BARC nas concentrações de 0, 0,5 e 1 mg/mL. O meio de cultura TCM 199, acrescido de bicarbonato, piruvato, gentamicina, FSH, LH e SFB, foi utilizado como grupo controle. Os oócitos, obtidos de ovários de vacas destinadas ao abate comercial, foram selecionados em meio PBS e, a seguir, maturados em meio BARC acrescido de FSH, LH, gentamicina e as respectivas macromoléculas. A seleção espermática foi realizada em gradiente de Percoll, utilizando o meio TALP para a FIV. O cultivo in vitro dos embriões foi em meio SOF modificado; todas as etapas foram realizadas em incubadora a 5% de CO2 em ar, a 38,7 ºC, atmosfera úmida. O número de oócitos que clivou e atingiu os estágios de blastocisto, blastocisto expandido e blastocisto eclodido foi registrado, respectivamente, as 72 e 168 horas pós-inseminação. ANOVA e teste t de Bonferroni foram empregados para a análise estatística, com P<0,05 sendo considerado significativo. Maior porcentagem (P<0,05) de oócitos que clivaram foi observada no grupo TCM + SFB do que nos grupos maturados em meio BARC com SFB ou BSA, independentemente da concentração adotada. Contudo, a taxa de fertilização foi similar entre os grupos BARC + PVA com 1 mg/mL (85,7%) e TCM + SFB (90,8%). Diferença significativa (P<0,05) foi constatada entre os grupos para o desenvolvimento de blastocistos, com o grupo TCM + SFB produzindo um maior número de blastocistos, em diferentes estágios (resultados variando de 47,4 a 51,4%) em comparação com os grupos utilizando BARC + SFB (4,1 a 19,7%), BSA (1,4 a 5,6%) e PVA (5,7 a 10,6%). Concluindo, o meio BARC suplementado com diferentes fontes de macromoléculas não foi eficiente em promover adequada maturação dos oócitos bovinos in vitro, resultando em uma baixa taxa de fertilização e de produção de blastocistos, em comparação com o meio TCM + SFB