Activation of the TRKB receptor mediates the panicolytic-like effect of the NOS inhibitor aminoguanidine

Nitric oxide (NO) triggers escape reactions in the dorsal periaqueductal gray matter (dPAG), a core structure mediating panic-associated response, and decreases the release of BDNF in vitro. BDNF mediates the panicolytic effect induced by antidepressant drugs and produces these effects per se when injected into the dPAG. Based on these findings, we hypothesize that nitric oxide synthase (NOS) inhibitors would have panicolytic properties associated with increased BDNF signaling in the dPAG. We observed that the repeated (7 days), but not acute (1 day), systemic administration of the NOS inhibitor aminoguanidine (AMG; 15 mg/kg/day) increased the latency to escape from the open arm of the elevated T-maze (ETM) and inhibited the number of jumps in hypoxia-induced escape reaction in rats, suggesting a panicolytic-like effect. Repeated, but not acute, AMG administration (15 mg/kg) also decreased nitrite levels and increased TRKB phosphorylation at residues Y706/7 in the dPAG. Notwithstanding the lack of AMG effect on total BDNF levels in this structure, the microinjection of the TRK antagonist K252a into the dPAG blocked the anti-escape effect of this drug in the ETM. Taken together our data suggest that the inhibition of NO production by AMG increases the levels of pTRKB, which is required for the panicolytic-like effect observed.Peer reviewe

Differential involvement of dorsal raphe subregions in the regulation of defensive responses associated with anxiety and fear.

O núcleo dorsal da rafe (NDR) é a principal fonte de projeções serotonérgicas que inervam o sistema límbico. Estudos mostram que o NDR é uma estrutura complexa, formada por distintas sub-regiões topograficamente organizadas e que apresentam diferentes propriedades neuroquímicas e funcionais. Tem sido proposto que duas vias serotonérgicas oriundas do NDR, o trato prosencefálico e o trato periventricular, modulam diferentemente a expressão de comportamentos defensivos associados aos transtornos de ansiedade generalizada e de pânico. O presente trabalho investigou se as respostas defensivas de esquiva e de fuga evocadas no modelo do labirinto em T elevado (LTE), relacionadas à ansiedade generalizada e ao pânico, respectivamente, recrutam diferentes sub-regiões do NDR. Na primeira etapa do trabalho, usando a técnica de imunoistoquímica para detecção da proteína Fos e da enzima triptofano hidroxilase, avaliamos a expressão da proteína Fos por neurônios serotonérgicos e não-serotonérgicos em diferentes sub-regiões do NDR, bem como em estruturas mesencefálicas vizinhas ao NDR, ou seja, o núcleo mediano da rafe (NMR) e substância cinzenta periaquedutal (SCP) de ratos em decorrência da expressão dos comportamento de esquiva inibitória ou fuga no LTE. Nossos resultados mostraram que os comportamentos de fuga e de esquiva evocados no LTE recrutam distintas populações neuronais do NDR, do NMR, bem como da SCP. Enquanto neurônios serotonérgicos localizados no nível médio e caudal do NDR, mais precisamente, nas sub-regiões dorsal (DRD), caudal (DRC) e interfascicular (DRI), bem como do NMR, estão envolvidos com a aquisição do comportamento de esquiva inibitória, neurônios não serotonérgicos das asas laterais do NDR/SCP ventrolateral, bem como das colunas, dorsomedial e dorsolateral da SCP participam da expressão da fuga. Na segunda parte deste trabalho, avaliamos os efeitos da administração do agonista de receptores AMPA/cainato, ácido caínico, no DRD, DRC e asas laterais do NDR sobre os comportamentos defensivos avaliados no LTE. Os resultados mostraram que a injeção de ácido caínico, tanto no DRD, quanto no DRC, facilita a aquisição da esquiva inibitória e também prejudica a expressão do comportamento de fuga. Já, a estimulação das asas laterais do NDR com ácido caínico induz a expressão do comportamento de fuga, sem alterar o comportamento de esquiva. Efeito oposto sobre o comportamento de fuga foi observado com a administração nesta região de cloreto de cobalto, um inibidor da transmissão sináptica. Nossos resultados mostraram ainda que a administração de ácido caínico nas asas laterais aumenta a distância percorrida pelos animais em uma arena circular, resultado indicativo da evocação da resposta de fuga. Por fim, avaliamos a o envolvimento da neurotransmissão mediada por receptores GABAA e por receptores CRF1 nas asas laterais do NDR, na expressão do comportamento de fuga expressa no LTE. Os resultados mostram que o bloqueio dos receptores GABAA nas asas laterais facilitou a expressão da fuga. Por outro lado a administração de antalarmina, antagonista de receptores CRF1 não alterou a expressão da resposta de fuga, porém prejudicou a aquisição da esquiva inibitória. Em conjunto, os resultados da primeira etapa indicam o envolvimento de diferentes sub-populações neuronais do NDR na expressão dos comportamentos de esquiva e fuga avaliados no LTE. Nossos resultados também apontam o envolvimento de neurônios serotonérgicos do NMR na expressão da esquiva inibitória, bem como a participação da SCP na resposta de fuga. Os resultados da segunda etapa indicam que neurônios serotonérgicos localizados no DRD e DRC possam dar origem aos tratos prosencefálico e periventricular abordados pela teoria de Deakin & Graeff (1991). Embora as asas laterais do NDR estejam marcantemente envolvidas na expressão/regulação da resposta de fuga, populações neuronais específicas dessa região também estão envolvidas na modulação do comportamento de esquiva inibitória.The dorsal raphe nucleus (DRN) is the main source of serotonergic projections that innervate the limbic system. A wealth of evidence indicates that the DRN is a complex structure composed by topographically organized sub-regions with distinct functional and neurochemical properties. It have been proposed that two serotonergic pathways originating in the DRN, the forebrain and periventricular tracts, distinctly modulate defensive behaviors associated with generalized anxiety disorder and panic disorder. The present study addressed the hypothesis that the two defensive responses evoked by the elevated T maze (ETM), i.e. escape and inhibitory avoidance which have been related to generalized anxiety and panic disorders, respectively, would recruit different subregions of the DRN. In the first part of this work, the number of doubly-immunostained cells for Fos protein and tryptophan hydroxylase, a marker of serotonergic neurons, was assessed within the rat DRN, median raphe nucleus (MRN) and PAG following inhibitory avoidance and escape performance in the ETM. Our results showed that these two defensive responses recruited distinct neuronal populations within the DRN, MRN and PAG. While serotonergic neurons located at the middle and caudal level of the DRN, specifically within the sub-regions dorsal (DRD), caudal (DRC) and interfascicular (DRI), and the MRN are implicated in the acquistion of inhibitory avoidance, nonserotonergic neurons in lateral wings (lwDR) of the DRN /ventrolateralPAG and the dorsal columns of PAG are implicated in the escape expression. In the second part of this study, we evaluated the effects caused by the administration of AMPA/kainate receptor agonist, kainic acid, into the DRD, DRC and lwDR of rats tested in the ETM. The results showed that injection of kainic acid into DRD and DRC facilitated inhibitory avoidance acquisition and impaired escape expression. On the other hand, stimulation of the lwDR by kainic acid facilitated escape expression, without interfering with inhibitory avoidance acquisition. Opposite effect on escape behavior was observed in this region followed injection of cobalt chloride, a synaptic transmission inhibitor. Our results also showed that administration of higher doses of kainic acid into the lwDR promptly evoked a vigorous escape reaction in animals tested in a circular arena. Finally, we evaluated the involvement of GABAA and CRF1 receptor-mediated neurotransmission in the lwDR in the regulation of the escape behavior measured by the ETM. Our results showed that the GABAA receptor antagonist bicuculine injected into the lwDR favored escape expression, without affecting inhibitory avoidance acquisition. On the other hand, local microinjection of the CRF1 receptor antagonist antalarmin impaired the acquisition of inhibitory avoidance, without changing escape expression. Together, our immunohistochemical results indicate the involvement of distinct DRN neuronal subpopulations in the regulation of escape and inhibitory avoidance responses. Our results also suggested that, while serotonergic neurons within the DRD, DRC, DRI and MRN are involved in inhibitory avoidance acquisition, non-serotonergic neurons of the vlPAG, dlPAG and dmPAG are involved in escape expression. The behavioral results with kainic acid indicated that the DRC and DRD may be the origin of the forebrain and periventricular tracts addressed by Deakin & Graeffs theory (1991). Although the lwDR are markedly implicated in escape regulation, specific neuronal populations within this region may also modulate inhibitory avoidance behavior

Differential involvement of dorsal raphe subregions in the regulation of defensive responses associated with anxiety and fear.

O núcleo dorsal da rafe (NDR) é a principal fonte de projeções serotonérgicas que inervam o sistema límbico. Estudos mostram que o NDR é uma estrutura complexa, formada por distintas sub-regiões topograficamente organizadas e que apresentam diferentes propriedades neuroquímicas e funcionais. Tem sido proposto que duas vias serotonérgicas oriundas do NDR, o trato prosencefálico e o trato periventricular, modulam diferentemente a expressão de comportamentos defensivos associados aos transtornos de ansiedade generalizada e de pânico. O presente trabalho investigou se as respostas defensivas de esquiva e de fuga evocadas no modelo do labirinto em T elevado (LTE), relacionadas à ansiedade generalizada e ao pânico, respectivamente, recrutam diferentes sub-regiões do NDR. Na primeira etapa do trabalho, usando a técnica de imunoistoquímica para detecção da proteína Fos e da enzima triptofano hidroxilase, avaliamos a expressão da proteína Fos por neurônios serotonérgicos e não-serotonérgicos em diferentes sub-regiões do NDR, bem como em estruturas mesencefálicas vizinhas ao NDR, ou seja, o núcleo mediano da rafe (NMR) e substância cinzenta periaquedutal (SCP) de ratos em decorrência da expressão dos comportamento de esquiva inibitória ou fuga no LTE. Nossos resultados mostraram que os comportamentos de fuga e de esquiva evocados no LTE recrutam distintas populações neuronais do NDR, do NMR, bem como da SCP. Enquanto neurônios serotonérgicos localizados no nível médio e caudal do NDR, mais precisamente, nas sub-regiões dorsal (DRD), caudal (DRC) e interfascicular (DRI), bem como do NMR, estão envolvidos com a aquisição do comportamento de esquiva inibitória, neurônios não serotonérgicos das asas laterais do NDR/SCP ventrolateral, bem como das colunas, dorsomedial e dorsolateral da SCP participam da expressão da fuga. Na segunda parte deste trabalho, avaliamos os efeitos da administração do agonista de receptores AMPA/cainato, ácido caínico, no DRD, DRC e asas laterais do NDR sobre os comportamentos defensivos avaliados no LTE. Os resultados mostraram que a injeção de ácido caínico, tanto no DRD, quanto no DRC, facilita a aquisição da esquiva inibitória e também prejudica a expressão do comportamento de fuga. Já, a estimulação das asas laterais do NDR com ácido caínico induz a expressão do comportamento de fuga, sem alterar o comportamento de esquiva. Efeito oposto sobre o comportamento de fuga foi observado com a administração nesta região de cloreto de cobalto, um inibidor da transmissão sináptica. Nossos resultados mostraram ainda que a administração de ácido caínico nas asas laterais aumenta a distância percorrida pelos animais em uma arena circular, resultado indicativo da evocação da resposta de fuga. Por fim, avaliamos a o envolvimento da neurotransmissão mediada por receptores GABAA e por receptores CRF1 nas asas laterais do NDR, na expressão do comportamento de fuga expressa no LTE. Os resultados mostram que o bloqueio dos receptores GABAA nas asas laterais facilitou a expressão da fuga. Por outro lado a administração de antalarmina, antagonista de receptores CRF1 não alterou a expressão da resposta de fuga, porém prejudicou a aquisição da esquiva inibitória. Em conjunto, os resultados da primeira etapa indicam o envolvimento de diferentes sub-populações neuronais do NDR na expressão dos comportamentos de esquiva e fuga avaliados no LTE. Nossos resultados também apontam o envolvimento de neurônios serotonérgicos do NMR na expressão da esquiva inibitória, bem como a participação da SCP na resposta de fuga. Os resultados da segunda etapa indicam que neurônios serotonérgicos localizados no DRD e DRC possam dar origem aos tratos prosencefálico e periventricular abordados pela teoria de Deakin & Graeff (1991). Embora as asas laterais do NDR estejam marcantemente envolvidas na expressão/regulação da resposta de fuga, populações neuronais específicas dessa região também estão envolvidas na modulação do comportamento de esquiva inibitória.The dorsal raphe nucleus (DRN) is the main source of serotonergic projections that innervate the limbic system. A wealth of evidence indicates that the DRN is a complex structure composed by topographically organized sub-regions with distinct functional and neurochemical properties. It have been proposed that two serotonergic pathways originating in the DRN, the forebrain and periventricular tracts, distinctly modulate defensive behaviors associated with generalized anxiety disorder and panic disorder. The present study addressed the hypothesis that the two defensive responses evoked by the elevated T maze (ETM), i.e. escape and inhibitory avoidance which have been related to generalized anxiety and panic disorders, respectively, would recruit different subregions of the DRN. In the first part of this work, the number of doubly-immunostained cells for Fos protein and tryptophan hydroxylase, a marker of serotonergic neurons, was assessed within the rat DRN, median raphe nucleus (MRN) and PAG following inhibitory avoidance and escape performance in the ETM. Our results showed that these two defensive responses recruited distinct neuronal populations within the DRN, MRN and PAG. While serotonergic neurons located at the middle and caudal level of the DRN, specifically within the sub-regions dorsal (DRD), caudal (DRC) and interfascicular (DRI), and the MRN are implicated in the acquistion of inhibitory avoidance, nonserotonergic neurons in lateral wings (lwDR) of the DRN /ventrolateralPAG and the dorsal columns of PAG are implicated in the escape expression. In the second part of this study, we evaluated the effects caused by the administration of AMPA/kainate receptor agonist, kainic acid, into the DRD, DRC and lwDR of rats tested in the ETM. The results showed that injection of kainic acid into DRD and DRC facilitated inhibitory avoidance acquisition and impaired escape expression. On the other hand, stimulation of the lwDR by kainic acid facilitated escape expression, without interfering with inhibitory avoidance acquisition. Opposite effect on escape behavior was observed in this region followed injection of cobalt chloride, a synaptic transmission inhibitor. Our results also showed that administration of higher doses of kainic acid into the lwDR promptly evoked a vigorous escape reaction in animals tested in a circular arena. Finally, we evaluated the involvement of GABAA and CRF1 receptor-mediated neurotransmission in the lwDR in the regulation of the escape behavior measured by the ETM. Our results showed that the GABAA receptor antagonist bicuculine injected into the lwDR favored escape expression, without affecting inhibitory avoidance acquisition. On the other hand, local microinjection of the CRF1 receptor antagonist antalarmin impaired the acquisition of inhibitory avoidance, without changing escape expression. Together, our immunohistochemical results indicate the involvement of distinct DRN neuronal subpopulations in the regulation of escape and inhibitory avoidance responses. Our results also suggested that, while serotonergic neurons within the DRD, DRC, DRI and MRN are involved in inhibitory avoidance acquisition, non-serotonergic neurons of the vlPAG, dlPAG and dmPAG are involved in escape expression. The behavioral results with kainic acid indicated that the DRC and DRD may be the origin of the forebrain and periventricular tracts addressed by Deakin & Graeffs theory (1991). Although the lwDR are markedly implicated in escape regulation, specific neuronal populations within this region may also modulate inhibitory avoidance behavior

Applicazione della Metodologia Jidoka e realizzazione di un Sistema di Gestione dei Piani di Reazione su una linea di assemblaggio semiautomatica di Fuel Rails

Sommario La seguente tesi è stata sviluppata attraverso un percorso formativo di sei mesi svolto presso l'azienda Continental (CPT Italy S.r.l), nella sede di Fauglia. L’obiettivo è quello di applicare i concetti della filosofia lean all'interno del reparto di assemblaggio dei fuel-rails. Il lavoro svolto mira all’introduzione della metodologia Jidoka all’interno della linea di assemblaggio e alla formazione degli operatori sul corretto utilizzo di questo procedimento. Per prima cosa, è stato creato un sistema di raccolta dati efficiente ed affidabile al fine di poter determinare quali fossero le principali voci di perdita che andassero ad impattare sul FPY della linea. Per fare questo è stato realizzato un file che dividesse i 165 codici di errore registrati dai vari moduli della linea, in 35 famiglie di voci di scarto, in modo che l’analisi dei problemi della linea risultasse più comprensibile e schematizzata. Una volta ottenuto un deployment di quali fossero i motivi di fermo più impattanti sul FPY, si è proseguito applicando i principi del Jidoka al modulo che più era affetto da questi problemi, introducendo una P-Chart per conteggiare gli scarti e far così scattare un allarme al raggiungimento della soglia prefissata. Per favorire la ripartenza dei moduli dopo il fermo Jidoka, sono stati redatti dei piani di reazione, cioè degli elenchi di azioni da seguire “passo-passo” per risolvere i possibili problemi del modulo in maniera facile e senza perdite di tempo. A completare il percorso formativo ha contribuito, anche, la creazione di un database per i piani di reazione compilati, in grado di archiviarli ed effettuarne un’analisi restituendo dei report utili all’interpretazione dei fermi macchina (tipologia di failure e ricorrenze). Infine, di fondamentale importanza è stata la formazione del personale di linea che, attraverso i formati standard aziendali (istruzioni ed OPL), ha aumentato il livello di preparazione degli operatori, aggiornandoli sulle migliorie apportate. Abstract Following thesis has been developed through a six-month stage carried out at the Continental company (CPT Italy S.r.l.), in Fauglia Plan. Aim of this work is the application of lean philosophy concepts in the fuel-rails assembly production area. The work goal is the integration of the Jidoka methodology on the assembly line and following operators training. In order to highlight main loss items that impacted the FPY of the line, an efficient and reliable data collection system has been preliminarily set-up. To do so, an excel file has been created collecting the 165 error codes registered by the various modules of the line. Those 165 error codes have been consequently aggregated into 35 families of scrap items, in order to make the analysis more actionable. Once the most impacting scrap items on the FPY has been deployed, we proceeded by applying the principles of the Jidoka to the module that was most affected by scraps. We introduced a trigger activated alarm linked to a P-Chart that permits to count the scraps by registering them and switch-on an alarm as soon as the limit has been reached. To facilitate the restart of the modules after the Jidoka shutdown, we set up reaction plans in order to provide a list of actions to be taken step-by-step to solve problems in an easy and as fast as possible way. A contribution to the stage completion was done by the creation of a database to register the filled-up reaction plans, with the aim to analyze them and returning useful reports to the interpretation of the machine stops (failure type, recurrences). Furthermore, continuous training of operation people has been fundamental to increase their knowledge, by the support of standard formats (instructions and OPL), and their relevant updates

Involvement of rat dorsal hippocampus TRPV1 receptors in the modulation of conditioned emotional response: an interaction with the glutamatergic, nitrergic and cGMP pathways

O hipocampo é uma estrutura encefálica situada medialmente ao corno inferior do ventrículo lateral e faz parte do sistema límbico. Pode ser dividido em três partes: o giro denteado, áreas denominadas CA1, CA2 e CA3, e o subículo. Com base em sua posição anatômica, o hipocampo pode ser dividido em porções dorsal (HIPd) e ventral (HIPv). De particular interesse para o presenta trabalho, o HIPd é uma estrutura que está intimamente relacionada com a modulação do aprendizado, da memória e de respostas defensivas relacionadas a transtornos de ansiedade. Um modelo animal utilizado para avaliação dessas respostas defensivas é o medo condicionado ao contexto. Nesse modelo, são avaliadas alterações comportamentais e autonômicas denominadas conjuntamente de resposta emocional condicionada (REC). Dentre os diversos sistemas neurotransmissores envolvidos com a modulação da REC, destaca-se a modulação pelo sistema endovaniloide via receptores vaniloides de potencial transitório tipo 1 (TRPV1). Estes receptores estão presentes em diversas estruturas límbicas, como, por exemplo, o HIPd. Sua ativação está relacionada à liberação de glutamato de forma direta, por ação em receptores pré-sinápticos, ou de forma indireta via ativação da formação de óxido nítrico (NO) e aumento dos níveis de GMPc. O objetivo do presente trabalho foi testar a hipótese de que os receptores TRPV1 e a via receptores NMDA/NO/GMPc no HIPd de ratos modulariam a expressão da REC no modelo do medo condicionado ao contexto. Para este fim, ratos Wistar com cânulas-guia bilaterais direcionadas ao HIPd receberam administração local de diferentes doses do antagonista de receptores TRPV1, 6-iodo-capsaicina, ou do agonista destes receptores, a capsaicina, na ausência ou presença do antagonista. Grupos independentes receberam uma primeira administração local do antagonista de receptores glutamatérgicos do tipo NMDA, AP7, do inibidor da enzima sintase neuronial do óxido nítrico (nNOS), NPLA, do sequestrador de NO, carboxi-PTIO ou do inibidor da enzima guanilato-ciclase solúvel, ODQ, seguida por injeção de capsaicina. O comportamento de congelamento e os parâmetros autonômicos de pressão arterial, frequência cardíaca e temperatura cutânea da cauda foram avaliados no modelo de medo condicionado ao contexto 10 minutos após a última administração das drogas. Nossos resultados demonstraram que o antagonista TRPV1 no HIPd reduz a expressão da REC, enquanto o agonista destes receptores promove efeito oposto. Além disso, foi observado que o pré-tratamento do HIPd com AP7, NPLA, c-PTIO ou ODQ atenuou o aumento da REC induzido pela capsaicina. Concluímos, portanto, que receptores TRPV1 no HIPd modulam a expressão da REC através da via receptores NMDA, nNOS e GMPc.The hippocampus is a brain structure that can be divided into dorsal (dHIP) and ventral (vHIP) portions. For the present work, we will highlight the dHIP funcition in conditioned fear. The dHIP is an encephalic structure intimately involved with memory, defensive responses, and anxiety disorders. An animal model used to evaluate these defensive responses is the conditioned fear to context. In this model, behavioral and autonomic (blood pressure, heart rate and cutaneous tail temperature) changes, called conditioned emotional response (CER) are evaluated. Among the several neurotransmitter systems involved in the modulation of CER, the endovanilloid system and its transient potential type 1 (TRPV1) vanilloid receptors, a nonselective cation channel, stands out. Evidences from Literature suggests the involvement of TRPV1 receptors in defensive responses during aversive situations such as fear conditioning context and these receptors are expressed in the dHIP. TRPV1 activation has been related to glutamate release. This effect could be direct via activation of presynaptic TRPV1 receptors or indirect via activation of postsynaptic TRPV1 receptors, resulting in formation of nitric oxide (NO) and retrograde action increasing levels of cGMP. The aim of the present study was to test the hypothesis that TRPV1 receptors increase the CER in the CFC model by modulating NMDA receptors activation, NO synthesis and GMPc formation in the dHIP. Wistar rats with guide cannula bilaterally implanted in the dHIP received local administration of different doses of the TRPV1 antagonist, 6-iodo-capsaicin, or the agonist of these receptors, capsaicin, in the absence or presence of the antagonist. Independent groups received a first local injection of the NMDA receptors antagonist AP7; or the neuronal nitric oxide synthase (nNOS) inhibitor NPLA; or the NO scavenger, carboxy-PTIO; or the soluble guanylate cyclase inhibitor ODQ; followed by injection of capsaicin. The freezing behavior and the CER response were evaluated in the CFC model during 10 minutes after the last administration of the drugs

DIFFERENTIAL INVOLVEMENT OF DORSAL RAPHE SUBNUCLEI IN THE REGULATION OF ANXIETY- AND PANIC-RELATED DEFENSIVE BEHAVIORS

A wealth of evidence indicates that the dorsal raphe nucleus (DR) is not a homogenous structure, but an aggregate of distinctive populations of neurons that may differ anatomically, neurochemically and functionally. Other findings suggest that serotonergic neurons within the mid-caudal and caudal part of the DR are involved in anxiety processing while those within the lateral wings (IwDR) and ventrolateral periaqueductal gray (vIPAG) are responsive to panic-evoking stimuli/situations. However, no study to date has directly compared the activity of 5-HT and non-5HT neurons within different subnuclei of the DR following the expression of anxiety- and panic-related defensive responses. In the present investigation, the number of doubly immunostained cells for Fos protein and tryptophan hydroxylase, a marker of serotonergic neurons, was assessed within the rat DR, median raphe nucleus (MRN) and PAG following inhibitory avoidance and escape performance in the elevated T-maze, behaviors associated with anxiety and panic, respectively. Inhibitory avoidance, but not escape, significantly increased the number of Fos-expressing serotonergic neurons within the mid-caudal part of the dorsal subnucleus, caudal and interfascicular subnuclei of the DR and in the MRN. Escape, on the other hand, caused a marked increase in the activity of non-5HT cells within the IwDR, vIPAG, dorsolateral and dorsomedial columns of the PAG. These results strongly corroborate the view that different subsets of neurons in the DR are activated by anxiety- and panic-relevant stimuli/situations, with important implications for the understanding of the pathophysiology of generalized anxiety and panic disorders. (C) 2012 IBRO. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.CNPqCNPqFAPESP (Brazil)FAPESP, Brazi

Dorsal raphe nucleus regulation of a panic-like defensive behavior evoked by chemical stimulation of the rat dorsal periaqueductal gray matter

Electrical or chemical stimulation of the dorsal periaqueductal gray matter (DPAG) evokes escape, a defensive behavior that has been related to panic attacks. Injection of 5-HT(1A) or 5-HT(2A) receptor agonists into this midbrain area inhibits this response. It has been proposed that the impairment of 5-HT mechanisms controlling escape at the level of the DPAG may underlie the susceptibility to panic attacks that characterizes the panic disorder. In this study we evaluated the effects of the pharmacological manipulation of the dorsal raphe nucleus (DRN), which are the main source of 5-HT input to the DPAG, on the escape response evoked in rats by the intra-DPAG injection of the nitric oxide donor SIN-1. The results showed that DRN administration of the 5-HT(1A) receptor agonist 8-OH-DPAT which inhibits the activity of 5-HT neurons favored the expression of escape induced by SIN-1. Intra-DRN injection of the excitatory amino acid kainic acid or the 5-HT(1A) receptor antagonist WAY-100635 did not change escape expression. However, both compounds fully blocked the escape reaction generated by intra-DPAG injection of the excitatory amino acid D,L-homocysteic acid (DLH). Overall, the results indicate that 5-HT neurons in the DRN exert a bidirectional control upon escape behavior generated by the DPAG. Taking into account the effect of WAY-100635 on DLH-induced escape, they also strengthen the view that DRN 5-HT(1A) autoreceptors are under tonic inhibitory influence by 5-HT. (C) 2010 Elsevier B.V. All rights reserved.CNPq and FAPESP, Brazi

Nitric oxide-mediated anxiolytic-like and antidepressant-like effects in animal models of anxiety and depression

The effects of microinjection of the nitric oxide (NO) precursor L-arginine (L-Arg), the NO synthase (NOS) inhibitors N-methyl-L-arginine (L-NAME) and 7-nitroindazole (7-NI), and the cyclic guanosine 3`,5`-monophosphate (cGMP) analog 8-Br-cGMP into the dorsal raphe nucleus (DRN) were assessed in rats using the elevated plus maze (EPM) and the forced swim test (FST). L-Arg (100 and 200 nmol) produced an anxiolytic-like effect in the EPM. 8-Br-cGMP (25 and 50 nmol) dose-dependently increased locomotor activity. In the FST, antidepressant-like effects were produced by L-Arg (50 and 100 nmol) and 8-Br-cGMP (12.5 and 25 nmol). Dual effects were observed with NOS inhibitors L-NAME and 7-NI in both the EPM and FST. While low doses of L-NAME (25 nmol) or 7-NI (1 nmol) induced a selective increase in EPM open arm exploration and a decrease in immobility time in the FST, high doses (L-NAME 400 nmol, 7-NI 10 nmol) decreased locomotor activity. These results show that interference with NO-mediated neurotransmission in the DRN induced significant and complex motor and emotional effects. Further studies are needed to elucidate the mechanisms involved in these effects. (C) 2007 Elsevier Inc. All rights reserved