Differential activities of glutathione s-transferase isoenzymes in strains of fasciola hepatica susceptible and resistant to triclabendazole

Fasciolosis, a parasitic zoonosis of intrahepatic location, is caused by the trematode Fasciola hepatica. Its control is mainly based on the use of the anthelminthic Triclabendazole (TCBZ). The indiscriminate use of this drug has favored the development of anthelmintic resistance. The Glutation S-Transferases (GSTs) are multifunctional enzymes involved in the detoxification of xenobiotics and endogenous compounds using conjugation with endogenous glutathione. Recently, it has been shown an active participation of this family of enzymes in the detoxification of TCBZ related to the phenomenon of resistance. In F. hepatica, eight isoenzymes of the GST are present. Since it is well known that different isoenzymes do not necessarily have the same metabolic activity, this study evaluated the cytosolic activity of mu and pi GST isoenzymes in TCBZ resistant (Sligo and Oberon strains) and TCBZ susceptible (Cullompton strains) of F. hepatica. The results obtained in this study confirm that, although both isoenzymes are involved in different processes of detoxification in F. hepatica, only the GSTmu isoenzyme is involved in the manifestation of resistance to TCBZ.Fil: Fernandez, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Ortiz Oblitas P.. Universidad Nacional de Cajamarca; PerúFil: Solana, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Ministerio de Ciencia. Tecnología e Innovación Productiva. Agencia Nacional de Promoción Cientifíca y Tecnológica; ArgentinaFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Propuestas vacunales para el tratamiento de la fasciolosis en rumiantes, un desafío aún no resuelto

La fasciolosis producida por el trematodo Fasciola hepatica es una enfermedad que provoca importantes pérdidas económicas en la producción ganadera siendo además una preocupante enfermedad zoonótica. Actualmente, la única herramienta disponible para el control de dicha enfermedad es la utilización de fármacos antiparasitarios. Hoy, la aparición de fenómenos de resistencia antiparasitaria llevan a la búsqueda de nuevas opciones terapéuticas. La búsqueda de antígenos vacunales para el desarrollo de una vacuna eficaz es una de las herramientas más investigadas. En el presente artículo se expone una revisión de los principales resultados obtenidos hasta el momento en la búsqueda de diversos candidatos vacunales. Se comparan diferentes intentos de vacunas experimentales: desde vacunas irradiadas atenuadas, hasta las nuevas estrategias que involucran el desarrollo de vacunas recombinantes y de ADN en el modelo ratón y en el huésped susceptible.The use of an effective vaccine against fasciolosis is currently and due to advances in the field, an achievable goal. This article is a review of recent data and the main results about the search for vaccine candidates against fasciolosis. In the present work it presents the search done and results from the use of attenuated vaccines irradiated to new strategies that involve the development of recombinant vaccines and DNA

A multienzyme response is involved in the phenomenon of resistance to triclabendazole on Fasciola

The trematode Fasciola hepatica is the producer of a parasitic zoonosis known as fasciolosis. Triclabendazole (TCBZ) is the most widely used fasciolicide anthelmintic. Today, its indiscriminate use has led to the expression of anthelmintic resistance. Our previous studies over the Sligo strain (TCBZ-R) confirmed in the Phase I of detoxification, an overexpression of Flavin-Monooxygenases. This phenomenon should not be the only response that the trematode has and should not rule out the involvement of other processes of detoxification of Phase I or II. In the processes of detoxification in Phase I, the Carboxylesterase (CE) is a serine esterase-dependent with broad substrate specificity. This family of enzymes are involved in many metabolic functions including detoxification of xenobiotics. In Phase II exists a system using the Glutathione (GSH). It is a sequence of certain enzymes that culminate adding reduced GSH to xenobiotic increasing its water solubility and facilitatingtheir excretion. Glutathione addition plays an important role in antioxidant defense in different tissues catalyze the reduction of oxidized to reduced GSH which will be utilized by GST to reduce the peroxide and lipoperoxide, which they are reactive oxygen species. This process involves Glutathione Peroxidase (GPx), Glutathione Reductase (GSR) and Glutathione S-Transferase (GST). In the present work, we evaluate, in vitro, the cytosolic activity of different xenobiotic metabolizing enzymes of Phase I: CE and Phase II: GST, GPx and GSR in adults of F. hepatica TCBZ susceptible (TCBZ-S) and TCBZ resistant (TCBZ-R),respectively Cullompton strain and Sligo and Oberon strains. In the TCBZ-R Sligo and Oberon strains, the GST activity was 1277±32 and 1216±16 nmol/min/mg protein, respectively, higher than that in the TCBZ-S Cullompton strain 800±60 nmol/ min/mg protein. Regarding the GPx activity in the Sligo and Oberon strains, TCBZ-R was 83±3.41 and 81±2.45 nmol/min/ mg protein, respectively, higher than that in the TCBZ-S Cullompton strain 49±2.58 nmol/min/mg protein. The GSR activity in Sligo and Oberon strains was 38±2.07 and 41±1.25 nmol/min/mg protein, respectively, higher than that in the TCBZ-S Cullompton strain 29±1.22 nmol/min/mg protein, whereas CE activity did not differ between the different strains tested. In this work, a multienzyme response involving at all the family of enzymes GSH dependent is detected. Carboxylesterase expressed no significant differences not being involved in the resistance phenomenon. These results contribute to the understanding of the mechanisms referred to the phenomenon of resistance to TCBZ.Fil: Fernandez, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Acevedo, Maria E.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; ArgentinaFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; ArgentinaInternational Conference on ParasitologyPhiladelphiaEstados UnidosOMICS Publishing Grou

Increase of gluthatione S-transferase, carboxyl esterase and carbonyl reductase in Fasciola hepatica recovered from triclabendazole treated sheep

Fasciolasis is a zoonotic parasitic disease caused by Fasciola hepatica and its control is mainly based on the use of triclabendazole (TCBZ). Parasite resistance to different anthelmintics is growing worldwide, including the resistance of F. hepatica to TCBZ. In the present work we evaluate “in vivo” the activity of xenobiotic metabolizing enzymes of phase I (carboxyl esterases) and phase II (glutathione S-transferases and carbonyl reductases) recovered of flukes from sheep treated with TCBZ. All three enzymes showed increased activity in TCBZ flukes returning 60 h post-treatment at similar to baseline unexposed flukes. TCBZ action may induce secondary oxidative stress, which may explain the observed increment in activities of the analyzed enzymes as a defensive mechanism. The enzymes analyzed are candidates to participate actively in the development of resistance at TCBZ in F. hepatica.Fil: Scarcella, Silvana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Solana, M. V.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Fernandez, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Lamenza, Pamela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Ceballos, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Tandil. Centro de Investigacion Veterinaria de Tandil; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentin

Comparative genetic analysis of glutathione S-transferase Fasciola hepatica from different definitive hosts

La fasciolosis, parasitosis zoonótica de ubicación intrahepática, es ocasionada por Fasciola hepatica. La resistencia de F. hepatica a TCBZ está progresando mundialmente por lo cual es necesario ampliar el conocimiento sobre los mecanismos de detoxificación que este helminto posee. Las glutatión S-transferasas (GSTs), enzimas multifuncionales implicadas en la detoxificación de compuestos endógenos y xenobióticos, podrían participar en la expresión de resistencia al TCBZ. En este trabajo se determinó el nivel de expresión del ARNm y se caracterizó el gen para GST (genGST) correspondiente a fasciolas provenientes de tres hospedadores diferentes infectados naturalmente. Las secuencias del genGST de las fasciolas analizadas se compararon con las secuencias de las cepas Sligo (triclabendazol resistente: TCBZ-R) y Cullompton (triclabendazol sensible: TCBZ-S) (GenBank ID: KF680281- KF680284, respectivamente) obtenidas en nuestro laboratorio. Las fasciolas de las tres especies hospedadoras expresaron diferencias significativas en el ARNm: cerdo 2> bovino 1.7> ovino 1 y un genGST idéntico al de la cepa TCBZ-S. La diferencia de expresión podría relacionarse con el nivel de resistencia de los diferentes huéspedes a F. hepatica. Estos resultados aportarían a la comprensión de los mecanismos generadores de resistencia a F. hepatica en los distintos huéspedes definitivos.Fasciolosis, a zoonotic intrahepatic parasitosisis caused by Fasciola hepatica. Resistance of F. hepatica to TCBZ is progressing globally so it is necessary to increase the knowledge of the mechanisms of detoxification that this helminth possesses. The multifunctional enzymes glutathione S- transferases (GSTs) are involved in the detoxification of endogenous and xenobiotic compounds and could be involved in the expression of resistance to TCBZ. In this work the level of mRNA expression was determined and the gene for GST (genGST) from flukes from three different naturally infected hosts was characterized. The sequence of the genGST was compared with the sequences of resistant (TCBZ-R) (Sligo) and sensible (TCBZ-S) (Cullompton) strains of F. hepatica (GenBank ID: KF680281 - KF680284, respectively) obtained in our laboratory. Flukes of three different hosts expressed significant differences in their mRNA: porcine 2> bovine 1.7 > ovine 1 and the genGST sequence was identicalto TCBZ-S strain of F. hepatica. The difference in expression of the genGST could be related to the level of resistance of the different hosts against F. hepatica. These results would contribute to the understanding of the mechanisms of resistance to F. hepatica in different definitive hosts.Fil: Fernandez, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Ortiz, Pedro. Universidad Nacional de Cajamarca; PerúFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Finding of Fasciola hepatica in a capybara (hydrochaeris hydrochaeris) in Tandil, province of Buenos Aires, Argentina

Fasciolosis is a zoonotic parasitic disease caused by Fasciola hepatica . The life cycle of thisparasite is indirect, it needs a snail of the Lymnaea family as an intermediate host to complete the cycle and sothe occurrence of cases is limited to the presence of these snails. Most of thestudies of this parasitic disease are in domestic animals and humans. Greateconomic losses are generated by this disease. Wild species are known to act asreservoirs and disseminators of the disease. The south-eastern zone of the province of Buenos Aires has been described with reference to the presence of Fasciola spp. in cattle but it is not yet known whether wild herbivores living in the zone are involved in the biological cycle of this disease. Among the wild species that have been positively reported to Fasciola hepatica the capybara, Hydrochaeris hydrochaeris is a poorly described species. In August of the present year, in the district of Tandil(BsAs), a dead capybara recently run over was found. At the macroscopic inspection the liver was apparently normal. At the magnifying glass inspection of the gall bladder, characteristics yellowish eggs were found. They were photographed with the Leica microscope and it can be seen that due to their morphology, size and location they were compatible with >Fasciola hepatica eggs. PCR was performed in search of the mitochondrial gene ITS1 (species indicator) confirming that the eggs found in the capybara belonged to Fasciola hepatica This is attractive for two main reasons; first, in the area where the animal was found there are no scientific reports of this disease or the presence of the snail, which prompts us to work on a more exhaustive search for cases. And secondly, the study of wild species as transmitters of this disease is not well studied and this ends up being a complication for producers and for the population ingeneral, so we consider that its study is very important.Fil: Solana, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Scarcella, Silvana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaLXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; IX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas y VI Reunión Científica Regional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de AnimaMar del PLataArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalSociedad Argentina de BiologíaSociedad Argentina de ProtozoologíaAsociación Argentina de NanomedicinasAsociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratori

Infección experimental con Fasciola hepatica en tres especies de gasterópodos de Tandil, Argentina

Antecedentes: La fasciolosis es una zoonosis parasitaria de distribución mundial causada por el trematode Fasciola hepatica siendo un serio problema sanitario al afectar humanos y rumiantes domésticos. Dentro de su ciclo biológico, F. hepatica necesita un huésped intermediario (caracol) y uno definitivo (mamífero). El huésped intermediario, asociado casi de forma exclusiva a la enfermedad, es un molusco gasterópodo pulmonado de agua dulce del género Lymnaea. Aunque a la fecha se ha detectado ADN de F. hepatica en caracoles de otros géneros aún no se ha demostrado que el parásito pueda completar su ciclo biológico. En varias regiones de la prov. de Buenos Aires, Argentina se ha descripto fasciolosis coincidente con la presencia de caracoles del género Lymnaea. EnTandil (Bs.As.), hasta el presente, no hay registros de fasciolosis ni reconocimiento de lymneidos aunque están presentes otros moluscos de agua dulce tales como Chilina sp., Bulimulus sp., Planorbis sp. los cuales participan activamente en el ciclo biológico de otros parásitos. Objetivo: Evaluar dentro del ciclo biológico de F. hepatica la factibilidad de una infección experimental a moluscos gasterópodos de las familias Chilinidae, Bulimulidae y Planorbidae. Metodología: Se colectaron, de diferentes arroyos del partido de Tandil, caracoles de los géneros Chilina sp., Bulimulus sp. y Planorbis sp. Se simuló un ambiente natural en peceras colectando agua y tierra de los lugares de captura. Durante 30 días los caracoles fueron mantenidos en condiciones controladas de humedad y temperatura. Los huevos de F. hepatica fueron incubados en oscuridad 15 días a 25°C. Luego de la eclosión, los miracidios obtenidos fueron enfrentados con moluscos de las tres especies en estudio dejándolos en convivencia durante 12 horas. Posteriormente los caracoles fueron mantenidos y observados durante 60 días más. Resultados: Los géneros Bulimulus y Planorbis no mostraron cambios ante la exposición a los miracidios corroborando 60 días después la ausencia de redias y/o cercarias. Interesantemente el género Chilina tuvo una rápida reacción letal ante la presencia del miracidio. A 10 minutos post exposición el miracidio desaparece y el caracol muere indefectiblemente. Discusión: Dicha respuesta del género Chilina merece toda su atención dado que puede aportar interesante información con respecto tanto al ciclo biológico de F. hepatica como a la patogenia de la enfermedad parasitaria en estudio.Fil: Solana, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Wlodek, Sabina. Universidad de la Republica; UruguayFil: Troncellito, Agustina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Solana, Hugo Daniel. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaXXIV Congreso Latinoamericano de ParasitologíaSantiago de ChileChileUniversidad de Chile. Facultad de MedicinaSociedad Chilena de ParasitologíaFederación Latinoamericana de Parasitologí

Histological demonstration of apoptosis activation in the liver fluke (Fasciola hepatica) following Closantel treatment of experimentally-infected sheep

The apoptosis can be by DNA damage, cytokine expression, etc. The study of apoptosis has application for the understanding of biological events, such as the tumorogenesis,the action mechanism to drugs, etc. For the apoptosis detection in differentcell lines and tissues there are methods such as TdT-mediated dUDP nick endlabelling (TUNEL) or directly the immunolocalization of Caspase-3. Closantel is an antiparasitic halogenated salicilanilide for the treatment of Fasciola hepatica infestation in farm animals. Its action mechanism is not fully known. It´s known decouple the oxidative phosphorylation but the probable degree of contribution of apoptosis. In this work, were used the Caspase-3 detection and TUNEL techniques to assess the probable involvement of the closantel in the generation of apoptosis in Fasciola hepatica. Fourteen lambs were infected orally with 200 metacercariae of Fasciola hepatica. At 16 weeks post-infection, 10 lambs were treated orally with closantel (10mg/kg.). Adult flukes were recovered from the liver of individual lambs at 0h (notreated n:4), 24h (n:5) and 36h (n:5) post treatment. The flukes were processed for usual histological analysis. There were no injuries at the controls. The F. hepatica at 24 h PT showed minor damage to the posterior end of syncytium. Those of 36 h PT lost large areas of the syncytium in the posterior and dorsal end with cell depletion in testis and vitelline follicles and the oocytes appear rounded with condensed cytoplasm, indicating apoptosis. In testis, ovary and vitelline follicles, defects in closantel-treated trematodes were aligned with failure inthe energy-demanding processes of mitosis and differentiation. These changes could be attributed to anthelmintic-induced blockage of intermediary metabolismand neuromuscular paralysis. This work confirm that closantel activates apoptosis being too this phenomenon its mechanism of action.Fil: Scarcella, Silvana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Solana, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Bianco, Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Lombardo, Daniel Marcelo. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Biología Celular y Molecular; ArgentinaLXIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; LI Reunión Anual de la Asociación Argentina de Farmacología Experimental; XXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biología; XXXI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; IX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Nanomedicinas y VI Reunión Científica Regional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de LaboratorioMar del PLataArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalSociedad Argentina de BiologíaSociedad Argentina de ProtozoologíaAsociación Argentina de NanomedicinasAsociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Laboratori

Approach to molecular characterization of different strains of Fasciola hepatica using random amplified polymorphic DNA polymerase chain reaction

The aim of the present study was to genetically characterize Fasciola hepatica strains from diverse ecogeographical regions (America and Europe), susceptible and resistant to Triclabendazole, using the random amplified polymorphic DNA fragments (RAPDs-PCR) technique to elucidate genetic variability between the different isolates. Ten different oligonucleotide primers of 10 bases with GC content varying from 50–70 % were used. A polymerase chain reaction (PCR) was carried out in 25 μl of total volume. Duplicate PCR reactions on each individual template DNA were performed to test the reproducibility of the individual DNA bands. The size of the RAPD-PCR fragments was determined by the reciprocal plot between the delay factors (Rf) versus the logarithm of molecular weight ladder. The phenogram obtained showed three main clusters, the major of which contained European Strains (Cullompton and Sligo) showing a genetic distance of 27.2 between them. The American strains (Cedive and Cajamarca) on the other hand formed each their distinctive group but clearly maintaining a closer genetic relationship among them than that to their European counterparts, with which showed a distance of 33.8 and 37.8, respectively. This polymorphism would give this species enhanced adaptability against the host, as well as the environment. The existence of genetically different populations of F. hepatica could allow, against any selection pressure, natural or artificial (for use fasciolicides products and/or control measures), one or more populations of F. hepatica to be able to survive and create resistance or adaptability to such selective pressure.Fil: Scarcella, Silvana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Miranda Miranda, E.. Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agrícolas y Pecuarias; MéxicoFil: Solana, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Sobrevida de metacercarias de F. hepatica expuestas en vinagre de mesa

Antecedentes: La fasciolosis es una zoonosis parasitaria causada por un trematodo del género Fasciola sp.Dicha parasitosis, de ubicación intrahepática, afecta al hombre y a gran cantidad de mamíferos, domésticos herbívoros. Se sabe que alrededor de 50 millones de humanos en todo el mundo presentan dicha enfermedad mientras otros 180 millones están en riesgo de infección. El hombre adquiere dicha enfermedad parasitaria al ingerir vegetales acuáticos contaminados con metacercarias (MCs) del parásito. Una de las formas más utilizadas para su profilaxis consiste en el exhaustivo lavado de los vegetales utilizando una dilución de vinagre de mesa en agua potable. Dicho método preventivo surgió a partir de estudios realizados hace mas de 20 años que demostraban que era suficiente para su inactivación la exposición de las MCs durante 10 minutos en vinagre de mesa al 12%. Dicha inactivación solo era confirmada por microscopia óptica evaluando la presencia/ausencia de movimientos internos de dicho estadio parasitario.Sabiendo que la evaluación de dichos movimientos tiene un gran comportamiento subjetivo se hace necesario evaluar dicho fenómeno teniendo en cuenta la manifestación o no de la evolución al siguiente estadio, el juvenil recién desenquistado (JRD), que confirme la muerte/sobrevida de la MCs expuestas al vinagre de mesa. Objetivo:Evaluar en función del tiempo, el efecto de diferentes concentraciones de vinagre de mesa sobre la sobrevida de MCs de F. hepatica evaluando la presencia/ausencia de la posterior eclosión y sobrevida de Juveniles recién desenquistados. Metodología: Se diseñaron 10 grupos de 30 MCs cada uno: I) Grupo Control expuesto 30 min a agua corriente, II) tres grupos (5, 15 y 30 min) expuestos a vinagre de mesa al 25%, III) tres grupos (5, 15 y 30 min) al 50% y IV) tres grupos al 100%. A su correspondiente tiempo, cada MC fue retirada y lavada varias veces en agua destilada. Inmediatamente se procedió a realizar el desenquiste y eclosión de los JRDs según el método de Cancela et al. Resultados: El grupo control tuvo una eclosión de más del 60% de las MCs. En todos los grupos salvo el correspondiente a la exposición a 100% de vinagre hubo al menos 10% de sobrevida y eclosión a JRD en los primeros 15 min de exposición a 25% observándose además que algunas MCs fueron capaces de sobrevivir y eclosionar a JRDs hasta 5 minutos de exposición en vinagre al 50%. Conclusion: El presente ensayo experimental confirma la ineficacia del simple lavado en vinagre como método seguro de muerte de la totalidad de las MCs infestantes.Fil: Solana, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Fernández, Alicia Silvina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Scarcella, Silvana Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaXXIV Congreso Latinoamericano de ParasitologiaSantiago de ChileChileUniversidad de Chile. Facultad de MedicinaSociedad Chilena de ParasitologíaFederación Latinoamericana de Parasitologí