Detecção do citomegalovirus humano em leucócitos de pacientes imunocomprometidos pela técnica de reação em cadeia da polimerase

BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe

Evaluation of polimerase chain reaction in epidemiological studies of human cytomegalovirus infection in distinct pediatric groups

A implementacao de medidas adequadas de prevencao e controle de disseminacao de doencas infecciosas exige um conhecimento amplo de diversos aspectos epidemiologicos do microrganismo responsavel pelo processo infeccioso. Essa caracterizacao epidemiologica, por outro lado, exige a utilizacao de tecnicas e metodologias, muitas vezes especificas para cada microrganismo ou situacao epidemiologica, que sejam capazes de agrupar isolados relacionados epidemiologicamente e diferenciar aqueles nao relacionados. Este trabalho teve como objetivo avaliar o desempenho de uma metodologia, baseada na tecnica da reacao em cadeia da polimerase (PCR), em estudos epidemiologicos da infeccao pelo citomegalovirus (CMV). Para isso, a tecnica foi desafiada em populacoes pediatricas e situacoes distintas, e continuamente aperfeicoada para responder as questoes epidemiologicas necessarias para uma melhor abordagem da transmissao do CNW em criancas. No primeiro estudo a metodologia foi utilizada para caracterizacao de cepas de CMV isoladas de pacientes pediatricos submetidos a transplante de medula ossea. Os isolados de um mesmo paciente apresentaram padroes identicos enquanto isolados de diferentes pacientes apresentaram padroes distintos. Alem de mostrar que essa populacao geralmente excreta a mesma cepa por longos periodos e que a transmissao paciente-paciente e baixa, a tecnica mostrou reprodutibilidade e poder discriminatorio ao agrupar isolados relacionados epidemiologicamente e diferenciar os nao relacionados, nessa populacao. No segundo estudo a metodologia foi aperfeicoada para ser desafiada em uma situacao epidemologica mais complexa. A regiao genomica do CMV estudada foi ampliada para se aumentar o poder discriminatorio do metodo. Este estudo mostrou que membros de uma mesma familia excretaram cepas identicas, enquanto que cepas de diferentes familias eram distintas. No terceiro estudo uma situacao ainda mais complexa foi avaliada: transmissao de uma crianca para outra (horizontal) em creches. Foram avaliadas amostras seriadas de 37 criancas (dois a seis isolados por crianca). O maior aperfeicoamento da tecnica permitiu demonstrar a reinfeccao por cepas distintas e a transmissao horizontal nessa populacao. O quarto estudo envolveu uma populacao bem maior e avaliou a diversidade geneticas de cepas excretadas por recem-nascidos (RNs) com infeccao congenita de uma determinada regiao. Os resultados obtidos sugeriram a existencia de uma relacao entre 91...(au)BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe

Effect of GB virus C on response to antiretroviral therapy in HIV-infected Brazilians

ObjectivesGB virus C (GBV-C) infection is associated with delayed mortality in HIV-infected people in most, but not all, studies. Previous investigations of the effect of GBV-C viraemia on response to antiretroviral therapy (ART) were inconclusive. To determine the effect of GBV-C on ART, we retrospectively analysed plasma samples taken from patients in a prospective randomized clinical trial of ART in HIV-positive Brazilians.MethodsGBV-C viraemia was characterized by testing stored serum samples from 175 participants by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). Subjects were randomized to receive indinavir (n=59), zidovudine and lamivudine (n=58), or zidovudine, lamivudine and indinavir (n=58). the effect of GBV-C viraemia on the average change in HIV viral load and CD4 count following initiation of therapy was evaluated in a multiple regression analysis.ResultsThe prevalence of GBV-C viraemia was similar to that observed in previous studies (24%). HIV viral load decreased following ART to a significantly greater extent in patients with GBV-C viraemia (by 0.48 log(10) HIV-1 RNA copies/mL, P=0.009, adjusting for age, ART group, and baseline CD4 count). Although there was no significant difference in change in CD4 count between individuals with and without GBV-C viraemia overall, CD4 counts were higher following 48 weeks of therapy in GBV-C viraemic individuals receiving the least potent ART regimen (zidovudine and lamivudine) compared with those without GBV-C infection.ConclusionsGBV-C viraemia is associated with an enhanced reduction of HIV viral load in response to ART. in this study of treatment-naive individuals during 48 weeks of follow up, patients with GBV-C viraemia had reductions in HIV viral load that were approximately 0.5 log copies/mL greater than those found in patients without GBV-C viraemia. This is similar to reductions observed with nucleoside reverse transcriptase inhibitors.Univ Iowa, Dept Internal Med, Roy & Lucille Carver Coll Med, Iowa City, IA 52242 USAIowa City Vet Adm, Med Ctr, Iowa City, IA USAUniversidade Federal de São Paulo, Paulista Sch Med, Div Infect Dis, São Paulo, BrazilUniv Iowa, Coll Publ Hlth, Dept Biostat, Iowa City, IA USAUniversidade Federal de São Paulo, Paulista Sch Med, Div Infect Dis, São Paulo, BrazilWeb of Scienc